葡萄酒中苹果酸测定
原理
利MegaQuantTM （专利技术）测定L苹果酸需进行三步酶解反响第步：L苹果酸脱氢酶（LMDH）催化作L苹果酸烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）氧化生成草酰乙酸：
（1） L苹果酸 + NAD+ （LMDH） oxaloacetate + NADH + H+
第二步：参加剩L谷氨酸谷草转氨酶作生成L天门冬氨酸2–酮戊二酸
（2） Oxaloacetate + Lglutamate （GOT） Laspartate + 2oxoglutarate
第三步：心肌黄酶催化作NADH复原碘硝基氯化四氮唑（INT）生成甲基 INT
（3） NADH + INT + H+ （diaphorase） NAD+ +甲基INT
生成甲基 INT量取决L苹果酸量甲基 INT吸光度值505nm测量
特异性 灵敏度 测量范围精确度
该实验方法专门测定L苹果酸含量
调吸光光度001吸光单位样品体积20uL时L苹果酸浓度77 mgL果调吸光光度002吸光光度样品体积20uL时L苹果酸检测线154 mgL
该实验测量范围01515ug L苹果酸（20uL样品液中浓度0007075 gL）样品分进行两次测定吸光度值会001002吸光单位变化样品体积20uL时L苹果酸 mgL间果样品稀释计算结果时候需相应稀释系数〔F〕果样品制备阶段样品重量称量：10gL002005g100g细微差异够分辨
干扰
红酒中酚醛树脂会试验造成干扰引起INT缓慢反响〞〔图2〕未稀释红酒进行测定时必须首先聚乙烯聚吡咯烷酮〔PVPP〕净化样品缓慢反响〞样发生未稀释白葡萄酒中提供方法进行测定缓慢反响速率非常慢
MegaQuantTM测定L苹果酸时候存两种潜次误差原认非常必：
1 PVPP红酒中局部酚醛树脂存着 缓慢反响〞PVPP处理葡萄酒〔导致潜高估白葡萄酒中L苹果酸000001gL红葡萄酒中浓度000003gL〕中存缓慢反响〞非常慢忽略计〔实验方法A〕然果想精确结果通实验方法B精确计算
2 推荐PVPP药片测试方法〔5 mL葡萄酒1药片〕中导致样品浓度进行2 （vv）稀释计算方法中考虑点〔请参PVPP处理样品方法〕
复原性物质够干扰试验引起缓慢反响〞：亚硫酸亚抗坏血酸盐仅仅够浓度高葡萄酒样品进行测定亚硫酸盐浓度4 gL果样品中抗坏血酸盐含量非常高（> 400 mgL）进行测定
已完成反响试中添加L苹果酸〔20uL添加75 ug〕通增加吸光度值进步验证干扰影响利附带部标准质控干扰物质进行鉴定通样品中添加标准质控做定量回收试验计算样品处理提取时损失
安性
L苹果酸测定试剂没毒物质然浓缩缓液中含作防腐剂叠氮化钠（002 wv）需实验室安操作规程进行试验
试剂盒
MegaQuantTM L苹果酸含量测定试剂盒进行60次测定试验提供全部试验方法：
58次测定试剂盒（cat no KLMALR）
瓶1 双甘氨肽缓液 （100 mL 100 mM pH100） +L谷氨酸（100 mM）+叠氮化钠（002 wv）
稳定性> 2年4°C保存
瓶2 药片〔60粒〕含心肌黄酶 GOT INT FADNAD+前先恢复室温翻开
稳定性> 2年20°C枯燥保存
瓶3 L苹果酸脱氢酶（13 mL 15000 UmL）
稳定性> 2年4°C保存
瓶4 L苹果酸质控标准液（5 mL 0375 mgmL）
稳定性> 2年4°C保存
瓶5 药片〔65粒〕含PVPP
稳定性> 5年室温保存
试剂制备1 备试剂盒中瓶1溶液时试验量15 mL等量蒸馏水稀释然试验3 mL
2 备试剂盒中瓶2时保存20°C稳定性> 2年
3 准备瓶3中溶液第次翻开前需充分晃动瓶子酶吸附橡皮塞然垂直存放瓶子次前需充分混合中溶物
4 备试剂盒中瓶4溶液时前恢复室温试验量20uL
5 准备瓶5溶液时
注意您疑心分光光度计准确性疑心样品中物质抑制试验L苹果酸标准质控溶液进行测定通提供公式计算L苹果酸浓度
实验需设备
1 检测仪中提供特定测试试（底 16 x 100 mm）时提供提取试（cat no GMQTB25）
2 10 mL聚丙烯试
3 微量移液器（20 uL）
4 连续分配器
5 玻璃刻度移液吸球
6 MegaQuantTM测定仪
7 定时钟
注意
1 方法专门测定苹果乳酸发酵葡萄酒果葡萄酒中L苹果酸浓度> 075 g L需样品进行稀释
2 稀释葡萄酒葡萄汁必须纯洁水〔蒸馏水高质量水〕果饮水首先需D果糖标准品验证否适合
3 测试试前必须清洗干净烘干
操作步骤
酚醛树脂
（红酒通常需进行处理）
1 取5 mL红葡萄酒参加10 mL聚丙烯试中
2 参加1片PVPP药片〔瓶5〕拧紧试盖充分混合5分钟Whatman No 1 （9 cm）滤纸滤收集约1 mL滤液滤液颜色深浅粉色〔般处理法〕然具深颜色葡萄酒5 mL需参加2片PVPP充分挤压收集滤液1 mL
3 取20uL滤液进行测定
A 测试方法A （简单法 –参图1）
1 取15 mL 溶液1（ ~ 23°C更高）15 mL蒸馏水参加测试中取30 mL等体积蒸馏水稀释溶液1〔参试剂配置方法第1点〕
2 提供镊子夹取1片药片〔瓶2〕充分混合12分钟完全溶解
3 参加20uL葡萄酒样品[PVPP处理（未稀释红白葡萄酒） 未PVPP处理（未稀释白葡萄酒）稀释葡萄酒葡萄汁]充分振荡混合
4 约1分钟试插入MegaQuantTM测定仪开关直屏幕显示’〔约2秒钟〕
5 屏幕出现000〞松开开关〔表示A1〕
6 取试参加20uL瓶3溶液〔L苹果酸脱氢酶〕充分混匀确保全部全部溶解时记录时间
7 次试插入MegaQuantTM测定仪5分钟开关直屏幕显示1 second’记录数值A2
8 确保试剂完全反响完全5分钟间隔1分钟读取数值直间隔1分钟数值变化〔参考图1图2〕
注意
1 果数值A2 > 10010倍稀释样品次测定果数值A2 < 010样品进行分稀释〔100倍稀释改10倍稀释〕
2 INT光敏感性〔显色剂药片中〕长时间反响导致溶液颜色加深必须推荐操作方法进行测定
3 进行试验前瓶1提前冰箱中取出恢复室温果温度< 23°C反响程快结束
4 添加药片15 mL溶液1152 mL蒸馏水中确保药片全部溶解测定 0 吸光度值作空白然参加20uL L苹果酸脱氢酶〔瓶3〕5分钟测定增加吸光度值（A2）微吸光度变化（A2）没意义〔000001〕
计算
ΔAL苹果酸 增加吸光度值 （A2）
常规ΔAL苹果酸 数值少010吸光单位获满意试验结果L苹果酸含量公式计算〔参图3中标准曲线〕
未PVPP处理样品中L苹果酸浓度
20uL未稀释样品
c 0771 x DΔAL苹果酸 [gL]
20uL稀释样品
c 0771 x 稀释系数 x ΔAL苹果酸 [gL]
PVPP处理样品中L苹果酸浓度
20uL未稀释样品
c 0771 x ΔAL苹果酸 x 102100 [gL]
0786 x DΔAL苹果酸 [gL]
20uL稀释样品
c 0786 x 稀释系数 x DΔAL苹果酸 [gL]
注释
102100 PVPP处理葡萄酒容差
图 1 分光光度仪测定（25°C 1 cm径）MegaQuantTM L苹果酸时间变化注意 方法测定L苹果酸浓度图3中测定浓度低方法中测试径1 cmMegaQuantTM测试约13 cm
测试方法 B （ 缓慢反响〞处理）
1 取15 mL 溶液1（ ~ 23°C更高）15 mL蒸馏水参加测试中取30 mL等体积蒸馏水稀释溶液1〔参试剂配置方法第1点〕
2 提供镊子夹取1片药片〔瓶2〕充分混合12分钟完全溶解
3 参加20uL葡萄酒样品PVPP处理红葡萄酒充分振荡混合
4 约1分钟试插入MegaQuantTM测定仪开关直屏幕显示’〔约2秒钟〕
5 屏幕出现000〞松开开关〔表示A0〕时记录时间
6 取试5分钟次插入试开关直屏幕显示1 second’插入试前压钮否导致测定仪读取错误 记录数值A1〔5分钟存缓慢反响导致颜色增深〕
7 取试立参加20uL瓶3溶液〔L苹果酸脱氢酶〕充分混匀确保全部全部溶解时记录时间
8 次试插入MegaQuantTM测定仪5分钟开关直屏幕显示吸光度记录数值A2
9 确保试剂完全反响完全5分钟间隔1分钟读取数值直间隔1分钟数值变化超001吸光单位〔参考图1图2〕
计算
ΔAL苹果酸 [（A2A1） （A1A0）]
A0数值0简化：ΔAL苹果酸 A2 （2 x A1）
例〔参图1〕 A2 042A1 002
ΔAL苹果酸 042 （2 x 002） 042 004 038
常规ΔAL苹果酸 数值少0100吸光单位获满意试验结果L苹果酸含量公式计算〔参图3中标准曲线〕
PVPP处理样品中L苹果酸浓度
20uL未稀释样品
c 0771 x ΔAL苹果酸 x 102100 [gL]
0786 x DΔAL苹果酸 [gL]
20uL稀释样品
c 0786 x 稀释系数 x DΔAL苹果酸 [gL]
注释
102100 PVPP处理葡萄酒容差
图 2 分光光度仪测定（25°C 1 cm径 492nm）MegaQuantTM L苹果酸时间变化测试样品PVPP处理滤浓度红葡萄酒〔018ug〕参加样品测A05分钟反响测定吸光度A1计算出缓慢反响〞率然参加L苹果酸脱氢酶〔20uL〕继续反响10分钟[5分钟测定吸光度值A2]果MegaQuantTM测试仪进行测定A0吸光度值0
制备样品
稀释样品
色杯中〔：分析20 uL样品〕L苹果酸含量必须15415ug间样品溶液必须充分稀释浓度0007 075 gL间
估计L苹果酸浓度（gL）
蒸馏水稀释
稀释系数F
< 075
07575
7575
稀释
1 + 9
1 + 99
1
10
100
样品处理事例
（a） 测定葡萄汁白葡萄酒中L苹果酸含量
测定白葡萄酒葡萄汁中L苹果酸含量样品通常需处理直接进行测定必进行稀释
样品处理事例
（b） 测定红葡萄酒中L苹果酸含量
取5 mL红葡萄酒参加10 mL聚丙烯试中参加1片PVPP药片〔瓶5〕拧紧试盖充分混合5分钟Whatman No 1 （9 cm）滤纸滤收集约1 mL滤液滤液颜色深浅粉色〔般处理法〕然果滤液深红色进行处理需参加2片PVPP充分挤压收集滤液1 mL澄清浅粉色滤液直接进行测定
（c） 测定葡萄中L苹果酸含量
取200 mL蒸馏水参加500 mL量筒中参加葡萄体积刚刚超400 mL参加400 mL等体积蒸馏水〔 总体积420 mL需外参加蒸馏水20 mL〕样等葡萄进行2倍稀释然充分均质3分钟然Whatman No 1〔9 cm〕滤纸滤弃初mL滤液收集510 mL滤液稀释直接进行测定
单葡萄进行测定压碎葡萄收集葡萄汁10 mL量筒中然等体积蒸馏水稀释混合均匀滤收集提取液稀释直接进行测定
图 3 MegaQuantTM 测定仪测定L苹果酸浓度（ug测定）相吸光度标准曲线〔室温 505 nm〕
参考文献
1 McCleary BV and Charnock S J （2005） Reagent components in tablet form for colorimetric assays of food and beverage analytes Patent submitted
2 Mollering H （1985） LMalate In Methods of Enzymatic Analysis （Bergmeyer H U ed） 3rd ed VolVII pp 3947 VCH Publishers （UK） Ltd Cambridge UK
验证MegaQuantTM 测定仪L苹果酸测试精确性性
1 提供MegaQuantTM 测定仪校验标准仪器参数程中应改变
2 通试剂盒中提供L苹果酸质控标准验证MegaQuantTM 测定仪准确性样品换L苹果酸质控标准20uL试验步骤进行测定吸光度（A2A1）049果存差异移取液体误差导致
MegaQuantTM 测定仪维护考前须知
错误信息
仪器面板出现种错误信息具体错误原处理方法：
错误信息显示
原
处理
E1
空白颜色干净划痕
干净枯燥空白重新测定
E2E3
a) 正确空白结果
b) 仪器漏电
a) 正确空白重新读0
b) 返回维修
E4
电压太低
更换电池
E5
散射光影响读取
a）聚光灯强烈光源移开
b）检查仪器损坏原
维护保养
干净测试试测试前试盖拧紧防试剂溅入仪器中果溢出立棉织物擦拭干净溶解性腐蚀性溶液擦拭仪器
显示屏出现B〞提示需更换新电池轻轻拉仪器部电池面板2节15VAA’ 碱性电池果长时间需仪器电池取出
MegaQuantTM 测定仪售出日起保修期1年意外损坏错误操作未指定点维修导致损坏保修范围果需维修请联系
技术规格：
仪器类型
单波长505nm预制测定程序
光学元件
Palintest M2 光学系统蓝绿LED显示屏滤波器光电探测器
测量范围
000120吸光单位
运行温度
040°C 32104°F
显示屏
10 mm LCD
测试试
圆底底试 160 cm OD 1415 cm light path
开关
单钮
空白0设置
测试做记忆重置选择
部校正
出厂时已设定
测定基座
设软垫防止溶液溅落
电源
2节15VAA’ 碱性电池
173 x 7544 x 41 cm
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葡萄酒中苹果酸测定
原理
利MegaQuantTM （专利技术）测定L苹果酸需进行三步酶解反响第步：L苹果酸脱氢酶（LMDH）催化作L苹果酸烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）氧化生成草酰乙酸：
（1） L苹果酸 + NAD+ （LMDH） oxaloacetate + NADH + H+
第二步：参加剩L谷氨酸谷草转氨酶作生成L天门冬氨酸2–酮戊二酸
（2） Oxaloacetate + Lglutamate （GOT） Laspartate + 2oxoglutarate
第三步：心肌黄酶催化作NADH复原碘硝基氯化四氮唑（INT）生成甲基 INT
（3） NADH + INT + H+ （diaphorase） NAD+ +甲基INT
生成甲基 INT量取决L苹果酸量甲基 INT吸光度值505nm测量
特异性 灵敏度 测量范围精确度
该实验方法专门测定L苹果酸含量
调吸光光度001吸光单位样品体积20uL时L苹果酸浓度77 mgL果调吸光光度002吸光光度样品体积20uL时L苹果酸检测线154 mgL
该实验测量范围01515ug L苹果酸（20uL样品液中浓度0007075 gL）样品分进行两次测定吸光度值会001002吸光单位变化样品体积20uL时L苹果酸 mgL间果样品稀释计算结果时候需相应稀释系数〔F〕果样品制备阶段样品重量称量：10gL002005g100g细微差异够分辨
干扰
红酒中酚醛树脂会试验造成干扰引起INT缓慢反响〞〔图2〕未稀释红酒进行测定时必须首先聚乙烯聚吡咯烷酮〔PVPP〕净化样品缓慢反响〞样发生未稀释白葡萄酒中提供方法进行测定缓慢反响速率非常慢
MegaQuantTM测定L苹果酸时候存两种潜次误差原认非常必：
1 PVPP红酒中局部酚醛树脂存着 缓慢反响〞PVPP处理葡萄酒〔导致潜高估白葡萄酒中L苹果酸000001gL红葡萄酒中浓度000003gL〕中存缓慢反响〞非常慢忽略计〔实验方法A〕然果想精确结果通实验方法B精确计算
2 推荐PVPP药片测试方法〔5 mL葡萄酒1药片〕中导致样品浓度进行2 （vv）稀释计算方法中考虑点〔请参PVPP处理样品方法〕
复原性物质够干扰试验引起缓慢反响〞：亚硫酸亚抗坏血酸盐仅仅够浓度高葡萄酒样品进行测定亚硫酸盐浓度4 gL果样品中抗坏血酸盐含量非常高（> 400 mgL）进行测定
已完成反响试中添加L苹果酸〔20uL添加75 ug〕通增加吸光度值进步验证干扰影响利附带部标准质控干扰物质进行鉴定通样品中添加标准质控做定量回收试验计算样品处理提取时损失
安性
L苹果酸测定试剂没毒物质然浓缩缓液中含作防腐剂叠氮化钠（002 wv）需实验室安操作规程进行试验
试剂盒
MegaQuantTM L苹果酸含量测定试剂盒进行60次测定试验提供全部试验方法：
58次测定试剂盒（cat no KLMALR）
瓶1 双甘氨肽缓液 （100 mL 100 mM pH100） +L谷氨酸（100 mM）+叠氮化钠（002 wv）
稳定性> 2年4°C保存
瓶2 药片〔60粒〕含心肌黄酶 GOT INT FADNAD+前先恢复室温翻开
稳定性> 2年20°C枯燥保存
瓶3 L苹果酸脱氢酶（13 mL 15000 UmL）
稳定性> 2年4°C保存
瓶4 L苹果酸质控标准液（5 mL 0375 mgmL）
稳定性> 2年4°C保存
瓶5 药片〔65粒〕含PVPP
稳定性> 5年室温保存
试剂制备1 备试剂盒中瓶1溶液时试验量15 mL等量蒸馏水稀释然试验3 mL
2 备试剂盒中瓶2时保存20°C稳定性> 2年
3 准备瓶3中溶液第次翻开前需充分晃动瓶子酶吸附橡皮塞然垂直存放瓶子次前需充分混合中溶物
4 备试剂盒中瓶4溶液时前恢复室温试验量20uL
5 准备瓶5溶液时
注意您疑心分光光度计准确性疑心样品中物质抑制试验L苹果酸标准质控溶液进行测定通提供公式计算L苹果酸浓度
实验需设备
1 检测仪中提供特定测试试（底 16 x 100 mm）时提供提取试（cat no GMQTB25）
2 10 mL聚丙烯试
3 微量移液器（20 uL）
4 连续分配器
5 玻璃刻度移液吸球
6 MegaQuantTM测定仪
7 定时钟
注意
1 方法专门测定苹果乳酸发酵葡萄酒果葡萄酒中L苹果酸浓度> 075 g L需样品进行稀释
2 稀释葡萄酒葡萄汁必须纯洁水〔蒸馏水高质量水〕果饮水首先需D果糖标准品验证否适合
3 测试试前必须清洗干净烘干
操作步骤
酚醛树脂
（红酒通常需进行处理）
1 取5 mL红葡萄酒参加10 mL聚丙烯试中
2 参加1片PVPP药片〔瓶5〕拧紧试盖充分混合5分钟Whatman No 1 （9 cm）滤纸滤收集约1 mL滤液滤液颜色深浅粉色〔般处理法〕然具深颜色葡萄酒5 mL需参加2片PVPP充分挤压收集滤液1 mL
3 取20uL滤液进行测定
A 测试方法A （简单法 –参图1）
1 取15 mL 溶液1（ ~ 23°C更高）15 mL蒸馏水参加测试中取30 mL等体积蒸馏水稀释溶液1〔参试剂配置方法第1点〕
2 提供镊子夹取1片药片〔瓶2〕充分混合12分钟完全溶解
3 参加20uL葡萄酒样品[PVPP处理（未稀释红白葡萄酒） 未PVPP处理（未稀释白葡萄酒）稀释葡萄酒葡萄汁]充分振荡混合
4 约1分钟试插入MegaQuantTM测定仪开关直屏幕显示’〔约2秒钟〕
5 屏幕出现000〞松开开关〔表示A1〕
6 取试参加20uL瓶3溶液〔L苹果酸脱氢酶〕充分混匀确保全部全部溶解时记录时间
7 次试插入MegaQuantTM测定仪5分钟开关直屏幕显示1 second’记录数值A2
8 确保试剂完全反响完全5分钟间隔1分钟读取数值直间隔1分钟数值变化〔参考图1图2〕
注意
1 果数值A2 > 10010倍稀释样品次测定果数值A2 < 010样品进行分稀释〔100倍稀释改10倍稀释〕
2 INT光敏感性〔显色剂药片中〕长时间反响导致溶液颜色加深必须推荐操作方法进行测定
3 进行试验前瓶1提前冰箱中取出恢复室温果温度< 23°C反响程快结束
4 添加药片15 mL溶液1152 mL蒸馏水中确保药片全部溶解测定 0 吸光度值作空白然参加20uL L苹果酸脱氢酶〔瓶3〕5分钟测定增加吸光度值（A2）微吸光度变化（A2）没意义〔000001〕
计算
ΔAL苹果酸 增加吸光度值 （A2）
常规ΔAL苹果酸 数值少010吸光单位获满意试验结果L苹果酸含量公式计算〔参图3中标准曲线〕
未PVPP处理样品中L苹果酸浓度
20uL未稀释样品
c 0771 x DΔAL苹果酸 [gL]
20uL稀释样品
c 0771 x 稀释系数 x ΔAL苹果酸 [gL]
PVPP处理样品中L苹果酸浓度
20uL未稀释样品
c 0771 x ΔAL苹果酸 x 102100 [gL]
0786 x DΔAL苹果酸 [gL]
20uL稀释样品
c 0786 x 稀释系数 x DΔAL苹果酸 [gL]
注释
102100 PVPP处理葡萄酒容差
图 1 分光光度仪测定（25°C 1 cm径）MegaQuantTM L苹果酸时间变化注意 方法测定L苹果酸浓度图3中测定浓度低方法中测试径1 cmMegaQuantTM测试约13 cm
测试方法 B （ 缓慢反响〞处理）
1 取15 mL 溶液1（ ~ 23°C更高）15 mL蒸馏水参加测试中取30 mL等体积蒸馏水稀释溶液1〔参试剂配置方法第1点〕
2 提供镊子夹取1片药片〔瓶2〕充分混合12分钟完全溶解
3 参加20uL葡萄酒样品PVPP处理红葡萄酒充分振荡混合
4 约1分钟试插入MegaQuantTM测定仪开关直屏幕显示’〔约2秒钟〕
5 屏幕出现000〞松开开关〔表示A0〕时记录时间
6 取试5分钟次插入试开关直屏幕显示1 second’插入试前压钮否导致测定仪读取错误 记录数值A1〔5分钟存缓慢反响导致颜色增深〕
7 取试立参加20uL瓶3溶液〔L苹果酸脱氢酶〕充分混匀确保全部全部溶解时记录时间
8 次试插入MegaQuantTM测定仪5分钟开关直屏幕显示吸光度记录数值A2
9 确保试剂完全反响完全5分钟间隔1分钟读取数值直间隔1分钟数值变化超001吸光单位〔参考图1图2〕
计算
ΔAL苹果酸 [（A2A1） （A1A0）]
A0数值0简化：ΔAL苹果酸 A2 （2 x A1）
例〔参图1〕 A2 042A1 002
ΔAL苹果酸 042 （2 x 002） 042 004 038
常规ΔAL苹果酸 数值少0100吸光单位获满意试验结果L苹果酸含量公式计算〔参图3中标准曲线〕
PVPP处理样品中L苹果酸浓度
20uL未稀释样品
c 0771 x ΔAL苹果酸 x 102100 [gL]
0786 x DΔAL苹果酸 [gL]
20uL稀释样品
c 0786 x 稀释系数 x DΔAL苹果酸 [gL]
注释
102100 PVPP处理葡萄酒容差
图 2 分光光度仪测定（25°C 1 cm径 492nm）MegaQuantTM L苹果酸时间变化测试样品PVPP处理滤浓度红葡萄酒〔018ug〕参加样品测A05分钟反响测定吸光度A1计算出缓慢反响〞率然参加L苹果酸脱氢酶〔20uL〕继续反响10分钟[5分钟测定吸光度值A2]果MegaQuantTM测试仪进行测定A0吸光度值0
制备样品
稀释样品
色杯中〔：分析20 uL样品〕L苹果酸含量必须15415ug间样品溶液必须充分稀释浓度0007 075 gL间
估计L苹果酸浓度（gL）
蒸馏水稀释
稀释系数F
< 075
07575
7575
稀释
1 + 9
1 + 99
1
10
100
样品处理事例
（a） 测定葡萄汁白葡萄酒中L苹果酸含量
测定白葡萄酒葡萄汁中L苹果酸含量样品通常需处理直接进行测定必进行稀释
样品处理事例
（b） 测定红葡萄酒中L苹果酸含量
取5 mL红葡萄酒参加10 mL聚丙烯试中参加1片PVPP药片〔瓶5〕拧紧试盖充分混合5分钟Whatman No 1 （9 cm）滤纸滤收集约1 mL滤液滤液颜色深浅粉色〔般处理法〕然果滤液深红色进行处理需参加2片PVPP充分挤压收集滤液1 mL澄清浅粉色滤液直接进行测定
（c） 测定葡萄中L苹果酸含量
取200 mL蒸馏水参加500 mL量筒中参加葡萄体积刚刚超400 mL参加400 mL等体积蒸馏水〔 总体积420 mL需外参加蒸馏水20 mL〕样等葡萄进行2倍稀释然充分均质3分钟然Whatman No 1〔9 cm〕滤纸滤弃初mL滤液收集510 mL滤液稀释直接进行测定
单葡萄进行测定压碎葡萄收集葡萄汁10 mL量筒中然等体积蒸馏水稀释混合均匀滤收集提取液稀释直接进行测定
图 3 MegaQuantTM 测定仪测定L苹果酸浓度（ug测定）相吸光度标准曲线〔室温 505 nm〕
参考文献
1 McCleary BV and Charnock S J （2005） Reagent components in tablet form for colorimetric assays of food and beverage analytes Patent submitted
2 Mollering H （1985） LMalate In Methods of Enzymatic Analysis （Bergmeyer H U ed） 3rd ed VolVII pp 3947 VCH Publishers （UK） Ltd Cambridge UK
验证MegaQuantTM 测定仪L苹果酸测试精确性性
1 提供MegaQuantTM 测定仪校验标准仪器参数程中应改变
2 通试剂盒中提供L苹果酸质控标准验证MegaQuantTM 测定仪准确性样品换L苹果酸质控标准20uL试验步骤进行测定吸光度（A2A1）049果存差异移取液体误差导致
MegaQuantTM 测定仪维护考前须知
错误信息
仪器面板出现种错误信息具体错误原处理方法：
错误信息显示
原
处理
E1
空白颜色干净划痕
干净枯燥空白重新测定
E2E3
a) 正确空白结果
b) 仪器漏电
a) 正确空白重新读0
b) 返回维修
E4
电压太低
更换电池
E5
散射光影响读取
a）聚光灯强烈光源移开
b）检查仪器损坏原
维护保养
干净测试试测试前试盖拧紧防试剂溅入仪器中果溢出立棉织物擦拭干净溶解性腐蚀性溶液擦拭仪器
显示屏出现B〞提示需更换新电池轻轻拉仪器部电池面板2节15VAA’ 碱性电池果长时间需仪器电池取出
MegaQuantTM 测定仪售出日起保修期1年意外损坏错误操作未指定点维修导致损坏保修范围果需维修请联系
技术规格：
仪器类型
单波长505nm预制测定程序
光学元件
Palintest M2 光学系统蓝绿LED显示屏滤波器光电探测器
测量范围
000120吸光单位
运行温度
040°C 32104°F
显示屏
10 mm LCD
测试试
圆底底试 160 cm OD 1415 cm light path
开关
单钮
空白0设置
测试做记忆重置选择
部校正
出厂时已设定
测定基座
设软垫防止溶液溅落
电源
2节15VAA’ 碱性电池
173 x 7544 x 41 cm
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