水果蔬菜中营养成分含量测定
学 院:生命科学学院
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水果蔬菜中营养成分含量测定
摘 :橘子猕猴桃两种水果胡萝卜种蔬菜材料次测定三种材料VC含量蛋白质含量溶性糖含量测定VC含量时利氧化型26二氯酚靛酚(DCPIP)酸性条件滴定VC酸性溶液滴定终点溶液色变粉红色刻测定蛋白质含量时采考马斯亮蓝法595nm处测吸光度进计算含量测定溶性糖含量时采蒽酮法进行测定
关键词:滴定法分光光度法蒽酮法VC含量蛋白质含量原糖含量
子课题 水果蔬菜中VC提取含量测定
引 言
Vc 类膳食营养中非常重维生素分布水果(柑橘草莓山楂苹果) 蔬菜(辣椒西红柿)中部分饮料中含水溶性 Vc猴等肝脏中缺少古洛酯氧化酶体合成 Vc必须食物中获现商家增加产品竞争 力提高知名度饮料产品中加入部分 Vc例脉动激活水溶 C100 等缺乏 Vc 易坏血病(毛细脆弱牙龈发炎出血肌肉出血) Vc 称抗坏血酸
11实验原理:
天然 Vc 原型氧化脱氢型两种原型 Vc 具强原性实验利原型 Vc 原染料 26二氯酚靛酚反应含量进行测定酸性条件氧化型 26二氯酚靛酚红色原型 Vc 红色氧化型 26二氯酚靛酚原成色原型 26二氯酚靛酚时原型 Vc 身氧化成脱氢型 Vc
酸性条件利氧化型 26二氯酚靛酚滴定 Vc 酸性溶液溶液色变粉红色 刻滴定终点杂质干扰消耗染料样品中原型 Vc 含量成正
12材料仪器试剂:
材料:橘子猕猴桃胡萝卜
仪器: 研钵锥形瓶微量滴定等
试剂:(1)2%草酸溶液 (2)02mgml 标准 Vc 溶液( 2%草酸溶液配) (3)01mgml 26 二氯酚靛酚溶液 (棕色瓶装 4℃保存)
13实验方法:
131标准液滴定:(1)取标准 Vc 液 5ml 锥形瓶中 26 二氯酚靛酚滴定粉红色15 秒褪色(2)取5 ml 2草酸作空白方法滴定
132样品Vc含量测定:取 1g 水果蔬菜加入 2草酸溶液 3ml 研磨成匀浆转入 10ml 离心 4ml 2 草酸溶液分两次洗研钵转入离心中3000rmin 离心 10 分钟清液转入 25ml 容量瓶定容取 5ml 溶液立 26 二氯酚靛酚滴定出现粉红色15 秒褪色重复三次
14结果讨
141 标准液滴定
标准 Vc 溶液
01mgml
滴定时消耗染料体积(ml)
(滴定标准 Vc 溶液染料体积 减滴定空白溶液染料体积)
1 毫升染料溶液 氧化 Vc 量
(mgml) (T)
5ml
第次
第二次
第三次
均
00714
7
7
7
7
142样品滴定
样品名称
样品液总体积(ml)
滴定时样品
液量 (ml)
滴定样品染料量Va(ml)
1
2
3
均
橘子
25ml
5ml
04
02
04
0333
猕猴桃
48
385
345
4033
胡萝卜
015
025
02
02
143结果计算
水果蔬菜 Vc 含量(mgg)[(Va*T*25)5]*100
Va:滴定样品染料量(ml) T: 1 毫升染料溶液氧化 Vc 量(mg)
橘子 Vc 含量(mgg)119047
猕猴桃 Vc 含量(mgg)14404836
胡萝卜 Vc 含量(mgg)71429
144讨
实验数常见果蔬中猕猴桃中Vc含量相较准确测定Vc含量需加入适宜提取剂延长稳定时间提高提取率查阅相关文献解2草酸5冰乙酸5三氯乙酸作提取剂提高Vc提取率
子课题二 水果蔬菜饮料中蛋白质提取含量测定
引 言
蛋白质含量测定广泛应生产实践医药卫生等领域测定牛奶等食品中蛋白质含量作营养成分参考值测定病尿液中蛋白质含量检测否某种疾病等测定蛋白质含量具非常重意义蛋白质身具系列特点(具等电点富含机氮含肽键存某含轭双键氨基酸残基某染料结合等)达测定蛋白质含量目蛋白质诸特点存决定会测定方法时种非蛋白组分存干扰种方法身局限性(适条件)种测定方法优缺点目前常蛋白质含量测定方法四种:凯氏定氮法Folin酚法考马斯亮蓝(G250)法紫外吸收法中三种方法常实验选择考马斯亮蓝(G250)法
21实验原理:考马斯亮蓝(G250)染色法测定蛋白质含量属染料结合法种考马斯亮蓝(G250)酸性溶液中游离状态棕红色蛋白质通范德华键结合变蓝色蛋白质染料复合物595nm见光光吸收定范围OD值蛋白含量成正
22材料仪器试剂:
材料橘子猕猴桃胡萝卜
仪器:见光分光光度计研钵离心机等
试剂:考马斯亮蓝(G250)染色液025mgml牛血清蛋白
23实验方法
231标准曲线测定:取7支试分加入00010020030040050ml牛血清蛋白溶液水补足050ml加5ml染色液立摇匀置室温放置5min然测量OD值绘制标准曲线
232样品蛋白质提取方法:取2克水果蔬菜加入水3ml研磨成浆转入10ml离心4ml水洗研钵两次转入离心中3000rmin离心10分钟清液转入25ml容量瓶中定容取05ml样品液试中加入考马斯亮蓝(G250)染色液5ml充分摇匀放置5分钟测量OD值记录结果
233样品提取液中蛋白质含量测定:吸取 05ml 样品提取液饮料试中加入考马斯亮蓝 G250 染色液 5ml充分混匀放置 5 分钟测 A595nm记录结果查标准曲线蛋白质浓度 X (μgml)
24结果讨
241标准曲线绘制
编号
1(空白)
2
3
4
5
6
标准蛋白(ml)
00
01
02
03
04
05
浓度(mgml)
00
005
01
015
02
025
吸光度值(A)
0
0137
0350
0657
0762
0875
242样品提取液中蛋白质含量测定
样品
橘子
猕猴桃
胡萝卜
吸光度(A)
1422
1256
1287
浓度X(μgml)
03808
03365
03448
243结果计算
样品蛋白质含量(μgg)[X•提取液总体积] 样品鲜重(g)
橘子蛋白质含量(μgg)4760
猕猴桃蛋白质含量(μgg)42063
胡萝卜蛋白质含量(μgg)4310
244讨
蛋白质含量重生理生化指标果蔬品质营养重评价指标利考马斯亮蓝法测定蛋白质含量时牛血清蛋白作标准液浓度定范围良线性关系提取蛋白质时定研磨充分搅拌均匀更含量蛋白质
子课题三 水果蔬菜中溶性糖提取含量测定
引 言
糖时体必须种营养物质体呼吸马转变碳水化合物供体量糖类物质具重生物学功例:提供量作物质代谢碳骨架细胞骨架细胞间识生物分子间识作等
31实验原理
原糖碱性条件加热氧化成糖酸产物35二硝基水杨酸原棕红色3氨基5硝基水杨酸定范围原糖量棕红色物质颜色深浅成正关系利分光光度计540nm波长测定光密度值查标准曲线便求出样品中原糖含量
32材料试剂仪器
材料橘子猕猴桃胡萝卜
仪器:电热恒温水浴锅分光光度计电子天容量瓶刻度吸等
试剂:(1)葡萄糖标准液:l00 µgml(2)浓硫酸(3)蒽酮试剂:02 g 蒽酮溶 100 ml
浓 H2SO4 中日配制
33实验方法
331标准曲线测定:取 7 支试表数配制系列浓度葡萄糖溶液
支试中立加入蒽酮试剂 40m1迅速浸冰水浴中冷加完起浸沸水浴中口加盖防蒸发水浴重新煮沸起准确煮沸 l0 min 取出冰浴冷 室温 620 nm 波长第空白迅速测余吸光值标准葡萄糖含量(µg) 横坐标吸光值坐标作出标准曲线
号
1
2
3
4
5
6
7
葡萄糖标准液(ml)
0
01
02
03
04
06
08
葡萄糖含量(µg)
0
10
20
30
40
60
80
332 样品蛋白质提取方法:取1克水果蔬菜加入水3ml研磨成浆4ml水洗研钵两次转入试中50度水浴20min取出冷室温3000rmin离心10分钟清液转入25ml容量瓶中定容
333样品总糖含量测定:吸取 1 ml 已稀释提取液试中加入 4O ml 蒽酮试剂行三份空白等量 蒸馏水取代提取液操作标准曲线制作根 A620 均值标准曲线查出葡萄糖含 量(µg)
饮料样品需根测定值适稀释 OD 值超 07 准
34结果讨
341标准曲线绘制:
号
1
2
3
4
5
6
7
葡萄糖含量(µg)
0
10
20
30
40
60
80
吸光度(A)
0
0039
0198
0304
0432
0590
0739
342样品提取液中溶性糖含量测定:
样品
橘子
猕猴桃
胡萝卜
吸光度(A)
1287
0130
0136
稀释倍数
100
1000
100
343样品提取液中溶性糖含量计算:
样品含糖量()( C×V总×D )(W×V 测×106)×100
中:C:标准曲线查出糖含量(µg) V 总:提取液总体积(ml)
V 测:测定时取体积(ml) D:稀释倍数 s
W:样品重量(g) 106:样品重量单位 g 换算成µg 倍数
计算:
橘子含糖量()0086
猕猴桃含糖量()6908
胡萝卜含糖量()0722
344讨
蒽酮色法测定溶性糖含量水杨酸法测定原糖含量实验中采蒽酮法测定溶性糖证明猕猴桃中糖含量远远高水果蔬菜愧水果王
参考文献
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10郭蔼光编基础生物化学高等教育出版社P137
11刘杰超焦中高周红王思新 蔬菜活性应前景中国食物营养2008年8期
12许淑芳 朱江 考马斯亮兰G250法测定苹果浓缩汁生产中蛋白含量饮料工业 2005年01期
13王林嵩生物化学实验技术2007年9月第版科学出版社
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