医院检验科完整SOP程序文件


    科室设置
    1科室实验室设置负责
    2科室员结构
    3检验中心面图
    4检验中心工作流程图
    二检验中心工作职责
    ()检验中心级员工作职责
    1检验中心副工作职责
    2检验师工作职责
    3检验师工作职责
    4检验师工作职责
    5检验士工作职责
    (二)检验中心实验室工作职责
    1检室员岗位职责
    2生化室员岗位职责
    3免疫室员岗位职责
    4细菌室员岗位职责
    5骨髓细胞室员岗位职责
    6 急诊检验员岗位职责
    三检验中心项规章制度
    1生物安全理制度
    2检验质量理制度
    3血型安全鉴定制度
    4差错事登记制度
    5安全制度
    6急诊检验制度
    7技术理制度
    8工作职责制度
    9试剂理制度
    10天称量制度
    11实生理制度
    12仪器理制度
    13标理制度
    14档案理制度
    15民服务公约
    16细菌培养室菌制度
    17位素实验室理制度
    18会议学制度
    19请示报告制度
    20保密守
    21职工考勤制度
    22事考核制度
    23治安保卫制度
    24消防安全制度
    25业务学理制度
    26物资报废制度
    27赔偿制度
    28奖罚制度
    29质量信息反馈制度
    30计算机理制度
    31血常规复查制度
    32卫生制度
    四检验中心标准操作规程
    ()检验中心类仪器标准操作规程
    1BECKMAN CX9生化操作规程
    2日立7600生化仪操作规程
    3RA1000生化仪操作规程
    4644电解质仪操作规程
    5SP4430干式生化仪操作规程
    6拜耳248血气分析操作规程
    7ACCESS化学发光操作规程
    8AXSYM化学发光仪操作规程
    9Array 360型全动特定蛋白分析仪操作规程
    10BIORADModel 550酶标仪操作规程
    11FJ放射免疫γ计数仪操作规程
    12ACL200动血凝仪操作规程
    13CoAgAMTX全动血凝仪操作规程
    14HMX全动血细胞分析仪操作规程
    15CD—1700全动血细胞分析操作规程
    16Coulter EPICS XL流式细胞仪操作规程
    17MONITOR JI红细胞沉降仪操作规程
    18NycoCard Reader II型功全定量金标检测仪操作规程
    19UF100全动尿液分析仪操作规程
    20盈东尿十项化学分析仪操作规程
    21ATB 细菌鉴定仪操作规程
    22二氧化碳孵箱操作规程
    23BacTAlert120全动血培养操作规程
    24伟力彩色精子动态分析仪操作规程
    25DiaMedID Micro TyPing System达亚美微量定型系统操作规程
    261575型微孔板清洗器操作规程
    (二)检验中心检测项目标准操作规程
    A检室
    A1血常规检验标准操作规程
    A2嗜酸性粒细胞直接计数标准操作规程
    A3红细胞沉降率测定标准操作规程
    A4血型鉴定标准操作规程
    A5尿常规标准操作规程
    A6时尿沉渣计数标准操作规程
    A7尿乳糜定性检查标准操作规程
    A8便常规标准操作规程
    A9虫卵包囊浓缩检查标准操作规程
    A10隐血试验标准操作规程
    A11脑脊液检验标准操作规程
    A12浆膜腔积液检查标准操作规程
    A13精液检查标准操作规程
    A14前列腺液检查标准操作规程
    A15阴道分泌物检查标准操作规程
    A16胃液检查标准操作规程
    B生化室
    B1血氨测定标准操作规程
    B217KS测定标准操作规程
    B317OH测定标准操作规程
    B4VMA标准操作规程
    B5Insulin Autoantibadies(IAA) 胰岛素身抗体标准操作规程
    B6Islet Cell Autoantibodies (ICA) 胰岛细胞身抗体标准操作规程
    B7脯氨酸肽酶测定(Prolidase Test Kit) 标准操作规程
    B8I型糖尿病检测(诊断酶联试剂盒)标准操作规程
    B9血清Ⅳ胶原蛋白(PANASSAY Ⅳ. C)标准操作规程
    B10血清蛋白电泳标准操作规程
    B11N乙酰葡萄糖苷酶(NAG) 标准操作规程
    B12腺苷脱氨酶(ADA) 标准操作规程
    B13尿肌酸测定标准操作规程
    B14肌钙蛋白(TNT)测定标准操作规程
    B15 肿瘤相关物质测定标准操作规程
    C免疫室发光放免室
    C1HAVAbIgM标准操作规程
    C2PreS1标准操作规程
    C3HBSAg 标准操作规程
    C4HBSAb标准操作规程
    C5HBEAg标准操作规程
    C6HBcAb标准操作规程
    C7HBcAbIgM标准操作规程
    C8HCVIgG标准操作规程
    C9HCVIgM 标准操作规程
    C10HDVAg标准操作规程
    C11HDVIgG标准操作规程
    C12HDVIgM标准操作规程
    C13HEVAbIgG标准操作规程
    C14HEVAbIgM标准操作规程
    C15HGVAb标准操作规程
    C16TTVIgG标准操作规程
    C17寒冷凝集反应标准操作规程
    C18ENA肽抗体谱标准操作规程
    C19ANA标准操作规程
    C20dsDNA标准操作规程
    C21幽门螺杆菌抗体标准操作规程
    C22嗜异性凝集试验标准操作规程
    C23肥达氏反应标准操作规程
    C24胰岛素测定标准操作规程标准操作规程
    C25C肽测定标准操作规程标准操作规程
    C26胰高血糖素测定标准操作规程标准操作规程
    C27α1微球蛋白测定标准操作规程
    C28β2微球蛋白测定标准操作规程
    C29THP蛋白测定标准操作规程
    C30抗TGTM抗体测定标准操作规程
    C31抗INS抗体测定标准操作规
    C32III型前胶原放射免疫测定标准操作规程
    C33逶明质酸放免测定标准操作规程
    C34Ⅳ型胶原放免测定标准操作规程
    C35皮素放免测定标准操作规程
    C36肺肿瘤标记CY211放免测定标准操作规程
    C37T3 T4 TSH FT3 FT4 测定标准操作程序(SOP)
    C38AFPCEAFerBROVGIPSA fPSACa125Ca199Ca153测定标准操作程序(SOP)
    C39HCGPRLFSHLHE2P(孕酮)T(睾酮)测定标准操作程序(SOP)
    C40铁蛋白叶酸VitB12测定标准操作程序(SOP)
    C41CKMBcTnIMYO测定标准操作程序(SOP)
    C42IgE测定标准操作程序(SOP)
    C43高辛茶碱皮质醇卡马西苯巴妥 苯妥英钠丙戊酸安定环胞霉素标准操作程序
    C44DPD测定标准操作程序(SOP)
    C45敏原测定标准操作程序
    D血液骨髓室FCM
    D1D二聚体标准操作规程
    D23P试验标准操作规程
    D3骨髓细胞学检查标准操作规程
    D4氧化物酶(POX)染色标准操作规程
    D5苏丹黑B(SBB)染色标准操作规程
    D6中性粒细胞碱性磷酸积分(NAP)染色改良GOmorI氏钙钴法标准操作规程
    D7中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)染色偶氮偶联法标准操作规程
    D8 糖原(PAS)染色标准操作规程
    D9 酯酶染色中性非特异性脂酶(αNAE)染色标准操作规程
    D10铁染色标准操作规程
    D11酸性磷酸酶(ACP)染色标准操作规程
    D12红细胞渗透脆性试验标准操作规程
    D13体溶血试验标准操作规程
    D14血清酸化溶血试验(Ham试验) 标准操作规程
    D15热溶血试验(定性) 标准操作规程
    D16蔗糖溶血试验(糖水试验) 标准操作规程
    D17变性珠蛋白体检查(Heinz体染色) 标准操作规程
    D18血浆游离血红蛋白测定标准操作规程
    D19淋巴细胞亚群测定标准操作规程
    D20HLA B27 HLA B7 测定标准操作规程
    D21活化细胞亚群测定标准操作规程
    D22活化血板测定标准操作规程
    D23APO 27测定标准操作规程
    D24CD25CD3 测定标准操作规程
    D25MDR(P—gP)药耐药基)测定标准操作规程
    D26TdT(MRD白血病残留病灶)测定标准操作规程
    D27血板糖蛋白测定标准操作规程
    D28CD23(Ige低亲力受体)测定标准操作规程
    D29CD95 Fas 测定标准操作规程
    D30FCM试剂配制标准操作规程
    D31Bcl2 测定标准操作规程
    D32ANNEXIN  V 测定标准操作规程
    D33P53 测定标准操作规程
    D34λ链测定标准操作规程
    D35CD55 测定标准操作规程
    D36血板抗体测定(PAIgGPAIgMPAIgA)标准操作规程
    D37DNA测定标准操作规程
    D38干细胞CD34测定标准操作规程
    D39CD34+ 细胞绝计数标准操作规程
    D40纤溶酶原激活剂抑制物(PAI)活性测定(发色底物法) 标准操作规程
    D41组织型纤溶酶原激活剂(tPA)活性测定(发色底物法)标准操作规程
    D42血性假血友病子(vWF)含量测定(ELISA)标准操作规程
    E细菌室
    E1革兰氏阴性鉴定卡药敏卡(GNIGNS卡操作步骤)标准操作规程
    E2革兰氏阳性鉴定卡药敏卡(GPI GPS卡操作步骤)标准操作规程
    E3酵母菌鉴定卡(YBC卡) 标准操作规程
    F血库
    第章 床输血技术规范
    第二章 输血申请
    第三章 受血者血样采集送检
    第四章 交叉配血
    第五章 血液入库核贮存
    第六章 发血
    第七章 输血
    附件 成分输血指南
    附件二 身输血指南
    附件三 手术创伤输血指南
    附件四 科输血指南
    附件五 术中控制性低血压技术指南
    附件六 输血治疗意书
    附件七 床输血申请单
    附件八 输血记录单
    附件九 输血良反应回报单






    科室设置

    1科室实验室设置负责
    检验中心



    副:


    质控组长:



    秘书:



    检组
    生化组
    免疫组
    细菌组






    组长:
    组长:
    组长:
    急诊组:
    检细胞组:


















    2科室员结构

    姓名

    出生
    年月
    学历
    毕业院校
    参加工作时间
    现职称
    手机
































































































































































































    3科室面图




































    4检验中心工作流程图

    实验室接收类标核

    贴条码编号处理标
    求处理标存放
    检验分析
    调整类仪器运行状态
    特殊结果疑难结果报实验室组长
    定期检验标
    实验室技术核准质控分析结果
    室质量控制
    签发报告
    记录仪器关参数室质控结果
    天检验标

    住院病诊检验流程

    医生电脑网络中申请检验项目
    申请填写检验申请输入电脑网络


    类穿刺液等

    护士工作站印条码粘贴


    便
    血液

    嘱病求留取标
    穿刺标求处理


    关求抽取血液样



    送回病房签收
    实验室检验签发报告单
    具体实验室进行检验
    检验中心实验室
    签收

    门诊病诊检验流程

    病诊卡



    医生填写检验申请单输入电脑网络



    病持诊卡收费处记帐交费


    体液
    便
    血液标检验



    相应科室取标
    病留取标
    病诊卡门诊抽血中心刷卡印条码关求抽血嘱
    病取报告时间




    体液实验室相关部门




    取回报告

    实验室检验签发报告
    实验室检验签发
    医生处诊疗
    取回报告

    二检验中心工作职责
    ()检验中心级员工作职责
    1检验中心副工作职责
    (1) 院长院委领导负责科业务教学科研行政理工作
    (2) 负责组织科业务技术建设规划年度工作计划诊断质量监测控制方案制定实施检查总结
    (3) 负责解决科复杂疑难检验诊断仪器设备等技术问题参加床会诊抢救疑难病例诊断审签重诊断报告
    (4) 常检查仪器设备保维修情况指定员负责登记统计资料积累保工作
    (5) 负责科业务训练培养技术考核工作安排进修实员培训担教学工作
    (6) 学运国外先进技术组织开展新业务新技术科研工作总结验撰写学术文
    (7) 督促检查科员履行职责认真执行规章制度技术操作常规常进行医疗安全教育严防事差错
    (8) 负责科医德医风建设掌握属员思想业务力工作表现提出考核晋升奖惩培养意见
    副协助科工作科领导分工履行职责相应部分
    2检验师工作职责
    (1) 科领导负责专业业务教学科研仪器设备理工作
    (2) 负责科仪器设备购置证验收安装调试定期检查指导仪器设备维修保养解决科复杂疑难技术问题参加相应诊断工作
    (3) 负责业务技术训练考核担教学工作培养技师解决复杂技术问题力
    (4) 掌握专业国外信息指导级技术员开展科研引新业务新技术工作总结验撰写学术文
    (5) 参加床疑难病会诊讨负责疑难检验项目检查室质控室间质评工作
    3检验师工作职责
    (1) 科领导正(副)技师指导进行工作
    (2) 熟悉种仪器原理性方法协科制定技术操作规程质量控制措施负责仪器调试鉴定操作维修保养解决较复杂疑难技术问题参加相应诊断工作
    (3) 担教学工作指导培养技师解决较疑难技术问题力担进修实员培训负责技术考核
    (4) 解国外专业信息应先进技术开展科研引新业务新技术总结验撰写学术文
    (5) 参加科室值班
    (6) 负责疑难项目检验报告审签参加床病例讨
    4检验师工作职责
    (1) 科领导级技师指导进行工作
    (2) 参加专业仪器设备调试鉴定操作建档维修保养负责仪器零配件器材请领保建帐做种专业资料积累保登记统计工作
    (3) 根科室情况参加相应检验工作指导培养技士进修员负责技术考核
    (4) 学应国外先进技术参加科研引新业务新技术总结验撰写学术文
    (5) 参加科值班
    (6) 负责菌株毒种剧毒药品检验器材理担种检验项目技术操作特殊试剂配制鉴定
    5检验士工作职责
    (1) 科领导级技师指导进行工作
    (2) 协技师做仪器设备安装调试操作维修保养建档建帐登记
    (3) 协技师做物品药品器材请领保种登记统计工作
    (4) 钻研业务技术引新业务新技术指导进修实员工作
    (5) 参加科值班
    (6) 负责收集采取检验标进行般检验工作洗刷检验器材做消毒灭菌工作
    (二)检验中心实验室工作职责
    1检室员岗位职责
    (1) 体液岗位职责
    1) 天早730岗负责种检验仪器启动然处理病房尿液样
    2) 准备工作完毕室项操作规程台尿液分析仪进行 工作前质控工作通进入日常样检验失控重做      检查失控原室汇报作记录工作未允许擅改动
    仪器种参数时做种试剂更换工作
    3) 体液岗位负责尿液便白带胸腹水脑脊液精液关节液等类体液常规检验严格卫生部操作规程进行遇法解决实际问题应逐级反映解决擅作张否责负沉渣分析复检率省检中心2000(6)文件
    4) 三乙医院标准做窗口文明服务工作具备良医德医风杜绝病争吵
    5) 天做类仪器质控工作状态记录种特殊样交接班处理急诊检验结果均书面记录备查急诊项目均优先检验时发出报告
    6) 工作结束做日卫生次日工作准备保持实验室整洁美观
    (2)血常规岗位职责
    1) 时岗班启动类血球分析仪做工作前准备工作质控工作做书面记录
    2) 质控正常室规定进行样检验做样核工作尤血型鉴定严格室规定进行杜绝差错发生记录工作应清淅详细
    3) 血常规镜检省检中心2000(6)文件复检明确标示做登记
    4) 天做类血球分析仪质控工作状态登记特殊样交接保存处理急诊项目优先检验时报告
    5) 严格三乙医院标准搞窗口服务工作具备良医德医风杜绝病争吵
    6) 做室仪器卫生工作次日工作准备试剂更换保持实验室安静整洁美观
    (3)抽血岗位职责
    1)菌操作时应戴帽子口罩次性手套病操作前勤洗手
    2)严格执行消毒隔离措施静脉抽血做针筒巾带消毒止血带纸垫日消毒末稍采血片杜绝交叉污染医垃圾求分类处理针头置锐器盒针筒置黄色垃圾袋
    3)严格三乙医院标准搞窗口服务工作具备良医德医风杜绝病争吵

    2生化室员岗位职责
    (1)岗位(服务台)
    1) 负责全天标接收分检外单位送检标(安保险)特定子作书面记录应认真核化验单试标签容否致符合求样(联号姓名致抽血符合求等)应立电话通知病房抽血处便时妥善处理作书面记录
    2) 溶血血清量太少等标应立电告病房抽血处建议重抽作书面记录
    3) 急诊标应马送急诊检验室保证急诊3060分钟报告
    4)午四点送报告单回房签收
    5)负责邮寄类报告单作书面记录

    (2)岗位二
    1) 负责生化标编号分离血清输入 输入时应认真仔细切忌求速度忽视质量姓名性年龄住院号病房床号等应逐项认真输入查确保病资料准确化验单输入完毕应重新核遍
    2) 必须认真核医生求检验组合化验单贴条码组合否致果误应立医生反映时更正

    (3)岗位三
    负责BECKMAN CX9日保养常规操作鉴发生化肝功肾功电解质血脂心肌酶糖耐量血糖生化项目等审核签发报告
    1) 严格仪器操作规程操作善改变原设置
    2) 负责BECKMAN CX9日常规保养定标质控样检测报告鉴发
    3) 遇失控仪器障等情况应立室志反映便时排做书面记录
    4) 溶血脂血标发报告时应审核处说明
    5) 某特异常结果应时床联系室组长汇报必时科记报逐级作书面记录
    6) 日工作结束必须维修保养记录仪器运行记录书面记录仪器运行状况遇仪器重障天出报告时应时告诉逐级汇报医务部院办院长便通知床门诊病应门诊服务台出具安民告示耐心做解释工作时告诉设备科做检修工作
    7) 应特注意电解质报告列项目超低求时时电话通知关科室便床时处理做记录
    血钾: ≤30mmoll>55mmolL
    血钠: ≤130mmolL>150mmolL
    血氯: ≤90mmolL>115mmolL
    空腹血糖:<38mmolL>111mmolL
    8) 做日室质控工作月底总结月质控情况更换质控品批号试剂校准品批号等室质控限关事项应记录册失控项目应认真填写失控报告期完成卫生部省检中心室间质评理想项目应注意总结保存资料作书面总结记录
    岗位四(机动)
    1) 三五午帮免疫室事岗位()工作 午帮生化室
    2)二四 协助岗位(二)(三)做生化室日常工作
    3免疫室员岗位职责
    岗位
    1) 负责全天标接收分检①科室部门特殊标应马口头转告者转送作书面记录②外单位送检标特定子作书面记录③应认真核化验单试标签容否致符合求样应立电话通知病房抽血处便时妥善处理作书面记录
    2) 离心分离血清:溶血血清量太少等标应立电告病房抽血处建议重抽作书面记录
    3) 根标试条码样品进行分类作标前期处理天时检验标应规定留取血清冷藏式冷冻保存
    4) 负责免疫室杂项检查肥达氏反应(LPSPHA)外斐氏反应(DX2OXDOX19)优生优育乳头瘤病毒抗体EB病毒抗体支原体衣原体出血热抗体(EHFV)智力筛查敏原肿瘤相关物质蛋白电泳身抗体等项目测定
    5) 协助(二)(三)岗位做免疫室日常工作
    岗位二
    1) 负责天乙肝三系输血前血清学检查测定报告①标查编号②正规试验操作程③结果报告审核④疑结果复查
    2) 协助岗位:进行样品分检:标离心等做前期样处理
    3) 做标测试项目查制度试标签做标留取工作防漏检
    4) 必须认真核医生求检验组合试贴条码组合否致果误应立样处理志反映时更正
    5)负责乙肝三系室室间质控
    岗位三
    1)负责AccessAXSYM特定蛋白等仪器日保养常规操作签发甲状腺全套肿瘤全套性激素全套药物浓度特定蛋白免疫项目报告
    2)严格仪器操作规程操作擅乱改设置
    3)负责甲状腺肿瘤特定蛋白室室间质控

    4细菌室员岗位职责
    岗位
    1) 班先搞室卫生核查培养箱冰箱工作温度否设定范围做记录
    2) 冰箱取出天需种板:5绵羊血哥轮亚皿沙保罗培养皿伊红美兰皿嗜血杆菌培养皿淋病奈瑟菌培养皿SS皿等 时检查种培养基试剂库存量做需配制培养基购买试剂交班工作
    3) 接收样:核样号申请单联号否致致马病房联系便作出相应处理退单重送样等做联系情况记录核查送检样否符合求
    ① 痰液样:先外观直接涂片镜检 低倍镜见白细胞>25>10皮细胞<25视野合格痰液
    ② 菌体液样:检查种菌体液样盛放器皿否符合求
    ③ 容易干燥样:容易干燥样便咽拭子脓液拭子泌尿生殖道拭子等否已干燥
    ④ 做厌氧菌培养样送检环境否满足等等
    符合求样必需床联系便作出相应处理方法联号符样做记录符合样进行原始单登记
    4) 样编号:符合样作出编号门诊标编号An病房标编号Bn便查证种培养基申请单编号时均需明确标明接种日期种涂片样编号:抗酸染色编T1nG双球菌涂片写病姓名性年龄
    5) 样接种:①痰液咽拭子脑脊液分接种血皿嗜血杆菌专皿伊红美兰皿脑脊液接种皿余部分倒入增菌瓶增菌②尿液接种血皿10ml伊红美蓝皿10 ml③种菌体液脓液泌尿生殖道分泌物接种血皿FM皿伊红美蓝皿④便致病菌三线接种SS板伊红美蓝皿沙保氏皿血皿⑤分泌物淋球菌培养接种淋球菌专板JXX皿⑥支原体培养+药敏说明书接种支原体专培养基⑦厌氧菌培养接种已原血板立放厌氧袋中时接种普通血板⑧真菌培养种标均接种沙保罗板⑨细菌L型菌培养接种L型细菌增菌肉汤⑩接种样前编号应记录外脓液脑脊液等接种时应沉渣进行革兰染色细菌立刻通知床做记录
    6) 样培养:①接种嗜血杆菌板淋球菌板置510CO2孵箱中支原体培养基L型细菌培养基均置355℃培养箱(SP250A型)②移种血板沙保罗板SS板伊红美兰板血液增菌培养瓶均置355℃培养箱(TABAIEAN140型)
    7) 涂片染色:①抗酸染色严格操作规程厚片法涂片痰液样胸腹水尿液脑脊液等约10ml试中低速1000转分离心2分钟取清中5000转分高速离心10分钟取沉淀涂厚片然干燥固定说明书染色镜检②G双球菌涂片应滚动式涂片法玻片端涂端反复次火焰固定进行革兰染色③脑脊液隐球菌涂片应快速离心倒清液沉淀涂片固定梅毒螺旋体涂片G双球菌涂片两种涂片均苯胺兰推片染色暗视野检测
    8) 需购买试剂板培养基染色液需配置培养基应时交班申报室组长午配制员
    9) 新岗实进修员时应认真交代岗位切事宜认真作带教工作
    10)协助岗位2做关工作岗位2休息时岗位1承担切工作
    (2) 岗位二
    负责菌株纯化鉴定机药敏纸片质控等
    1) 班首先检查ATBMoriemx动分析仪工作否正常 做记录查昨日机结果印
    2) 查昨天移种板申请单原始登记确定标移种否正确观察血液增菌培养瓶发现细菌生长马涂片革兰染色细菌染色特性形态报告床做记录时继续步工作
    3) 阳性血液增菌瓶连申请单交岗位1号进行移种
    4) 观察板挑取疑菌落涂片革兰染色革兰阳性菌阴性杆菌菌落纯化普通血板真菌菌落纯化沙博罗板革兰阴性双球菌菌落纯化巧克力板置CO2气袋中嗜血杆菌纯化专巧克力板置CO2气袋中
    5) 前天分纯细菌严格ATB分析仪机前种试剂条说明配制菌悬液抽样机操作冰箱取出种试剂条时应详细登记取条种类数量日期
    6) 适合仪器检测药敏细菌改标准KB法进行检测 碰异常耐药模式应时报组长 碰耐万古霉素葡萄球菌粪肠球菌耐泰肠埃希菌克雷伯菌属肠杆菌属等加做特殊药敏纸片改纸片法加较
    7) 特殊细菌嗜血杆菌棒状杆菌李斯特菌属等相应API鉴定条进行鉴定相应ATB药敏条进行耐药性检测(包括酵母菌药敏)操作严格参说明书
    8) 做菌种保存难菌株标准菌株等定期移种般二周次做移种记录
    9) 定期做室药敏纸片质控二周次做记录
    10)负责肠道门诊处理报告单印审核登记等
    11) 处理肠道门诊工作前24时接收移种样肠道门诊细菌处理章程进行处理核报告单关信息包括联号编号结果记录疑菌落进行霍乱价血清凝集报等登记报告结果签发报告
    12) 核已印报告原始报告符合情况符合报告重新印
    13) 月做出受检种样量种样阳性检出率 种细菌床常药耐药性类细菌检出构成百分统计印成文交科统保存备查
    14) 定期组织室关员周工作情况进行讨定期某专题进行讨记录岗位休息时岗位二承担切工作
    5骨髓细胞室员岗位职责
    1)接受标:填写收费单门诊病先清病交费合求(填写姓名稀释片子太少)者退回 涂片填补病姓名BM(B)采取日期
    2)标染色: Wright染色染色固寂静半分钟加Giemas缓液吹吸
    Fe染色贫血者做取含骨髓粒涂片 AL组化POXSBNSENaF尿水解方法见操作特殊染色:NAP先95乙醇固定冰箱保存PASACP见操作
    3)标观察:先涂片骨髓粒脂肪滴核细胞量染色坏特异常细胞计数巨核细胞细胞者1片分类25分类计数200骨髓细胞注意形态变化
    4)填写报告 :申请报告单写初稿初学者已原始记录写初稿书写骨髓报告单少审阅次登记填写档案袋乙醚轻轻擦洗涂片装袋保存
    5)负责ACL200血凝仪日常规保养定标质控样检测求PTAPTT抽血2时完成检测严格控制影响素合格标退回
    6)负责PT APTT FIB INR室室间质控工作
    7)参加骨髓室间质评工作
    8)7:30-9:00门诊抽血帮班
    6 急诊检验员岗位职责
    1 急诊检验处医疗第线抢救急危重患者重环节必须强调优质服务时准确发出报告
    2检验科值班员接急诊检验通知标应立检查标否符合求然立进行检验出血等危生命急诊检验优先速3.项检验结果应电话床医生立报告化验单记电话报告时间报告单病房化验单送病房登记检验结果备查询报告时间:三常规30分钟生化3060分钟
    4急诊检验项目:
    常规:血常规便常规隐血便常规类穿刺液常规涂片检查 02培养
    生化:钾钠氯血气分析血尿淀粉酶尿素氮肌酐糖肌钙蛋白心肌酶谱胆碱酯酶PTAPTT
    ★项目根床病情需床医师检验科值班员联系
    5急诊检验24时运行交接班时间:午7:30-11:30倒连11:30-6:00夜班:6:00-次日7:30检验工作员必须坚守岗位工作需短暂离开岗位时应明显标志指明交班时填交班记录仪器运行情况工作情况交代清楚

    三检验中心项规章制度
    () 生物安全制度
    1医务员
    1)1—2年做体检次接受乙肝疫苗接种
    2)1—2年检查乙肝病毒抗原抗体水发现乙型肝炎者应进行隔离治疗
    3)检验员进入实验室应穿工作服允许实验室进食吸烟
    4)检验员工作前污染应肥皂流水清洗必时消毒液浸泡双手季度抽查检验员手做细菌培养次
    2环境消毒隔离
    1)实验室应分清洁区操作区清洁区注意保护受污染操作气溶胶标应配置生物安全柜防护设置紫外线灯排气扇等操作区工作台面日消毒液擦拭次污染时时消毒周扫次
    2)采血室日操作前清水擦拭操作台次采血结束消毒液擦拭操作台桌子面次紫外线日射消毒次月空气细菌培养次紫外线强度定期测定做记录
    3种检验标收集送检必须相应指定容器留取外溢污染
    4静脉末稍采血应严格执行消毒隔离措施静脉抽血做针筒巾带消毒止血带纸垫日消毒末稍采血片杜绝交叉污染
    5次性医器具包括采血针注射器尿杯血红蛋白微量吸血吸应严格做领发登记注射器先浸泡消毒供应室调换统处理余次性器具浸泡消毒装入污物袋送焚烧炉焚烧
    6检验员进行静脉抽血时应严格遵守菌操作技术操作前必须洗手必须戴帽子口罩操作台手污染时应肥皂流水认真洗手必时消毒液浸泡双手酒精碘酒瓶周更换消毒两次
    7肝炎病透析病血液标疑黄疸血标视肝炎污染标应贴红色危险标记放规定区域引起警惕防止扩污染面
    8溢出试外血液应立碘酒棉签擦拭干净注意防止玻璃碎片刺伤手注意试破裂
    9针头碎玻璃刺伤手时流水洗挤出血水应立碘酒消毒局部
    10实验室操作时应戴手套吸取标离心振荡等应严格操作规程防止身实验室受污染
    11已检查标容器分浸泡施康1号消毒液(2000mgL)中两时标倾弃次性容器送焚烧重复清洗消毒灭菌均记录毒化学试剂放射性试剂害化处理防止污染环境
    12菌种毒种传染病防治法进行理
    13三级医院必须设置清洁区污染区操作气溶胶标应配置生物安全柜防护设置紫外线灯排气扇等
    14非科室工作员准进入实验室外员参观需科意方进入
    (二) 质量理制度
    1专业实验室根省检中心关规定开展实验室质量控制制定关措施室 內质控应日记录失控情况纠正方法预防性措施目前尚完整室质控体系实验室应积极创造条件建立室质量控制体系
    2专业实验室必须参加部省次室间质控活动次质控评价应记录
    3计量仪器(包括分析天天分光光度计等)应定期校正年次
    4型分析仪器必须专负责维修记录
    5商品化试剂盒申购专业室组长负责申报月次报科审批期批准文号劣质试剂进货统科室理配试剂须严格校正方
    6专业实验室必须建立完整操作程序应严格程序执行
    7日发出全部检验报告单须日科室总值班员严格审核方发出
    8科室完成严格室室间质量控制体系时应逐步建立全面质量控制体系标采集运送保存等纳入严格理中日送检标应签收
    9急诊检验应严格急诊制度执行
    (三) 血型安全鉴定制度
    1认真核病样确保误进行鉴定
    2加强血型试剂理室组长负责试剂质量关操作员负责时工作中 质量问题鉴定完成必须放回冰箱
    3鉴定应原始资料登记备查详细记录病姓名科否送检型检验者检验日期字迹必须清渐查
    4出报告前必须核原始报告单进行电脑原始资料回顾确认误签发报告
    5遇技术鉴定问题应逐级反映意结果报告床
    6作血型鉴定血样律放置7天处理
    7发现未科室规定进行血型鉴定造成鉴定错误责事负责科室规定扣发奖金
    (四) 差错事登记报告制度
    1科室应月底报差错事登记报告医教科
    2般差错医疗纠纷应积极妥善处理严格教育事全科室志吸取教训引戒三天报告医教科
    3严重差错医疗事必须发生日报医教科时做处理工作事应填写书面材料汇报事实表明态度整改措施科室会议讨做讨记录重事应立讨总结验教训提出整改防范措施事批评教育必处理投诉答复
    4医疗纠纷差错事均应认真登记讨做包庇隐瞒弄虚作假采取事化事化做法
    5差错事定性处罚措施应时通报事全科志做记录
    (五) 安全制度
    1菌种毒种剧毒品贵重仪器物品指定专保防盗措施建立帐册记录进出数量定期检查制度剧毒药品专保科室试剂志负责放保险柜领时须志场作领登记
    2易燃物品专柜存放普通试剂常规分类存放科室试剂志负责注意电安全特电炉子烤箱火焰光度计科志负责安全严防火灾
    3 工作中发生触电失火玻璃割伤针头刺伤烧伤慎中毒传染性标污染实验室应应急处理方法关员均应熟悉
    4电设备电源线路CO2气体排水系统安全性符合求带电检修仪器
    5强酸碱腐蚀品时应适环境正确操作防止腐蚀灼伤中毒火灾爆炸等事件发生
    6 注意安全手时关门班时做水电门安全保卫工作防火防盗防水
    7科室安全保卫负责:范波
    (六) 急诊检验制度
    1 急诊检验处医疗第线抢救急危重患者重环节必须强调优质服务时准确发出报告
    2根三乙综合性医院求承担急诊检验务配备必资深检验员急诊检验设备提高检验工作效率
    3科床医生根病情实际需填写急诊检验输入电脑条码电话通知检验科值班员血尿脑脊液护理员床医生送检验科
    4检验科值班员接急诊检验通知标应立检查标否符合求然立进行检验出血等危生命急诊检验优先速
    5.项检验结果应电话床医生立报告化验单记电话报告时间报告单病房化验单送病房登记检验结果备查询常规30分钟生化3060分钟
    6急诊检验项目:
    常规:血常规便常规隐血便常规类穿刺液常规涂片检查 02培养
    生化:钾钠氯血气分析血尿淀粉酶尿素氮肌酐糖肌钙蛋白心肌酶谱胆碱酯酶PTAPTT
    ★项目根病情需床医师检验科值班员联系
    7急诊检验24时运行检验工作员必须坚守岗位工作需短暂离开岗位时应明显标志指明交班时填交班记录仪器运行情况工作情况交代清楚
    (七) 技术理制度
    3根具体情况确立业务建立目标制定长远发展规划具体实施年度计划
    4建立责制中心项规章制度明确类员职责严格执行项技术操作规程积极预防减少差错事
    5配合床开展科学研究工作诊疗工作服务
    6切实做新技术开展业务技术保密工作
    7根现代医学科技发展实际工作需计划购置仪器设备切实加强理
    8型精密仪器必须确定专负责建立理档案严格执行条例定期校正维修保养实行专充分发挥工作效
    (八 )工作职责制度
    1热爱热爱社会义坚持四项基原全心全意民服务
    2努力学政治刻苦钻研业务发扬救死扶伤实行革命道义病vk 亲态度蔼问必答
    3热爱职工作服分配遵守劳动纪律做迟早退擅离开工作岗位私干私活
    4严格执行规章制度时做项检验结果记录职责觉抵制良风
    5识体顾局关心集体团结友爱背议搬弄非
    6讲究文明礼貌积极参加爱国卫生运动美化环境保持医院科室整洁安静方
    九) 试剂理制度
    1专业实验室应根工作需月科申报购试剂应做时盘存清点入库做心中数
    2试剂申请进货律科室统理严格市卫生局招标求执行做三证齐全三产品
    3专业实验室应试剂库存定期检查期变质试剂
    4配试剂须严格校正方
    5试剂保存应严格求保证效期效杜绝浪费现象
    6试剂外律须科意方执行
    7剧毒试剂必须科负责科室保卫志负责保存放保险箱时应两场做登记
    8易燃易爆试剂应分开存放远离火源电源
    9科室试剂理员:章勇
    10供应商送试剂必须先药库清点接受检验科员清点必须货单签字出入者必须科试剂理员组长报告货单交试剂理员便月底结帐

    (十)天称量制度
    1非室员律私入室
    2取试剂应先取已开封瓶等开封试剂完开新瓶
    3试剂称取完毕应试剂序号放回原处
    4试剂出制度普通试剂保员视库存情况决定否贵重试剂须科室意出试剂应立登记写条
    5分析天扭力天
    (1)必须严格操作规程进行
    (2)保持天箱清洁干燥称取试剂程中量避免试剂散落天箱称取完毕清理干净注意天复原登记情况
    6保员定期申报试剂购买计划检查天性
    (十)实生理制度
    1科室实纲安排实时间表遇特殊情况科室统安排
    2实生必须服实单位科室直接理遵守实单位规章制度参加实单位政治业务学关活动会议
    3实生必须加强医德医风修养文明行医礼貌动热情病服务
    4实生应指导老师指导进行实工作切实验结果均须指导老师签名方发出报告擅签名发出报告指导老师应严格关逐步培养学生独立工作力
    5严格请假制度学生般情况请事假节假日国家法定准假请假律写报告天指导老师意科批准报告交俞北伟老师登记三天医教科批准三天学校批准
    6实生必须准时班迟早退严格实作风离岗培养学生应急处理力实生必须天晚轮流班(600900)
    7实生必须严格保护实验仪器公物科室贵重仪器必须指导老师具体指导进行操作
    (十二)仪器理制度
    1非室员未允许入外参观必须院办科领导意方参观
    2室工作员必须熟悉仪器性方操作严格遵守操作规程
    3仪器前必须检查否完旦发现问题时汇报责科室领导私乱动乱修
    4注意保持仪器卫生整洁严禁室抽烟吃零食非仪器操作应量少入
    5注意仪器安全防火防盗防水手关门
    6责定期检查纠正种仪器天解仪器运转情况试剂情况负责仪器整洁安全检查电源水笼头

    (十三)标理制度
    标采集
    1 项目求告诉病病房护士室采血员佳采血时间采血
    前空腹饮食注意药情况活动情况体位等
    2明确抗凝剂种类抗凝剂血例抽血时注意事项
    3体液分泌物细菌培养标求留足量时送检
    二 标运送
    1 运送程中原带盖(棉花等吸水物品)防倒翻溢出雨淋含传染源标必须带盖外套尼龙袋防溢出污染环境
    2 剧烈振荡防标溶血形成分破坏
    3 必须时送检
    三 标接收
    1 必须认真核标病姓名病区床号联号申请单符合
    2 必须观察标量标类型否抗凝凝块细菌培养标否符合菌求否明显溶血脂浊
    3 符求标必须时填写退回理单时反馈床
    四 标检测
    1 检测程中应复核标接收程中步骤
    2 标足够情况浪费意丢弃损坏标
    五 标储存
    1 天完成标必须分离血清求储存2℃8℃20℃
    2 天检测完成标血常规储存2℃8℃3天生化免疫储2℃8℃7天脑脊液胸腹水等重标储存2℃8℃7天
    3 特殊标求保存
    六 标处理
    检验标先含23gL效氯消毒灵浸泡半时煮沸清洗试烘干备双层专黄色医垃圾袋专收集废弃医垃圾送专门存放医垃圾处统处理做登记
    七. 外单位标
    外单位送检样律服务台志登记转交实验室检测实验室保留原始申请单
    八张检验单标
    两张检验申请单( 包括实验室外送兄弟医院)原分装 检验申请单起分放置样盒 采样困难者动踪样作详细记录免漏检分清责
    (十四)检验科档案理制度
    1档案理范围:包括科室员业务技术情况业务资料(含检验操作规程质控资料检验结果登记等)仪器试剂资料财产情况教育科研资料医疗纠纷资料理制度等
    2档案资料应注意完整规范保密圆珠笔书写热敏印低意抽样遗失关员泄露
    3档案资料应登记分类编号俞北伟专保
    4档资料中质控资料检验结果登记操作规程少应保存五年销毁前必须科室领导审批
    5档案资料时便查阅建立索引
    6外员须查阅档案资料均应科意
    7述档案存入计算机述理办法进行理未允许意开加密措施保护档案安全
    (十五)民服务公约
    1文明行医礼貌病态度蔼认真解释
    2外病免费代寄检验单时提供电话查询服务(2308607)
    3时发送报告单急诊检验项目时迅速老弱幼孕重症病优先
    (十六)细菌培养室菌制度
    1 提倡严肃科学作风工作时全神贯注保证实验质量
    2 进菌室前先开紫外灯电子消毒器少半时开回风机
    3 进菌室必须先换室消毒鞋更衣室中穿菌衣裤戴菌帽口罩
    4 1:1000新洁尔敏液中浸泡双手5分钟做严格消毒
    5 转角风淋室吹风3分钟进入操作室
    6 器材进菌室前均先高压消毒更衣室紫外线半时开第层消毒包布带入操作室
    7 关细菌培养操作均生物安全柜中进行严格程序操作
    8 操作完成1:1000新洁尔敏溶液抹台面面等处出门前注意关闭酒精灯明灯开紫外灯半时消毒关风机紫外灯
    9 CO2 培养箱中新洁尔敏液月换次浸泡手新洁尔敏液周换次
    10 室严格注意防火
    11
    (十七)位素检测实验室理制度
    1检测质量保证制度
    1)项检测项目应根选试剂说明书制定室标准操作规程(SOP)科批准操作时须严格SOP执行需修改SOP须科意执行新修订版
    2) 效期试剂药盒需改动外厂家药盒须报告科避免常更换药盒检测结果波动甚
    3) 做RIA检测室质控药盒附质控品须次检测时做药盒质控品采制质控品病数质控等方法进行室质控(IQC)参加室间质评(EQA)项目应积极动参加
    4) 认真做项检测原始记录妥善保存报告结果均需存入电脑
    5) 做移液器连续加样器定期校正工作
    6) γ计数器应严格规程操作做保养维修记录
    2放射防护保健制度
    1)碘放射性位素标记物应放铅盒铅罐
    2)工作员事RIA工作时应先做健康体检女性工作员应妊娠期哺乳期停止RIA工作RIA工作员应二月检查血常规次年全面体检次体检资料完善连续保存
    3)操作时应戴橡皮手套铅玻璃保护镜必时应戴铅围勃铅裙
    4)位素实验室设备器具单独试剂单独存放互混放
    5)位素慎污染时应时报告作出明显标记时处理
    6)位素检测废弃物应集中存放送医院指定点销毁
    7)工作员应参加培训执证岗掌握关安全防护措施质量保证措施
    8)位素工作员休假制度(天工作时间休假)国家规定执行(进修医师外)
    (十八)会议学制度
    1会议学提高职工思想政治素质业务技术水必手段工作处样重位参加象缺席
    2建立政治教育行政理业务生产营教学科研等类学专业会议制度会议(学)求目明确容简炼时间保证讲求实效
    3定期召开会议学
    1)会议
    (1)周星期-午科室早会传达院周会精神定期科务会
    (2) 季次质控会议组长员参加
    (3)半年(元月七月)次质量分析总结会领导关员参加
    (4)年(元月)次全体职工会(头年工作总结年度工作计划)
    2)学
    (1)月20日晚科室职工业务学科室安排少二时
    (2)季政治学次院部统安排
    (3)团工会妇女组活动组织安排般占工作时间
    4时性必召开会议学领导决定
    5部门(班组)特殊性会议(学)部门(班组)负责安排领导报告
    (十九)请示报告制度
    1发生重事件严重差错时报:
    1)影响业务生产正常运转事件
    2)员伤亡事设备事交通事质量事严重差错
    3) 批食物中毒传染病然灾害突发事件
    4)发生火情失窃泄密事件
    5)新技术新工艺新业务开展新产品试制首次应
    6)固定资产技术转超出预算财务支出
    7)职工严重违法乱纪涉政治法律问题
    8)损坏丢失贵重器材贵重物品剧毒试剂时
    2职权范围处理事件逐级报
    3年度(半年)工作计划总结月(年)统计报表期报

    (二十)保密守
    1该说机密绝说
    2该问机密绝问
    3该机密绝
    4该记录机密绝记录
    5非保密记录机密
    6私通信中涉机密
    7公场家属子女亲友面前谈机密
    8利保密方存放机密文件资料
    9普通电话明码电话普通邮件传达机密事项
    10携带机密材料游览参观探亲访友出入公场
    (二十)职工考勤制度
    1科室设考勤员名科(负责)领导逐日认真进行考勤制度登记
    2月考勤应次月5日前考勤表汇总计算出勤率(年出勤率年12月底前算出)科室领导签阅送交办公室
    3考勤员应备缺勤登记簿详细记载职工迟早退病事假医院诊断等容
    4职工工作需加班应科室领导意批准科室领导签发加班补休单否记出勤
    5请假员请假制度执行急(重)病急事时委托亲友医院职工代办请假手续外余均需提前办理请假手续公休补休应事先科意交出公休补休单
    6考勤员必须秉公办事查实徇私舞弊现象扣发考勤员月奖金
    7年评定优秀考勤员予定物质奖励
    (二十二)事考核制度
    鼓励先进鞭策进择优聘培训晋升予合理遇限度调动职工积极性形成等竞争机制年定期职工进行全面考核评工作
    1考核容:
    1)考德具体容包括:
    (1)政治态度:忠民热爱祖国拥护贯彻执行路线方针政策正确处理国家集体三者间利益关系
    (2)遵纪守法:觉遵守国家项法律法规维护国家民利益遵守社会义公德
    (3)工作作风:实事求弄虚作假联系群众关心群众疾苦谦洁奉公贪污受贿处理问题公正坚持原敢良倾作斗争
    2)考绩具体容包括:
    (1)工作质量:工作认真负责差错事质量符合标准工作令放心起检查
    (2)工作效率:工作速度快效率高数量完成超额完成规定指标工作务
    (3)工作成绩:工作出色成绩突出成果文服务质量高
    3)考勤具体容包括:
    (1)事业心勤奋精神:事业心热爱医院热爱职工作时抓紧时间学钻研业务工作勤奋进心
    (2)服务态度:全心全意积极动病服务态度蔼病发生争吵
    (3)劳动纪律:觉遵守医院规章制度违反劳动纪律班时间做私活工作关书籍报刊迟早退乱放车辆(行车)
    (4)团结协作:服组织分配新生级团结志顾全局动帮助级志做项工作敢挑重担
    (5)出勤率高:出满勤病事假超全年工作天数3
    4)考具体容包括:技术操作水程度工作验否丰富否带教新志理力计划性否解决工作中难题专业理基础水知识面判断力处理问题力否动提出合理化建议改进措施等等
    5)分类考核标准:见附表二三
    )考核象:检验科全体职工(科院部组织考评)
    二)考核方式:评价组织考核(级考核级逐级考核)
    三)考核求:
    (1)着严格公正原实事求态度感情事敷衍事流形式
    (2)考核结果见面签署意见


    (二十三)治安保卫制度
    1全体职工觉遵守国家政策法令市民公约治安规定单位规章制度严禁切扰乱单位工作秩序行
    2严格执行门卫制度值班制度
    3认真遵守保密守
    4职责保公财产钱物

    5严禁理取闹造谣生事诽谤中伤吵架骂流氓斗殴
    6严禁种方式进行赌博活动
    7严禁损坏公物切设施
    8严禁盗窃公财物私钱物
    9机房重工作区关员入
    10科室严禁传播淫秽色情违禁出版物音制品
    11遇正发生刑事犯罪案件职工应见义勇挺身出特产员
    12职工家属外工作学进修员均应遵守制度
    (二十四)消防安全制度
    1根谁谁负责原实行科室负责制
    2领导保卫科全体职工常进行消防安全教育提高思想认识掌握消防知识消防器材
    3严格执行安全防火理制度种火种易燃易爆物品必须保持定安全距离
    4禁火区域严禁吸烟
    5电器安装拆必须电工进行严禁乱接电源乱电线
    6种机电设备高温电器设备耐高压容器设施时必须专负责时检查消隐患严防事发生
    7科室公区场通道乱堆放易燃爆物品杂物
    8防火区域设置消防器材设备应定期进行检查维修更换时处完状态便挪动
    9发现火水灾等隐患者必须时科领导报告科时院领导报告时做善事处理工作
    (二十五)业务学理制度
    更新知识适应业务科学技术发展需求计划提高职工业务素质理水特制订制度
    1职工业务学计划科室统制订组织实施初级高级循渐进
    2学容全面质量理工艺规程岗位操作新工艺新技术紧密结合单位(部门岗位)工作实际
    3学象:全科工作员进修实志全部参加(值班员外)
    4学方式:采取学定期举办类讲座学班(包括外单位办)相结合形式分全科部门(组单位)二种规模注意理联系实际
    5学时间:月二次科室组织签规定必须参加学位职工全年参加学时间少48时(指参加讲座学班时间包括学时间)医教科统印发业务学登记卡部门(组)负责登记签章作年业务考核容
    6实行技术岗位考核年分院长会办公室关科室实施合格者发岗位合格证合格者予补考技术性岗位必须取考核合格证岗
    (二十六)物资报废制度
    1仪器设备药品器材原辅材料等报废须科室填写物品报损报废单办公室会检定关部门鉴定提出意见报院领导批准方报废注销
    2次性材料消耗品日常损耗率处理超定额应说明原
    3报废已报废物品应注意修旧利废改作达物
    4报废仪器设备物品设备科总务科统处理
    5合格报损报废应先入库登记填写报损报废单规定程序办理说明报废原
    (二十七)赔偿制度
    1工作失误负责违反操作规程致国家财产受损失者根情节轻重损失予批评教育处分直赔偿
    2劳动合单位服务规定年限未满员必须规定赔偿单位损失
    3财务错帐短款财务规定赔偿
    4批财物积压浪费霉烂变质丢失查明原关科室提出处理意见报领导审查处理
    5属太久中然损坏器材说明原免予赔偿须填写报损单
    6阅图书资料污损丢失者应规定赔偿
    7赔偿细见奖惩制度关规定
    (二十八)奖罚制度
    1保证检验工作质量准确性科学性服务性激励全科员觉遵守院纪院规岗位职责特制订制度
    2忠职守发现防止质量事集体予奖励
    3质量监测工作中发明创造科研成果技术革新提高实验准确度灵敏度集体社会效益济效益报单位批准予奖励
    4质量教育标准化计量测试质量信息质量责制设备档案理等工作中作出成绩者应予奖励
    5质量监督质量检验工作中违反职业道德弄虚作假伪造实验数报告者予严惩怠
    6遵守院纪院规违反操作规程操作细粗心意民造成事差错者视情节果态度报单位行政批准予行政济处罚业务学次扣50元政治学次扣50元发现工作场吸烟次扣50元
    7违章精密贵重设备仪器工作负责失误造成国家财产损坏重零配件丢失者视情节责令检查作出济赔偿
    8违反劳动纪律未完成工作务服务态度差者科制订关规定处理迟早退擅离岗锐岗者造成良影响者次扣月奖50100元院部规定加处理
    9隐瞒事差错知情报者视情节果予相应处理
    10应逐步建立健全岗位工作质量评估标准奖惩工作逐步做科学化制度化常化
    (二十九)质量信息反馈制度
    1检验科检验质量信息反馈专负责组长负责制时处理
    2检验质量差错反馈报复性质足充分认识加强质量意识避免差错
    3反馈差错事应原分析处理意见
    4室反馈卡时交科室保存处理
    5检验科工作员欢迎床医生检验质量信息反馈
    (三十)计算机理制度
    1计算机室科室设置计算机专业岗训练专负责理员乱动设备机操作
    2计算机严格执行操作规程游戏
    3定期做清洁维修保养工作发生障时报修保证计算机正常运行
    4注意信息防止计算机病毒污染
    5违反理制度造成事损坏电脑者查实性质情节严肃处理
    (三十四)血常规复查制度
    1符合列情况者作血涂片镜检复查:
    (1)WBC总数>100×109L
    WBC总数<40×109L
    (2)WBC直方图显示单峰现象分GR高LY高MO高尤MO高(MO>8)
    (3)重度贫血Hgb<80gL
    (4)已确诊血液病病标
    (5)床医生特注明求注意细胞形态
    (6)仪器测定分类全者
    2PLT <100×109LPLT>300×109L应作血板手工计数
    3仪器提示血板凝块检测结果PLT<100×109L者应重新采血复查
    4WBC<40×109L Hgb<80gL PLT<100×109L作仪器重复测定
    (三十)卫生制度
    1天早班午班前包干区工友应卫生工作搞该放清洁干燥玻璃器皿放规定位置放迎接工作员准时班
    2工作员天早班午班前检查室卫生否整洁干净整洁做干净告诉包干工友搞干净
    3室仪器卫生必须天搞次灰尘整洁
    4月底前室必须搞卫生彻底做整洁工作迎接医院检查查某室整洁干净造成扣分扣罚事室工作员奖金50元
    5年评卫生先进室年终进行表扬奖励

    (三十二)检验科审制度

    科室施金俏滕贤麟已取国家认实验室审员资格
    1检验科质量理组
    施金俏负责组织滕贤麟负责记录成员:施金俏滕贤麟周益琴范波章勇胡玲王惠姣章楠宁负责督查室质控检测记录失控处理月结质控图(生化血凝乙肝三系特定蛋白发光仪血球尿化学尿沉渣仪血气)类仪器较情况记录二月次检查容分次分项进行检查结果记录
    2仪器试剂理组
    保证检验科仪器正常维护保养障时处理检验试剂质量价格出入库情况保证试剂时供应检验科决定成立仪器试剂理组
    试剂理组:章勇负责滕贤麟负责记录成员:章勇施金俏周益琴滕贤麟检查接收试剂否签字效期试剂保存否时合理二月次检查记录
    仪器理组:周益琴负责滕贤麟负责记录成员周益琴范波章勇胡玲王惠姣章楠宁俞北伟滕贤麟负责督查仪器情况维护维修记录二月次检查记录

    3信息反馈理组
    组轮流月检查次包括病区室门诊输液厅医务员病科室员信息反馈记录汇总(★负责安排记录)
    ★滕贤麟 ★俞北伟 ★ 周益琴 ★ 王惠姣
    张永金 胡玲 黎 朱根林
    翁巍 国丽 章勇 陈
    范波 章丽琴 章楠宁 沃关忠


    四检验中心标准操作规程
    ()检验中心类仪器标准操作规程
    Beckman CXCX9生化仪操作规程
    1基操作规程
    (1)开机准备
    1) 检查蒸馏水否充足够应重新加入.
    2) 检查Wash Concentrater(浓缩洗液)Probe Rinse Solution(探针洗液)量时补充.
    3) 开显示屏检查试剂存量够应时加足
    4) 检查液压系统压力表指针保持绿色区.
    5) 检查CX3部分红色(C02碱性缓液)兰色(电机参液)液体应维持MAXMIN间.
    6) 洗电解质部分道4—5次排例泵(Ratio Pump)道中气泡.
    7) [F8]→[F7]检查仪器工作状态异常应没法排志汇报作书面记录.
    (2)定标
    1) 菜单胺 [F3]进入定标菜单
    2) 带*提示昨日更换非原装试剂均需定标.
    3) ↑↓选择需定标试剂[ select]确定.
    4) 种项目定标已设置条码(CX4△设定定标架子58架CX7 △设架子5960架).根项目需定标液装定标液放入仪器
    5) 定标完成印机会动印定标报告仪器室工作员应判断该定标否正常.定标客作书面记录.果定标弄常应时志反映作书面记录.
    (3)质控
    1) 定标利完成开始进行室质控.
    2) 质控分析已作条码设置标CX4 △ CX7△记号试中加入质控品放样架放Auto Loader.
    3) 质控结果良进入样分析.果出现失控结果应时处理志汇报直找原解决方进行该项目样测定.
    4) 样分析半时应插入质控品监测分析程中出现问题.
    (4)样分析
    l) 普通样检验:
    仪器采先进 Barcode Mode血样离心直接放入样品架(条码须面条码阅读器)放入Auto Loader[Load]键.
    2) 急诊样检验:需手工编制程序操作方法:
    a) 菜单[F1]键.[F1]键进入编程先输入Sample ID(样号)然输入Panel(组合号)输Panel号直接项目表中选择测项目.选择Sample type(样类型)样稀释输入Dilutionfactor(稀释子) tF4]→ tF8].
    b) [prev Screen]进入样编程菜单[F6]设定该样样架号杯子位置重复输次Sample ID[Enter].
    (5)病资料输入:
    中文系统中输入病资料.
    (6)数传递
    [P4]接着选择[2]然选择[1]需传递架子号选择[3]结果传中文电脑
    (7)报告印
        样分析完毕发病报告单.张报告单必须仪器室员审核签名方发出.出现特异常结果应时志生化室反映床联系发报告作书面记录必时料汇报.
    (8)更换试剂
    般情况样品分析完成应进行试剂更换.
    (l)菜单[F2]键进入试剂菜单 [F5]键检查试剂状况.
    (2)手工装载:→←↑↓健光标移需试剂[ Select][F2]键选择安装试剂类型编程序试剂[2]原装试剂[l]入需试剂名称等然开冰箱盖试剂推入[Fl].
    (3)动装载:先根需选择相应数目空位置然 [Fl]键开冰箱试剂推入听鸣声关闭门.
    述两种方式转换.
    (9)仪器简单保养关机.
    (l)擦洗仪器表面
    (2)70%酒精清洁两组探针搅棒然[homs]键复位.
    (3)清天数关闭显示屏.
    (4)中文电脑必须先进行工作结束关机.
    (10)注意事项
    (l)断电马启动必须等5分钟方启动.
    (2)装试剂前必须先察该试剂否需预处理否气泡装孔等
    (3)时运行时应量连续运行间断意黄色紧急停机[Stop]健
    (4)中文电脑关机前定进行工作结束
    (5)运行中出现障时应时志汇报便时排障作书面记录.
    (6)天必须机器运行记录书面记录机器运行状况.
    (7)溶血脂血标发报告时应备注处说明.
    2保养程序
    (1) 日保养
    1.检查 WaSh Concent rateprobe Rinse Solution存量.
    2.检查StatuS monitor
    3.检查Cuvette wipers
    4.检查水运空气压力系统
    5.检查Syringe plunger tips
    6.清洁探针搅拌棒外部.
    7.检查试剂存量效期
    8.检查Damper液面高度.
    9.清洁CX3检体探针
    10.CX3设定动洗观察试剂路反应杯搅伴否问题排Ratio pump气泡
    (2)周保养
    1.清洁仪器表面
    2.清洁CX4样试剂探针部
    3.清洁 In line filter
    4.移动摩电动阀路(CX3部分)
    ① E Cam pinch Value
    ② C Cam pinch Valus
    ③ Solenoid Valus
    (3)两周保养
    1.更换试剂样注射器tip
    2.清洁BUN电机头反应杯搅拌子
    3.更换Glu电极膜
    4.清洁TP反应杯搅拌子
    5.清洁Cre反应杯搅伴子
    6.清洁CX4. CX7空气滤网.
    (4)月保养
    1.检查冰箱风扇运转否正常否结冰现象.
    2.清洁试剂读码器.
    3.更换Probe Rinse SolutionIn—line filter.
    4清洁样条码阅读器
    5.清洁FlOw cellElectrolyte ln—jection cup
    6.清洁CL电机
    7.更换Alkaline Bufferperi—pump路
    8.更换Alkaline Buffer
    9.清洁试剂置放处.
    (5) 两月保养
    1.检查Diluted Wash Botlles Probe Rinse Botlle液面感应器否受污染
    2.更换Cuvette清洁Wipes
    3.更换CX3Peri—pump路
    4.更换PeripumpIn—line filter
    5.检查C Cam pinch Value Vent line#124
    (6) 半年保养
    1.更换Wash Concent rate滤器
    2.清洗Diluted Bottles. Probe Rinse Bottle波面感应器
    3.更换K Ca电机帽
    4.清洁电解质排液系统
    5.更换五RatiO—pump中Quad—Ring
    (7) 视情况需保养
    1.清洁Cuvettes反应槽
    2.清洁Sample sectors.
    3清洁CX7 CX4仪器
    4.更换试剂样搅拌棒.
    5更换C02电极膜
    6更换Injection cup中Quad—Ring
    7更换样试剂探针
    8清洁C Cam Vent Line
    详细操作方法请参阅保养手册
    根样数量某保养行确定保养时间保养请作书面记录.
    日立7600020型动生化分析仪操作规程
    1开机检查:确认样品针试剂针脏污弯曲确认清洁剂否充足样品试剂吸量器漏液注射器气泡
    2找开水源仪器动完成指定准备工作呈机状态分析开始前确认报警发生流路气泡发应槽温度光度计光量检查(检查值19000)
    3测定结果删(前日样品号测定次结果前日结果产生记忆混乱需删前次结果)
    1)般样品删
    触摸常规操作workplace测定结果Data Review键测定结果画面开触摸面Batch Delete全部删键窗口开选择样品种类全部触摸OK键确认yes键结果全部删
    2)日质控样品测定结果删
    触摸质控QC键Individual日键日画面开选择质控样品
    触摸删Delete键yes键确认结果全部删
    4试剂准备:
    触摸试剂理(Reagent)键状况画面开确认查检验项目效数试剂足项目进行添加更换
    5标准液质控样品测定:
    1)校准项目确认:触摸Caibration键status状况键开触摸需项目校准方法(1—4)save登记键start up登记项目呈黄色
    2)标准液设置:标准calibuationcalibrator键标准液画面开标准物架子号应相应标准液装入(黑色)S架
    3)样品供部设置:标准液S架(黑色)质控样品C架(白色)序装入样品传送架(急查样品投入口进入)
    4)仪器起动:触摸菜单开始键开始窗口开触摸选择起始校准变更(select start up calibuation)change键选择起始校准(带 √印)OK登记触动摸索开始start键测定开始(结果查:workplace中Datareview中)
    5)质控样品测定:项目确认触摸QC键status状况键画面开触摸缺省QC(DEFAULT QC)键横箭头(←)确认质控项目质控样品设定:序QC质控control画面开架子号位置质控相应位号质控样品装入C架(白色)
    6)般样品测定:
    (1)测定项目登记:序键workplacetest selectionRoutine(般)般画面开样品号处输入样品号确认触摸测定项目键(选定白色显示)save键登记样品升位类推进行样品连续登记样品登记时进行完第样品登记触摸Repeat键进行批量登记输入样品号结束样品号登记OK键登记项目修改:修改样号输入样号登记项目显示触摸项目键修改容save键登记
    (2)般样品准备:分样品号序样品装入架子(灰色)样品号架子装入样品架放入样品供部(样品回收部装空托盘)
    (3)测定开始:触样品开始号输入触摸start开始键开始测定
    7急诊样品测定:序workplacetestselection急查stat画面开输入样品种类架子号位置号输入选择项目触摸登记start键样品架E架(红色)装入急查样品供部(操作中时动加入测定)菜单开始start键窗口开start开始键测定开始
    8结束操作:关机检查切断电源关闭水源
    RA1000生化仪操作规程
    1 开仪器右方电源开关然扣磁盘拴仪器进入检输入时间日期测定组合选择
    2 预热仪器STANBY状态23FUNCTION检查暗电流读数24FUNCTION检查滤光片空气中读数21 FUNCTION道中气泡排
    3 装入反应盘30 FUNCTION反应盘进行扫描仪器动记录通杯子
    4 2 FUNCTION输入盘号输入相应杯号检测项目
    5 xxFUNCTION OPERATE ENTER(xx代表相应盘号)仪器进行测定
    6 某盘测定未完成反应盘已满换反应盘参步骤3扫描新反应盘0 OPERATE ENTER继续测定
    7 关机开磁盘拴关闭电源
    644电解质分析仪简操作规程
    1 开机
    2 仪器显示ANALYZE BLOOD?NO键直显示CAL…YES定标
    3 仪器显示ANALYZE BLOOD?YES键提起吸样针放入标中YES屏幕显示SAMPLING等屏幕显示RETUNE PROBE开血样关闭吸样针
    4 读取结果
    SP4430干式生化仪简操作规程
    1 开电源
    2 预热Warming up10分钟
    3 显示菜单:1Measure 2Submenu 3Calibrate
    4 〈START〉〈1〉键显示机状态
    5 放吸头样正确安放测项目试纸条(复合试纸条放入横槽单项试纸条放入槽)
    6 〈START〉开始测试
    7 测试结束印结果回准备状态
    8 取出测试完试纸条标〈STOP〉回屏幕

    拜耳248血气分析仪规范操作
    1标准备
    病样必须采肝素抗凝血采血器应密封立送检操作前标必须充分混匀排采血器头部分血液开进样品推入血液听嘟声关闭进样品
    2标检测
    仪器准备状态掀开样品针插入注射器标屏幕显示收回样关闭进样口#键输入种信息 包括操作者编号病区标类型采集时间病体温血色素病编号FIO2等等(FIO2=21+氧流量*4)
    3病结果报告
    病结果包括实际测定三值:PHPCO2PO2根体温血色素等计算参数#键显示
    4定标
    定标般动定时定标需操作:退回菜单MENUCAL屏幕方选择需定标类型进行定标
    5病结果重新印
    退回菜单次MENUDATAPATIENT REPORT选择查找病标编号VIEW REPORT显示病报告结果需修改病资料ID移动光标修改RESULTSPRINT 取出已做病结果报告

    ACCESS全动微粒子化学免疫分析系统仪器操作规程
    1检查仪器发光剂反应杯种试剂剩余量废反应杯回收袋情况足应更换
    2路清洗屏—F6—F4—输入221F5
    3样测试程屏F1—输入扫描样架号—手工输入样架号编号—手工输入样号—光标移测试项目处输入项目代码+(删项目-)输完测试项目—输入放架子指令F1—放入架子F1确认—提示回车—F11(RAN)—F8(仪器开始工作)
    4查测试结果查出结果时间需屏F2
    5中文电脑中输入样品号病姓名年龄病区床号关资料
    6测试完毕屏F2—选定已测结果—F5送中文电脑然印结果报告
    7屏F1—F1(取出样架)—F1确认
    8路清洗 屏F6—F4—键入220F5
    AxSYM化学发光仪操作程序
    开机
    开电源→开印机→开仪器电源→F3(startup)→等温育时→查库存(INVENTORY)→倾倒废液加消耗品→更改库存→放1号液→MAINTENANCE→PRIME AND FLUSH(洗路)
    二 申请病样品测试
    1 单病样品测试申请
    菜单
    →ORDERLIST→F6(PATIENT)→输入样
    蓝位置编号样品编号→选择该样品测项目→F6(ADD)→输入样品申请→…→F1(EXIT)→核病项目申请表中项目→查库存否足够(试剂缓液RV杯纤维杯)→RUN

    2 病样品测试批处理申请
    菜单
    →ORDERLIST→F6(PATIENT)→F2(BATCH)→输入起始样蓝位置→输入起始样编号→输入测试样品数→选择测试项目→F6(ADD)→重复申请新批处理病样→F1(EXIT)→核病项目申请表中项目→查库存否足够(试剂缓液RV杯纤维杯)→RUN
    三 定标申请(更换批号试剂时)
    菜单→ORDERLIST→F4(CAL)→选项目(Index cal单点Master cal两点Standard六点)→ADD(F6)→F1(EXIT)→RUN
    注:两点定标需加入定标值
    菜单→STORD RESULTS→CALIRATION REVIEW→F4(NEW LOT)→F4(SCAN CURVE)→扫条码→F6(ADD)
    四 质控定义(添加新项目时)
    菜单→CONFIGURATION→CONTROL→选项目→输入质控值水→F2(ADD CONTROL)
    注:定量项目
    →选相应质控水→F6→输入水值→F6
    五 参数盘安装(添加新项目时)
    菜单→CONFIGURATION→INSTALLATION→插入软盘→SCAN→选择安装项目→安装
    六 关机
    菜单→MAINTENANCE→PROBE CLEAN→系统提示LOAD STATION位置放置2RV杯→RV杯预稀释孔缓液孔加1ml探针清洗液→OK→返回菜单→F2(shutdown)

    Cyclo样预处理操作
    1 准确吸取Cyclo全血(振摇混匀)150ul沉淀中
    2 加50ul溶解剂注意气泡
    3 加300ul沉淀剂注意气泡盖紧盖子
    4 振荡器振摇10秒充分混匀
    5 离心10000转5分钟
    6 取清夜置样中机检测

    [注意事项]
    1 抗凝剂常EDTA肝素
    (常EDTA抗凝制备:分取02molL EDTA2Na溶液50ul烘干)
    2 沉淀剂非常稳定时保存防止蒸发
    3 离心时间太短少5分钟
    4 定标质控法操作



    Array 360 型全动特定蛋白分析仪操作规程
    1 Array360检测项目表
    编号
    中文名称
    英文缩写
    编号
    中文名称
    英文缩写
    1
    免疫球蛋白G
    IgG
    11
    类风湿子
    RF
    2
    免疫球蛋白A
    IgA
    12
    前白蛋白
    PAB
    3
    免疫球蛋白M
    IgM
    13
    转铁蛋白
    TRF
    4
    补体C3
    C3
    14
    a1微球蛋白
    A1M
    5
    补体C4
    C4
    15
    尿微量白蛋白
    MA
    6
    α1酸性糖蛋白
    AAG
    16
    尿转铁蛋白
    TRU
    7
    触珠蛋白
    HPT
    17
    轻链KaPPa链
    KAP
    8
    铜兰蛋白
    CER
    18
    轻链Lamma链
    LAM
    9
    C—反应蛋白
    CRP
    19
    抗凝血酶Ⅲ
    ATⅢ
    10
    抗O
    ASO
    20
    尿免疫球蛋白G
    IgU


    2
    3
    4

    1 标准备



    (1)标处理:
    血标23ml离心分离血清血浆尿液脑脊液标混浊离心吸取清液新鲜标分离贮存20℃冰箱保存



    (2)检测项目标校正液量:
    项目
    校正液

    项目
    校正液
    标种类

    种类

    种类


    种类

    种类


    IgG
    Cal 1
    200ul
    血清CSF
    150ul
    RF
    Cal 5
    900ul
    血清
    225ul
    IgA
    Cal 1
    200ul
    血清
    150ul
    PAB
    Cal 3
    200ul
    血清
    150ul
    IgM
    Cal 1
    200ul
    血清
    150ul
    TRF
    Cal 1
    200ul
    血清
    150ul
    C3
    Cal 1
    200ul
    血清
    150ul
    A1M
    upcal
    450ul
    尿液
    250ul
    C4
    Cal 1
    200ul
    血清
    150ul
    MA
    upcal
    450ul
    尿液
    250ul
    AAG
    Cal 1
    200ul
    血清
    150ul
    TRH
    upcal
    300ul
    尿液
    250ul
    HPT
    Cal 1
    200ul
    血清
    150ul
    KAP
    Cal 1
    200ul
    血清尿液
    150250ul
    CR
    Cal 2
    200ul
    血清
    150ul
    LAM
    Cal 1
    200ul
    血清尿液
    150250ul
    CRP
    Cal 2
    300ul
    血清
    50ul
    ATⅢ
    Cal 2
    300ul
    血浆
    180ul
    ASO
    Cal 5
    200ul
    血清
    200ul
    IgU
    upcal
    300ul
    尿液
    250ul
    3试剂仪器
    1) 试剂试剂保存:试剂包括检测项目相应抗血清定标液质控液稀释液缓液试剂保存4℃冰箱应注意保质期存放试剂室Beekmom公司产品
    2) 仪器:Beckman公司 Array360 system
    4Array360方法原理
    1)速率散射浊测定原理:
    测抗原相应抗体结合形成免疫沉淀反应反应形成悬浮颗粒(浊度)导致光路中散射光强度改变抗原含量呈线性关系
    1) 原量检测(AgX检测)
    抗原抗体结合反应存抗原量抗体量状态速率散射浊测定特定蛋白求抗体量情况抗原定量抗体反应浊度浓度线性关系AgX检测检查某反应处抗原量状态抗体量状态测物抗体反应加入少量抗原(AgX)度浊度产生表示处抗体量情况时应该该测物进行更高稀释度检测

    5检测项目定标定标盘设置
    (1) 开机
    1) 启动仪器:
    先开显示屏印机机电源开关屏幕出现提示扦入启动软盘ENTER键
    2) 光路校正
    a 菜单F4键(system setup)→F2(optics update)→F1(left scatter)
    b 等反应杯里液体排空取出流动杯放入120参安瓿ENTER键
    c 读完参换墨棒ENTER键
    d 读完换回反应杯ENTER键时屏幕出现结果应GAIN 12 3非曲直120±3GAINOVER
    e 菜单F4→F2→F2(Right Scatter)bd

    3) 定标
    a 菜单F2(Cal Status)Setect键选择项目
    b F1(Read AB Card)插入抗体卡
    c F2(Cal Tray Setup)输入杯号钦ENTER键
    d F2(Read Cal cards)插入定标卡
    e F1(save cup) 时显示F杯号定标液测试项目 定杯位请重复CE步骤
    f 全部设定完毕放抗血清标准品连二start键仪器开始定标

    (2)定标项目盘号相应位置:
    盘号(Reagent Wheel) 1
    盘号(Reagent Wheel):2

    抗血清位置
    检测项目
    抗血清位置
    检测项目
    1
    IgG
    1
    A1M
    2
    IgA
    2
    Agx4
    3
    IgM
    3

    4
    C3
    4

    5
    C4
    5
    IgU
    6

    6
    Agx1
    7
    AAG
    7
    MA
    8
    HPT
    8
    Agx3
    9
    CER
    9
    TRU
    10
    CRP
    10
    KAP
    11
    ASO
    11
    LAM
    12
    RF


    13
    PAB


    14
    TRF


    15



    16
    Agx1


    室定标目前状况
    6Array360基操作
    (1)测定前准备:
    a 检查试剂:
    稀释液缓液量否足够查废液否倾倒
    b 洗系统
    菜单F4(System setup)F1(Prime)Setect键 选择洗Mode 1Prev Screen)键确认时检查道阻塞渗漏
    (2)测定(IgG检查例):
    a 抗IgG血清Agx1质控液标放相应位置
    b 菜单F1(Sample Program)键
    C 输入杯号
    d SELECT键选择测项目(里IgG)
    e F1(save cup)确认
    f 继续编程请重复ce键
    g 完成编程连击2次start键仪器开始检测
    (3)测定结果分析报告:
    a 质控:
    质控品应标起检测检测分析判断天检测结果否
    控失控检查原重新检测
    b 报告:
    确认质控情况结果输入报告系统核误方发出
    c 异常值怀疑结果床联系重新检测


    BIORADMODEL 550酶标仪操作规程
    . 仪器安装
    1. 仪器安放清洁稳固操作台实验室注意防潮防尘
    2. 电源线接仪器面请清单电源电压否匹配接电源
    3. 仪器板开关合仪器液晶显示屏出现版号然仪器动检约1分钟然仪器预热10分钟
    二. 安装印纸
    1. 开仪器盖
    2. 印纸起始剪成三角形热敏纸外放入印纸槽
    3. 走纸键印机动卷热敏纸
    4. 关紧盖
    三. 操作程序
    1. 开仪器盖检查滤光片波长否正常位置否放妥然关盖
    2. 开电源开关仪器检1分钟预热10分钟
    3. 选择滤光片:MODE次显示屏出现PRINTREPORT键显示屏出现SET ANALYSIS MODEENTER键显示屏出现SET ANALYSIS键DS中选择双波长D单波长S操作14号滤光片中选择滤光片(1号:405nm波长2号450nm波长3号:492nm波长4号:620nm波长)选择需滤光片SELECT键选中ENTER键完成设定
    4. 设定印方式: 键显示屏出现SET REPORTTYPESERTER键显示屏出现种报告方式:原始资料报告光吸收值报告矩阵报告设限报告阈值报告浓度报告:选择需报告方式显示SELECT键选中ENTER键完成设定
    5. 设定空白: 键显示屏出现SET BLANKENTER键显示屏出现[]CLEAR BLANK空白设定重改[]Co1竖行[]ROW横行[]Well孔键SELECT键选定[]Well孔ENTER键显示屏出现[]A1键SELECT键选中相应位置ENTER键完成设定

    6. 读板:完成述设定MODE键屏幕显示进入PLATE READINGSingle2开仪器前盖微孔板放置板架盖前盖START键仪器开始读板然结果印出
    四. 仪器保养
    1. 次前填写仪器登记
    2. 保持仪器室清洁相湿度90防震
    盖防尘罩
    BIORADMODEL 550酶标仪操作规程
    五. 仪器安装
    4. 仪器安放清洁稳固操作台实验室注意防潮防尘
    5. 电源线接仪器面请清单电源电压否匹配接电源
    6. 仪器板开关合仪器液晶显示屏出现版号然仪器动检约1分钟然仪器预热10分钟
    六. 安装印纸
    5. 开仪器盖
    6. 印纸起始剪成三角形热敏纸外放入印纸槽
    7. 走纸键印机动卷热敏纸
    8. 关紧盖
    七. 操作程序
    7. 开仪器盖检查滤光片波长否正常位置否放妥然关盖
    8. 开电源开关仪器检1分钟预热10分钟
    9. 选择滤光片:MODE次显示屏出现PRINTREPORT键显示屏出现SET ANALYSIS MODEENTER键显示屏出现SET ANALYSIS键DS中选择双波长D单波长S操作14号滤光片中选择滤光片(1号:405nm波长2号450nm波长3号:492nm波长4号:620nm波长)选择需滤光片SELECT键选中ENTER键完成设定
    10. 设定印方式: 键显示屏出现SET REPORTTYPESERTER键显示屏出现种报告方式:原始资料报告光吸收值报告矩阵报告设限报告阈值报告浓度报告:选择需报告方式显示SELECT键选中ENTER键完成设定
    11. 设定空白: 键显示屏出现SET BLANKENTER键显示屏出现[]CLEAR BLANK空白设定重改[]Co1竖行[]ROW横行[]Well孔键SELECT键选定[]Well孔ENTER键显示屏出现[]A1键SELECT键选中相应位置ENTER键完成设定

    12. 读板:完成述设定MODE键屏幕显示进入PLATE READINGSingle2开仪器前盖微孔板放置板架盖前盖START键仪器开始读板然结果印出
    八. 仪器保养
    3. 次前填写仪器登记
    4. 保持仪器室清洁相湿度90防震
    盖防尘罩

    FJ γ—计数仪仪器操作规程
    1开电源印机开关电脑机开关出现提示符:\>开计数器开关键入字母XH回车
    2F1(程序页)—F5(远行程序)—F2(选择程序)—选定程序回车Y键确认—F3(进入测量)输入样品数回车仪器开始工作
    3工作结束ESC键返回菜单Y键退出放免程序
    4先关闭电脑机电源关计数器印机开关然关闭总电源
    ACL200血凝分析仪规范操作
    1开UPS电源开关开ACL200开关等分钟准备标试剂反应盘
    2根屏幕显示输入日月年时间(时分)输项数字ENTER键进入
    3轻PROG键屏幕PROG状态↑↓键移动光标PRIMINGENTER键动洗
    4PROG键分析屏幕移动光标选择测定项目PTFIBAPTTT等ENTER屏幕转↓键开始分析
    (注:根屏幕提示标试剂反应盘全放操作规程进行分析测试)
    5 等仪器动印报告结果填入报告单做结果查方发出报告单(严重异常标应重复次测定注明两次结果)
    CoAgAMTX全动血凝仪操作规程
    1标准备
    熟练取血18ml加0109molL枸椽酸钠抗凝剂02ml19准确混合
    标微凝块溶血抗凝例符血量少均宜检测应重新取样
    采血快分离血浆3000rpm 15min离心取乏血板血浆备
    需成批检测样离心装入塑料试加塞密封20℃快速冷冻凝血子检测冰冻保存应保证首先检测
    2试剂
    仪器配套试剂
    更换试剂批号改变均需重新定标质控品 Verify1Verify2Verify3次测试保证结果准确
    3操作
    2) 开机
    次机→工作电脑→显示器→科室联网电脑→印机 开机工作电脑屏幕出现Do you want to work with the used →cuvette rings选择Yes
    2)换标盘:
    Preparation Menu选择Replace sample rotor选择Replace测试完检验试全部样品盘中取出

    放置洗液清洗Preparation Menu选择PrimeWashclean次选择PrimewashcleanPrime进行清洗
    3)装试剂:
    Preparation Menu中选择Load reagent屏幕显示试剂放入试剂储存槽End
    4)装载质控:
    Routine Menu选择Load Control屏幕显示Controls Verify1Verify2Verify3放Sample rotor(样品盘)选择Within run选择End
    5)装载标:
    Routine Menu菜单选择Load Sample输入Sample ID选择测试项目Loaded样资料输入电脑选择OK利checkmodify sample更改

    显示Sample Loading视窗<>选择需修改Position号码然增加测试项目

    样输入完成start屏幕显示Measurement start视窗显示试剂情况果试剂足够start仪器开始测试

    轮测试完毕会发出嘟嘟声Done提示出现测量盘完Replace cuvette rings更换选择Replace

    果reagent够需加入选择Add reagent添加需试剂然选择Continue Measurement开始测试
    6)急诊样:
    测试程中需测急诊标时Interrupt出现提示:Do you really want to interrpt run选择Yes

    约20秒屏幕会跳Routine program选择Load sample继续操作测量结果发出报告
    7)关机
    首先屏幕选择Preparation menu击PrimewashcleaningPrime次清洗

    选择Quit CAM—MTX software关机开机次序相反
    4测试原理床意义
    仪器采凝固法产色底物法原理检测项目床意义:
    ⑴PT:凝血酶原时间
    延长 见先天性ⅡⅤⅦⅩ缺乏症低()纤维蛋白原血症获肝脏疾病DIC原发性纤溶症维生素K缺乏症等监测口服抗凝治疗性见作口服抗凝药指标
    缩短 见先天性子Ⅴ增症长期口服避孕药血栓前状态血栓性疾病等
    ⑵FIB:纤维蛋白原
    床手术前血栓溶栓抗凝治疗诊断局部缺血心脏疾
    病危险性预防血栓形成等
    减少:见先天性纤维蛋白原异常DIC严重肝脏疾病
    增高:见糖尿病心脑血病手术某急性传染病等
    ⑶APTT:活化部分凝血活酶时间
        手术前检查源性途径凝血子—ⅧⅨⅪⅫ监测肝素首选指标凝血子治疗检测狼疮抗凝物手段
    ⑷TT:凝血酶时间
        延长见肝素类肝素物质增ATⅢ活性增高血中FDP增高低纤维蛋白原病异常纤维蛋白原血症等
    ⑸Factor凝血子
        ⅡⅤⅦⅩⅧⅨⅪⅫ子等测定单子缺乏缺乏程度先天性获性子缺乏疾病检查
    ⑹ATⅢ:抗凝血酶—Ⅲ
        活性减低见先天性获性ATⅢ缺乏见肝脏疾病外科手术DIC血栓前期血栓性疾病活性增高见血友病口服抗凝剂应黄体酮等
    ⑺抗凝系统检测:PcPs等
    ⑻纤溶系统检测:PLGа2APLPAI等
    5注意事项
    1) 标必须完全符合求
    2) 操作说明认真操作仪器运行时便开安全盖免发生障
    3) 试剂批号改变必须重新定标(专门员进行)
    4) 定期维护具体天清洗次道清洁机器部消毒次道周消毒机器部清洁移液器末端消毒样品孔安全盖手月清洗样品盘清洁试剂区
    5) 认真分析测试结果床诊断否符合疑问时床联系出现危险指标刻通知床登记
    HMX五分类血球仪操作规程
    Ⅰ开电源
    1插座插入电源
    2开机电源
    3睡眠测试键处O位置设置|
    4开DMS 电源键 显示屏开关
    5开印机电源
    Ⅱ开机
    1 检查前仪器状态
    (1) 否开电源
    (2) 机处睡眠状态转换准备状态
    (3)果DMS屏幕亮空格键
    (4) 启动结果已通直接运行第三步反输入操作员编号
    菜单[F5]键
    输入操作员编号
    [Esc]键回菜单
    2启动
    (1)菜单选择Diluter FunctionsStart Up
    (2) [Enter]键
    3检查结果
    启动完成浏览屏幕结果必浏览系统状态屏未通结果红色显示
    底检测失败[F2]查系统状态屏[F3]重新底计数检测失败[F2]查系统状态屏运行System Test 选择Special Functions DiagnosticsOperator OptionsSystem Test[Enter]键然[F3]键运行根提示进行操作
    述操作效参特殊操作维护手册 联系公司工程师
    启动结果保存动印出保存启动屏系统状态屏印件备文案

    Ⅲ 系统设置
    1 菜单选项设置
    菜单选择Special FunctionSet Up 进入菜单Set Up子菜单包括列三选项:
    Control set up 质控设置
    Sample analysis set up 标分析设置
    System set up 系统设置

    2 质控文件建立
    住菜单选择Special FunctionSet UpControl set up
    选择20 种质控文件建立质控文件文件类型CBCDIFF 文件(全血+分类)Latex 文件(乳胶)CBC文件(全血)RETIC 文件(网织红细胞)
    选择动停止功出现质控错误信息时仪器动停止发出报警常见错误:质控结果超出范围质控品期质控文件已满文件未找(出现CBCDIFF)C驱动盘太满
    动停止功关闭质控出现错误信息时仪器继续分析
    1) 建立乳胶质控文件
    菜单选择Special FunctionsSet UpControl set upLatex file光标移NOT SETUP文件[ENTER]手工 输入文件名操作者编号批号效期核信息正确[F10] 存盘退出
    2) 建立CBCDIFF 质控文件
    菜单选择Special FunctionSet UpControl set upCBCDIFF file光标移NOT SETUP 文件[ENTER]
    5C质控盘插入计算机软驱F5加载靶值功键选择质控水输入相应信息核信息正确F10 存盘退出
    果需建立种水质控文件光标移NOT SETUP 文件回车重复第2第6步
    设置完成取出磁盘
    3) 建立网织红细胞质控文件
    菜单选择Special FunctionsSet UpControl set upRetic file光标移NOT SETUP文件[ENTER]
    预期结果表输入批号效期班次操作员标号红细胞靶值网织红细胞百分
    核输入信息正确[F10] 存盘退出
    3标分析设置
    菜单选择Special FunctionsSet UpSample analysis set up
    (1)XB 范围设置
    设置靶值范围户定义
    (2)确定旗标范围
    产生文字报警信息户定义范围决定
    (3)旗标限限
    旗标限根户定义界限值产生
    (4)实验室正常参考范围设置
    HmX血液分析仪默认正常参考范围实验室定义参考范围输入
    4印选项
    (1) 动印格式
    选择标签图谱印格式
    (2) 标签印选项
    选择适标签格式选项包括单位(103uL)参考范围参数标识怀疑性旗标定 义性旗标否印
    (3) 图谱印选项
    选择适图谱印格式选项包括页面设置(宽度字体)种散点图统计量怀疑性旗标定义旗标单位正常范围三维分类图

    Ⅳ日质控
    乳胶质控
    乳胶质控品监控VCS通道白细胞分类网织红细胞检测质量该质控品保存冰箱中室温冰箱保存测试前必须放室温
    乳胶质控包含两种试剂:
    A准备液
    含种表面活性剂清气泡清洗路整标通道
    B质控液
    包含特定乳胶颗粒监控流式通道体积传导性激光散射性测定流式通道校准调整增益变异系数(CV)
    乳胶颗粒易沉淀瓶底时应轻微翻转混匀度振荡会影响测试结果质控品应避免阳光直射放30摄氏度环境中远离窗户热源
    3)乳胶质控操作
    a操作状态
    *确定启动已通
    *准备液质控液必须放室温
    b运行准备液
    DMS屏
    *菜单选择ControlControl Run
    *文件未显示[F2 ]选择文件
    *[F4]充注准备液
    稀释器
    *手动吸样准备液
    吸样针完全浸入准备液
    吸样针碰瓶壁
    吸样开关
    听哔噗声显示屏出现Diluting 移开瓶
    DMS查准备液结果
    *分析完成检查DIFFRETIC计数
    *果结果等500
    ESC键回运行窗口
    转第3步运行乳胶质控液
    *果中等500
    重复运行准备液
    *果问题重新开启瓶请工程师帮忙
    c运行质控液
    DMS屏
    *果需 ESC关闭准备液窗口
    *[F3] 运行质控液

    稀释器
    *轻轻颠倒混匀质控液58次
    *手动吸样质控液(方法)

    DMS屏查质控结果
    *检查质控结果
    *果结果出控重复整运行程序(包括准备液)
    *果两次结果问题
    根实验室规定
    参考操作指南中 乳胶出控处理 请工程师帮忙
    *选择ControlsGraphs查LeveyJennings曲线
    2 5C质控
    1) 点说明
    *CBCDIFF 质控品
    *5C质控动进样方式
    *三种水质控品:NormalAbnormalⅠ AbnormalⅡ
    储存
    *28摄氏度(3546华氏度)保存
    *质控品颠倒存放
    注意事项
    *质控条形码瓶盖知间空白处填写开瓶日期签字
    导致正确识条形码
    果条形码识质控会作标储存标数库
    *混匀前室温放置1015 分钟
    *8*8*8方式轻轻混匀两次
    两次混匀检查质控壁底部确认完全混匀
    度混匀导致溶血
    *动混匀器混匀装置
    *30分钟放回冰箱
    注条形码标签损坏条形码标签质控品
    建议参操作指南第2节 条形码标签质控品操作 运行质控
    5C质控运行介绍
    质控标块意放置
    * Sample Analysis菜单动吸样
    标测试屏显示质控结果
    继续显示标程
    条形码标签动质控结果存入质控文件
    *果手动进样方式运行5C质控实验室必须重新制定参数均值期范围根值建立质控文件
    2) 5C 质控操作
    a 根包装说明准备质控
    *质控品室温放置1015 分钟
    *够质控品8×8×8式混两次
    混匀器
    条形码瓶盖空白处填写开瓶日期签字
    b检测标方式运行质控
    *质控品装入标架
    标混合放置
    确认条形码放置
    *标架放入装载槽
    *屏幕选Sample AnalysisRun Sample
    d查质控结果
    *确认质控结果否储存质控文件选ControlsReview or Report
    *果条形码没正确放置条形码损坏没识质控结果储存患者数库
    果条形码没放置放正位置重新测试
    果条形码损坏参操作指南启动质控章节 条形码质控品操作
    e质控品稳定性
    开瓶稳定性
    *开瓶稳定性13天13次测试
    *次测试操作员必须列序
    冰箱出质控品
    室温放置1015 分钟
    8×8×8方式轻轻混匀两次
    吸样
    30 分钟放回冰箱
    *MCVRDW表现定趋性质控品身成分决定认已稳定已变质
    稳定指征
    *清液轻微粉红色正常
    *已知仪器正常情况获正常质控结果已溶血(清液黑色)表明质控品已变质
    3RETICC 质控
    *三种水:LevelⅠⅡ Ⅲ
    *COULTER ReticPrep™试剂制备样品完成进行网织红细胞质控分析
    *监控流式通道分析网织红细胞质量
    *控制手工方法
    1)储存
    *28摄氏度保存
    *已开瓶质控品应垂直存放颠倒
    颠倒需特殊混合方式完全混匀
    2)包装说明准备质控品
    *冰箱出质控品
    *混匀前室温放置1015 分钟
    *8×8×8方式轻轻混匀次
    混匀检查质控壁底部确认完全混匀
    度混匀导致溶血
    *动混匀器混匀装置
    *30分钟放回冰箱
    3)稳定性
    开稳定性
    *开瓶稳定性30天30次测试
    *次测试操作员必须列序
    冰箱出质控品
    室温放置15 分钟
    8×8×8方式轻轻混匀次
    质控瓶中吸取质控标
    30 分钟放回冰箱
    注:*粉红微红色清液正常
    *适度溶血度震荡导致质控品变质
    4)运行RETICC 质控
    *Control Run 选项运行质控
    *分析前ReticPrep试剂盒准备稀释溶液
    *手动进样模式
    RETIC 质控分析专试剂
    试剂

    成分

    CBC
    DIFF
    RETIC
    开瓶稳定性

    网织红细胞A液
    新亚甲蓝染色剂
    · 红细胞网状组织着色



    60 天
    网织红细胞B液
    漂洗剂(稀硫酸)
    · 红细胞血红蛋白保留着色RNA复合物
    · 保持细胞膜完整性



    60 天

    a制备网织红标
    *分质控品准备两12×75mm试分标记AB
    *A加入4滴试剂A
    *加入50uL混匀质控品
    *轻轻混匀
    室温放置560分钟
    bDMS准备
    *菜单选ControlsControl Run
    *[F2] 选择文件
    *[F3] 手动运行质控
    c 标方式运行质控
    *轻轻混匀A
    *A取出2uL质控液混合染色液放入B底部
    *B成定角度放B试剂
    *B加入2ml B试剂
    *混合
    *等30秒手动进样分析
    d查结果
    * 果结果出控
    实验室规定
    参操作指南 网织红出控处理方案
    *果需较前质控结果
    ControlsReview or Report屏分析储存结果
    ControlsGraphs分析LeveyJennings曲线变化走势
    质控样品表
    推荐质控品

    CBC
    DIFF
    RETIC
    开瓶稳定性
    LATRON Primer
    (乳胶准备液)
    质控液测试前路径清洁洗



    30天
    LATRON Control
    (乳胶质控液)
    监控流式通道检测质量



    30 天

    5C 细胞质控
    监控CBCDIFF 检测质量



    13天次
    网织红细胞质控
    监控RETIC检测质量



    30天次
    SCAL®校正品
    调整CBC参数准度



    1时
    LINC®质控品
    监控CBC参数线性



    7天

    IQAP(实验室间质量保证体系)
    库尔特IQAP 4C 4C PLUS 5CRETIC质控品LINC线形质控户提供免费服务(详见IQAP操作指南)

    V标检测
    1.标求
    1) HmX进行操作
    *动进样
    *手动进样
    *预稀释标测试
    2) 标求EDTAK2抗凝先配成15EDTAK2溶液般10uL抗凝
    0510ml全血(150±025mgml)
    3) 样求清洁光滑带盖试
    4) 全血标室温加盖保存求24时检测
    5) 预稀释标室温保存5分钟~5时检测
    6) RETIC标室温保存8时检测2~8℃储存24时检测
    2 条形码粘贴
    1)条形码必须瓶塞行倾斜超5度阅读
    2)标签覆盖试底部
    3标检测
    1) 动进样
    a屏幕选择Sample Analysis Run Sample
    bSAMPLE MODE选择[F2] Start Primary
    c 标插入进样架
    d[F3] Run
    2) 手动进样
    a屏幕选择Sample AnalysisRun Sample
    bSAMPLE MODE 选择[F3] Secondary
    c[F3] Run
    d标条形码阅读器前进行识
    e手工输入116位标编号
    f标充分混匀手动吸样
    3) 预稀释标
    标量足125uL时预稀释模式标进行13稀释手动进样分析仪器动计算结果 预稀释模式检测CBC结果
    a 准确加入份全血标两份稀释液轻轻混匀
    b菜单选Sample AnalysisRun Sample
    cSAMPLE MODE 选[F4] Predilute
    d[F3] RUN
    e手工输入116位标编号
    c手动吸样检测
    次检测结束均进行核疑旗标结果进行选择性手工复查

    VI关机
    *确保仪器24时运行次清洗循环关机
    *清洗液浸泡少30分钟清仪器部蛋白沉积
    1. 清洗循环
    1) 执行清洗循环
    进入屏F3 回车
    2 )保持仪器状态
    *清洗剂浸泡仪器
    *仪器保持供电状态
    *清洗剂浸泡30分钟仪器动启动
    3)检查结果
    *启动完成浏览屏幕结果(必浏览系统状态屏)
    底检测失败[F2]查系统状态屏[F3]重新底计数
    检测失败[F2]查系统状态屏运行System Test
    Special FunctionsDiagnosticsOperator OptionsSystem Test
    [Enter]键然[F3]键运行根提示进行操作
    *启动结果保存动印出
    *保存启动屏系统状态屏印件备文案
    2.关机说明
    1)运行关机操作
    *确认状态行显示选择功
    *菜单选择Diluter FunctionsShut Down
    *回车
    2)仪器保持状态
    *清洗剂浸泡少30 分钟
    *电源保持接通仪器24时动洗

    3.延迟关机程序
    果仪器准备停机48时请执行操作
    屏幕选择 Shut Down清洁剂浸泡少30分钟
    屏幕选择Start Up稀试剂浸泡道
    保持电源关闭电源
    时开机操作

    VCS应问题
    影响VCS分类质量素问题:
    u 标身干扰素
    u 静脉采血试抗凝例
    u 标运输温度
    u 标静置时间
    u 仪器身素
    1. 抗凝剂(EDTAK2EDTAK3)浓(应15gL宜)
    血细胞遇抗凝剂先短暂收缩程(12分钟)K+离子加入血浆改变渗透压细胞水份渗出
    K+离子逐渐透细胞膜进入细胞细胞恢复原态绝部分程需分钟需2030分钟
    抗凝剂浓会延长衡时间果收缩状态检测V减少S减少LY BANE区分受影响
    2.标静立3~4时
    标静立导致细胞份层RBCWBCPLT(WBC+PLTbuffy coat)排列分层细胞代谢产生代谢物造成层微环境WBC层微环境(WBC代谢产物+扩散物质)相适应
    重新混合细胞需重新建立衡初1~2min收缩达衡需30min
    血脂高标变化犹明显VS减少幅度达衡时间更长
    纠正方法:静置标进行间隔性混匀放置混匀等30分钟测
    (直方图点分布图显示)
    3. 量白细胞(衰老温度影响获生理异常)
    类细胞scatterpak双试剂反应快肿胀状态恢复原态起新鲜标V变S减少
    4. 标冰箱储存
    冰箱储存细胞收缩抑制细胞膜离子泵导致VS减少细胞易分开回温等段衡时间纠正
    *户根验低量标(肿胀)放冰箱段时间测会张正常分布图
    5. 温度影响(溶血素红细胞溶解影响)
    温度低时(冬天早刚开机)溶血素红细胞反应充分导致红细胞溶解完全出现PC2报警
    温度高时(夏天)溶血素细胞反应快导致部分白细胞溶解剩细胞核
    适温度21~25摄氏度
    6. 标化学成分影响

    VCS白细胞五项分类原理技术特点应问题

    VCS原理技术特点
    流式通道单白细胞进行直接时三重测量然进行三维分析
    1 Scatterpak试剂保证接原态分析避免化学方法细胞特性破坏
    Scatterpak(Erythrolyse—低渗低pH具表面活化性)
    (Stabilyse—高渗高pH)
    WBC EL 肿胀 ST:恢复等渗生理pH 接原态
    RBC 肿胀debris流式通道
    PLT 肿胀 El表面活化作继续发挥 debris
    (28mL) (300mL×2) (133mL)

    2 流体动力聚焦细胞令流式通道作适单细胞排列
    ISOTON III作鞘流
    3VCS检测视角手工相似
    VCS技术检测细胞角度镜检血片相似体积核质颗粒特性膜特性形态等方面观察检测工具敏感度提高描绘程度更精细细胞状态染色情况更然
    Volume
    u 运低频电流准确分析细胞体积
    体积区分白细胞亚群重参数效区分LYMO然存定程度混淆:LYBA(f912mm范围)成熟LYNE(f1214mm范围)
    u 该技术1967年开始
    u 库尔特专利

    ConductivityOpacity
    u 运高频电磁探针检测细胞含物(细胞核颗粒化学组份)特性
    细胞膜高频电流具传导性电流通细胞时细胞核颗粒细胞化学组份令电流传导产生变化变化量(RF)反映细胞含物信息
    u RFf(细胞体积细胞含物传导性)
    u Opacity(阻光性)指细胞体积RF影响高频传导数更确切描述细胞含物
    Opacity@RFDC
    u 该参数进步区体积差细胞:LYBA(f912mm范围)核质C参数区
    u 库尔特先生60年代着手研究该项技术1970年获美国专利

    Light ScatterRLS
    u 运氦氖激光源发出单色激光扫描细胞收集细胞角度(2070度)散射光(MALS)提供关细胞形态膜结构颗粒性信息
    u MALSf(细胞体积细胞膜结构颗粒性)
    Rotated Light ScatterLog(LS)DC减少细胞体积影响
    u S根细胞颗粒类型颗粒数量区分细胞时十分VCS成功处EO识力计数
    五分类仪器EO分辨够成功精度高难粒细胞区分完全
    u 库尔特先生流式光感应系统研究追溯20年前Fulwyler前辈时代时库尔特公司流式细胞仪制作程中积累丰富激光技术验

    4三维分析
    u 根细胞VCS检测量分布三维坐标(256×256×25616777216)数学公式计算出白细胞亚群分布区分辨率止高
    u 高分辨率仅令五项分类清晰令异常敏感特异显示原始细胞进步区分淋巴区单核区粒细胞区
    u 高分辨率提供科研潜力

    5VCS统计量达8000细胞保证定精度

    6VCS分类手工分类相关系数:LY>09 NE>09 MO>07

    7流式通道进步发展潜力
    u MAXM:RET
    u STKS:RETCD4CD8

    8清晰白细胞分布图
    u 仪器屏幕印报告三维座标代表性三侧面:
    DF1VS座标面观察LYNEEOMO 4细胞亚群
    DF2VC座标面观察LYMO颗粒细胞
    DF3VC座标面DF2NEEO画面观察LYMOBA细胞
    u 外汇总VCS三种技术直方图协助进行数判断
    u 点分布图种颜色代表细胞浓度:
    黄>红>绿>蓝


    CD—1700全动血细胞分析操作规程

    1 开电源
    2 出现菜单画面时Primerun键作空白试剂检测通画面出现Ready状态
    3 左右数字键输入查标号床号充分混匀标置进样针进样阀进行测定
    4 动印报告
    5 日清洗程序:回屏幕Daily Shutdown键屏幕显示Process Active…PrimeRun回准备状态
    6 关机

    COULTER EPICS XL 型 FCM流式细胞仪操作规程
    (1)开机
    1)开机前分鞘液盒清洁液盒加满
    2)开 UPS
    3)开启计算机动进入程序启动流式细胞仪
    4)开电源箱门检查 WATER  TRAP AIRFILTER  VACUUM  FILTER 列情况通知工程师:
    <1>TRAP 超 1 / 3
    <2>FILTER 液体
    <3>SYSTEM  VACUUM 表超- 17 - 25 英寸
    <4>SYSTEM  PRESURE 表超 8 - 23psi 间
    <5>VACUUM  TRAP 超 0 . 5 英寸液体
    5)预热三十分钟仪器提示插入标
    6)选择需 Protdcol Panel
    (2)光路流路校准
    1) DNA  check 放室温 10 分钟
    2)选择 FLOW CHECK  ( Protocol)
    3)取 0 . 5ml  DNA Check  放塑料试
    4)试放进样台取数 5000 ( FS )
    5)核查 FS 荧光信号 HPCV 否前记录相符
    (3)清洗
    1)准备清洗液:
    <1>次氯酸钠   1ml+ 双蒸水 1ml 等量混匀
    <2>双蒸水 5ml
    2)仪器选择  PANEL 中 CLEANING
    3)试放置标台
    4)提示次氯酸钠次双蒸水三次次放入标台
    (4)真空清洗
    1) RUN 键 RUN 键指示闪烁
    2)真空清洗器加入 5ml 双蒸水(黑色)
    3)清洗器放置样品台水吸入
    4)清洗器 CLEANSE 键清洗循环结束 RUN 键指示灯亮仪器显示 Cytometer ReadyRUNo 灯亮
    (5)关机
    1) 70 %酒精清洗标台
    2)双蒸水试放样品台
    3) Applications 中 EXIT 关闭仪器
    4)出现 XL 键入 XLOFF
    5)分关闭计算机屏幕印机
    6)关闭 UPS
    (6)注意事项

    1)出现述情况必须立进行清洗:
    <1>染料 PI EB AO TO Coriphosphine0 FITC`Fura3 Fiuorescein Diacetate
    <2>染料进行免疫分型前
    <3>果碎片计数明显增加
    2)工作 24 时少关机次
    3)重新启动必须仪器关闭 30 分钟
    4)月清洗次空气滤膜
    5)月清洗鞘液盒次
    6) 60 天清洗清洁液盒次

    MONITOR JI红细胞沉降仪操作规程

    [原理]
    离体抗凝血液置特制刻度测定(魏氏法血沉)垂直立室温中定时间时观察层血浆高度毫米数值报告
    [仪器试剂]
    MONITOR JI血沉仪专血沉
    109mmoI/L(32gL)枸橼酸钠溶液:取含二分子结晶水枸橼酸钠(分子量294.12)3.28蒸馏水溶解稀释100ml液室温保存超2周
    [操作]
    1.专血沉1支加抗凝剂0.2ml
    2.静脉采血取针头加血刻度颠倒混匀
    3.血沉(300mm×2.5mm)吸取述混匀血液0刻度处拭外附着血液血沉直立血沉架
    4.记时室温中静置lh读出血沉仪读数血沉值
    [参考值]
    男<15mm/60min
    女:<20mm/60min
    [附注]
    1.红细胞单位时间沉速度血浆蛋白量质血浆中脂类量质红细胞数量否成串钱相聚血沉径清洁度放置位置否垂直室温高低等素关系
    2.求
    (l)标采集时避免脂肪血
    (2)血液抗凝剂例准确
    (3)血沉径标准(2.5mm)放置垂直
    (4)做血沉标采集3h测定充分混匀
    3.室温低高贫血时结果影响血沉应量放18—25℃室温测定室温高时血沉加快温度系数校正室温低时血沉减慢法校正


    Nycocard ReaderⅡ
    功全定量特种蛋白金标检测仪操作规程

    1 开机等仪器进入准备状态
    2 根仪器提示定标
    3 取全血5ul加入样品稀释液中
    4 反应板中加入稀释样品50ul渗透
    5 垂直滴入滴金标记抗体渗透
    6 垂直滴入滴洗涤液渗透
    7 5分钟Nycocard ReaderⅡ读数色定量测定结果

    U F —100操作规程
    1开电源开关
    2开sysmerpower
    3开spectraphysics中开关
    4旋转idec24401钥匙ON
    5等READX灯亮(绿灯亮)
    6sampter
    7Tube中数字(数字试架序号致)
    8sample NO(输入标序号)
    9start开始标测定
    10质控品测定应Nanual ModE QcolQco2ENTEROD放入质控品吸针START等测定结束QCFile键送文件号OK
    11需更换试剂报警时屏幕左角Sysmex停止报警更换缺试剂Replaur Reasent相应更换试剂名称
    12天测试结束Moreshutelown洗液进行洗
    13关机:洗结束旋转ielec24401钥匙OFF关掉spetraphysics中开关关掉sysmexpower开关关掉总电源开关

    盈东Uriscan-尿十项化学分析仪操作规程



    1 开电源仪器检进入准备状态
    2 取刻度离心倒入混合新鲜尿液10ml
    3 取出密封保存尿分析试纸条插入尿液中尿液浸湿块反应区半分钟取出滤纸拭余尿液
    4 置尿分析仪底板仪器感应灯亮仪器动进行分析
    5 试置1500转分钟×5分钟
    6 弃清液留取尿沉渣02ml倒玻片进行镜检


    ATB Expression全动鉴定药敏测试仪操作规程
    1开
    1)检查电源否正常电源正常方开机
    2)开电源插座开关开UPS电源开关
    3)序开印机—显示屏—电脑机—ATB Expression测试仪开关
    2测试操作
    1)显示屏显示C:\>键ATBENTER进入ATB鉴定药敏测试系统
    2)选择菜单标栏输入标相关资料
    3)进入细菌鉴定F1动读入者F2工输入
    4)ATB Expression测试仪↓键试剂船移出放置鉴定试剂条年试剂条盖子仔细检查试剂条保持清洁避免污染
    5)键盘ENTER键仪器进入动测试注意先做日质控做病标测试
    6)选择细菌鉴定结果ENTER 键注意结果标源细菌基形态培养特性做切忌盲目迷信仪器测试结果结果符应仔细查找原必时重做测试
    7)进入第三试验F1动读入者F2工输入
    8)试剂船放置药敏试剂条操作第4步
    9)ENTER仪器进入动测试测试完毕ENTER显示测试结果F1接受测试结果者F2修改测试结果软件配专家系统
    动调整药敏测试结果需仔细结果结果疑时应查找原必时重做测试K—B法作
    10)ENTER保存测试结果
    11)选择菜单查阅栏ENTER输入记录编号查出需测试结果F6印报告
    3关机
    1)ESC键退出操作程序
    2)DELETE键退出软件程序
    3)关机序ATB Expression测试仪—电脑机—显示屏—印机关闭开关
    4)先关掉UPS电源开关关掉插座开关
    4搞仪器清洁卫生工作罩护套贵重仪器手册登记仪器运行情况
    5隔二周清洁次试剂船应彻底清洁晾干放回原处

    二氧化碳孵箱操作规程

    1二氧化碳孵箱24时开机
    2日检查孵箱工作情况:
    1)CO2浓度5—7范围
    2)温度应保持孵箱温度35±1℃
    3)湿度孵箱烧瓶应盛水确保孵箱湿度
    3孵箱日工作情况应登记册

    BACTALert120全动血培养仪操作规程注意事项

    .开机 显示屏→印机→机→电脑动进入监视屏幕
    二输入操作者密码
    三日做仪器质控
    四周做次数备份
    五出现断电现象时关机步骤关闭计算机电开
    六日做培养箱温度计录
    七培养放室温阴凉处保存严禁放入冰箱保存
    八天保持仪器外表面清洁
    九月清洁刷清洁培养孔次
    十半年酒精沙布清洁培养孔次
    十关机 退出ESC→输入密码→F5→OFF→CD显示屏显示根目录关电脑机→显示屏→印机

    伟力彩色精子动态分析仪操作规程
    1开电源开关
    2伟力彩色精子质量检测系统中power(键盘面)
    3开显微镜温控仪开关显微镜开关显微镜拉杆印机开关VCD中power键显示AU:0:00
    4双击伟力彩色精子动态分析
    5输入项目(姓名年龄病历号送检时间精液颜色气味精液量液化程度液化时间检验医生)确定
    6活动显示
    7停止显示
    8计算分析
    9右侧确定确定
    10屏幕点击鼠标锁住屏幕
    11修改重新分割中新阈值(90—120)重新分割
    12输入圆细胞数(数屏屏幕般3—5)开始计算
    13采组数
    14进行场分析中Y()重复1013步骤般分析3场
    15进行场分析中N(否)
    16印(印纸)印完重新原印纸反面直方图印
    17全部保存确定关闭印选择中报告中轨迹图预览选①视野开保存确定取消结果浏览全部保存分析结果否履盖中Y()关闭退出系统

    DiaMedID Micro Typing System达亚美微量定型系统操作规程
    1简介
    1) 1984 年 Yves Lapierre 发明凝胶测试法1988 年 瑞士达亚美专利产品推市场
    2) 原理:基生物化学凝胶滤技术离心技术免疫化学抗原抗体特异反应抗原抗体反应抗球试验时血细胞发生凝聚离心时凝聚块通凝胶间隙留凝胶层呈阳性反应未凝聚血细胞离心时通凝胶间隙沉积凝胶底部呈阴性反应
    3) 达亚美凝胶测试产品途
    i ABOD血型反定型 交叉配血
    ii 抗体筛查 Rh分型
    iii 抗体鉴定 稀血型
    iv 抗体滴定
    4) 瑞士达亚美公司已获GMP ISO9001 认证
    2特点
    1) 结果清楚明确凝聚层阳性沉积层阴性血型配血结果清晰明结果易判定
    2) 结果稳定保存 拍 存入计算机复检
    3) 操作简明凝胶卡中已抗血清 加入样细胞定型
    a) 避免忘加抗血清引起错误
    4) 卡六减少标记减少错误发生环节利正定反定
    5) 简化操作程序减少接触玻璃品提高操作安全性
    6) 达亚美凝胶测试抗球配血检出完全抗体避免ABO外血型抗体引起输血溶血时达亚美卡存抗球中问题避免费时费力洗涤程假阴性
    7) 达亚美抗体筛查检出床意义抗体避免盲目配血提高安全输血水
    8) 样量少利新生少血液量样检测
    9) 结果重现性血型配血操作实现标准化
    10) 血型配血动化
    11) 达亚美产品齐全途广泛
    3注意事项
    (1)血型鉴定
    1) 日实验前先取出瓶2号稀释液标准细胞放置段时间室温防冷凝集
    2) 必须标记卡
    3) DiaMed卡封口已损坏时中干涸气泡时卡
    4) 2号稀释液保证反应结果细胞浓度5左右太浓太稀
    5) 纤维蛋白吸附部分红细胞呈假阳性应血样离心
    6) 反定先加样便标准细胞血清血浆反应
    7) 正反定型确定结果A亚型正定型结果弱阳性应怀疑ABO亚型重做完全测试正反结果符时请设计实验分析
    8) 质控(Ctl)阳性时请先生理盐水洗细胞做血型
    9) 严格标准程序操作检出弱抗原血型亚型
    10) 某药物疾病导致弱阳性正反定型符
    11) 细菌异常血清蛋白影响结果
    (2)注意事项 (交叉配血)
    1) 日实验前先取出瓶2号稀释液标准细胞放置段时间室温防冷凝集
    2) 必须标记卡
    3) DiaMed卡封口已损坏时中干涸气泡时卡
    4) 必须2号稀释液保证反应结果细胞浓度08左右太浓太稀
    5) 纤维蛋白吸附部分红细胞呈假阳性应血样离心
    6) 液体应加卡反应室中
    7) 严格标准程序操作检出弱抗原抗体反应弱凝集
    8) 某药物疾病导致血液配合
    9) 细菌异常血清蛋白影响结果
    4异常情况分析
    1) 假阳性发生原分析:①干卡②期卡③密封严④胶中气泡⑤直接抗球蛋白实验DAT阳性⑥凝聚性细胞⑦酶引起身凝聚⑧抗血清交叉污染加样器问题 ⑨细胞悬液正常⑩Rouleaux细胞排列(先细胞重做)Wharton’s Jelly
    2) 疑难结果:①离心机问题②凝胶反应腔
    3) 假阴性:①没加血浆血清②量相差太③抗体失活病抗体极低抗体病④弱凝集素⑤弱 抗原⑥细胞污染失效
    4) 双细胞样:①输血样②BMT骨髓移植样③量胎母亲出血症④亚型A3Am等⑤Chimerism 嵌合体⑥样污染⑦纤维蛋白⑧弱化抗原(白血病新生高龄老)
    1:⑤⑦⑩温生理盐水洗涤卡重做
    2:①请销售员联系检查离心机②离心凝胶复位卡应正立放置
    3:③新鲜样避免现象④⑤参阅病历分析病理治疗年龄原发生抗体弱抗体弱抗原亚型引起弱反应结果
    5) 发性骨髓瘤慢性髓白血病淋巴瘤发生正反定型符5分钟37℃反应反定型
    5ABO正反定型抗D
    1) 准备样A1B 细胞室温衡标记达亚美DiaMed ID卡
    2) 50ul A1B 细胞(08)加入A1B中
    50ul 血清血浆加入A1B中
    3) 样压积红细胞25ul50ml全血悬浮05ml 2号稀释液(Dil 2)溶液中5样红细胞
    4) 10ul 5 样红细胞加入A B D Ctl中
    5) 离心10 分钟
    6) 读结果
    7) 记录
    6交叉配血
    1) 准备样标记达亚美DiaMed ID卡
    2) 10ul样压积红细胞悬浮1ml 2号稀释液(Dil 2)溶液中08样红细胞
    3) 1号中(侧)加入50ul 08献血者细胞25ul 受血者血浆血清
    4) 2号中(次侧)加入50ul 08受血者细胞25ul 献血者血浆血清
    5) 37℃ 15 分钟
    6) 离心10 分钟
    7) 读结果
    8) 记录
    7抗体筛查
    1) 准备样抗体筛查ⅠⅡⅢ细胞室温衡
    2) 标记达亚美DiaMed ID卡 姓名病历号ⅠⅡⅢ
    3) 抗体筛查ⅠⅡⅢ细胞50ul (08)
    4) 25ul 检样血浆血清
    5) 37℃ 15 分钟
    6) 离心10 分钟
    7) 读结果
    8) 记录
    8 BO 血型基础
    血型
    抗原
    抗血清反应
    A1B细胞反应
    抗A
    抗B
    抗A抗B
    A1
    B
    A
    A
    反应

    反应

    反应
    B
    B

    反应
    反应
    反应

    AB
    AB
    反应
    反应
    反应


    O
    H



    反应
    反应


    抗A
    抗A1
    抗H
    A
    ++++
    ++++

    A2
    +++

    +++++
    O


    ++++

    1) Rh 血型
    2) 抗原:C cEeD CdeR1 cder CDER2 CcDdeeR1r 抗D阳性反应红细胞Rh+
    3) 完全抗体筛查
    4) ABO系统抗体外血型抗体通抗体筛查检查O型细胞检查血浆血清样血型抗体
    5) 交叉配血
    6) 交叉配血方法考察细胞血清血浆相容性完全抗体引起输血反应 传统配血方法检出完全抗体 传统抗球配血检出完全抗体操作复杂
    列情况建议做抗体筛查
    1) 需量输血病
    2) 反复输血病
    3) 血色素低红细胞压积例低严重贫血病
    4) 溶血症状病

    1575型微孔板清洗器操作规程
    . 概述
    1575型微孔板清洗器ELISA实验中清洗微孔板具程序动精确安全功
    二. 技术性指标
    1. 电源电压:220V+104763HZ
    2. 操作温度:535C
    3. 仪器存放温度:2050C
    4. 相湿度:095
    5. 清洗程序:175(中18仪器已备)
    6. 液体注液容量:503000ul
    7. 液体浸泡时间:010秒
    8. 孔清洗次数:高调9次
    9. 吸针移动位置:02mm(横)
    10. 10吸液深度位置:0115mm
    三操作方法
    1操作单

    SELECT RUN 操作
    IN YES OUT
    SELECT PRINSERINSE 充盈洗
    IN YES OUT



    SELECT DISINFECTION 消毒部件
    IN YES OUT



    SELECTCONFIGURETION 程序编制
    IN YES OUT

    SELECT SERVICEVER 仪器维护
    IN YES OUT
    2 操作程序 接通电源 显示器显示:
    SELECT RUN
    IN YES OUT


    RUN PO4
    IN YES OUT
    LAST STRIP 12
    IN YES OUT
    键头选择需操作规程
    键头选择第条清洗
    RUN PO4
    STRIP 12 YES OUT


    RUN PO4
    WASH+ASP ESC
    YES进行WASH+ASP清洗
    SELECT PRINSERINSE
    IN YES OUT

    CONNECT YHE RINSE
    IN YES OUT
    清洗完道洗
    PRIMINGRINSE
    ESC

    SELECT RUN
    IN YES OUT

    四仪器维护保养
    1.切记水情况输液泵启动会泵阀门受损影响分液准确性
    2.仪器应放通风避光稳固台子
    3.道清洗部件清洗液时清洗机关闭
    4.注液针骨清洗液会形成结晶次清洗结果蒸馏水洗遍
    5.消毒结束必须蒸馏水彻底洗留微量消毒液
    6.通常清洗器前次操作前消毒


    (二)检验中心检测项目标准操作规程
    A检室
    A1血常规检验
    (1)标
    EDTAK202ul抗凝静脉血1ml门诊病CD1700仪器做三分类测定住院病COULTER HMX仪器做五分类测定
    (2)试剂仪器
    COULTER HMX五分类血球分析仪配套试剂质控COULTER 4C PLUS全血质控品COULTER HMX五分类血分析仪配套试剂质控COULTER 5C 全血质控品(血液细胞动化分析仪介绍)
    (3)操作
    1) 门诊:
    a) 收血常规标查核检验项目立编号放混匀器混匀3分钟
    b) 血型立玻片法试法测定血型输入电脑
    c) 血标ABBOT CD1700检测结果入库
    d) 中间细胞较应手工涂片染色分类血板等图形结果异常较应手工复查
    e) 结果核半时报告
    2) 病房:
    a) 采集血常规标立编号试加盖放专试架放入HMX动混匀
    b) 血型玻片法试法测定血型输入电脑
    c) 血标COULTER HMX机检测结果入库
    d) 分类图形结果应手工涂片染色分类血板等结果图形结果异常较应手工复查(复查条件)
    e) 结果核签发报告单果急诊电话报告血型话通知病房报告单(血液项目)
    (4)项目
    代号
    中文名
    单位
    WBC
    白细胞计数
    ×109L
    LY(LY)
    淋巴细胞分类

    MO
    单核细胞分类

    NE(GR)
    中性细胞分类

    LY#
    淋巴细胞计数
    ×109L
    MO#
    单核细胞计数
    ×109L
    NE#
    中性细胞计数
    ×109L
    RBC
    红细胞计数
    ×1012L
    HGB
    血红蛋白
    gL
    HCT
    红细胞压积
     
    MCV
    均红细胞体积
    fl
    MCH
    均红细胞血红蛋白含量
    pg
    MCHC
    均红细胞血红蛋白浓度
    gL
    RDW
    红细胞分布宽度
     
    PLT
    血板计数
    ×109L
    MPV
    均血板体积
    fl
    PCT
    血板积

    PDW
    血板分布宽度
     

    EO
    嗜酸性细胞分类

    BO
    嗜碱性细胞分类

    EO#
    嗜酸性细胞计数
    ×109L
    BO#
    嗜碱性细胞计数
    ×109L
    (5)特殊规定
    检验血常规时科室工作员志发现样结果高低务必作登记复查时报告备查询
    1血红蛋白低100gL
    2白细胞低3000ul
    3血板低8万ul
    4发现白细胞分类异常图形时
    5发现中项高时床指定镜检时
    (6)床意义
    (6.1)WBC计数
    参考范围
    410 × 109L
    1增加
    (l)生理性:初生妊娠末期分娩期期饭剧烈运动冷水浴极度恐惧疼痛等
    (2)病理性:部分化脓性细菌引起炎症尿毒症严重烧伤传染性单核细胞增症传染性淋巴细胞增症急性出血组织损伤手术创伤白血病等
    2.减少
    病毒感染伤寒副伤寒黑热病疟疾生障碍性贫血极度严重感染X线镭射肿瘤化疗非白血性白血病等
    (6.2)白细胞分类计数
    (621)染色液
    1瑞氏—姬姆萨复合染色液
    I液
    取瑞氏染粉 lg姬姆萨染粉1g加入甲醇(分析纯)充分振摇第二天加甘油10ml混匀
    Ⅱ液
    pH6.4—6.8磷酸盐缓液(H2O代缓液)

    磷酸二氢钾(水)6.648

    磷酸氢二钠(水)2.56g

    加少量蒸馏水溶解磷酸盐调整 pH加水1000ml


    染色
    置玻片染色架滴加染液3—5滴迅速盖满血膜约1min滴加缓液510滴轻轻摇动玻片准血片吹气染液充分混510min水染液干染色液盖满血片半分钟水洗镜检
    2.快速染色液

    I液
    磷酸二氢钾 6.648

    磷酸氢二钠 2.56g

    水溶性伊红 Y 4g(伊红 B2.5g)

    蒸馏水 1000ml

    石炭酸 40ml

    煮沸冷备

    Ⅱ液
    亚甲蓝 4g

    蒸馏水 1000m1

    高锰酸钾 2.48g

    煮沸冷备




    染色

    干燥血片浸入快速染色液I液中30s水洗浸入Ⅱ液30s水洗干



    注:染色法快速急症外玻片质量求高着染液次适延长染色时间更换新液


    3.30s快速单染色液

    贮存液
    瑞氏染粉 2.0g
    姬姆萨染粉 0.68
    天青 E 0.6g
    甘油 10.0ml
    聚乙烯D咯烷酮(PVP) 20.0g
    甲醇 1000mI

    磷酸盐缓液(pH626.8)
    磷酸二氢钾 6.648
    磷酸氢二钠 0.268
    石炭酸 4.0ml
    蒸馏水加 1000mI

    应液
    l液2液3:1例混合放置14天备


    染色
    染液铺满血膜血片浸入染色缸30s水洗

    注:加表面活性剂 PVP增加染料溶解度起稳定作加入天青 E缩短染色时间
    (622)参考范围
    LY 18.7%47%
    LY#:(1.0—3.3)×109/L

    MO 3.5%7.9%
    MO#:(0.2—0.7)×109/L
    GR 46.0%76.5%
    GR#:(1.8—6.4)×109/L
    1.增
    (l)中性粒细胞:急性化脓感染粒细胞白血病急性出血溶血手术尿毒症酸中毒急性汞中毒急性铅中毒等
    (2)嗜酸性粒细胞:变态反应寄生虫病某皮肤病某血液病手术烧伤等
    (3)嗜碱性粒细胞:慢性粒细胞白血病杰金病癌转移铅铋中毒等
    (4)淋巴细胞:百日咳传染性单核细胞增症慢性淋巴细胞白血病麻疹腮腺炎结核传染性肝炎等
    (5)单核细胞:结核伤寒亚急性感染性心膜炎疟疾黑热病单核细胞白血病急性传染病恢复期等
    2.减少
    (l)中性粒细胞:伤寒副伤寒疟疾流感化学药物中毒X线镭射抗癌药物化疗极度严重感染障粒细胞缺乏等
    (2)嗜酸性粒细胞:伤寒副伤寒应肾腺皮质激素
    (3)淋巴细胞:见传染病急性期放射病细胞免疫缺陷等
    (63)常见异常白细胞形态变化
    外周血象中类白血病幼稚细胞外通常见细胞形态异常变化
    (631)中性粒细胞
    1.核象变化:反映中性粒细胞成熟程度正常血象中少量杆状核细胞出现分叶核细胞间值约占1:13
    (1)核左移:指杆状核细胞增常见感染晚幼粒中幼粒等细胞增核象极度左移见类白血病反应白血病
    ① 伴白细胞总数增高核左移:称生性左移常见急性化脓性感染叶性肺炎等
    ② 白细胞总数增加减低核左移:称退行性左移常见严重感染机体抵抗力低时伤寒伴感染中毒性休克败血症等
    (2)核右移:指仅分叶核粒细胞增分叶常见4叶5叶(正常时分3叶)造血功衰退造血物质缺乏表现常见营养性巨幼细胞性贫血抗代谢药物外疾病进行期突然出现核象右移表示预良
    2毒性变化:
    严重感染恶性肿瘤种重金属药物中毒面积烧伤等症时中性粒细胞出现形态变异
    (l)细胞均:骨髓幼稚粒细胞发生规分裂增殖致
    (2)毒性颗粒:胞浆中部分全部颗粒变粗着色深颗粒分布等中性颗粒成熟程中发生变性致
    (3)空泡:胞浆核中出现常认细胞脂肪变性未着色致
    (4)Dohle体:脑浆出现嗜碱性点线梨形云雾状物质核浆发育衡致细胞严重毒性变表现
    (5)核棘突:胞核种形态芽状突出 床意义尚明确中毒癌转移严重放射损伤等关
    3退行性变:
    表现胞体肿结构模糊边缘清胞核呈固缩肿胀破碎溶解等变化退行变细胞衰老死亡表现
    (632)淋巴细胞
    淋巴细胞形态变异种疾病种病毒感染传染性单核细胞增症常见外疟疾敏性疾病淋巴结炎等见统称异型淋巴细胞传染性单核细胞增症患者血液中常出现3种异型淋巴细胞空泡型规型幼稚型
    (64) 血红蛋白
    [参考值]
    男120160gL
    女110150gL
    (65)红细胞分布宽度
    RDW反映红细胞体积异质性参数常测红细胞体积变异系数(CV%)表示血涂片红细胞形态均观察更客观准确 RDW增时床意义
    (l)缺铁性贫血(IDA)诊断疗效观察:
    缺铁性贫血时 RDW增尤MCV尚处参考值范围时(缺铁性贫血时MCV应降)RDW增更早期缺铁指征MCV减时RDW增更显著予铁剂治疗效时 RDW药前更逐渐降正常水产生种现象原补铁产生网织红细胞正常红细胞生成释放血药前红细胞存 RDW先增着正常红细胞增红细胞减少 RDW便逐渐降参考范围
    (2)细胞低色素性贫血鉴诊断:
    IDA轻型中海性贫血时MCV均减 IDA时 RDW增轻型中海性贫血时 RDW正常
    (3)贫血分类(Bessman分类法):
    MCV反映红细胞均体积代表红细胞体积异质性红细胞体积评价血涂片红细胞形态观察种观察常受血涂片制作观察者观素影响较定量RDW较反映红细胞体积异质性 MCV RDW结合贫血分类更完善(表 l—l—2)
    表 l12 Bessman MCV/RDW贫血分类

    MCV
    RDW
    正 常


    缺铁性贫血


    巨幼细胞性贫血


    溶血性贫血


    铁粒幼细胞贫血


    生障碍性贫血



    单纯细胞性贫血


    注:→变化↑增↓减少
    (66) 均血板体积
    MPV床意义结合 PLT变化价值
    (1)鉴血板减少原:
    ① 骨髓造血功损伤致血板减少时 MPV减少
    ② 血板周围血液中破坏增时导致血板减少 MPV增
    ③ 血板分布异常致血板减少时MPV正常
    (2) MPV增作骨髓造血功恢复较早期指征:
    骨髓造血功衰竭时MPV PLT时持续降造血功抑制越严重功恢复时MPV增常先 PIT升高 MPV越造血
    (3)方面应:
    ① MPV增:见骨髓纤维化原发性血板减少性紫痰(ITP)血栓性疾病血栓前状态脾切慢粒巨血板综合征镰刀细胞性贫血等
    ② MPV减:见脾亢化疗障巨幼细胞性贫血等
    (67)血板积(plateletcritPCT)
    参考范围
    男 0.108% 0.272%
    女 0.114%0.282%
    PCT PLT MPV正相关PLTMPV增减均 PCT发生变化
    增高:见骨髓纤维化脾切慢粒等
    减低:见障化疗血板减少症等
    (68)血板体积分布宽度(platelet volume distribution widthPDW )
    参考范围
    0.1550.181(15.5%18.1%)
    (血板体积变异系数 CV%表示)PDW反映血板体积异质性参数
    增:
    急非淋化疗巨幼细胞性贫血慢粒脾切巨血板综合征血栓性疾病等
    (69)血细胞体积分布直方图应
    (l)红细胞体积分布直方图:
    MCVRDW配合直方图分析直接观察红细胞体积分布情况
    ① 现峰:见正常缺铁性贫血(峰左移)巨幼细胞性贫血(峰右移)
    ② 现两峰:缺铁性贫血予铁剂治疗效时出现红细胞峰正红细胞(网织红细胞)峰巨幼(红)细胞性贫血予叶酸维生素 Bl2治疗效时见两峰
    (2)白细胞体积分布直方图:
    静脉血毛细血白细胞数量略低中档血细胞分析仪般三分群根加入溶血剂白细胞膜通透性改变发生皱缩类型白细胞皱缩体积明显差皱缩白细胞通血细胞分析仪微孔时产生脉信号放甄微机处理数体积分布直方图
    淋巴细胞群35—90 fI
    中间细胞群90160 fl
    粒细胞群160—450 fI
    三群细胞百分白细胞数量积绝数
    正常白细胞体积分布直方图见两明显分离峰左峰细胞群(淋巴细胞)右峰细胞群(粒细胞)两峰间中间细胞群分布
    急性白血病时异常原始幼稚细胞增见中间细胞明显增高时直方图见峰峰值常90160 fl间时必须推片染色镜检
    (3)血板体积分布直方图:
    正常血板体积分布2—20 fl间21—30 fI间少量血板般仪器30 fI分析界标
    血板体积增时直方图会出现明显拖尾现象红细胞红细胞碎片干扰时直方图尾部会抬高
    (610)三种红细胞参数均值计算
    1原理
    根红细胞血红蛋白浓度红细胞积计算红细胞均容量红细胞均血红蛋白量红细胞均血红蛋白浓度作贫血形态学分类
    2计算方法
    (1)均红细胞体积(mean corpuscularvolume MCV):指红细胞均体积飞升(fI)单位

    L血液中红细胞体积(L)×1015

    MCV=
    ──────────────
    =××fl

    L血液红细胞数()

    (2)均红细胞血红蛋白含量(mean Corpuscular hemoglobinMCH):指红细胞含血红蛋白均量皮克(pg)单位

    L血液中血红蛋白浓度(g)×1012

    MCH=
    ──────────────
    =××pg

    L血液红细胞数()

    (3)均红细胞血红蛋白浓度(mean Corpuscular hemoglobin concentrationMCHC):指均 L红细胞中含血红蛋白浓度(gL)

    L血液中血红蛋白g数(gL)

    MCHC=
    ──────────────
    =××gL

    L血液红细胞积(LL)

    3床意义
    正常型贫血时红细胞均参考值表
    均 值
    MCH(pg)
    MCV(fl)
    MCHC(gL)
    正 常
    2731
    8295
    320360
    细胞性贫血



    正常细胞性贫血




    单纯细胞性贫血



    细胞低色素性贫血



    注: 正常↑增↓减少
    (611)红细胞参数
    1红细胞(red blood ceIIRBC)
    男 (4.05.5)×1012/L
    女 (3.55.0)×1012/L
    2血红蛋白(hemoglobinHGB)
    男 120160 g/L
    女 l10150 g/L
    3红细胞积(hematocritHCT)
    男 0.40—0.50 (40%50%)
    女 0.35—0.45 (35%45%)
    A2嗜酸性粒细胞直接计数
    [标]
    EDTAK2 10ul抗凝静脉血1ml
    [原理]
    手工法
    血液中嗜酸性粒细胞含伊红低渗溶液中染成红色红细胞白细胞破裂溶解
    仪器法(VCS原理)
    [试剂]
    手工法
    嗜酸性粒细胞直接计数稀释液种类较定优缺点尚家继续实验找出佳配方列3种稀释液供参考
    1. Hinkelmann液
    伊红 0.2g
    95%石炭酸 0.5m1
    40%甲醛 0.5ml
    蒸馏水 加100m1
    2.乙醇—伊红稀释液
    90%乙醇 30ml
    甘油 10ml
    碳酸钾 lg
    枸橼酸钠 0.5g
    20g伊红液 10ml
    蒸馏水 加100m1
    配方背景清晰嗜酸性粒细胞着色鲜明缺点含10%甘油较粘稠细胞易混匀计数前必须充分振摇
    3.伊红—丙酮稀释液
    20gL伊红液 5mI
    丙酮 5mI
    蒸馏水 90ml
    新鲜配制效果周配1次
    仪器法
    COULTER HMX 五分类血细胞仪专试剂
    [操作]
    手工法
    1.试中加稀释液0.38mI
    2.常法取末梢血20μl加入混匀红细胞溶解两侧充池
    3.静置3—5min低倍镜(必时高倍镜)镜计数10方格嗜酸性粒细胞数
    仪器法
    操作血常规
    [计算]
    10方格嗜酸性粒细胞数×20× lO=嗜酸性粒细胞L
    [参考值]
    (50300)×106/L(50300/μl)
    [附注]
    l 血液稀释应1h计数完毕否嗜酸性粒细胞会逐渐破坏结果偏低易辨认
    2 充池前充分混匀宜力猛特含甘油稀释液适延长混匀时间
    3 注意中性粒细胞区免误认中性粒细胞般着色着浅红色颗粒较
    4.住院病采标时间力求统免受日间生理变化影响
    5.白细胞总数分类百分率求绝值直接计数结果准确
    [床意义]
    1.直接计数观察传染病预手术烧伤病预测定肾腺皮质功
    2.变化床意义白细胞分类计数中嗜酸性粒细胞增减
    A3红细胞沉降率测定
    [标]
    200ul枸橼酸钠抗凝静脉血11ml颠倒混匀
    [原理]
    离体抗凝血液置特制刻度测定(魏氏法血沉)垂直立室温中定时间时观察层血浆高度毫米数值报告
    [仪器试剂]
    MONITOR JI血沉仪专血沉
    109mmoI/L(32gL)枸橼酸钠溶液:取含二分子结晶水枸橼酸钠(分子量294.12)3.28蒸馏水溶解稀释100ml液室温保存超2周
    [操作]
    1.专血沉1支加抗凝剂0.2ml
    2.静脉采血取针头加血刻度颠倒混匀
    3.血沉(300mm×2.5mm)吸取述混匀血液0刻度处拭外附着血液血沉直立血沉架(MONITOR JI操作)
    4.记时室温中静置lh读出血沉仪读数血沉值
    [参考值]
    男<15mm/60min
    女:<20mm/60min
    [附注]
    1.红细胞单位时间沉速度血浆蛋白量质血浆中脂类量质红细胞数量否成串钱相聚血沉径清洁度放置位置否垂直室温高低等素关系
    2.求
    (l)标采集时避免脂肪血
    (2)血液抗凝剂例准确
    (3)血沉径标准(2.5mm)放置垂直
    (4)做血沉标采集3h测定充分混匀
    3.室温低高贫血时结果影响血沉应量放18—25℃室温测定室温高时血沉加快温度系数校正室温低时血沉减慢法校正
    [床意义]
    增快:
    (l)生理性:
    年幼期妊娠3月产1月
    (2)病理性:
    急性炎症结缔组织病活动性结核风湿热活动期组织严重破坏贫血恶性肿瘤高球蛋白血症重金属中毒等
    A4血型鉴定
    (1)ABO血型鉴定
    根红细胞A抗原/B抗原血型分A型B型AB型O型4种利红细胞凝集试验通正反定型准确鉴定ABO血型谓正定型已知抗—A抗—B分型血清测定红细胞相应A抗原/B抗原谓反定型已知A细胞B细胞测定血清中相应抗—A/抗—B
    [试剂材料]
    1.抗—A(B型血)抗—B(A型血)抗—A十B(O型血)分型血清制备方法见节附注
    2.5%ABO型试剂红细胞盐水悬液制备方法见节附注
    3.受检者血清
    4.受检者5%红细胞盐水悬液制备方法见节附注
    [方法]
    1.试法
    (1)取洁净试(径10mm×60mm)3支分标明抗—A抗—B抗—A十B滴分加抗—A抗—B抗—A十B分型血清l滴试底部滴分加入受检者5%红细胞盐水悬液1滴混
    (2)取洁净试(径10mm×60mm)3支分标明ABO细胞滴分加入受检者血清l滴试底部分滴加入ABO型5%试剂红细胞悬液l滴混
    (3)立1000r/min离心lmin
    (4)试轻轻摇动沉底红细胞浮起先眼观察凝集(溶血)现象眼见凝集应反应物倒玻片低倍镜检查
    (5)观察结果时凝集更注意凝集强度助AB亚型类BcisAB发现
    (6)凝集强度判断标准
    4十
    红细胞凝集成块血清清晰透明
    3十
    红细胞凝集成数块血清尚清晰
    2十
    红细胞凝块分散成许块见游离红细胞
    1十
    肉眼见颗粒周围较游离红细胞

    镜见数红细胞凝集起周围游离红细胞
    MF
    混合凝集外观(mixed field)指镜见少数红细胞凝集极数红细胞呈分散分布

    表示阴性镜未见凝集红细胞均匀分布
    2.玻片法
    (1)取清洁玻片1张(白瓷板1块)蜡笔划成方格标明抗A抗B抗A十B分滴滴加抗A抗B抗A十B分型血清 l滴标明方格加受检者2%红细胞悬液1滴混
    (2)取洁净玻片张(白瓷板1块)蜡笔划成方格标明A细胞B细胞O细胞滴加受检者血清1滴分滴滴加ABO型试剂红细胞悬液1滴
    (3)玻片(白瓷板)断轻轻转动血清细胞充分混匀连续约15min肉眼观察凝集(溶血)反应玻片作试验时低倍镜观察结果
    [结果判定]
    ABO血型正反定型结果
    分型血清+受检者红细胞
    受检者血型
    受检者血清+试剂红细胞
    抗A
    抗B
    抗A十B
    A细胞
    B细胞
    O细胞




    A






    B






    O






    AB



    注:十凝集─凝集
    [附注]
    1.分型血清质量性符合求毕应放置冰箱保存免细菌污染
    2.试剂红细胞3健康者型新鲜红细胞混生理盐水洗涤1次存血清中抗体溶性抗原
    3.试滴玻片必须清洁干燥防止溶血
    4.操作方法应规定般应先加血清然加红细胞悬液便容易核实否漏加血清
    5.理IgM抗A抗B相应红细胞反应温度4℃强防止冷凝集现象干扰般室温(20—24℃)进行试验37℃反应减弱
    6.离心时间宜长短速度宜快慢防假阳性假阴性结果
    7.观察时应注意红细胞呈特异性凝集继发性凝固缗钱状排列区
    8.判断结果应仔细核记录避免笔误
    [正反定型结果致原]
    技术性问题红细胞血清身问题常见者种:
    1 分型血清效价太低亲力强抗—A血清效价高A亚型误定O型AB型误定B型
    2.红细胞悬液浓淡抗原抗体例适反应明显误判阴性反应
    3.受检者红细胞抗原位点少(亚型)抗原性减弱(见白血病恶性肿瘤:类BcisAB等
    4.受检者血清中蛋白紊乱(高球蛋白血症)实验时温度高常引起红细胞呈缗钱状排列
    5.受检者血清中缺乏应抗A抗—B抗体丙种球蛋白缺乏症
    6.种原引起红细胞溶解误判凝集部分溶血时溶性血型物质中相应抗体
    7.细菌污染遗传素引起凝集全凝集正反定型符原
    8.血清中意外抗体身抗—I常引起干扰
    9.老年血清中抗体水幅度降正反定型结果致解决办法发现ABO正反定型结果致先重复作试验1次严格执行操作规程质量合格试剂细心观察解释试验结果解决明显问题疑难问题月必须进步研究
    [检查步骤]
    1.受检者采取l份新鲜血液标样纠正污染搞错样造成符合
    2.红细胞洗涤数次配成5%盐水细胞悬液抗—A抗—B抗—Al抗—A十B抗H做试验信息
    3.受检红细胞作直接抗球蛋白试验结果呈阳性表示红细胞已抗体致敏
    4.AlAzBO红细胞身红细胞检查受检血清果怀疑抗—IO型(ABO相合)脐血红细胞检查
    5.果试验结果未见凝集应细胞血清试验少室温4℃放置30min显微镜检查核实
    6.疑A抗原B抗原减弱受检红细胞抗—A抗—B血清作吸收放散试验受检者唾液作ABH血型物质测定者80%HAB分泌型
    7.试验结果红细胞呈绢钱状排列加等渗盐水l滴混绢钱现象消失应注意应先加盐水l滴受检者血清中红细胞作试验免血清中抗体稀释
    8.受检者A型血疑类B抗原时列方法进行鉴:
    (1)观察细胞抗—A抗—B凝集强度抗—A反应抗—B反应强种区玻片法作试验更明显
    (2)受检者红细胞身血清作试验血清中抗—B凝集身红细胞类B抗原
    (3)检查唾液中否AB物质果分泌型检出A物质B物质
    (4)核患者诊断类B抗原形成结肠癌直肠癌革兰阴性杆菌感染关
    9.发现凝集现象应考虑遗传产生Cad抗原活性细菌酶激活T丁K受体产生机制太明丁n受体引起凝集红细胞具特点:
    (1)许家兔血清凝集
    (2)数成年血清凝集相应种抗体
    (3)脐带血清凝集
    (4)通常身血清凝集
    A5尿常规
    (1)尿液标处理
    [收集]
    1.应留取新鲜尿清晨第次尿宜较浓缩条件恒定便急诊患者时留取
    2.清洁盖容器(次性容器)
    3.容器应贴检验条码
    4.尿标应避免血白带精液粪便等混入外应注意避免烟灰糖纸等异物混入
    5.标留取应时送验免细菌繁殖细胞溶解等
    6.尿胆原等化学物质光分解氧化减弱
    [防腐保存]
    1.冷藏:防腐剂检验目定般放4℃冰箱保存6h
    2.甲醛:型细胞防腐400g甲醛0.5ml/100ml尿加入甲醛具原性适尿糖等化学成分检查
    3.甲苯(二甲苯):尿糖尿蛋白防腐甲苯0.5ml/100m1尿加入
    4.麝香草酚:检查尿中化学成分细菌防腐剂100ml加入<0.18
    [标处理]


    收门诊标核检验项目倒入普通长试液面距中约1cm



    收病房标核检验项目倒入普通长试约10ml液面距中约1cm放UF100专试架
    [检验处理]
    标检验必须消毒处理排放入水道盛尿容器试等须30—50g漂白粉澄清液10gL次氯酸钠液中浸泡2h5g/L氧乙酸浸泡30—60min清水洗干净
    (2)常规检查
    ()尿 量
    气候出汗量饮水量等异般健康成约1.0—1.5L/24h1m1/(hkg体重)k8体重计算尿量较成3—4倍
    (二)颜 色
    根尿颜色进行报告:淡黄色深黄色褐黄色红色乳白色深红浓茶红茶色乳白色
    (三)透明度
    分透明微浑浑浊明显浑浊乳糜状等
    (3)生化检查
    [仪器试剂]
    仪器 盈东URISCAN
    试剂 盈东尿十联试纸
    [操作]

    试纸条全部浸没尿液中约35秒取出放盈东URISCAN
    试纸条架测定
    (4)尿沉渣检查
    1)非染色尿沉渣镜检(门诊)
    1.取刻度离心倒入混合新鲜尿液10ml1500r/min离心5min
    2.离心停止取出离心弃层清液留02m1沉渣轻摇离心尿沉渣形成分充分混匀
    3.取尿沉渣0.02m1滴载玻片18mm×18mm盖玻片覆盖
    4结果判断
    尿沉渣镜检观察10×10镜头观察中形成分全貌型10×40镜头观察鉴定细胞成分计算数量应观察10视野见低高值记录结果型低倍镜鉴定计数数量应低倍镜观察20视野算出视野均值记录结果
    2)UF100尿沉渣分析(病房)
    尿生化检查完成立试架放UF100进架仪进行尿沉渣分析果结果发现情况者应手工镜检(镜检条件)
    3)特殊规定
    检验尿常规时工作员进修实志发现情况者显微镜进行复检登记备查
    1未 UF100尿沉渣分析时样必须做镜检
    2尿常规发现尿干化学尿沉渣结果发生偏差
    3尿UF100正常尿蛋白阳性尿NIT阳性时
    4尿干化学尿UF100均正常病肾科泌尿科时
    5床指定必须镜检
    (5)床意义
    1)颜 色
    正常尿液含尿色素呈淡黄色尿液浓缩时颜色呈深黄色受某食物药物影响病理性尿色呈褐黄色红色乳白色等均应报告尿色深红浓茶样见胆红素尿红茶色见血尿血红蛋白尿乳白色乳糜尿脓尿
    2)尿量
    增见:
    1.生理性:饮水饮浓茶咖啡酒精类精神紧张等
    2.病理性:常见糖尿病尿崩症慢性肾炎神性尿等
    减少见:
    1.生理性:饮水少出汗等
    2.病理性:常见休克脱水严重烧伤急慢性肾炎心功全肝硬变腹水等流行性出血热少尿期尿毒症急慢性肾功衰竭等
    3)非染色尿沉渣镜检
    (1).尿白细胞增加表示泌尿系统化脓性炎症红细胞增加常见肾球肾炎泌尿系结石结核恶性肿瘤
    (2).透明型偶见正常清晨浓缩尿中轻度暂时性肾循环功改变时尿少量透明型肾实质性病变肾球肾炎时见较颗粒型
    (3).红细胞型出现常见急性肾球肾炎等颗粒型出现提示肾单位淤滞现象脂肪型出现见慢性肾炎肾病型类脂性肾病
    (4).慢性肾功全时尿出现肾衰竭型提示预良
    (5).蜡样型出现提示肾脏长期严重病变见慢性肾球肾炎晚期肾淀粉样变时A6时尿沉渣计数
    [标收集]
    患者先排尿弃准确收集3h尿液清洁干燥容器送检(标留取时间5:308:30)
    [操作]
    手工法
    准确测量3h尿量充分混合取混匀尿液10m1置刻度离心中1500r/min离心5min吸吸弃层尿液9m1留 lm1充分混匀吸取混匀尿液1滴注血细胞计数板细胞数10方格型计数20方格
    仪器法(UF100操作)
    准确测量3h尿量充分混合取混匀尿液10m1倒入UF100专试直接机测定读出定量尿液细胞数100031时细胞数
    [计算]


      
    1000

    3时尿总量ml数
    1时细胞数=
    10方格细胞总数
    ×
    ──
    ×
    ─────────



    10

    3


    20方格型总数

    1000 

    3时尿总量ml数
    1时型数=
    ─────────
    ×
    ──
    ×
    ────────

    2

    10

    3
    式中:1000μl换算成m1数10尿液浓缩倍数
    [参考值]
    红细胞
    男性<3万/h
    女性<4万/h
    白细胞
    男性<7万/h
    女性<14万/h

    <3400/h

    [附注]
    1.尿液应新鲜检查pH应6碱性尿血细胞型易溶解
    2.检尿液重1.0261.016低渗尿细胞易破坏
    3.尿中含量磷酸盐时应加入少量稀醋酸液溶解切勿加酸免红细胞型溶解含量尿酸盐时应加温溶解便观察
    [床意义]
    1.急性肾炎患者红细胞增加
    2.肾盂肾炎患者白细胞明显增加
    A7尿乳糜定性检查
    脂肪尿指混脂肪尿液乳糜尿指乳糜微粒蛋白质混合致呈乳化状态浑浊尿液
    [原理]
    脂肪溶解乙醚中脂肪滴通染色识
    [试剂]
    1.乙醚(AR)
    2.苏丹m醋酸乙醇染色液:5%乙醇10m1冰醋酸90m1苏丹m粉末药匙先乙醇冰醋酸混合倾入苏丹m粉末
    充分溶解
    3.猩红染色液:先配70%乙醇丙酮1:1溶液猩红加入饱止
    [操作]
    1.取尿510m1加乙醚2—3m1混合振摇脂肪溶乙醚静置数分钟2000r/min离心5min
    2.吸取乙醚尿液界面层涂片加苏丹m醋酸乙醇染色液猩红染色液1滴
    3.镜检观察否红色脂肪滴
    [结果判断]
    1.浑浊尿液加乙醚澄清脂肪乳糜尿
    2.镜检见红色脂肪滴
    [附注]
    1.尿液中加少量饱氢氧化钠加乙醚助澄清
    2.分离乙醚层隔水蒸干留油状沉淀加苏丹m镜检证实脂肪滴
    [床意义]
    1.正常阴性
    2.丝虫原阻塞淋巴尿路淋巴破裂形成乳糜尿丝虫病患者乳糜尿沉渣中常见红细胞找微丝蝴
    A8便常规
    (1)标采集
    1.采集粪便标方法检查目差般检验留取新鲜指头(约5g)放入干燥清洁吸水性盖容器送检标容器层涂腊硬纸盒便检查焚毁血吸虫毛蝴孵化留全量新鲜便(少30g)细菌检查粪便标应收集灭菌封口容器勿混入消毒剂化学药品
    2.检查蛲虫卵需软玻璃纸拭子清晨排便前肛门四周拭取标棉拭子拭取均须立镜检
    3.检查阿米巴滋养体应排便立检查冬季需采取保温措施迅速送检
    4.应该采取尿壶便盆中粪便标标中混入尿液柔弱原虫致死白明胶膜法检查粪便中胰蛋白酶活性时尿液中存溶解白明胶物质导致检查结果错误增高粪便标中混入植物泥土污水等腐生性原虫真菌抱子植物种子花粉易混淆实验结果
    5.盛粪便标容器必须盖明显标记粪便标应选择中脓血粘液等病理成分病理成分部位取材采取标应时完成检查否9H消化酶等影响粪便中细胞成分破坏分解
    6.检查胆石胰石寄生虫体虫卵计数应收集24h粪便送验
    7.隐血试验应嘱患者收集标前3日禁食动物性食物连续检查3天选取外表层粪便收集标须迅速进行检查免长时间放置隐血反应敏感度降低
    8.粪胆原定量检查应收集二天粪便混合称量中取出约20g送验查胆汁成分粪便标应室温中长时间放置免阳性率减低
    9.脂肪定量检查时应先食定量脂肪食天进食脂肪50—1508连续6天第三天起收集72h粪便定时口服色素(刚果红)作留取粪便指示剂收集粪便混合称量中取出608左右送检简易法正常膳食情况收集24h全部粪便混合称量中取出约60g送检测脂肪含量
    10.细菌检验标应全部菌操作收集
    (2)常规检验
    1)颜 色
    根观察见报告黄色褐色土灰色绿色红色柏油样等
    正常粪便粪胆素呈棕黄色饮食药物病理原影响改变粪便颜色灰白色见钡餐服硅酸铝阻塞性黄疽胆汁减少缺乏绿色见食含叶绿素蔬菜含胆绿素时红色见消化道出血食西红柿西瓜等柏油样便见消化道出血等酱色常见阿米巴痢疾食量咖啡巧克力等米泔水样见霍乱
    2)性 状
    报告软硬糊状泡沫样稀汁样血水样血样粘液血样粘液脓样消化食物等正常时形软便
    1.球形硬便:便秘时见
    2.粘液稀便:见肠壁受刺激发炎时肠炎痢疾急性血吸虫病等
    3.粘液脓性血便:见细菌痢疾
    4.酱色粘液(带脓)便:见阿米巴痢疾
    5.稀汁样便见急性肠胃炎量时见伪膜性肠炎隐孢子虫感染
    6.米泔样便量肠粘膜脱落见霍乱副霍乱等
    7.扁带状便:直肠肛门狭窄致
    3) 寄生虫虫体
    蛔虫蛲虫绦虫节片等较虫体肉眼分辨钩虫虫体常需粪便洗筛方服驱虫剂排便时应检查虫体驱绦虫应仔细寻找虫头
    4)直接涂片镜检
    1.洁净玻片加等渗盐水1—2滴选择粪便正常部分挑取部位粪便做直接涂片检查
    2.取玻片制成涂片应覆盖片涂片厚度透印刷物字迹准
    3.涂片中发现疑似包囊该涂片加1滴碘液高倍仔细鉴决定时取全量粪便浓缩法检查
    4.虫卵报告方式:未找者注明未找虫卵找种报告种找种报告种该虫卵面注明数量干低倍视野计算
    5.应注意植物纤维细胞寄生虫体细胞相鉴应注意肌纤维结缔组织弹力纤维淀粉颗粒脂肪滴球等量出现提示消化良胰腺外分泌功全
    6.细胞中应该注意红细胞白细胞嗜酸性粒细胞(直接涂片干瑞氏染色)皮细胞巨噬细胞等
    7.夏科—雷登(Charcot—Leyden)结晶:色浅黄色两端尖透明具折光性菱形结晶常见肠道溃疡尤阿米巴感染粪便中易检出敏性腹泻钩虫病患者粪便常见
    8.细菌: 占粪便净重l/3(4000亿/g干粪)正常菌群肠杆菌肠球菌占80%路菌(产气杆菌变形杆菌绿脓杆菌等)超10%芽胞茵(梭状菌)酵母菌常住菌总量超10%正常菌群消失例失调量应抗生素致涂片染色找细菌外应采培养基培养鉴定
    A9虫卵包囊浓缩检查
    (1)漂浮法
    法适钩虫卵等线虫类虫卵
    操作
    取拇指(蚕豆)粪便1块放号青霉素瓶酒杯先加入少量饱盐水(粗食盐400g加水1000m1应成饱液煮沸冷取清液)玻棒粪便充分混合加入饱盐水瓶口硫酸镁浮聚液硫酸镁1858食盐2908溶1L水中重1230洁净载玻片覆盖瓶口静置3040min执载玻片提翻转镜检
    (2)清水沉淀法
    1.取粪便208左右置搪瓷杯中加水少许竹签捣碎成糊状
    2.16孔/cm40孔/寸铁筛纱布滤粗糙粪质滤入三角烧瓶加清水约500m1静置2030min心倾面3/4液体
    3.加清水500m1混匀静置30min心倾面4/5液体
    4.加清水500m1静置30min倾面水留底部沉淀混合吸取沉淀镜检
    (3)原虫包囊碘液染色法
    染剂D’Antoni氏碘液:取碘化钾1.Og溶100m1蒸馏水中加入碘1.58溶解
    操作
    1.生理盐水涂布粪便载玻片滴加碘液1—2滴混匀覆盖片
    2.病理粪便查滋养体时应15min检查完毕
    3.包裹染色包囊壁包涵体细胞核均清楚见
    (4)血吸虫卵沉淀孵化法
    操作
    1.取新鲜标约308放入广口容器加入少量清水长柄搅拌器粪调匀成糊状
    2.通金属纱网(40孔/寸)两层纱布滤粪渣滤液放入500m1尖底量杯三角烧瓶
    3.加清水容器口静置2030min倾层清液沉渣移入三角烧瓶加清水接瓶口静置15min
    4.操作3次层液体澄清勿超2h
    5.动换水装置心洗液澄清沉淀
    6.放入25—30℃温箱温室中孵化4—6h观察作定方运动毛蚴
    7.次晨复查出具报告
    8.孵化阴性应吸取沉渣涂片注意寄生虫卵
    报告方式
    毛蚴沉孵阳性毛蚴沉孵阴性


    附注
    1.水中含氯含氨浓度较高者应水预先煮沸缸预先水储存氯水中加硫代硫酸钠(120kg水中加50g/L硫代硫酸钠6m1)水中氯氨
    2.农村河水者应防止水中杂虫混入换水应先煮沸冷
    3.水质浑浊先明矾澄清(100k8水约明矾38)
    4.毛蚴孵出时间温度密切关系高30℃仅需1—3h25—30℃4—6h25℃应夜观察室温高防止毛蚴逸出早108/I盐水换洗换水孵化时必须淡水含盐
    A10隐血试验
    消化道少量出血时红细胞消化分解破坏显微镜发现称隐血
    (1)免疫学检测法
    [原理]
    便隐血免疫步检验法高灵敏度夹心式酶联免疫测定法该法采抗血红蛋白单克隆抗体克隆抗体特异针粪便样品中血红蛋白试验受动物血红蛋白干扰试验前须禁食肉类
    [操作]
    取片洁净干燥载玻片滴加2—3滴蒸馏水取粪便许调成均匀混悬液取便隐血试纸条说明书操作试纸条反应端浸湿5min观察结果反应线(T)质控线(C)时呈蓝色色带阳性C线呈色阴性丁线C线均显色说明试验效

    [附注]
    1.敏感性特异性
    (1)敏感性:
    样品中血红蛋白浓度超0.2μg/m1阳性结果
    (2)特异性:
    便潜血免疫步检验法特异体血红蛋白检验样品中含干扰物实验结果会受影响:
    鸡血红蛋白 500μg/ml
    牛血红蛋白 500μg/m1
    马血红蛋白 500μg/ml
    猪血红蛋白 500μg/m1
    羊血红蛋白 500μg/m1
    兔血红蛋白 500μg/m1
    辣根氧化酶 200μg/m1
    2.试验局限性
    (1)法帮助医生早期发现胃肠道病变然家族性息肉直肠癌出血间断性出血出血粪便中分布均匀造成阴性结果
    (2)法正常检验时会阳性结果某种刺激胃肠道药物造成便潜血
    (3)检验法作筛选辅助诊断代胃镜直肠镜窥镜X光检查
    [床意义]
    1.消化道出血时(溃疡病恶性肿瘤肠结核伤寒钩虫病等)试验阳性
    2.消化道恶性肿瘤时粪便隐血持续阳性溃疡病时呈间断性阳性
    3.法作消化道恶性肿瘤普查初筛试验
    (2)试带法
    国外生产四甲基联苯胺显色基质隐血试验试带方便患者留标检测
    (3)邻甲联苯胺法
    [原理]
        血红蛋白中亚铁血红素类似氧化物酶活性催化氧化氢放出新生态氧受体邻甲苯胺氧化成邻甲偶氮苯显蓝色
    [试剂]
    1.10g/L邻甲联苯胺(otolidine)溶液:
    取邻甲联苯胺18溶冰醋酸水乙醇50m1混合液中置棕色瓶中保存4℃冰箱中8—12周变暗色应重新配制
    2.3%氧化氢液
    [操作]
    1.竹签挑取少量粪便涂消毒棉签白瓷板
    2.墒加0.15LL邻甲苯胺冰乙酸溶液2—3滴粪便
    3.滴加3%氧化氢2—3滴
    4.立观察结果2min显蓝色阳性
    [结果判断]
    阴性:加入试剂2min显色
    十加入试剂10s浅蓝色渐变蓝色
    2十:加入试剂初显浅蓝褐色逐渐呈明显蓝褐色
    3十:加入试剂立呈现蓝褐色
    4十:加入试剂立呈现蓝黑褐色
    [附注]
    1. O—tolidine[33’Dimethyl(11’biphenyl)—44’Diamine Cl4 Hl6 N2MW212.3]中文名称邻甲联苯胺称邻联甲苯胺O—toluidine(2Aminot01ueneC7H9NMWl072)中文名称邻甲苯胺血糖测定两者应予区
    2.粪便标必须时检查免灵敏度降低
    3.3%氧化氢必须效应进行阳性试验氧化氢滴血片产生泡沫滴加重铬酸钾硫酸液显褐色示效
    4.强调实验前三天禁食动物血肉肝脏富含叶绿素食物铁剂中药免假阳性反应齿龈出血鼻出血月血等均导致阳性反应
    5.具应加热处理(试玻片滴等)破坏污染氧化物酶
    A11脑脊液检验
    (1)标处理
    1.标送验必须时收标应立检验久置致细胞破坏影响细胞计数分类检查葡萄糖分解含量降低病原菌破坏溶解
    2.细胞计数应避免标凝固遇高蛋白标时EDTA盐抗凝
    (2)般性状检查
    观察颜色透明度记录水样透明白雾状浑浊微黄浑浊绿黄浑浊灰白浑浊等脓性标应立直接涂片进行革兰染色检查细菌应时接种培养基
    1)红色:
    标血性区蛛网膜腔出血穿刺性损伤应注意:
    (1)血性脑脊液试离心沉淀(1500r/min)层液体呈黄色隐血试验阳性蛛网膜腔出血出血时间已超4h层液体澄清色红细胞均沉底穿刺损伤病变致新鲜出血
    (2)红细胞皱缩仅见陈旧性出血穿刺外伤引起出血时见脑脊液渗透压较血浆高致
    2)黄色:
    陈旧性出血外脑脊髓肿瘤致脑脊液滞留时呈黄色黄疸患者脑脊液呈黄色前者呈黄色透明胶冻状
    3)米汤样:
    白(脓)细胞增见种化脓性细菌引起脑膜炎
    4)绿色:
    见绿脓杆菌肺炎链球菌甲型链球菌引起脑膜炎
    5)褐黑色:
    见侵犯脑膜中枢神系统黑色素肉瘤
    (3)潘氏(Pandy)球蛋白定性试验
    [原理]
    脑脊液中球蛋白苯酚结合形成溶性蛋白盐沉产生白色浑浊沉淀
    [试剂]
    5%苯酚溶液:
    取纯苯酚25m1加蒸馏水500m1力振摇置37℃温箱1—2天完全溶解置棕色瓶保存
    [操作]
    取试剂2—3m1置试毛细滴滴入脑脊液l2滴衬黑背景立观察结果
    [结果判断]
    阴性:清晰透明显雾状
    极弱阳性(土):微呈白雾状黑色背景
    弱阳性(十):灰白色云雾状
    阳性(2十):白色浑浊
    强阳性(3十):白色浓絮状沉淀
    强阳性(4十):白色凝块
    [床意义]
    正常时阴性脑组织脑膜疾患时常呈阳性反应化脓性脑膜炎结核性脑膜炎梅毒性中枢神系统疾病脊髓灰白质炎流行性脑炎等脑出血时呈强阳性反应外伤性血液混入脑脊液中呈阳性反应
    (4)细胞计数
    1)细胞总数
    [器材试剂]
    1.细胞计数板
    2.红细胞稀释液(配法血液红细胞稀释液)
    [操作]
    1.澄清脑脊液混匀滴直接滴入计数池计数10方格红白细胞数总μl细胞数换算成升脑脊液中细胞数细胞较计数格细胞×10μl脑脊液中细
    胞总数升表示10
    2.浑浊带血脑脊液血红蛋白吸吸取混匀脑脊液20μl加入含红细胞稀释液0.38m1试混匀滴入计数池低倍镜计数4方格中细胞总数50μl脑脊液细胞总数
    2)白细胞数
    1.非血性标:
    试放入冰乙酸1—2滴转动试壁沾冰乙酸倾然滴加混匀脑脊液3—4滴数分钟混匀充入计数池细胞总数操作中红白细胞计数法计数
    2.血性标:
    混匀脑脊液1%冰乙酸溶液稀释进行计数剔出血白细胞数式进行校正
    μl脑脊液白细胞校正数=
    μl脑脊液白细胞未校正数


    μl脑脊液红细胞数×μl血液白细胞


    ──────────────────────


    μl血液红细胞
    [参考值]
    正常脑脊液中红细胞仅少量白细胞
    成:(0—8)×106L
    童:(015)×106L
    淋巴细胞单核细胞两者约7:3偶见皮细胞
    [附注]
    1.计数应时进行免脑脊液凝固结果准确
    2.细胞计数时应注意新型隐球菌白细胞区前者溶乙酸加优质墨汁见着色荚膜
    3.计数池应75%乙醇消毒60min忌苯酚消毒损计数池刻度
    3)细胞分类
    <1>.直接分类法:
    白细胞计数低倍镜换高倍镜直接高倍镜根细胞核形态分计数单核细胞(包括淋巴细胞单核细胞)核细胞应数100白细胞百分率表示白细胞少100应直接写出单核核细胞具体数字
    <2>.染色分类法:
    直接分类易区分细胞时脑脊液离心沉淀取沉淀物2滴加正常血清l滴推片制成均匀薄膜置室温37℃温箱干进行瑞氏染色油镜分类
    见分类细胞应行描述报告脑膜白血病肿瘤时
    4)床意义
    1.中枢神系统病变脑脊液细胞数增增程度细胞种类病变性质关
    2.中枢神系统病毒感染结核性霉菌性脑膜炎时细胞数中度增加常淋巴细胞
    3.细菌感染时(化脓性脑膜炎)细胞数显著增加中性粒细胞
    4.脑寄生虫病时见较嗜酸性粒细胞
    5.脑室蛛网膜腔出血时脑脊液见数红细胞
    (5)细菌直接涂片检查
    床怀疑流行性脑脊髓膜炎化脓性脑脊髓膜炎时应作细菌学涂片检查操作:
    1.脑脊液立离心沉淀取沉淀物涂片2张
    2.涂片应室温中置37℃温箱中干燥切勿火焰烘烤
    3.火焰固定张涂片亚甲蓝染色30s张作革兰染色
    4.注意细胞外细菌形态报告时应予描述
    (6)真菌检查新形隐球菌检查
    [操作]
    1.取脑脊液2000r/min离心10min沉淀物作涂片加阿利新兰染液l滴混合加盖玻片检查
    2.先低倍镜检查发现新形隐球菌部结构清晰高倍镜仔细观察结构新形隐球菌直径5—20μm见明显厚膜出芽球形孢子
    [报告方式]
    涂片找隐球菌属
    A12浆膜腔积液检查
    (1)标收集
    1.穿刺取标防止细胞变性出现凝块细菌破坏溶解等送检检查必须时
    2.防止凝固加入1008/L乙二胺四乙酸二钠(EDTA钠盐)抗凝0.1m1抗凝6m1浆膜腔积液时完成细胞涂片检查
    (2)理学检查
    1.记录标送检量颜色透明度凝固物质沉淀物浆液性粘液性黄色透明脓样浑浊乳糜样血样等报告
    2.测重前标应充分混匀方法尿重测定相量少时微量法测定
    (3)浆膜粘蛋白定性试验(Rivalta反应)
    原理
    渗出液中含量浆膜粘蛋白酸性条件产生白色雾状沉淀
    操作
    取100m1量筒加蒸馏水100m1滴入冰醋酸0.1m(pH3—5)充分混匀静止数分钟穿刺液量筒液面逐滴轻轻滴黑色背景观察白色雾状沉淀发生降速度等
    结果判断
    阴性:清晰显雾状
    (土)渐呈白雾状
    (十)加呈白雾状
    (2十)白薄云状
    (3十)白浓云状
    附注
    滴穿刺液见浓厚白色云雾状沉淀快降形成较长沉淀物Rivalta反应阳性产生白色浑浊明显沉缓慢较快消失者阴性反应
    床意义
    1.渗出液中含较浆膜粘蛋白呈Rivalta阳性漏出液阴性漏出液长期吸收蛋白浓缩呈阳性反应
    2.炎症性疾患(化脓性结核性等)蛋白含量408L3恶性肿瘤2040g/L肝静脉血栓形成综合征40—60g/L淤血性心功全肾病变患者胸腹水中蛋白浓度低l108/L肝硬变腹水5—20g
    (4)细胞学检查
    ()细胞总数核细胞计数
    计数方法基脑脊液相漏出液中核细胞数量常100×106L渗出液中核细胞数量较常500×106L
    (二)细胞分类
    穿刺液应抽出立离心沉淀物涂片瑞氏染色法进行分类必时制备稍厚涂片干燥前放置乙醚乙醇等量混合液中固定30min苏木素—伊红(HE)巴氏法染色查找癌细胞
    (三)床意义
    1.穿刺液中形核白细胞提示化脓性炎症早期结核性积液结核性渗出液吸收期见嗜酸性粒细胞增
    2.淋巴细胞增提示慢性炎症见结核性渗出液病毒感染系统性红斑狼疮发性浆膜炎等
    2. 间皮细胞组织细胞增提示浆膜皮脱落旺盛见淤血恶性肿瘤等

    五渗出液漏出液鉴

    渗出液漏出液鉴
    鉴点
    漏 出 液
    渗 出 液

    非炎症致
    炎症肿瘤物理化学刺激致
    外观
    淡黄浆液性
    定黄色脓性血性乳糜性
    透明度
    透明微混
    浑浊

    低1.018
    高1.018
    凝固性


    粘蛋白定性试验
    阴性
    阳性
    蛋白总量
    常25gL
    常30gL
    蛋白总量/血清总蛋白
    <0.5
    >0.5
    LD总活性/血清LD总活性
    <0.6
    >0.6
    葡萄糖定量
    血糖相
    常低血糖水
    蛋白电泳
    白蛋白白/球高血浆
    电泳谱血浆相似
    核细胞计数
    常100×106L
    常500×106L
    细菌检查
    细菌发现
    找病原菌

    A13精液检查
    (1)标收集
    清洁干燥瓶收集精液宜采避孕套精液
    (2)检查容
    记录精液量颜色透明度粘稠度否液化显微镜检查包括精子计数活动力活动率形态
    1)精子活动率
    操作
    取新鲜标混匀温玻片高倍镜观察100精计数活动精活动精子例计算精子活动百分率
    精子活动率= ×100%
    参考值
    排精30—60min应70%精子活动精子
    附注
    室温低10℃时应标先放入37℃温育5—10min镜检
    2)精子活力取述新鲜湿片标观察精活动力列5级报告:
    0级:活动力加温活动
    I级:良精子摆动抖动运动迟缓
    Ⅱ级:较精子活动方明确呈直线运动活泼
    Ⅲ级:中速运动
    Ⅳ级:良快速直线运动快超越视野运动活泼
    3)精子计数
    试剂
    精子稀释液:碳酸氢钠5840%甲醛溶液1ml蒸馏水100m1完全溶解滤
    操作
    1.试加精子稀释液0.38m1吸液化精液20μl加入稀释液摇匀
    2.充分摇匀滴入血细胞计数池静置1—2min精子沉精子头部作基准进行计数
    3.精子数少计数2方格精子数数总数10万毫升精液精子数换算成×109L报告
    4.精子数计数5中方格精子数加6零ml精液精子数换算成×109L报告
    参考值
    正常男性(10—130)×109L
    附注
    1.收集精液前避免性生活3—7天收集精液标应时检验冬季应注意保温
    2.出现次异常结果应隔周复查反复查2—3次方出较正确结果
    3.低倍镜高倍镜检查均精应精液离心沉淀涂片检查两次均精报告精子
    4)精子形态观察
    革兰瑞氏染色油镜观察
    异常精子:头部尖细外缘齐双头等中部消失分枝肿胀尾部呈双尾卷曲度短消失(缺尾)
    参考值
    正常精液中异常精子应少20%超20%正常
    5)细胞
    正常精液中:红白细胞<5/高倍视野
    6)pH
    正常7.2—8.0(均7.8)
    7)成分
    精液中结晶体卵磷脂体淀粉样体脂滴脱落皮细胞等
    (3)床意义
    1.正常精液呈灰白色久未排精者呈淡黄色离体30min完全液化根精液检查结果床常诊断男子育症观察输精结扎术效果
    2.正常精子活动力般Ⅲ级0级 I级精子>40%成男性育原
    3.精索静脉曲张症患者精液中常出现形态正常精子
    4.血液中毒性代谢产物接触铅等污染物应剂量放射线细胞毒药物等精子形态异常
    A14前列腺液检查
    (1)标收集
    床医师作前列腺摩术采集标清洁玻片立送检
    (2)检查容
    记录液体颜色否混血液粘稠度(脓块)湿片镜检高倍镜观察白细胞红细胞卵磷脂体次皮细胞精子淀粉样体等革兰染色检查细菌
    (3)报告方式
    1.卵磷脂体:报告高倍视野中分布数量
    2.白细胞红细胞:报告方式尿液
    3.找精皮细胞应报告
    (4)参考值
    正常卵磷脂体量满视野白细胞<10/HP红细胞<5/HP
    (5)床意义
    前列腺炎时白细胞增找细菌卵磷脂体常减少前列腺癌时血性液体镜检见量红细胞见癌细胞
    A15阴道分泌物检查
    阴道分泌物女性生殖系统分泌液体中阴道分泌液体
    (1)PH值
    收标(干棉拭子)先PH试纸测PH值记录
    (2)清洁度
    取阴道分泌物生理盐水涂片高倍镜检查根含白细胞(脓细胞)皮细胞杆菌球菌少分成I—Ⅳ度判定结果见表
    阴道涂片清洁度判定表
    清洁度
    杆菌
    球菌
    皮细胞
    脓细胞白细胞
    I


    满视野
    05/高倍视野



    1/2视野
    5—15/高倍视野




    15—30/高倍视野




    30/高倍视野
    床意义
    清洁度 Ⅰ—Ⅱ度视正常ⅢⅣ度量异常数阴道炎发现阴道霉菌阴道滴虫等病原体单纯清洁度增高见滴虫霉菌者见非特异性阴道炎
    (3)滴虫检查
    阴道滴虫呈梨形白细胞2倍顶端鞭毛4根25—42℃温度活动寒冷天气标采取保温措施滴虫活动适pH值5.5—6.0
    (4)霉菌检查
    湿片高倍镜见卵圆形抱革兰染色油镜见革兰阳性孢子假菌丝出芽细胞相连接成链状分枝状找阴道霉菌霉菌性阴道炎诊断
    (5)线索细胞检查
    阴道鳞状皮细胞黏附数加德纳菌致生理盐水涂片见细胞边缘呈锯齿状细胞已溶解附着量加德纳菌厌氧菌表面毛糙斑点量细颗粒
    A16胃液检查
    (1)基础胃酸分泌量胃酸分泌量测定
    1)标收集:
    先晨间空腹残余胃液抽空弃连续抽取l时胃液放入瓶作标计胃液量酸度计准确测定氢离子浓度(pH纸测定做胃酸浓度滴定)
    次皮注射五肽胃泌素(Pentagas—trin)6μg/kg注15min收集份标连续抽4次分法测胃液量胃酸氢离子浓度
    2)胃酸浓度滴定:
    取澄清胃液5m1加0.02%苯酚磺酞指示剂(苯酚磺酞50mg加0.01m01氢氧化钠14.1m1研磨溶解加蒸馏水250m1)2滴呈黄色表示胃酸存0.1mo/L氢氧化钠溶液滴粉红色止(终点pH7.0)耗氢氧化钠毫升数20胃酸浓度mm01
    3)计算方法
    (1)基础胃酸分泌量(BAO)注射胃泌素前1h胃液总量胃酸浓度(mm01/L)
    (2)胃酸分泌量(MAO):取注射五肽胃泌素4次标分记录胃液量胃酸浓度胃酸浓度:_MAOmmol/h
    4)参考值
    BAO:25mm0l/h
    MAO:1520mmol/h
    (2)pH值测定
    先pH试纸测定pH值>3者pH计测定氢离子浓度
    参考值
    正常时pH0.81.8pH3.57.0时酸度低3pH>7.0真性胃酸缺乏
    床意义
    1.胃酸增高见十二指肠球部溃疡胃泌素瘤幽门梗阻慢性胆囊炎等
    2.胃酸减低见胃癌萎缩性胃炎继发性缺铁性贫血口腔化脓感染胃扩张甲状腺功亢进少数正常
    3.胃酸缺乏指注射五肽胃泌素盐酸分泌常见胃癌恶性贫血慢性萎缩性胃炎
    4.影响胃液酸度种原患者精神状态神反射烟酒嗜便秘采集方法等解释实验结果应综合分析
    (3)常规镜检
    镜检胃液报告镜检结果
    A17白带检查


    B1血氨测定
    [测定步骤]
    ① 开盖放进4节电池ON键
    ② 定标FACT键CHESTART键
    ③ 180秒黑色条放进定标测试面均关盖
    ④ 20秒显示数值91~111间状态佳
    ⑤ 玻璃细套塑料头吸血清纸擦净外余血清
    ⑥ 样注入试纸条时START键开始计时清试纸条型号(F4)FACT键调需型号
    ⑦ 180秒放入糟盖20秒读数测值单位ugdl
    ⑧ OFF键电池取出
    [参考范围]
    140ugdl
    B217—KS测定
    [试剂]
    试剂名

    成份贮存


    Reagent 1

    KOH(1molL 56)

    550ml
    Reagent 2

    96乙醇

    165ml
    Reagent 3

    显色剂(13二硝基酚)2~8℃保存

    40ml
    Reagent 4

    KOH(6molL268)

    100ml
    DHEA标准液

    28℃贮存

    2ml
    滤柱



    50支


    带盖玻璃试

    54支
    25HCL





    乙醚




    [试剂准备]
    乙醚 试验4ml分离漏斗中放入200ml 乙醚50ml蒸馏水加盖振摇避免压力高应开盖次然水
    [标收集准备]
    需24h尿液加25乙酸延长稳定性(样保持PH5)充分混匀尿液记录尿量留取100ml备分析
    [分析步骤]
    A第次测试前仔细阅读手册
    B开始第3步骤时17OH17KS时行操作
    C次测定超20Tests
    D第4步骤实验中断标需2~8℃夜
    E标避免光线直
    F保持较实验次试验中应带质控
    [操作步骤]
    1 水解
    11 支试标记实验号质控外加试剂空白标准
    12 加5ml标质控
    13 空白标准加5ml蒸馏水
    14 加10ml 25HCl混匀
    15 沸水浴10分钟10分钟冷室温
    16 测定水解沉淀出现应离心
    2 滤柱准备
    21 滤柱标记测定质控空白标准
    22 盖加7ml蒸馏水加盖混匀树脂沉盖扭头柱流入废液溶器中
    3 柱吸附
    31 柱中加入水解标完全流洗出液
    32 柱加2×50ml Reagent 1 加第二次前须完全流柱头水滴洗出液
    4 洗涤
    41 柱放入标记收集中
    42 柱加3×10ml Reageut 2次须完全流柱
    43 充分混匀洗出液沉定物影响测定
    注意步骤中断2℃~8℃夜
    5 标准试剂空白
    51 标质控3标准空白准备根抽提试
    52 分吸取10ml洗出液相应抽提中
    53 标准中加102050ul DHEA标准溶液
    6 显色反应乙醚抽提
    61 中(标质控标准试剂空白) 05ml Reagent 315ml Reageut 4
    62 盖紧混匀
    63 35℃孵育30′(避光超35℃)
    64 冰冷水浴迅速冷室温
    65 开盖加40ml水洗乙醚立盖紧盖子
    66 混匀架振动抽提34′注意充分混匀重复性取决提抽效果乙醚层变粉红色(混匀2分钟)立乙醚层色
    67 层粉红色乙醚层含17KS
    测定 520nm波长色
    [计算]
    A20S×u (ug17ksml) Mg17ks24hA1000×35×24h尿量
    Umol17ks24h mg17ks24h×3467
    [参考范围]
    <8岁童

    03mg17ks24h

    (0104umol24h)


    720mg17ks24h

    (243693umol24h)


    1025mg17ks24h

    (347867umol24h)
     <1>水解


    U

    S

    B


    5ml尿

    5mlDwater

    5mlDwater
    25HCL

    10ml

    10ml

    10ml
    ───────────────────────
    沸水浴 10ˊ
    <2>滤柱准备:
    盖+7mlDwater加盖混匀盖头废液
    <3>吸附:


    U

    S

    B
    加入水解标





    √洗出液
    Reagent 12×50ml





    √ 洗出液
    <4>洗涤:(准备收集)


    U

    S

    B
    Reagent 2 3×10ml





    √ 收集洗出液
    ───────────────────────

    充分混合步中断 2℃8℃夜
    <5>标准空白:


    U

    S

    B
    洗出液

    1ml

    1ml

    1ml
    DHEA标准溶液



    20ul


    <6>显色反应:乙醚抽提


    U

    S

    B
    Reageut 3

    05ml

    05ml

    05ml
    Reageut 4

    15ml

    15ml

    15ml
    ───────────────────────


    35℃避光孵育30′




    ───────────────────────
    水洗乙醚

    4ml

    4ml

    4ml
    振动混匀34分钟乙醚层色波长520nm

    B317—OH测定
    [试剂]
    试剂名


    成份



    Reagent A


    NaBH4


    5g
    Reagent B


    24乙酸


    50ml
    Reagent C


    NaIO4


    20g
    Reagent D


    10molL30NaOH


    50ml
    Reagent 1


    1molL56KOH


    550ml
    Reagent 2


    96乙醇


    165ml
    Reagent 3


    显色剂:13二硝基苯


    40ml
    Reagent 4


    6molL337KOH


    100ml
    DHEA标准


    1mgml 35mmolL


    2ml
    滤柱





    50支
    提抽





    54支
    外试剂


    01N NaOH 乙醚



    [试剂准备]
    10 NaBH4溶液


    20gNaBH4+20ml 01N NaOH

    10 NaIO4溶液


    50gNaIO4+50ml Dwater

    水洗乙醚( 17KS)




    [标收集分析前准备]
    17KS
    [分析步骤]
    17KS
    [操作步骤]
    1 浓缩
    11 50ml100ml烧杯标记标质控标准空白
    12 吸5ml尿液质控烧杯中
    13 加5mlDwater标准空白杯中
    14 NaOHHCl调整标质控PH值70—80
    15 杯中加10ml新配10NaBH4混匀
    注意泡沫加1—2滴乙醚
    16 薄膜盖住烧杯黑暗中室温孵育2h夜
    17 杯中加05ml Reagent B 混匀
    18 黑暗中室温孵育15′
    2 氧化
    21 杯加4ml新配10NaIO4
    22 15ml 1N NaOH调整PH70混匀
    23 35℃避光孵育60′间应混匀数次
    24 杯加05ml Reagent D 35℃ 15′
    25 水浴冷离心 1500×g 2′—3′
    3 柱准备
    17—KS
    [测定]:
    17—KS
    [计算]
    A20S×U
    Mg17—KS24hA1000×35×24h尿量
    Umol7—KS24hmg17—KS24h×3467
    [参考范围]
    <1y童

    <1mg17OH24h

    (<35umol24h)
    <10y童

    <5mg17OH24h

    (<173umol24h)


    5—23mg 17OH24h

    (173797umol24h)


    3—5mg 17OH24h

    (104520umol24h)
    >70y

    3—12mg 17OH24h

    (104416umol24h)

    B4VMA
    试剂:
    Reagent B
    1M Tris
    75ml
    Reagent C
    02N醋酸钠洗液
    550ml
    Reagent 1
    02N醋酸钠微柱缓液
    550ml

    Reagent 2
    4M碳酸钾缓液
    30ml
    Reagent 3
    2瓶瓶04克NaIO4

    Reagent 4
    2瓶瓶25克Na2S2O5

    VMA标准
    1瓶

    树脂柱
    50支

    外试剂
    乙醇(分析纯)


    1N乙酸:571ml冰醋酸+Dwater1000ml

    试剂准备
    Reagent B C 1 2 提供
    NaIO4溶液 4Reaent 3+10ml Dwater 28℃ 稳定2周
    Na2S2O5溶液10 Reagent 4+25ml Dwater 28℃稳定2周
    VMA标准液1N乙酸5ml加VMA标准瓶中浓度12mg
    VMAml 28℃稳定4周20℃稳定3月
    注意
    收集标前3天病禁食香蕉香草巧克力咖啡茶呋喃嘧啶类药物包括25二羟基苯甲酸25二羟基苯乙酸
    收集干净容器加入15ml 20HCl(12ml 25HCl)作稳定剂
    重:调整标PH值15~35
    注意 尿液质控必须01N HCl溶解Dwater需加10ul6N HCl20 ml
    操作步骤
    A 第次操作分析前须完整仔细阅读操作手册
    B 试剂标达室温
    C 非常熟练前试验必须双份
    D 良实验操作次操作须携带质控
    操作程
    1 准备标准
    Tube 1standard So Oul(Omg VMAL) +20ml urine
    Tube 2standard S125ul(15mg VMAL)+20ml urine
    2 吸20ml标质控标记试中
    3 试剂B调PH约55~75(PH指示纸)接超PH75时会出现混浊加少许1N乙酸
    4 准备标准质控标滤柱摇动柱树脂完全悬浮树脂沉(避免气泡)帽滴头柱完全架流
    5 加标准质控标相应柱中完全流洗出液
    6 转移柱子相应试中(16×160mm)柱中加10ml Reagent
    1收集洗出液滤柱
    7 准备测定空白测定空白加20ml 洗出液
    8 加02ml Reagent 2中混匀3~5秒
    9 支测定加01ml Reagent 3支空白加02ml Reagent 4充分混匀
    10 37℃水浴30′
    11 未冷测定中直接加02ml Reagent 4空白中加01ml Reagent 3 充分混匀
    测定
    360nm波长Dwater空白测出吸光度380nm波长Dwater空白测出吸光度
    计算
    a
    △Eso(380)Eso(380)EBo(380)△Eso(360)Eso(360)EBo(360)

    △Es1(380)Es1(380)EB1(380)△Es1(360)Es1(360)EB1(360)

    △ Et(380)Et(380)EBt(380) △Et(360)Et(360)EBt(360)
    b
    Net Eso△Eso(360)△Eso(380)

    Net Es1△Es1(360) △Es1(380)

    Net Et△Et(360) △Et(380)
    c
    CorrEs1Nets1Netso
    d
    VMAt(mgL)15mgcorrEs1×NetEt
    e
    MgVMA24h mgVMAL×24h尿量
    正常范围
    mg VMA24h18 mg VMA24h
    VMA
    So Oul标准+20ml尿液

    S1 25ul标准+20ml尿液

    B试剂调整20ml尿液PH5575出现混加少许1N乙酸

    摇动柱完全悬浮脂降(气泡)帽滴头

    相应标加入柱中余液3ml Dwater 洗加入+10ml Reagent C
    柱中完全流洗出液

    移柱相应中+10ml Reagent 1收集洗出液柱

    均设定测定空白加20ml洗出液

    BT+02ml Reagent 2 混匀35秒


    T
    B
    Reagent 3
    01ml

    Reagent 4

    02ml

    充分混匀37℃水浴30分钟


    T
    B
    Reagent 3

    01ml
    Reagent 4
    02ml


    充分混匀360nm 380nm波长色

    B5Insulin Autoantibadies(IAA) 胰岛素身抗体
    (1)试剂准备:
    1.IAA—IgG酶标液:1瓶IAA—IgG酶标浓缩液(lml)+5ml稀释液配制效期30天
    2.IAA标稀释缓液:浓缩IAA标稀释液(50ml)+200ml蒸馏水2—8℃放置
    3.IAA洗液:浓缩洗液(20ml)+蒸馏水(480ml)2—8℃放置.
    4.血清标准备:25ul血清+25ml标稀释液(实际操作20ulsample+20mldelution)
    5.显色剂准备:前时配制显色剂片剂(l片)+6ml显色剂缓液放置空瓶中溶解60min效.
    (2)操作:
    1需取出包孔固定.分加入阴阳性质控已稀释标血清100UL(留取相应空白孔)封板留置2—8℃夜(12—16h)
    2取出反应板置室温纸巾拍干洗次加300ul IAA洗液重复3次轻拍干.
    3加l00UL IAA—IgG酶标液(包括空白孔)封板室温(25℃土1℃)放1h
    4准备显色荆(见标准备5)
    5时重复2步骤洗.
    6孔加显色剂l00ul(包括空白孔)操作—定节律间断
    7避光25℃士 l℃放置30min.
    8时加中止液50ul连续间段
    9色波长405nm
    (3)计算
    Cut0ff(N—B)×2.5+B
    B6Islet Cell Autoantibodies (ICA) 胰岛细胞身抗体
    (1)试剂准备:
    1ICA—IgG酶标液:1瓶ICA—IgG酶标浓缩液(1ml)+5ml稀释液配制效期30天
    2ICA标稀释缓液:浓缩ICA标稀释液(50ml)+200ml蒸馏水2—8℃放置.
    3ICA洗液:浓缩洗液(20ml)十蒸馏水(480ml).2—8℃放置.
    4血清标准备25ul血清十2.5ml标稀释液(实际操作20ulsample+20ml delution)
    6.显色荆准备:前时配制显色剂片剂(1片)+6ml显色剂缓液放置空瓶中溶解60min效
    二.操作
    1需取出包孔固定分加入阴阳性质控已稀释标血消100ul(留取相应空白孔)封板留置室温(26℃±1℃)lh.
    2取出反应板置室温纸巾拍干洗次加300ul ICA洗液重复3次轻拍干.
    3加100ul ICA—Ig6酶标液(包括空白孔)封板室温(25℃士1℃)放lh
    4准备显色剂(见标准备5)
    6时重复2步骤洗
    6况加显色剂100ul(包括空白孔)操作定节律间断
    7避光26℃士1℃放置30min
    8时加中止液60ul连续间段)
    9色波长405nm.
    (3)计算:
    Cut0ff=(N—B)×2.5+B
    B7脯氨酸肽酶测定(Prolidase Test Kit)
    脯氨酸肽酶(PLD)参胶原蛋白胞步降解酶富含(羟)脯氨酸末端氨基二肽水解富含肝细胞浆中床实验研究均证实血清PLD活性肝纤维化关时肝细胞炎症坏死时释放该酶反映肝损害程度.广泛类急慢性肝病诊断预观察.
    (1)试剂组成:
    1) 样品稀释液:7Oml
    2) 基质液:前加5ml稀释液溶解
    3) 终止液:100ml
    4) 标准脯氨酸溶液:3ml
    5) 显色液:100ml 1瓶前摇匀
    二操作方法:
    1)样品稀释:取0.1ml血清加05ml稀释液37℃水浴24h(稀释血清)
    2)活性测定(单位: ul)
    试剂
    空白
    标准
    测定

    稀释血清


    100
    100
    终止液



    1000
    基质液


    10O
    100
    37℃水浴30’(准确计时)
    终止液
    500

    1000

    离心(2500r/Pm×5min)取清液测定
    清液
    500

    500
    500
    标准液

    500


    显色液
    2000
    200O
    2O0O
    2000
    充分混匀88—90℃水浴10min(准确计时)冷水冷室温空白调零分光光度计515nm色(A)
    3)活性计算:

    A测定—A



    血清PLD活性(UL)
    ───────
    ×
    [标准浓度]
    ×2400

    A测定

    (065)

    4)正常参考值:
    932土236UL明显性年龄差异
    (3)注意事项:
    1) A值均0010土0.005常规检测时免设讨001计
    2) 空腹静脉血清—20℃保存半月活性变化溶血标结果偏高
    3) A测定>1.8时血清宜冰醋酸倍稀释测定
    B8I型糖尿病检测(I型糖尿病预测诊断酶联试剂盆)
    谷氨酸脱羧酶(GAD)糖代谢程中种酶研究发现血清中抗体(抗—GAD抗—DM— I)升高影响糖代谢容易引起I型糖尿病试剂盒采间接EIA法测定血清中 GAD抗体预测 I型糖尿病发生提前预防糖尿病分型诊断
    (1)试剂盒组成:

    1抗原包板(活板条)


    6HRP稀释液

    2阴阳血清


    7显色剂 A

    3阳性血清


    8显色荆 B

    4样稀释液


    9终止液

    5酶结合物


    10洗涤液(30×0.01M PBST)
    (2)操作步骤:
    1) 需份取出预包板条放板架剩余板条放回袋中封口备.
    2) 离子水蒸馏水1瓶洗涤液全部稀释6O0ml
    3) 样稀释:先样1:10稀释取1001ul生理盐水塑料中加10ul样阴阳性已1lO稀释直接
    4) 加样孔加2滴样稀释液分加10ul阴阳稀释样孔中43℃水浴反应46min洗涤液洗孔4次次静置片刻面巾纸轻轻拍干
    5) 加酶:开酶结合物盖瓶HRP稀释液全部挤入酶结合物瓶中盖瓶盖混匀.孔加2滴.空白孔加.43℃水浴反应30min洗板.拍干.
    6) 显色:孔先加l滴显色剂A然加l滴显色剂B(包括空白孔)室温避光显色10—15min孔加l滴终止液反应肉眼判定终止
    三结果判定:
    1) 肉眼判定:色阴性兰色阳性
    2) 仪器测定:空白孔调零波长450nm分测孔OD值.
    Cut 0ff值 =0.2 + 阴性值
    样值 Cut off值者阳性
    B9血清Ⅳ胶原蛋白(PANASSAY Ⅳ. C)
    IV胶原蛋白认形成基底膜骨架基底膜成分形成体存纤维胶原蛋白种样根分子两端2总位形成网络结构.
    正常肝脏窦间隙周围缺乏基底膜结构肝炎肝硬化肝纤维化发展程中肝淋巴间隙中引起基底膜增生肝组织血中 Ⅳ型胶原蛋白量着增加血清中Ⅳ型胶原蛋白测定作检查肝纤维化程度指标引起关注.
    PANASSAY Ⅳ C试剂盒采步夹心固相酶免疫法两种单克隆抗体识IV型胶原蛋白分子部位.简便准确测定血清中Ⅳ型胶原蛋白浓度.
    [成分]
    抗体包珠
    Mouse抗Ⅳ型胶原蛋白单克隆抗体包珠
    100粒
    酶标抗体液
    氧化物酶标记Mouse抗 Ⅳ型胶原蛋白单克隆抗体
    35ml
    显色剂
    33’55’—四甲基联苯胺
    40ml
    显色剂溶解辅助液
    N N—二甲基联苯胺
    1ml
    色剂溶液
    100ml醋酸缓液
    40ml
    底物液
    含0015%氧化氢10mM醋酸缓液
    15ml
    终止液
    133N硫酸
    70ml
    标准品稀释液
    10mM硫酸缓液
    15ml
    CL—Ⅳ标准品
    Ⅳ型胶原蛋白
    1ml
    浓缩缓液
    0.1M碳酸缓液
    lL
    [测定方法]:
    步夹心固相酶免法(EIA法)
    [测定原理]
    PAHASSAY IV C试剂盒两种单克隆抗体识Ⅳ型胶原蛋白分子部位采步夹心固相酶免疫法测定血清中Ⅳ型胶原蛋白浓度.
    1)第项反应:
    样品中CL—Ⅳ抗体包珠酶标抗体时反应形成3相复合体
    2)第二项反应
    显色刑(四甲基联苯胺)存氧化氢底物测定 CLⅣ反应结合抗体包珠酶量.
    酶量存样品中 CL—Ⅳ浓度已知浓度标准液制成标准曲线求出血清中Ⅳ型胶原蛋白浓度.
    [特点]:
    1) 采合固相抗体标记抗体单克隆抗体血清Ⅳ型胶原蛋白特异性.
    2) 酶标抗体Fab’ hinge领域—SH基标记抑制非特异性结合.
    3) 显色剂四甲基联苯胺原0PD方法相灵敏度显色稳定性良致癌性.
    [方法]:
    (1)试剂配制方法
    1)标准曲线标准液
    CL—IV浓度(ng/ml)
    500

    250

    125

    62
    0
    标准液(ul)[2000ngml]
    50
    吸100

    吸100

    吸100




    ──→
    100
    ──→
    100
    ──→
    100
    适量
    标准品稀释液(ul)
    150







    2)显色液
    显色剂溶解液显色剂溶液(显色剂加显色剂溶解辅助液500ul)1:100例实际需配制
    3)洗液:
    浓缩洗液蒸馏水稀释例19.
    述试剂配制2—8℃稳定2月.
    (2)操作方法
    准备标准曲线试5根取浓度 CL—Ⅳ标准液50ul(0ng/ml稀释液)样品试里加入样品50ul.

    加酶标抗体液300ul

    钳子取出抗体包珠滤纸吸沾附液体逐放入试立混匀10—30℃准确静放l时

    定间隔时间加洗液l0ml终止反应

    洗净:吸吸反应液加洗液35ml进行吸操作反复3次

    加显色液300ul定间隔加底物液100ul混匀10—30℃情况准确静放30min.

    定间隔加终止液10m1终止酶反应

    水作测定450nm(7)处波长吸光度值
    [计算方法]:
    a) 付图表纸(双数)攒轴取CL—IV浓度(16—1000ng/ml)坐标取吸光度.标准品吸光度扣0nm/ml吸光度测值画出曲线
    b) 画出通4点光滑标准曲线
    c) L—Ⅳ浓度扣0nm/ml吸光度标吸光度相应标准线求
    [注意事项]:
    1) 标请新鲜血清
    2) 血清分离马检测场合样品保存:
    冷藏保存周稳定冷冻保存6月稳定
    3) 请避免标反复冷冻复溶
    4) 标准曲线请双重测定次测定帽成次测定时配制标准曲线标准液较高灵敏度
    5) 请抗体包珠完全浸透反应液里塑料试.(径10—18mm长60—75mm)
    6) 抗体包珠干燥直接手触模强力刮搓
    7) 完全吸咐沾付抗体包珠液体
    8) 配制显色液时请严格遵守操作规程
    9) 洗净操作时请连续操作中断
    10) 标测定时请注意统步骤规定反应时间
    11) 样品浓度超检测范围时调标难品稀释液稀释重测
    12) 干扰物质:
    胆红素<20mg/dl血红蛋白<500mg/dlIntralipos <2%测值影响
    [参考正常值]
    993士228 ng/ml(均值±SD)
    参考正常值限:140 ng/ml
    B10血清蛋白电泳
    (1)试剂
    1. PH 86 M006 巴妥缓液:
    巴妥2.21g巴妥钠12.36g 加热溶解加蒸水lL冷.
    2.丽春红S染色液:
    称丽春红S04g三氯醋酸6g蒸馏水溶解稀释100m1.
    3漂洗液:3(v/v)醋酸溶液:适丽春红染色漂洗
    4.透明液:液体石蜡+氢萘
    5.洗脱液:04M NAOH
    (2)操作
    a) 取醋纤膜粗面编号浸入巴妥缓液浸透取出吸水纸吸缓液.
    b) 加样:加样器取血清约3ul加薄膜(粗面)垂直点样粗面距端25cm
    c) 电源:已加样薄膜附贴电泳糟支架(粗面)求中部悬空直衡6—10分钟电泳仪正负极电泳糟正负极连接点样端负极端通电源调电压80120V电流强度0406mA/cm通电40—50分钟
    d) 染色漂洗:通电毕立薄膜取出浸染液中5—10分钟取出漂洗数次背景完全漂净呈白色止蒸馏水中漂洗半分钟立定量保存漂洗液中
    (3)定量:
    1)光密度计扫描法:
    吸薄膜液体干燥薄膜浸入十氢萘中完全透明放入光密度计扫描求组百分含量
    2)洗脱法:
    漂洗薄膜吸水纸吸干色带剪白蛋白强入加04M NaOH6ml中部份分浸入0.4 M NaOH3ml中振摇数次色泽完全浸出 600—620nm色空白04MNa0H
    (4)计算:
    白蛋白%白蛋白吸光度×2 T× l00
    α1球蛋白% Αα1×100 T
    α2球蛋白% Aα2 T×100
    β球蛋白%βT×lO0
    γ球蛋白%γ T×100
    (T= Aa1b 十 Aα1 十 Aα2 十 Aβ 十 Aγ)
    (5)参考值:
    ALB
    55—74%
    α1:
    08—32%
    α2:
    45—9%
    β:
    58—12%
    γ:
    1019

    B11N乙酰葡萄糖苷酶(NAG)
    (1)试剂配制:
    1) NAG缓液: PH5.0 +β糊精含量10%
    2)基质干粉(CNP—NAG)5mg十6mlNAG缓液(PH60柠檬酸缓液).
    (2)方法:
    Beckman分析仪操作.
    (3)计算公式:

    NAG测—NAG空


    NAG
    ───────
    ×100(U/gCr)

    Cr×50884

    注尿肌酐50倍稀释.
    B12腺苷脱氨酶(ADA)
    (1)试剂宁波新芝
    (2)操作
    BECKMAN CX9生化仪动检测仪器参数试剂说明书
    (3)计算:
    ADA=Au—Aub/As—ab×30
    (4)参考植:
    0—25单位
    (5)床意义:
    1肝硬化原发性肝癌ADA均升高
    2测定胸水ADA血清ADA值诊断结核性胸膜炎诊断价值积液中ADA活性结核明显高癌性心衰性值l诊断结核性项指标.
    3伤寒病ADA活性显著升高明显高非伤寒发热患者报道ADA敏感性达100特异性923伤寒发病初期高正常24倍极期缓解期持续处高水病程第4周逐渐降低ADA检测伤寒病早期诊断价值
    4.血液病血细胞中ADA活性血清中ADA活性4070倍慢淋白血病性网状皮增生病淋巴细胞中ADA活性明显降急淋急粒患者淋巴细胞中ADA活性正常高110倍类恶性肿瘤患者外周血淋巴细胞ADA活性明显降低
    5.疾病传单栗粒性结核风湿热溶血性贫血白血病部分肿瘤病血清ADA呈程度升高
    6结核性脑膜炎ADA活性升高脑膜炎升高
    B13尿肌酸测定
    [原理]
    血清(浆)蛋白滤液稀释尿液中肌酸酸加热罴转变成肌酐然测肌酐总量时测未处理标中肌酐量两相减标中肌酐量 值肌酐计算换算成肌酸应转换字数116(C4H9O2N3C4H7ON3116)
    [试剂]
    10036M苦味酸取饱苦味酸04NNa滴定酚酞作指示剂根浓度稀释
    214NNaoH
    3肌酐标准液(15mgdl)海生物北化厂产
    4制作蛋白滤液钨酸蛋白沉定剂钨酸钠555g NH2SO4 37ml H3PO4015ml加水500ml
    5蛋白滤液制作取血清(浆)05ml加钨酸蛋白沉定剂35ml放置5分钟离心取清液备
    [步骤]
     
    肌酸
    肌酐
    标准
    空白
    1100稀释尿液
    3
    3
     
     
    1N H2SO4
    07
     
     
     
    高压15磅30分钟
    +



    1N NaoH
    07
     
     
     
    标准液
     
     
    03
     
    H2O
     
     
    27
    3
    碱性苦味酸
    3
    15
    15
    15
    H2O
    16
     
     
     
    37℃ 10分钟721色510nm波长
    [计算]
    肌酸量肌酸标准*15*2
    肌酐量肌酐标准*15
    肌酸(肌酸量肌酐量)*116
    [正常范围]
    肌酸mgdl
    血37mgdl
    尿<100mg24h尿
    [附注]
    1肌酸肌酐时测定先肌酐放冰箱 等肌酸高压起碱性苦味酸测定
    2尿液标新鲜1200稀释
    B14肌钙蛋白(TNT)测定
    [试剂材料]
    1 亲素包塑料
    2 TNT标准(3a3b3c3d3e)
    3 TNT质控品(4a4b)
    4 pod标记抗TNT抗体
    5 缓液
    6 洗涤液
    7 显色液
    [ 测定方法]
    1) 次测定均设标准质控标准般做3a3d标准视具体情况定4a4b时做仅做份
    2) 准备亲素包编号标准 质控样分加标准液质控品标01ml室温放置30min
    3) 配制酶标抗体应液根测定数(05ml)配制缓液100份+POD标记抗TNT抗体1份混匀
    4) 述中加酶标抗体应液05ml充分混匀 室温1时
    5) 洗涤洗涤液2ml左右洗涤4次次间隔23min
    6) 加显色剂05ml室温避光放置约2030min
    7) 显色液体加入干净酶标板中孔200ul
    8) 酶标仪直接读数般程序已编酶试剂标准浓度变检测程序应作调整
    [参考范围]
    < 02ngml
    [床意义]
    1) 急性心肌梗塞实验室诊断
    2) 稳定心绞痛预判断
    3) AMI溶栓药物治疗监测
    4) 心肌细胞损害疾病定诊断价值
    B15肿瘤相关物质测定
    测定原理
    试剂采生化方法联合检测血清中恶性肿瘤相关物质(TSGF)种肿瘤相关物显色进行叠加提高检测灵敏度检测种早期恶性肿瘤
    试剂盒组份
    1. 检测试剂
    1ml20份
    2. 标准品
    20Uml40Uml 60Uml 80Uml 100Uml五浓度400ul
    样品收集处理
    采血(勿需空腹)应快分离血清日检测应血清样品全血中分离出置10摄氏度冷冻保存时须复温溶解充分摇匀量避免反复冻融明显溶血黄疸高脂标影响测定
    试验仪器
    见分光光度计定时器40ul移液器水浴锅反应架
    操作步骤
    1. 加样:准确吸取40ul测血清五浓度标准品加入盛1ml试剂反应中盖紧盖子充分混匀
    2. 显色:反应插入试架置100摄氏度沸水浴中加热15分钟迅速取出置冷水中冷5分钟终止反应
    3. 色:反应液倒入05cm光程色杯中470nm波长处蒸馏水空白调零测定样吸光度值
    结果计算判断
    1. TSGF标准品五浓度分20Uml 40Uml 60Uml 80Uml 100Uml(1U1268ugTSGF物质)标准浓度作横坐标应吸光度值坐标制作标准曲线
    2. 标准曲线查血清标吸光度值应浓度单位
    3. 参考值:TSGF64uml 阴性64uml等TSGF71uml疑阳性TSGF等71uml阳性
    4. 部分急性炎症身免疫性疾病系统性红斑狼疮类风湿等病症产生交叉反应引起假阳性
    晚期癌症患者TSGF值低界值(64umi)
    注意事项
    1 色波长必须保证470nm准确误差范围2nm
    2 加样量40ul须严格控制误差范围1ul
    3 反应时间15分钟许方面严格控制
    4 血清加入反应必须盖紧盖子充分摇匀速进行加热显色
    5 水面高度应达反应架脚部水位线反应液高度致
    6 色求反应终止1时完成
    7 检测样品冷水应时更换加冰袋确保反应终止
    8 空白蒸馏水需澄清透明必须天更换
    9 水浴锅应该钢精锅电炉代免受热均
    10 反应液产生褐色絮状物请充分摇匀色
    11 尚未完标准品需密封低温保存
    方法学参数
    1精密度:批间批CV等5
    2回收率:100+5
    3特异性:常规肿瘤标志物发现交叉反应








    C1HAVAbIgM
    [标准备]
    检样稀释取1ml生理盐水加5ul检样振荡混匀(作1200稀释)
    [步骤]
    1) 检样孔加100ul样品稀释液+5ul稀释检样(1200)孔分加阴性阳性品100ul封板混匀
    2) 40℃水育30分钟洗板6次
    3) 加50ul酶标物 A型肝炎试剂混匀
    4) 40℃水育40分钟洗板6次
    5) 加显色剂AB滴室温放置10分钟
    6) 终止液50ul混匀450nm处测OD值
    [结果计算判断]
    界值 (Cutoff)阴性OD值+025
    检样孔OD值<界值阴性
    检样孔OD值等界值阳性
    C2PreS1
    [原理]
    采双抗夹心ELISA法微孔条预包纯化乙肝表面抗体(抗HBs)捕获检标中乙肝病毒表面抗原酶标抗PreS1抗原单抗(抗PreS1HRP)作检测抗体根酶底物反应颜色变化测定血清中乙肝病毒PreS1抗原
    [试剂]
    厂家:海阿尔法物物技术限公司
    1预包反应板 8孔*6条 48份
    5洗涤液(浓缩液)
    2酶标液 滴瓶 1瓶 3ml
    6显色剂A 滴瓶1瓶 3ml
    3阳性 1支 150ul
    7显色剂B 滴瓶1瓶 3ml
    4阴性 1支 150ul
    8终止液 滴瓶1瓶 3ml
    [步骤]
    1 检标(50ul)阴性阳性50ul空白1孔加溶液
    2 酶标物50ul混匀封板37℃水浴60分钟
    3 弃液体板洗涤液注满孔静置5秒弃液体吸水纸量吸干反复洗板5次
    4 加显色剂AB1滴(50ul)混匀置37℃暗置15分钟
    5 加终止液1滴单波长450nm 者说双波长 450630nm 处测OD值
    [结果判断]
    1) 阴性阳性标读数值减空白孔读数计算值
    2) 阳性读数必须阴性读数0300
    3) 目测:
    白色背景观察孔显色情况明显桔黄色蓝色明显穿深阴性者PreS1阳性:色者极浅黄色者PreS1 阴性
    4)酶标仪检测:
       界值(CO) 阴性×21

    检样OD界值 ≥ 1阳性 (TODTON(SN)≥ 21)

    检样OD界值 < 1阴性 (TODTON(SN)< 21)
    注:阴性均OD值≤005时005计算≥005时实测值计算
    [注意事项]
    1) 试剂盒28℃避光保存
    2) 测标NaN3防腐
    3) 加样轻摇反应板充分混匀    
    4) 温育反应板温度时间必须严格控制
    5) 试剂盒中阳性仅判断试剂盒包微孔板酶否效界值标志
    C3HBSAg
    [原理]
    微孔条预包纯化乙肝表面抗体(抗HBs)配酶标抗体(抗HBsHRP)TMB显色剂等试剂采夹心法原理检测血清(血浆)中乙肝表面抗原(HBsAg)
    [试剂]
    厂家:厦门新创科技限公司
    1预包微孔条
    6显色剂A (Color A)
    2酶联试剂
    7显色剂B (Color B)
    3HBsAg阳性
    8终止液(2M H2SO4)
    4HBsAg阴性
    9封板胶
    5PBST洗涤液(浓缩液)
    10塑料袋
    [步骤]
    1 标(50ul)阴性阳性1滴
    2 酶标物1d混匀封板43℃水浴40分钟
    3 洗板5次
    4 加显色剂AB1滴置37℃暗置15分钟
    5 加终止液1滴单波长450nm 者说双波长 450630nm 处测OD值
    [结果判断]
    目测:
    白色背景观察孔显色情况明显蓝色者HBsAg阳性:色者HBsAg阴性
    酶标仪检测:
    界值(CO) 阴性×21

    检样OD界值 ≥ 1阳性 (TODTON(SN)≥ 21)

    检样OD界值 < 1阴性 (TODTON(SN)< 21)
    [灵敏度]
    ≤ 1ng
    C4HBeAb
    [原理]
    微孔条预包纯化乙肝e抗原(HBeAg)配酶标抗体(HBeAgHRP)TMB显色剂等试剂采夹心法原理检测血清(血浆)中乙肝e抗体(HBeAb)
    [试剂]
    厂家:厦门新创科技限公司
    1预包微孔条
    6显色剂A (Color A)
    2酶联试剂
    7显色剂B (Color B)
    3HBeAb阳性
    8终止液(2M H2SO4)

    4HBeAb阴性
    9封板胶
    5PBST洗涤液(浓缩液)

    [步骤]
    1 标(50ul)阴性阳性1滴
    2 酶标物1d混匀43℃水浴40分钟
    3 洗板5次
    4 加显色剂AB1滴置37℃暗置15分钟
    5 加终止液1滴450nm处测OD值
    [结果判断]
    目测:
    白色背景观察孔显色情况明显色者HBeAb阳性:蓝色者HBsAb阴性
    酶标仪检测:
    界值(CO) 阴性×21

    检样OD界值 ≥ 1阳性 (TODTON(SN)≥ 21)

    检样OD界值 < 1阴性 (TODTON(SN)< 21)
    [灵敏度]
    ≤ 30mIU
    C5HBEAg
    [原理]
    微孔条预包纯化乙肝病毒e抗体(抗HBe)配酶标抗体(抗HBeHRP)TMB显色剂等试剂采双抗夹心法原理检测血清(血浆)中乙肝病毒e抗原(HBeAg)
    [试剂]
    厂家:厦门新创科技限公司
    1预包微孔条
    6显色剂A (Color A)
    2酶联试剂
    7显色剂B (Color B)
    3HBeAg阳性
    8终止液(2M H2SO4)
    4HBeAg阴性
    9封板胶
    5PBST洗涤液(浓缩液)

    [步骤]
    1 标(50ul)阴性阳性1滴
    2 酶标物1d混匀43℃水浴40分钟
    3 洗板5次
    4 加显色剂AB1滴置37℃暗置15分钟
    5 加终止液1滴450nm处测OD值
    [结果判断]
    目测:
    白色背景观察孔显色情况明显蓝色者HBeAg阳性:色者HBeAg阴性
    酶标仪检测:
    界值(CO) 阴性×21

    检样OD界值 ≥ 1阳性 (TODTON(SN)≥ 21)

    检样OD界值 < 1阴性 (TODTON(SN)< 21)

    C6HBcAb
    [原理]
    微孔条预包纯化乙肝核心抗原(HBcAg)配酶标特异抗体(抗HBcHRP)TMB显色剂等试剂采竞争抑制法原理检测血清(血浆)中乙肝核心抗体(HBcAb)
    [试剂]
    厂家:厦门新创科技限公司
    1预包微孔条
    6显色剂A (Color A)
    2酶联试剂
    7显色剂B (Color B)
    3HBeAg阳性
    8终止液(2M H2SO4)
    4HBeAg阴性
    9封板胶
    5PBST洗涤液(浓缩液)

    [步骤]
    1 稀释:PBST洗涤液作1:30稀释(10ul样品加290ul洗涤液)
    2 标(100ul)阴性阳性2滴
    3 酶标物1d混匀
    4 混匀43℃水浴40分钟
    5 洗板5次
    6 加显色剂AB1滴置37℃暗置15分钟
    7 加终止液1滴450nm处测OD值
    [结果判断]
    目测:
    白色背景观察孔显色情况色阳性孔蓝色明显更浅者HBeAg阳性:阴性孔颜色相深者HBeAg阴性
    酶标仪检测:
    界值(CO) 阴性孔OD×02

    样品ODCO ≤ 10阳性 (TODNOD≤02)

    样品ODCO > 10阴性 (TODNOD > 02)
    [灵敏度]
    ≤ 2NCU
    C7HbeAb
    [原理]
    采抗类IgG包酶标板配酶标记特异性抗HBc缓液试剂组成采双层三明治法检测血清血浆样品中抗HBcIgM
    [试剂]
    厂家:厦门新创科技限公司
    1抗IgG酶标板
    6显色剂A (Color A)
    2抗HBe酶标记液
    7显色剂B (Color B)
    3乙型肝炎病毒核心抗原试液
    8样品稀释液
    4抗HBe阳性血清
    9终止液(2M H2SO4)
    5抗HBe阴性血清
    10PBST洗涤液(浓缩液 20×)
    [步骤]
    1 取需包孔加稀释测血清100ul(130)阴性阳性两滴
    2 温育43℃20分钟
    3 甩干洗板5次扣干
    4 孔HBcAg酶标试剂1滴混匀
    5 水育43℃30分钟
    6 洗板6次扣干
    7 加显色剂AB1滴混匀室温放置15分钟
    8 终止液100ul混匀450nm处测OD值
    [结果判定]
    目测:
    白色背景观察孔显色情况色阳性孔蓝色明显更浅者HBeAg阳性:阴性孔颜色相深者HBeAg阴性
    酶标仪检测:

    界值(cut off)阴性OD+025

    样品OD界值阴性

    样品OD界值阳性

    C8HCVIgG
    [步骤]
    1稀释:样品稀释液100ul加检标10ul阴性阳性两滴封板混匀
    2温育37℃30分钟
    3甩干洗板5次扣干
    4加酶标试剂100ul封板混匀
    5水育37℃20分钟
    6洗板6次扣干
    7加显色剂AB1滴混匀室温放置10分钟
    8终止液100ul混匀450nm处测OD值
    [结果判定]
    目测:
    白色背景观察孔显色情况色阳性孔蓝色明显更浅者HBeAg阳性:阴性孔颜色相深者HBeAg阴性
    酶标仪检测:

    界值(cut off)阴性OD+01

    样品OD界值阴性

    样品OD界值阳性

    C9HCVIgM
    [试剂]
    底物液配制OPD半片+底物缓液5ml溶解混匀
    [步骤]
    1取需包孔孔加样品稀释液100ul阴性阳性 检样5ul混匀封板
    237℃ 30分钟
    3洗板6次 扣干
    4孔加(1101) 酶标记物100ul封板
    537℃ 30分钟
    6洗板6次 扣干
    7TMB A液B液1滴放室温15分钟
    8终止液50ul混匀450nm处测OD值
    [结果判断]
    界值(cut off)阴性OD+04
    样品OD界值阳性
    样品OD界值阴性
    C10HDVAg
    [步骤]
    1取需包孔检样品阴性阳性50ul
    2加入脱壳剂25ul(1滴)混匀45℃ 60分钟
    3洗板5次 扣干
    4孔加入酶标记物50ul(1滴)混封板匀45℃ 30分钟
    5洗板5次 扣干
    6底物显色液1滴
    7终止液50ul混匀450nm处测OD值
    [结果判断]
    界值(CO) 阴性×21
    检样OD界值 ≥ 1阳性 (TODTON(SN)≥ 21)
    检样OD界值 < 1阴性 (TODTON(SN)< 21)
    C11HDVIgG
    [步骤]
    1检标(50ul)阴性阳性1滴
    2酶标物1d混匀封板45℃水浴30分钟
    3洗板5次
    4底物显色液1滴(25ul)置37℃暗置15分钟
    5加终止液1滴(50ul)单波长450nm 者说双波长 450630nm 处测OD值
    [结果判断]
    目测:
    白色背景观察孔显色情况明显天蓝色者HBsAg阴性:色者HBsAg阳性
    酶标仪检测:
    界值(CO) 12×(阴性OD + 阳性OD)
    检孔OD值 < 界值阳性
    检孔OD值 > 界值阴性
    C12HDVIgM
    [步骤]
    1取需包孔孔加(1100)稀释样品5ul加入样品稀释液50ul阴性阳性50ul
    2加入抗原50ul(1滴)混匀45℃ 30分钟
    3洗板5次 扣干
    4孔加入酶标记物50ul(1滴)混封板匀45℃ 30分钟
    5洗板5次 扣干
    6底物显色液1滴
    7终止液50ul混匀450nm处测OD值
    [结果判断]
    界值(CO) 阴性×21
    检样OD界值 ≥ 1阳性 (TODTON(SN)≥ 21)
    检样OD界值 < 1阴性 (TODTON(SN)< 21)
    C13HEVAbIgG
    [步骤]
    1取需包孔孔样品稀释液100ul加入样品5ul阴性阳性100ul
    2封板混匀37℃ 30分钟
    3洗板6次 扣干
    4孔加入酶标记物(1100稀释)100ul
    5混封板匀37℃ 30分钟
    5洗板6次 扣干
    6底物显色液1滴(100ul)
    737℃水浴15分钟
    8终止液100ul混匀450nm处测OD值
    [结果判断]
    界值(cut off)阴性OD+05
    样品OD 界值阳性
    样品OD 界值阴性
    C14HEVAbIgM
    [步骤]
    1取需包孔孔样品稀释液100ul加入样品5ul阴性阳性100ul
    2封板混匀37℃ 30分钟
    3洗板6次 扣干
    4孔加入酶标记物(1100稀释)100ul
    5混封板匀37℃ 30分钟
    5洗板6次 扣干
    6底物显色液1滴(100ul)
    737℃水浴15分钟
    8终止液100ul混匀450nm处测OD值
    [结果判断]
    界值(cut off)阴性OD+025
    样品OD 界值阳性
    样品OD 界值阴性
    C15HGVAb
    [步骤]
    1取需包孔孔样品稀释液100ul加入样品阴性阳性10ul
    2封板混匀37℃ 20分钟
    3洗板6次 次置1分钟扣干
    4孔加入酶标记物100ul(2滴)
    5混封板匀37℃ 20分钟
    5洗板6次 次置1分钟扣干
    6加入底物液AB1滴(100ul)
    7室温避光反应1015分钟
    8终止液50ul(1滴)混匀450nm处测OD值
    [结果判断]
    阴性OD值 <02阳性OD值阴性 >05方认测定效
    界值(cut off)阴性OD+021
    样品OD 界值阳性
    样品OD 界值阴性
    C16TTVIgG
    [原理]
    采抗类IgG包酶标板配酶标记特异性TTV抗体缓液试剂组成采双层三明治法检测血清血浆样品中TTVIgG抗体
    [试剂]
    厂家:北京医科学肝病研究北京肝炎研制中心
    1包板 4×12孔
    5酶结合物液 1瓶
    2阳性 1支
    6洗涤夜 1瓶
    3阴性 1支
    7底物液A&B 备1瓶
    4标稀释液 1瓶
    8终止液 1瓶
    [操作]
    1 标稀释液100ul(2滴)加入包板孔(阴阳性孔直接加入100ul血清)检血清取5u1加入反应孔置37℃温箱反应60分钟
    2 蒸溜水洗涤液洗释200ml洗板5次次放置5—10秒钟
    3 孔加入100ul(2滴)酶结合物液置37℃温箱反应20分钟洗板5次操作步骤2
    4 底物A B液50ul(1滴)加反应孔37℃避光显色10分钟
    5 孔加入终止液50ul(1清)终止反应
    [结果判定]
    界值=阴性(N) OO值十0.15
    标OD值≤界值阴性标OD值>界值阳性
    [注意事项]
    1. 试剂盒置28℃保存效期6月
    2. 批号试剂请勿混
    3. 严格说明书操作
    4.反应温度时间必须严格控制
    C17寒冷凝集反应
    [原理]
    原发性非典型性肺炎肺炎支原体引起病血清中常出现高滴度寒冷凝集素身O型红细胞04℃寒冷情况产生凝集现象原发性非典型性肺炎辅助诊断
    [试剂]
    1生理盐水
    22血球O型RBC
    [方法]

    1
    2
    3
    4
    5
    6
    7
    8
    9
    10
    N S
    075
    05
    05
    05
    05
    05
    05
    05
    05
    05
    血清
    025
    05
    05
    05
    05
    05
    05
    05
    05

    2RBC
    05
    05
    05
    05
    05
    05
    05
    05
    05
    05
    稀释倍数
    18
    116
    132
    164
    1128
    1256
    1512
    11024
    12048
     
    第1孔075mlNS+025ml血清混匀吸05ml第2孔混匀第2孔吸05ml第3孔第9孔混匀吸05ml弃10号加血清放冰箱夜
    [观察结果]
    凝集者++高血清稀释倍数报告放37℃水浴1530'观察凝集消退
    [正常参考值]
    132
    C18ENA肽抗体谱
    [原理]
    试剂盒采国际先进生物技术免疫印迹技术(Immunoblotting)具种抗原性细胞核盐水提取性抗原(ENA)凝胶电泳分离转印硝酸纤维膜次检测810种身抗体系统工斑狼疮(SLE)混合性结缔组织病(MCTD)硬皮病(PSS)干燥综合症(SS)发性肌炎皮肌炎(PDDM)类风湿性关节炎等六种风湿性疾病诊断鉴诊断
    [试剂]
    1浓缩洗涤液25ml×2
    4显色液B25ml×1
    2酶标抗体06ml×2
    5终止液25ml×1
    3显色液A25ml×1
    6膜条8条×5
    [步骤]
    1 浓缩洗涤液蒸馏水作1:10稀释
    2 槽加05ml洗涤液然加测血清10ul充分混匀置37℃孵育30分钟
    3 取出反应槽弃槽中液体吸水纸拍干洗涤液洗涤4次次1ml摇动次1分钟
    4 槽加入洗涤液05ml加酶标抗体20ul混匀置37℃孵育30分钟
    5 (3)洗涤
    6 加入显色剂A05ml+显色剂B05ml室温反应10分钟
    7 阳性带显色清晰加终止液05ml终止反应1分钟弃液体水洗涤取出薄膜干判定结果
    [结果观察]
    检测膜显色区带身抗体检测判断
    显色区带位置
    代号
    检测抗体
    说明
    29 KD
    B'
    抗Sm
    DD总B起出现 单独出现B'BD判断抗Sm阳性
    28 KD
    B
     
     
    135 KD
    D
     
     
    73 KD
     
    抗U1RNP



    73KD(国外报道70KD) A时出现分出现C 常伴述二区带 起出现单独出现少见 抗U1RNP时B'B反应出现显色区带
    32 KD
    A
     
     
    175 KD
    C
     
     
    52 KD
     
    抗SSA
    试剂盒兔胸腺抗原源缺60KD蛋白肽
    48 KD
     
    抗SSB
    三区带仅时出现52KD 区带时出现 4847KD时弱 易分辨
    47 KD
     
     
     
    45 KD
     
     
     
    86 KD
     
    抗Scl70
    两区带时出现两区带间时见两条较弱区带100KD降解产物
    70 KD
     
     
     
    55 KD
     
    抗Jo1
    确定55KD需慎重床意义明5456KD55KD位置相差1毫米
    38 KD
     
    抗核糖体
    三区带时出现时165 15KD区带较弱
    165 KD
     
     
     
    15 KD
     
     
     
    [注意事项]
    1 结果判断请参标准谱带图零位线(兰线)约2mm处第条显色带试剂质控线显色带出现说明试剂失效
    2 试剂盒放4℃保存酶标抗体勿放—20℃保存取膜条时剪开铝塑外包装剩余膜条须放入封袋中仔细封封袋口防膜条潮湿置4℃保存
    3 浓缩洗涤液需前稀释整操作中洗涤液量约份1伽l参量稀释未完洗涤液弃留作次
    4 全部操作生化摇摆台摆动进行改手工间隙晃动检测敏感性会降
    5 显色液AB需恢复室温方显色液棕色颗粒时影响检测结果
    6 标准带谱根相应标准血清定位电脑制作试剂盒应张标准带谱进行结果判断时试剂盒间标准带谱混注意膜条铝塑袋批号标准带谱方批号致
    7 判断结果时注意谱带定位带型结合起带型指种抗体条区带时区带间相变位置关系构成图型抗Scl70常出现4条抗SSB常出现2条总抗SSA时出现抗Sm常出现23条抗 D’E(抗Ijl4)常出现5—6条等等谱带定位时标准带相差1mm属允许范围
    8 试剂盒作抗 DM—53抗RA—54检测类风关病54KD抗体外出现36KD抗体
    9 血清标带型显色强度会致遇弱阳性结果时请仔细观察
    C19ANA
    [步骤]
    1) 141稀释测血清阳性校正液(5ul述样品加入200ul样品稀释液中混匀)
    2) 取100ul已稀释述样品加入相应微孔中空白孔加样品稀释液100ul
    3) 置20℃28℃30分钟
    4) 洗涤6次
    5) 孔加酶结合物100ul
    6) 置25℃28℃30分钟洗涤6次
    7) 孔分加入100ul溶液AB
    8) 20℃28℃ 30 分钟
    9) 孔加入50ul 2NHCL终止反应混匀450nm处测OD
    [结果判定]
    测血清OD
    ────── <10 阴性
    校正液OD
    测血清OD
    ────── 120明确阳性需重测
    校正液OD

    测血清OD
    ────── >20 阳性
    校正液OD
    [质量控制]
    空白OD必须<010校正液OD<008检测结果效须重做
    C20dsDNA
    [步骤]
    1 需取包孔孔加稀释液100ul检样 校正液阳性5ul混匀封板
    2 置2125℃30分钟
    3 洗板6次扣干
    4 孔加酶结合物100ul封板
    5 置2125℃30分钟
    6 洗板6次扣干
    7 TMB 100ul置2125℃5分钟
    8 终止液100ul混匀450nm处测OD值
    [结果判定]


    检样OD
    检样指数值(SIV)

    ───────


    校正液OD×*系数
    SIV<090 阴性
    SIV091099间疑
    SIV>110阳性
    附注*系数(Factor)厂家通分析数提供批号试剂盒系数进行
    C21幽门螺杆菌抗体
    [步骤]
    1 需取包孔孔加100ul零缓液分加已稀释样品(11011ml样品稀释液加10ul样品)100ul标准品(单孔20uml25uml35uml者)相应孔中混匀
    2 置室温(2025℃)30分钟洗涤5次扣干
    3 孔加100ul酶结合物
    4 置室温30分钟洗涤5次扣干
    5 孔加入TMB液置室温30分钟
    6 加50ulHcl中止反应轻混匀30秒450nm处(模式3)测OD值
    [结果计算]
    TOD
    ━━━━ × C(浓度)
    SOD
    TOD
    ━━━━ × C<20uml阴性
    SOD
    TOD
    ━━━━ × C≥ 20uml阳性
    SOD
    C22嗜异性凝集试验
    [原理]
    传染性单核细胞增症患者血清中常产生高滴度嗜异性抗体绵羊红细胞发生凝集
    [试剂]
    1 生理盐水
    2 百分二血球(羊鸡猴血球均)
    [方法]
    灭活血清血清56℃放置30分钟
    试号
    1
    2
    3
    4
    5
    6
    7
    N S
    060
    025
    025
    025
    025
    025
    025
    血清
    010
    025
    025
    025
    025
    025

    2RBC
    010
    010
    010
    010
    010
    010
    010

    室温2h放冰箱夜(4℃)

    稀释度
    17
    114
    128
    156
    1112
    1224
     
    第1孔060mlNS+010ml血清混匀吸025ml第2孔混匀第2孔吸025ml第3孔第6孔混匀吸025ml弃7号加血清放冰箱夜
    [正常参考值]
    统计正常值
      羊血球 156
      豚血球 128
      猴血球 128
      鸡血球 128
      超156者具床诊断价值
    C23肥达氏反应
    [原理]
      法伤寒OH甲乙丙副伤寒分培育甲醛处理杀死做成菌液供肥达氏应伤寒辐助诊断
    [操作方法]
    取试排成5 × 6形式5 排分编成OH甲乙丙取试支加入病血清025ml475ml生理盐水作120稀释取25ml生理盐水分注入排第05ml取25ml生理盐水血清作2 倍稀释排加05ml生理盐水作阴性然逐加入菌液005ml
    稀释度12014018011601320
    充分振荡混匀37℃放置1620时判定结果
    [结果判定]
    根凝集反应强弱分4+3+2+1+±记录呈现(+)血清高稀释度终点效价
    [注意事项]
    1) 应光亮处观察底凝集状态轻轻摇动判定结果剧烈振荡
    2) 菌液稀释应时
    3) 菌液中摇散凝块时
    4) 应标签载明效期
    C24胰岛素测定标准操作规程
    (1) 产:
    中国原子科学研究院北京
    (2) 途:
    定量测定血清血浆中胰岛素含量床糖尿病分类胰岛素瘤鉴诊断
    (3)试剂:
    1 标准品六瓶浓度510204080160miuL时加温育液10ml放置10分钟充分溶解分装01ml零20℃保存月完
    2 125I胰岛素瓶时加温育液11ml
    3 胰岛素抗体瓶时加温育液11ml
    4 温育液瓶分离试剂瓶前定充分摇匀
    5 质控品时加水05ml溶解分装01ml零20℃保存月完
    (4)曲线范围:
    5160MiuL 灵敏度:<5 MiuL
    (5)方法
    分析见表 单位:ml

    T
    标准曲线组
    测组
    名称
    N

    标准
    温育液

    02
    01


    标准品



    01






    01
    抗体


    01
    01
    01
    125IINS
    01
    01
    01
    01
    01
    充分摇匀放37℃2时
    分离剂
    05
    05
    05
    05
    05
    充分摇匀放室温15分钟
    充分摇匀3500转分离心15分钟弃清液测沉淀计数
    (6)标准曲线:
    NSB<5B0T4070ED50256miuL
    (7)参考范围
    92名正常空腹胰岛素40168miuL
    C25C肽测定标准操作规程
    (1) 产:
    中国原子科学研究院北京
    (2) 途:
    定量测定血清C肽含量床解胰岛β细胞功糖尿病分型药指导
    (3)试剂
    a) 标准品六瓶浓度0206153060120ngml时加温育液10ml放置10分钟充分溶解分装01ml零20℃保存1月完
    b) 125IC肽瓶时加温育液11ml
    c) C肽抗体瓶时加温育液11ml
    d) 温育液瓶
    分离试剂瓶前定充分摇匀
    (4)曲线范围:
    018ugL 灵敏度:008ugL
    (5)方法
    分析见表 单位:ml

    T
    标准曲线组
    测组
    名称
    N

    标准
    温育液

    02
    01


    标准品



    01






    01
    抗体


    01
    01
    01
    125IC肽
    01
    01
    01
    01
    01
    充分摇匀放4℃24时
    分离剂
    05
    05
    05
    05
    05
    充分摇匀放4℃60分钟
    充分摇匀3500转分离心15分钟弃清液测沉淀计数
    (6)标准曲线:
    NSB<12B0T3045ED50119ugL
    (7)参考范围
    100名正常空腹C肽0638ngml均值182ngml


    C26胰高血糖素测定标准操作规程
    (1)产:中国原子科学研究院北京
    (2)途:定量测定血清胰高血糖素含量床解胰岛α细胞功胰高血
    糖素瘤胰岛素瘤鉴诊断
    (3)试剂
    1) 标准品2瓶瓶加温育液溶解配制成25501002004001000pgml溶解标准次
    2) 125I胰高血糖素瓶时加温育液11ml
    3) 胰高血糖素抗体瓶时加温育液11ml
    4) 温育液瓶
    5) 分离试剂瓶前定充分摇匀
    (4)样处理
    加入抑肽酶1000020ul50ulEDTA 加入2ml血样充分摇匀离心20℃保存(室50ulEDTA抗凝2ml全血测定INSC肽胰高血糖素)
    (5)曲线范围:
    25100ngL 灵敏度:183ngL
    (6)方法:
    分析见表 单位:ml

    T
    标准曲线组
    测组
    名称
    N

    标准
    温育液

    03
    02


    标准品



    02






    02
    抗体


    01
    01
    01
    充分摇匀放4℃4时
    125I
    01
    01
    01
    01
    01
    充分摇匀放4℃24时
    分离剂

    05
    05
    05
    05
    充分摇匀放4℃60分钟
    充分摇匀3500转分离心15分钟弃清液测沉淀计数
    (7)标准曲线:
    NSB<5B0T2545ED50183±40ngL
    (8)参考范围:
    40名正常空腹血浆<200pgml
    C27α1微球蛋白测定标准操作规程
    (1) 产:
    中国原子科学研究院北京
    (2) 途:
    定量测定尿液中α1微球蛋白含量床肾脏疾病肾功鉴诊断
    (3) 试剂:
    1) 标准6瓶瓶加水05ml溶解2550100200400800ugL
    2) 抗体1瓶加缓液22ml溶解
    3) 125Iα1MG 1瓶加缓液11ml溶解
    高浓度缓液1瓶加水135ml稀释
    4) PR 1瓶前充分摇匀
    (4) 曲线范围:
    25—800ugL 灵敏度:16ugL
    (5) 分析步骤:
    首先尿液41倍稀释(2ml应缓液加入50ul尿样混匀)
    T NSB 零 标准 样品
    缓液 50 50
    标准 50
    样品 50
    125Iα1MG 100 100 100 100 100
    NSB 200
    α1MG抗体 200 200 200
    摇匀37℃3时
    PR 500 500 500 500

    摇匀室温15分钟离心3500rpm15分钟弃清液测沉淀计数结果41
    (6) 标准曲线:
    NSB<3B0T40ED5090100ugL
    (7) 正常参考值:
    586±450mgL
    C28β2微球蛋白测定标准操作规程
    (1) 产:
    中国原子科学研究院北京
    (2) 途:
    定量测定血尿液中β2微球蛋白含量床肾脏疾病某恶性肿瘤鉴诊断
    (3)试剂:
    1) 标准7瓶瓶加水05ml溶解
    1 (浓度:00205102050100mgL)
    2) 抗体1瓶加水24ml溶解
    3) 125Iβ2 MG 1瓶PR 1瓶前充分摇匀
    (4)曲线范围:
    0210mgL 灵敏度:005mgL
    (5)分析步骤:
    单位:ul尿样稀释
    T NSB 零 标准
    血样 尿样
    零标准 250
    标准 50
    样品 50 200
    125Iβ2 MG 100 100 100 100 100 100
    混匀
    β2MG抗体 200 200 200 200
    摇匀室温051时
    PR 500 500 500 500 500
    摇匀室温15分钟离心3500rpm15分钟
    (6)标准曲线:
    NSB<5B0T5080ED50117mgL
    (8) 正常参考值:
    血清:1615±0335mgL
    尿样:0091±0068mgL
    C29THP蛋白测定标准操作规程
    (1) 产:
    中国原子科学研究院北京
    (2) 途:
    定量测定血清尿液中THP糖蛋白含量床肾脏疾病肾功鉴诊断
    (3) 试剂:
    1) 标准6瓶5010020050010002000ngL
    2) 抗体1瓶加缓液23ml溶解
    3) 125ITHP1瓶11ml高浓度缓液1瓶加水25ml稀释
    PR 1瓶前充分摇匀
    (4) 曲线范围:
    50—2000ugL 灵敏度:20ugL
    (5) 分析步骤:
    首先尿液51倍稀释(必须双蒸水稀释100ul尿样5ml双蒸水)
    血样稀释
    T NSB 零 标准 样品
    缓液 100 100
    标准 100
    样品 100
    125ITHP 100 100 100 100 100
    NSB 200
    THP抗体 200 200 200
    摇匀37℃3时
    PR 500 500 500 500
    摇匀室温15分钟离心3500rpm15分钟
    (6) 标准曲线:
    NSB<7B0T5080ED50309330ugL
    (7) 正常参考值:
    24时尿液:2884±1499mg24h
    喝水尿样:2896±193ugml
    血清:15989±5157ngml
    C30抗TGTM抗体测定标准操作规程
    (1) 产:
    中国原子科学研究院北京
    (2) 途:
    半定量检测TGTM抗体床诊断甲状腺身免疫疾病
    (3) 试剂:
    1 125ITG125ITM1瓶加10ml 稀释液溶解
    2零值血清正常血清阳性血清缓液稀释液1瓶
    3PR试剂2瓶
    (4) 分析步骤:

    T 零 正常 阳性 样品

    零值血清 20
    正常血清 20
    阳性血清 20
    血样 20
    缓液 200 200 200 200
    125ITG 100 100 100 100 100
    125ITM
    摇匀37℃1时
    PR 500 500 500 500
    摇匀室温30分钟离心3500rpm20分钟弃清液测沉淀cpm
    (5) 正常参考值:
    TGAb<30TMAb<20
    C31抗INS抗体测定标准操作规
    (1) 产:
    中国原子科学研究院北京
    (2) 途:
    定性检测血清胰岛素抗体床诊断胰岛素赖型糖尿病指导药
    (3) 试剂
    1125I瓶加温育液11ml
    2阴性阳性血清瓶
    3温育液PR瓶
    (4) 分析步骤

    T NSB 阴性 阳性 样品
    零值血清 20
    阴性血清 50
    阳性血清 50
    血样 50
    缓液 100 100 100 100
    125Iins 100 100 100 100 100
    摇匀37℃3时
    PR 500 500 500 500

    摇匀离心3500rpm20分钟弃清液测沉淀cpm
    (5) 正常参考值:
    SN<5
    C38III型前胶原放射免疫测定标准操作规程
    (1) 产:
    海海军医学研究生物技术中心
    (2) 原理途:
    试剂III型前胶原(Procoll en Type IIIPC III)抗原免疫新西兰兔相应抗体125I标记抗原采非衡双抗体+PEGRIA法测定血清中PC III含量试剂诊断肝纤维化早期肝硬变疗效观察药物筛选等研究结果显示血清PC III水肝活检显示肝纤维化严重程度呈高度正相关
    (3) 试剂:
    1) 标准品:6瓶浓度分04080160320640ugL
    2) PBS 1瓶
    3) 125I hpc III 2瓶
    4) hpc III抗体3瓶
    5) 沉淀剂 3瓶 二抗PEG组成前应混匀
    (4)操作步骤:
    排列放免 T NSB 标准 标 质控
    测血清 100
    质控血清 100
    标准液 100
    PBS 200
    HPC III抗体 200 200 200
    4摄氏度放置18~24时
    125IhpcIII 100 100 100 100 100
    4~10摄氐度放置4~6时
    分离剂 500 500 500 500
    室温放置30分钟3500rpm离心20分钟吸(1)弃清测沉淀物放射性计数(B)
    (5)正常参考值:
    〈120ugL
    (6)注意事项:
    1)反应时间定求进行
    2)离心分离沉淀48摄氏度
    C39逶明质酸放免测定标准操作规程
    (1) 产:
    海海军医学研究生物技术中心
    (2) 原理途:
    血清HA肝皮细胞摄取分解少量分子肾球滤肝肾功受损时血清HA升高病变加剧呈升高趋势HA预测肝硬化优现常规肝功指标测定盒采放免分析法第二抗体作分离剂测定量值范围0800
    ngml
    (3) 试剂:
    1) HA标准6瓶(050100200400800ngml)
    2) 试剂 1瓶
    3) 125IHA 1瓶 冻干品10ml生理盐水溶解
    4) 第第二抗体瓶冻干品10ml生理盐水溶解
    5) 质控血清 前加05ml双蒸水溶解分装冷冻保存允许范围:
    L8581165ngml
    M15812158ngml
    H38935268ngml
    (4)操作步骤:
    试剂 NSB 标准 样品
    标准 150 50
    样 50
    试剂1 100 100
    125IHA 100 100 100
    混匀37度水浴60分钟
    抗 100 100 100
    混匀37度水浴30分钟
    二抗 100 100 100
    混匀37度水浴30分钟3500转分离心15分钟弃清液测沉淀CPM
    (5)数处理:
    HA标准浓度横座标BB0坐标LogitLog方式拟合标准曲线
    (6)正常参考:
    2110ngml
    C40Ⅳ型胶原放免测定标准操作规程
    (1) 产:
    海海军医学研究生物技术中心
    (2)原理途:
    Ⅳ型胶原基底膜网状结构组成成份反映胶原合成纤维化程度正相关测定采竞争放射免疫分析方法固相第二搞体作分离剂测定血清体液组织中ⅣC含量
    (3)试剂
    1)ⅣC标准液7瓶(0204080160320640ngml)
    2)125IⅣC1瓶冻干品加105ml缓液溶解
    3)抗ⅣC血清:1瓶冻干品加105ml缓液溶解
    4)第二抗体:1瓶前充分混匀
    5)缓液:1瓶加双蒸水10倍稀释备
    (4)操作步骤(单位:ul)
    试剂 NSB 标准液 标
    标准 200

    标 200
    125IⅣC 100 100 100
    抗血清 100 100
    缓液 200
    混匀4摄氏度反应>16时
    第二抗体 1000 1000 1000
    4摄氏度反应约60分钟离心(3500rpm10分钟)弃清测定沉淀放射性Logitlog法拟合
    (5)参考值:
    4977±150ugL
    (6)注意事项:
    1. 溶液操作宜10度宜低温离心
    2. 试剂盒效期月
    C41皮素放免测定标准操作规程
    (1) 产:
    东亚免疫技术研究 中国北京
    (2) 途:
    测定血浆体液皮素解血皮功
    (3) 样品收集:
    静脉血2ml注入含10EDTA二钠30ul抑肽酶40ul试中混匀4 摄氏度3500rpm离心10min分离血浆20摄氏度保存二月测定前室温复融次4摄氏度3500rpm离心取清测定
    (4)试剂:
    1)缓液1瓶:双蒸水稀释50ml
    2)ETAb1瓶加缓液11ml
    3)125IET1 瓶:加缓液11ml
    4)ET标准5瓶:前加PBS1ml溶解浓度:0601805001000pgml
    5)抑肽酶10EDTAF二钠1瓶
    6)PR试剂:1瓶
    (5)测定步骤:
    ET RIA加样程序列(ul)
    T NSB S0 S1S6 U0 U
    缓液 200 100 100
    标准液 100
    样 品 100
    抗血清 100 100 100
    摇匀4摄氏度24h
    125IET 100 100 100 100 100 100
    摇匀4摄氏度24h

    PR试剂 500 500 500 500 500
    混匀室温15min 3500rpm离心20min测沉淀cpm
    (6)正常血浆参考值:
    X±SD:508±758pgml
    C43肺肿瘤标记CY211放免测定标准操作规程
    (1) 产:
    天津新传生物技术限公司(022)8343217300221
    (2) 途:
    CYFRA2111评价肺癌恶性良性肺部疾病
    (3)试剂:
    1) KS191鼠单克隆抗体包珠:100粒稀释液1瓶:100ml
    2)标准品:5瓶冻干品1 ml双蒸水复溶浓度分 03152550ngml
    3) 125I标记BM1921鼠单克隆抗体2瓶5ml瓶
    4) 质控血清:2瓶分1ml 双蒸水复溶高值约13ngml低值约5ngml
    (4)操作步骤:
    1) 反应盘孔分加入01ml标准品质控血清测血清
    2) 孔加入粒包珠
    3) 孔加入01ml251I标记物
    4) 混匀28℃应约20时
    5) 动洗珠器洗4次次2ml水
    6) 放免测量器测量放射强度
    (5)参考值:
    CYFRA211肺良恶必性疾病界值33ngml

    C45T3 T4 TSH FT3 FT4 测定标准操作程序(SOP)

    1.目
    ⑴检查甲状腺功
    ⑵检查垂体—甲状腺轴调节关系
    ⑶:垂体分泌功等
    2.该SOP变动程序
    SOP试剂说明仪器操作程序修改原致改动化学发光免疫测定技术修改报科批准签字
    3.操作方法
    (1)样品收集处理
    样品类型:血清 少500μl
    保存方法:血清室温放置超8时28℃冷藏超48时超应20℃冷冻样品冷冻1次复融应彻底混匀
    (2)试剂 (试剂定标液质控品均BECKMAN公司提供)
    ⑴ T3 T4 TSH FT3 FT4液相固相试剂
    ⑵ 辅助试剂:T3 T4 释放试剂 洗试剂1
    ⑶ 非必需试剂:T3T4稀释液 稀释液1
    保存方法: 液相固相试剂28℃失效期室温累计超40时T3 T4释放试剂室温累计超8时
    (3) 定标
    新批号试剂时需先定标T3 T4 FT3 FT4 定标液A定标TSH定标液B定标事先标准曲线条码定标液浓度条码扫描入仪器
    (4)质控
    定标必须做质控判断样品测值否准确做质控Ligand Plus 123质控物事先质控物浓度输入仪器
    (5)机检测
    参见ACCESS仪器标准操作程序
    4参考值
    T3 06181μgL
    T4 45109μgL
    TSH 03555 mIUL
    FT3 2342 ngL
    FT4 89180 ngL
    5相关技术指标
    项 目 T3 T4 TSH FT3 FT4
    测定范围 0280 5300 001150 020 1130
    灵敏度 02 5 001 05 10
    6.SOP处请详阅相关项目试剂说明书
    C46AFPCEAFerBROVGIPSA fPSA测定标准操作程序(SOP)
    1该SOP变动程序
    SOP试剂说明仪器操作程序修改原致改动化学发光免疫测定技术修改报科批准签字
    2.操作方法
    (1)样品收集处理
    样品类型:血清
    样品量: AFP少200μl血清()AFP CEA Fer GI 300μl
    PSA fPSA 300μl 肿瘤标志物全套 600μl
    保存方法:血清室温放置超8时28℃冷藏超48时超应20℃冷冻样品冷冻1次复融应彻底混匀
    (2)试剂 (试剂定标液质控品均AXSYM公司提供)
    ⑴ AFP CEA Fer BR OV GI PSA fPSA液相固相试剂
    ⑵ 辅助试剂:AFP:AFP洗试剂CEA:洗试剂1BR:BR预处理试剂
    ⑶ 非必需试剂:稀释液128CEA稀释液GI稀释液
    保存方法:液相固相试剂28℃失效期室温累计超40时
    (3) 定标
    新批号试剂时需先定标详见附表事先标准曲线条码定标液浓度条码扫描入仪器
    项 目 AFP CEA Fer BR OV GI PSA fPSA
    定标液 D D C G X W D fPSA
    (4)质控
    定标必须做质控判断样品测值否准确做质控Tumor Marker Plus 12质控物事先质控物浓度输入仪器
    (5)机检测
    参见AXSYM仪器标准操作程序
    3参考值
    AFP 0200μgL
    CEA 050μgL
    Fer 男性22322μgL 女性10291μgL
    BR 0350Uml
    OV 34686 Uml
    GI 0370Uml
    PSA 040μgL
    fPSA 025μgL
    fPSAPSA 01610
    1 相关技术指标
    项 目
    AFP
    CEA
    Fer
    BR
    OV
    GI
    PSA
    fPSA
    测定范围
    101000
    05100
    051650
    35450
    17900
    042500
    006135
    0120
    灵敏度
    10
    05
    05
    35
    17
    042
    006
    01

    5.SOP处请详阅相关项目试剂说明书
    C47HCGPRLFSHLHE2P(孕酮)T(睾酮)HGH测定标准操作程序(SOP)
    1该SOP变动程序
    SOP试剂说明仪器操作程序修改原致改动化学发光免疫测定技术修改报科批准签字
    2.操作方法
    (1)样品收集处理
    样品类型:血清
    样品量: hCG少200μl血清()PRL 200μl性激素全套500μl
    保存方法:血清室温放置超8时28℃冷藏超48时超应20℃冷冻样品冷冻1次复融应彻底混匀
    (2)试剂 (试剂定标液质控品均BECKMAN公司提供)
    HCGPRLFSHLHE2P(孕酮)T(睾酮)HGH检测试剂
    (3) 定标
    新批号试剂时需先定标详见附表事先标准曲线条码定标液浓度条码扫描入仪器
    (4)质控
    定标必须做质控判断样品测值否准确做质控事先质控物浓度输入仪器
    (1) 机检测
    参见ACCESS仪器标准操作程序
    3参考值
    hCG 0100IUL
    PRLFSHLHE2PTHGH详见报告单附参考值表
    4相关技术指标
    项 目 hCG PRL FSH LH E2 P T
    测定范围 201000 03200 03200 007200 101000 0140 0115
    灵敏度 20 03 03 007 100 01 01
    5.SOP处请详阅相关项目试剂说明书
    C48铁蛋白叶酸VitB12测定标准操作程序(SOP)
    1该SOP变动程序
    SOP试剂说明仪器操作程序修改原致改动化学发光免疫测定技术修改报科批准签字
    2.操作方法
    (1)样品收集处理
    样品类型:血清少400μl严重溶血标拒收
    保存方法:血清室温放置超8时28℃冷藏超48时超应20℃冷冻样品冷冻1次复融应彻底混匀
    (2)试剂 (试剂定标液质控品均BECKMAN公司提供)
    铁蛋白叶酸VitB12检测试剂
    (3)定标
    新批号试剂时需先定标详见附表事先标准曲线条码定标液浓度条码扫描入仪器
    (4)质控
    定标必须做质控判断样品测值否准确做质控事先质控物浓度输入仪器
    (5)机检测
    参见ACCESS仪器标准操作程序
    3参考值
    铁蛋白 男性:22322μgL 女性:10291μgL
    叶酸 26200μgL
    VB12 211911ngL
    4相关技术指标
    项 目 铁蛋白 叶酸 VB12
    测定范围 051650 02520 202000
    灵敏度 05 025 20
    5.SOP处请详阅相关项目试剂说明书
    C49CKMBcTnIMYO测定标准操作程序(SOP)
    1该SOP变动程序
    SOP试剂说明仪器操作程序修改原致改动化学发光免疫测定技术修改报科批准签字
    2.操作方法
    (1)样品收集处理
    样品类型:血清少300μl严重溶血标拒收
    保存方法:血清室温放置超8时(cTnI超4时)28℃冷藏超48时(cTnI超24时)超应20℃冷冻样品冷冻1次复融应彻底混匀
    (2)试剂 (试剂定标液质控品均BECKMAN公司提供)
    CKMBcTnIMYO检测试剂
    (3) 定标
    新批号试剂时需先定标详见附表事先标准曲线条码定标液浓度条码扫描入仪器
    (4)质控
    定标必须做质控判断样品测值否准确做质控事先质控物浓度输入仪器
    (2) 机检测
    参见ACCESS仪器标准操作程序
    3参考值
    CKMB 05μgL
    CTnI 0015μgL
    MYO 0110μgL
    4相关技术指标
    项 目 CKMB cTnI MYO
    测定范围 018300 00150 01000
    灵敏度 018 001 3
    5.SOP处请详阅相关项目试剂说明书
    C50IgE测定标准操作程序(SOP)
    1该SOP变动程序
    SOP试剂说明仪器操作程序修改原致改动化学发光免疫测定技术修改报科批准签字
    2.操作方法
    (1)样品收集处理
    样品类型:血清少200μl
    保存方法:血清室温放置超8时28℃冷藏超48时超应20℃冷冻样品冷冻1次复融应彻底混匀
    (2)试剂 (试剂定标液质控品均BECKMAN公司提供)
    IgE检测试剂
    (3) 定标
    新批号试剂时需先定标IgEB定标液定标事先标准曲线条码定标液浓度条码扫描入仪器
    (4)质控
    定标必须做质控判断样品测值否准确做质控事先质控物浓度输入仪器
    (5)机检测
    参见ACCESS仪器标准操作程序
    3参考值
    IgE <1岁 0017806784nmolL
    14岁 0005144837nmolL
    510岁 0006450116nmolL
    1115岁 0024221730nmolL
    >15岁 0000048204 nmolL
    4相关技术指标
    项 目 IgE
    测定范围 00191382569
    灵敏度 00191
    5.SOP处请详阅相关项目试剂说明书
    C51高辛茶碱皮质醇卡马西苯巴妥 苯妥英钠丙戊酸安定环胞酶素标准操作程序
    1该SOP变动程序
    SOP试剂说明仪器操作程序修改原致改动化学发光免疫测定技术修改报科批准签字
    2.操作方法
    (1)样品收集处理
    样品类型:血清24时尿游离皮质醇留24时尿记录尿量10g硼酸防腐混匀
    采样时间:皮质醇抽血时间79AM35PM
    样量: 项目少需血清200μl24时尿游离皮质醇少需尿200μl
    保存方法: 血清尿室温放置超8时28℃冷藏超48时超应20℃冷冻样品冷冻1次复融应彻底混匀尿标复融混匀前需离心取清液测定

    Cyclo样预处理操作
    1 准确吸取Cyclo全血(振摇混匀)150ul沉淀中
    2 加50ul溶解剂注意气泡
    3 加300ul沉淀剂注意气泡盖紧盖子
    4 振荡器振摇10秒充分混匀
    5 离心10000转5分钟
    6 取清夜置样中机检测

    [注意事项]
    1抗凝剂常EDTA肝素
    (常EDTA抗凝制备:分取02molL EDTA2Na溶液50ul烘干)
    2沉淀剂非常稳定时保存防止蒸发
    3离心时间太短少5分钟
    4定标质控法操作

    (2)试剂 (试剂定标液质控品均BECKMAN公司提供)
    高辛茶碱皮质醇卡马西苯巴妥苯妥英钠丙戊酸安定环胞酶素检测试剂
    (3) 定标
    新批号试剂时需先定标详见附表事先标准曲线条码定标液浓度条码扫描入仪器

    (4)质控
    定标必须做质控判断样品测值否准确做质控事先质控物浓度输入仪器
    (3) 机检测 参见AXSYM仪器标准操作程序
    3参考值
    高辛 0820μgL
    茶碱 1020mgL
    皮质醇 79AM:43224μgL 35PM:3091666μgL
    24时尿游离皮质醇 2852137μg24h
    卡马西 410 mgL
    苯巴妥 1540 mgL
    苯妥英钠 1020 mgL
    安定 0100μgL
    丙戊酸 50100 mgL
    4相关技术指标
    项 目 高辛 茶碱 皮质醇 卡马西 苯巴妥 苯妥英钠
    测定范围 0150 0340 2750 018 01580 01540
    灵敏度 01 03 20 025 015 015
    5.SOP处请详阅相关项目试剂说明书
    C52DPD测定标准操作程序(SOP)
    1该SOP变动程序
    SOP试剂说明仪器操作程序修改原致改动化学发光免疫测定技术修改报科批准签字
    2.操作方法
    (1)样品收集处理
    样品类型: 第2次晨尿少1ml
    保存方法: 尿液避光保存28℃冷藏超48时超应20℃冷冻保存保存2年样品冷冻复融5次复融应彻底混匀离心取清液测定
    样品拒收标准:非第2次晨尿长时间暴露强光
    (2)试剂 (试剂定标液质控品均AXSYM公司提供)
    ⑴DPD液相固相试剂
    ⑵非必需试剂:DPD稀释液
    保存方法:液相固相试剂28℃失效期室温累计超40时
    (3) 定标
    新批号试剂时需先定标DPDP定标液定标事先标准曲线条码定标液浓度条码扫描入仪器
    (4)质控
    定标必须做质控判断样品测值否准确做质控DPD ABC质控物事先质控物浓度输入仪器
    (5)机检测 参见AXSYM仪器标准操作程序尿Cr送生化室测定
    3参考值
    DPDCr 男性:2354 女性:3074
    (DPD nmolL Cr mmolL)
    4相关技术指标
    项 目 DPD
    测定范围 0350
    灵敏度 5
    5SOP处请详阅相关项目试剂说明书

    敏原检测操作规程
    QD敏原检测原理:
    具敏抗原固化表面载体病血清培养起血清中特异性IgE(抗)会特异结合抗原特异结合抗体酶联二抗识加入显色剂二抗联酶显色剂橘黄色变成蓝色显色深度血清中特异性IgE成正定性半定量检测血清中特异性IgE浓度
    检测盒组成
    1. QD敏原检测板:5支支检测板中色检测片段间均白色隔离片段分开色检测片分结合种敏原例:猫狗毛皮屑螨虫屋尘霉菌种花草树鱼虾蟹牛奶蛋肉类花生豆麦等中二片分阳性阴性反应片鉴定终结果性
    2. QD洗涤缓液(试剂1):瓶60毫升白色瓶
    3. QD酶联抗体(试剂2)瓶4毫升红色
    4. QD显色剂(试剂3):五瓶25毫升瓶橘黄色(发现试剂呈浅兰色应弃)
    5. 1毫升次性注射器:5支检测板末端连接吸入血清试剂清洗剂
    6. 10毫升次性塑料杯:5清洗操作程分装清洗剂
    7. 说明书份
    盒未提供需材料:水水槽吸水纸纱布定时钟
    二操作步骤
    操作前准备:(1)常规获1毫升病血清(2)测试前试剂检测板衡室温(2025℃)(3)操作时戴橡胶手套
    1. 检测板两端密封塞装1ml注射器推出液体然病血清吸入检测板发现检测板气泡排出重吸
    室温培养100分钟200分钟
    2. 推出检测板血样拉出注射器推杆1号试剂(白色瓶)灌满注射器试剂流装入注射器推杆水洗检测板尖端纱布吸水纸擦干尖端
    3. 吸入二号试剂(红色)检查气泡室温培养100分钟200分钟
    4. 注射器推出检测板试剂拉出注射器推杆1号试剂灌满注射器试剂流(步骤1)装入注射器推杆少量1号试剂装入塑料杯注射器吸入检测板拉出注射器推杆试剂流(步骤2)重复洗涤步骤12次1号试剂灌满注射流(洗五次)装入注射器推杆水洗检测板尖端纱布吸水纸擦干尖端
    5. 吸入三号试剂(橘黄色)检查气泡室温培养30分钟观测结果
    试剂盒储存注意事项
    1. 试剂盒应保存28℃仅供体外检测失效期产品请勿
    2. 试剂盒前冷藏环境中取出应先置室温衡方
    3. 检测板重复供样品时
    4. 操作均应说明书步骤进行固相酶联反应中抗原抗体反应逆严格注意加样序颠倒
    5. 检测操作程3次加样步骤加标(血清)加酶联抗体加显色剂次加样均检测板相连接1毫升注射器稳吸入般加样注射器接口加入标酶联抗体应仔细检查发现检测片段表面气泡应试剂排回试剂瓶直接重新加样
    6. 检测程洗涤达分离游离结合酶标记物目通洗涤清残留检测板中没固相抗原抗体结合物质反应程中吸附固相载体干扰物质(蛋白质等)洗涤检测操作关键步骤防止清彻底导致游离酶残留造成非特异性显色操作者应严格求洗涤





    D1D二聚体
    [原理]
    抗D二聚体单克隆抗体标记固相载体胶乳颗粒胶乳颗粒抗体结合物中加入受检血浆血浆中含05mgLD二聚体胶乳颗粒 发生凝集反应
    [标试剂准备]
    0109M枸椽酸钠抗凝剂血液19混匀2500g 10分钟离心 试剂室温衡15分钟摇匀
    [操作]
    黑色纸片圈放入15ul未稀释样血浆阳性阴性血浆次圈加摇匀胶乳试剂15ul(标等量)塑料棒搅匀轻轻摇动纸片2~3分钟观察未稀释血浆呈阳性继续样标稀释液作倍稀释
    [结果]
    根阳性结果倍值作半定量结果报告
    [床意义]
    DIC时血浆D二聚体明显升高呈阳性反应诊断DIC重D二聚体原发性纤溶症时正常继发性纤溶亢进显著增高二者鉴重指标外型白血病急性心肌梗死脑血疾病肺脏疾病外科手术等均见血浆D二聚体水增高
    D23P试验
    [原理]
    凝血酶作纤维蛋白原释出纤维蛋白肽AB转变纤维蛋白单体(FM)纤维蛋白纤溶酶降解产生fdpFMfdp形成溶性纤维蛋白单体复合物
    硫酸鱼精蛋白乙醇该复合物中FM游离然行聚合呈肉眼见纤维状絮状胶冻状反映fap尤碎片×存
    [操作]
    1 取05ml贫含血板枸椽酸抗凝血浆放入试中
    2 置37℃水浴中3min
    3 加10gL硫酸鱼精蛋白溶液005ml混匀置37℃水浴中15min立观察结果
    [结果判断]
    阴性:血浆清晰变溶解物产生
    阳性:血浆中细粗颗粒沉淀出现纤维蛋白丝(网)胶冻形成
    [床意义]
    3P阳性:见DIC早期中期出血样置冰箱呈假阳性
    3P阴性:见DIC晚期原发性纤溶症
    D3骨髓细胞学检查
    骨髓细胞学检查应抽取骨髓少量制成薄片采骨髓粒丰富制片厚薄均匀涂片瑞氏—姬姆萨混合染色显微镜检查细胞质量变化
    [试剂]
    1) 瑞氏染色液:瑞氏染粉18置洁净干操研钵加甘油35ml研磨片刻瑞氏染粉充分溶解加甲醇约50ml继续研磨片刻收集层染液残余部分加甲醇50ml研磨:收集层染液重复次甲醇洗研钵倒入瓶加甲醇500mi开始周应常振摇染色液染色液存放时间越长染色效果越佳外研磨时染粉应先加甘油免染粉研磨程中结成块更易溶解染粉未研磨配成染液宜作骨髓片染色
    2) 姬姆萨浓缩染液:姬姆萨染粉3.8g放入纯甘油250ml中置60℃水浴2时溶解力口60℃预热甲醇250m1混匀室温棕色瓶保存配数天长期保存
    3) pH6.5磷酸盐缓液:磷酸二氢钾1.5g磷酸氢二钠1.0g加蒸馏水5000ml纠正pH6.5
    4) 姬姆萨稀释液:取姬姆萨溶液50m1加pH6.5磷酸盐缓液500ml混匀液姬姆萨应液直接作涂片复染作瑞氏稀释液时取液1020mL加蒸馏水100ml混匀
    [操作]
    4. 骨髓取材:
    取材部位胸骨棘突髂骨前嵴嵴等两岁孩胫骨成常取髂棘部位穿刺方便病易接受.穿刺前求严格消毒杜绝细菌感染穿刺室紫外线消毒皮肤消毒外应注意穿刺包手套消毒时间否期戴手套熟练避免手套接触消毒物品穿刺针进入髓腔时常脱空感吸取前针筒应留1m1左右空隙否髓液快进入针筒空隙法取出针筒水份消毒纱布擦干免溶解细胞吸液量般控制0.2m1左右吸量易外周血稀释部分病干抽吸出量太少时针头立拔出边抽边调节针头深浅边抽边缓慢外移针头针头残留髓液量推出制片减少病痛苦
    5. 涂片:
    选两块粒较厚薄均匀骨髓片然干燥较厚头端髓膜写病姓名日期BM标记加瑞氏染色液8—12滴吸球吹吸布满整张涂片约半分钟加姬姆萨稀释液510滴吸球吹吸气两液充分混匀金黄色油膜出现染色效果更佳染色时间般1020分钟夏天缩短冬天延长洗时应放玻片流水缓慢洗外手玻片处会染料残留应更换手位置予洗染色太淡涂片姬姆萨稀释液复染3分钟着色太深时瑞氏
    染液滴加涂片立洗实验室摸索出染色验量做次性染色成功没姬姆萨染液单位蒸馏水加少量天青(美蓝)代染色效果没前者染涂片然干燥切忌加热烘干否细胞退色影响观察
    6. 染色
    选两块粒较厚薄均匀骨髓片然干燥较厚头端髓膜写病姓名日期BM标记加瑞氏染色液8—12滴吸球吹吸布满整张涂片约半分钟加姬姆萨稀释液510滴吸球吹吸气两液充分混匀金黄色油膜出现染色效果更佳染色时间般1020分钟夏天缩短冬天延长洗时应放玻片流水缓慢洗外手玻片处会染料残留应更换手位置予洗染色太淡涂片姬姆萨稀释液复染3分钟着色太深时瑞氏
    染液滴加涂片立洗实验室摸索出染色验量做次性染色成功没姬姆萨染液单位蒸馏水加少量天青(美蓝)代染色效果没前者染涂片然干燥切忌加热烘干否细胞退色影响观察
    [分析点]
    (1) 骨髓片观察容
    1) 肉眼观察涂片骨髓粒脂肪滴制片染色否良
    2) 低倍镜观察骨髓增生情况(分5级)标否稀释计数全片巨核细胞解特殊异常细胞
    3) 高倍镜观察巨核细胞形态巨核细胞分类计数(般分类巨核细胞应少25)进步观察低倍镜疑细胞
    4) 油镜明确低高倍镜发现异常疑细胞性质作骨髓细胞分类全面细胞形态分析
    骨髓细胞分类计数正常范围较难制定分析骨髓骨髓细胞变化基础结合床表现血综合性分析单例作否正常标准外体差异穿刺否成功分类部位等会影响细胞分类结果
    (2)正常骨髓指标分类原:

    1.正常骨髓指标:

    (1)
    骨髓增生程度呈增生活跃

    (2)
    核细胞量中等粒细胞较丰富

    (3)
    涂片脂肪滴中老年者见少量脂肪滴

    (4)
    粒红细胞例约2—4:1粒细胞占50%淋巴细胞约占20%(高达40%)单核细胞浆细胞网状细胞般<3%

    (5)
    巨核细胞1.5×3cm2涂片找20—10020排标稀释原外结合床考虑巨核细胞减少产血板巨核细胞应少总巨核细胞1/3成血板易见

    (6)
    嗜酸性粒细胞5%嗜碱性粒细胞<1%

    (7)
    原始细胞中原细胞原红细胞均2%

    (8)
    偶尔见皮细胞组织嗜碱细胞组织嗜酸细胞成骨细胞破骨细胞脂肪细胞等

    2.观察骨片应注意事项:


    (1)
    介两阶段系细胞应划划原分类分类曲线出现明原畸形分布时介阶段细胞适调整阶段性

    (2)
    般病骨髓片中偶见疑似原始单核细胞原始淋巴细胞(外)原始浆细胞作报告原始粒细胞中减少分类出现混乱

    (3)
    骨髓细胞分类计数应少200否分类误差太较难反映细胞实分布情况

    (4)
    书写报告时粒红巨三系细胞例形态变化分描写特殊变化情况尤床诊治价值细胞应加说明骨髓报告结应结合床实验室检验加考虑尚明确结果须描写容意结

    (5)
    骨髓片出现列情况提示标全部部分稀释



    骨髓粒少量骨髓粒粒细胞丰富涂片核细胞量减少



    外周血中血板量正常增涂片巨核细胞量减少



    成熟阶段粒细胞例明显增高核细胞量减少

    (6)
    怀疑骨髓转移性肿瘤时涂片否稀释应完涂片尤注意涂片头尾两侧部位否成堆排列肿擅细胞
    常见血液病骨髓诊断点:
    1)缺铁性贫血(IDA):
    成熟红细胞体积偏幼红细胞呈现核固缩胞浆量少着色偏蓝等核老浆幼核浆发育衡现象外铁明性含铁细胞减少类贫血常见床常胃病痔疮月等病史
    2)巨幼细胞性贫血(MA):
    成熟红细胞体积偏见巨红细胞幼稚红细胞常呈核染色质疏松浆量增着色偏红等核幼浆老核浆发育衡现象找巨晚幼粒杆状核粒细胞分叶核粒细胞分叶偏巨核细胞核分叶增出现核巨核细胞巨核细胞浆易见核染色质脱落核体(该类细胞约占巨核细胞20—30%)床常胃肠手术营养良妊娠等情况外周血常出现3系减少
    3)溶血性贫血(HA):
    骨髓幼红细胞显著增生总例常50%中晚幼红细胞增生见球形红细胞椭圆形红细胞等特殊形态变化病床资料诊断尤重病常出现黄疽尿胆原间接胆红素增高网织红细胞常5%急性溶血时外周血出现幼红细胞抗球蛋白试验酸溶血试验常出现阳性
    4)生障碍性贫血(AA):
    骨髓粒呈空架状脂肪球增粒红巨三系细胞减少中巨核细胞减少更明显成熟淋巴细胞例相增高网状细胞浆细胞嗜碱组织细胞常偏血3系减少脾脏肿
    5)骨髓增生异常综合征(MDS):
    红细胞见核核碎裂巨幼样变成熟粒细胞分叶减少(增)粒细胞脑浆颗粒减少核浆发育衡易见核颗粒巨核细胞微型巨核细胞类病外周血易见幼稚红细胞幼稚粒细胞成熟单核细胞常增床抗贫血治疗效果差诊断MD3骨髓外周血中原始细胞少否环状铁粒幼红细胞分难治性贫血(RA)难治性贫血伴环状铁粒幼红细胞增(RAS)伴原始细胞增难治性贫血(RAEB)转化中原始细胞片增难治性贫血(RABBT)4型授性粒单细胞性白血病(CMMl)已属白血病列入MDS
    RA:外周血原始细胞<1%骨髓原始细胞<5%
    RAS: RA骨髓中环形铁粒幼细胞铁粒细胞15%
    RAEB: 外周血原始细胞<5%骨髓原始细胞520%
    良AEBT:外周血原始细胞>5%骨髓原始细胞2030%
    6)慢性粒细胞性白血病(CML):
    粒系极度增生晚幼粒细胞杆状粒细胞增生嗜碱性粒细胞易见血片中白细胞增出现中晚幼粒细胞嗜碱性粒细胞例增高床出现乏力巨脾等碱性磷酸酶(NAP)积分明显减低
    7)慢性淋巴细胞性白血病(CLL):
    成熟淋巴细胞明显增例占50%原始幼稚淋巴细胞少见出现异型淋巴细胞系细胞增生情况血白细胞增高成熟淋巴细胞明显增发病年龄较常伴乏力脾脏肿
    8)急性淋巴细胞性白血病(ALL):
    区分ALL急性非淋巴细胞性白血病(ANLL)床药病预重意义报告时应慎重ANLL分M0M1M2M3M4 M5 M6M7等亚型 M0极低分化髓性白血病诊断M7样结合免疫标记电镜组化ALL分L1L2L3 3亚型亚型特点见表急非淋巴细胞相原始幼稚淋巴细胞体积胞浆量少较
    透明颗粒奥氏体核染色质粗排列致密着色深紫红色核仁少组织化学染色POX(SB)阳性率<3%型白血病童见预较
     
    L1
    L2
    L3
    细胞
    细胞
    细胞
    细胞较致
    核形
    规偶凹陷折叠
    规偶凹陷折叠

    核染色质
    细分散结构较致
    细分散粗浓集结构致
    粗点状均均致
    核仁
    清楚少见
    清楚1
    明显1泡状
    胞浆量

    定常较

    胞浆嗜碱性
    轻中度
    定细胞深染
    深蓝
    胞浆空泡
    定较少

    常明显蜂窝状

    9)急性粒细胞性白血病(AGL):
    原始粒细胞异常早幼粒细胞中性中幼粒细胞显著增白血病细胞浆较丰富着色灰蓝见较粗非特异性颗粒(单核细胞颗粒常较细)易见粗奥氏体核染色质粗颗粒状排列较规核仁清晰数目1—4急性粒细胞性白血病分Ml M:(包括M:.M2b亚型) M:(包括M3nM:b亚型)3型 M骨馈原始粒细胞≥90%(非红系分类NEC)M2l骨髓原始粒细胞>30<90%(NEC)单核细胞<20%早幼粒阶段细胞>10%M2b异常中性中幼粒细胞增生该类细胞核浆发育衡见核仁数量>30%原始早幼阶段细胞时增M早幼粒细胞布满粗非特异性颗粒该类细胞核形态规见外浆M3b早幼粒细胞布满细非持异性颗粒形态变化M30该类白血病细胞数量>30%(NEC) POX(SB)染色常强阳性
    10)急性单核细胞性白血病(AMOL):
    该型白血病细胞脑浆丰富着色灰蓝细散颗粒奥氏体较细长核形态规外折切现象核染色质呈细沙状排列成疏松租网状着色偏淡核仁较数量少根白血病细胞分化程度分M5tM5b型 M50骨髓
    原始单核细胞>80%(NEC)未分化型 Msb骨髓原始单核细胞<80%(NEC)原始幼稚单核细胞>30%(NEC)部分分化型粒细胞区组织化学染色非特异性脂酶(NSE)阳性受氟化钠(NaF)抑制粒细胞NSE阴性(弱阳性)受NaF抑制
    11)真性红细胞增症(PV):
    红系增生活跃幼红细胞形态正常期幼红细胞值程度增高 Hb>180 g/L红细胞量>7×1012L皮肤粘膜呈暗红色脾肿
    12)红(白)血病(M6):
    骨髓中红系>50%伴 形态学异常骨髓中原始粒细胞(原始幼稚单核细 胞)>30%(NEC)外周血中原始粒细胞(原始幼稚 单核细胞)>5%骨髓原始粒细胞(原幼单核细胞)>20% (NEC)单纯原始红细胞早幼红细胞显著增者
    13)巨核细胞白血病(M7):
    骨髓原始巨核细胞>30% 该类细胞原粒原淋细胞胞浆丰富常伪足状突 起型易ALL混淆诊断时结合电镜组化免疫标记 测定
    14)粒细胞缺乏症:
    粒细胞显著减少早期阶段中性 粒细胞示左移现象典型发作时阶段中性粒细 胞极度减少阶段红巨两系细胞常明显改变 床常伴感染高热等症状外周血中性粒细胞极度减少 消失 
    15)粒细胞减少症:
    粒系统增生良成熟障碍部分 粒细胞出现空泡中毒性颗粒外周血中性粒细胞绝值 常(1—1.8)×109L间感染化学物理损伤 造血系统疾病巨脾胶原性疾病等致
    16)原发性(免疫性)血板减少性紫癜(ITP):
    骨髓巨核细胞量明显增少数病正常轻度减少产血 细胞瘤细胞分布常弥漫性引起广泛骨路破坏 骨髓功抑制核细胞量常偏少床常骨痛史X 片示骨质虫蚀样改变免疫球蛋白测定异常成熟红细胞 涂片呈串钱状排列血沉明显加快部分病尿中
    检 出周蛋白
    17)急性粒单核细胞性白血病(AMML):
    白血病 时含原始早幼粒细胞原始幼稚单核细胞根两系血板巨核细胞例减低病常出现脾肿血板抗体增 高皮肤出血点等
    18)传染性单核细胞增:
    骨髓中见淋巴细胞稍增少量异形淋巴细胞表现血片中成熟淋巴细胞4090%间中数细胞胞浆增空泡异形淋巴细胞该类细胞易误认单核细胞原始细胞核变化胞浆变化结合床发热脾肿青少年见等作出判断 
    19)脾功亢进:
    骨髓增生明显活跃粒红巨3系均示明显增生粒系成熟障碍巨核细胞系产血板巨核细胞减少晚幼红细胞例偏高外周血两系三系减少脾脏肿
    20)骨髓纤维化:
    骨髓核细胞偏少骨髓血片中均见泪滴状红细胞骨髓穿刺时常干抽床脾明显肿贫血外周血易见幼稚红细胞幼稚粒细胞病诊断应结合骨髓活检
    21)纯红细胞生障碍性贫血(PRAA):
    幼红细胞显著减少(常5%)粒系巨核细胞系明显异常外周血中单纯红细胞减少血红蛋白降低白细胞血板正.常略低网织红细胞明显减低病常免疫功紊乱关
    22)发性骨髓瘤(MM):
    原始浆细胞幼稚浆细胞成熟浆细胞明显增该类细胞恶性浆细胞骨髓瘤白血病细胞例分M4aM4bM4cM4EO4型m4a原始早幼粒细胞原始单核细胞加幼稚单核细胞>20%(NEC) M4b原始幼稚单核细胞增生原始.粒细胞早幼粒细胞>20%(NEC) M4c原始细胞具粒系细胞特征具单核细胞特征细胞>30%(NEC)型细胞形态较难识结合免疫标记测定 M4EO述特征外嗜酸性粒细胞占5—30%
    23)骨髓转移性肿瘤:
    成堆出现肿瘤细胞特征该类细胞核染色质疏松核仁脑浆量少胞界常清转移骨髓神母细胞瘤见菊花状排列类病骨韶核细胞量常明显减少伴标稀释找坏死成分病涂片需找许张发现堆集肿瘤细胞床常骨痛低热消瘦等病史
    24)恶性组织细胞病:
    找较吞噬细胞淋巴样单核样组织细胞外见巨恶性组织细胞核巨组织细胞该类细胞体积(达3040um)胞浆着色深蓝核染色质粗着色深紫红色核仁血3系减少持续高热脾肿 NAP积分减低部分恶性组织细胞恶性淋巴细胞瘤相鉴
    25)明原发热病骨髓:
    常反应性骨髓报告特征粒细胞成熟障碍毒性变网状细胞增时见少量吞噬型网状细胞淋巴样单核样组织细胞易见浆细胞单核细胞特殊情况找疟原虫伤寒特征细胞等类病常类微生物(细菌病毒立克次体等)感染免疫系统疾病致控制病骨髓然转病发热恶性淋巴瘤致找淋巴母细胞(淋巴瘤细胞)诊断应结合病理活检确定
    D4氧化物酶(POX)染色
    [原理]
    粒细胞单核细胞脑浆含氧化物酶助受体(联苯胺)脱氢催化氧化氢释放新生氧受体氧化成联苯胺蓝亚硝基铁氰化钠结合成稳定蓝色颗粒沉淀脑浆
    [试剂]
    1.联苯胺溶液:联苯胺0.38加36%亚硝基铁氰化钠溶液1ml取95%乙醇加100ml水浴加热助溶贮棕色瓶中保存数月工作时应心溶液污染皮肤
    2稀双氧水:前30%双氧水蒸馏水1:80稀释
    [操作]
    (1)新鲜干燥血片骨髓片加联苯胺液5—8滴布满整张涂片固定1—2分钟
    (2)加等量稀双氧水吸球吹吸两液混匀作4—8分钟
    (3)涂片流水洗干瑞氏染液复染复染时间约30分钟
    [结果观察]
    报告阳性程度阳性细胞%
    阴性:蓝色颗粒蓝色物质
    弱阳性:蓝色颗粒量少细相(十)
    阳性:蓝色颗粒量粗细相(++)
    强阳性:细胞充满粗紧密蓝色颗粒相(+++)
    [床意义]
    (1)粒系统细胞早期原粒细胞阴性外晚期原粒细胞阶段细胞均含程度蓝色颗粒嗜酸性粒细胞颗粒更粗呈深蓝色嗜碱性细胞阴性
    (2)单核细胞中早期原始阶段外皆呈弱阳性反应颗粒细稀疏
    (3)某网状细胞吞噬细胞呈程度氧化物酶阳性反应 
    (4)淋巴细胞氧化物酶染色皆阴性
    (5)该化学染色区急性淋巴细胞性白血病急性非淋巴细胞性白血病关键化学染色FAB分型规定前者阳性率<3%
    [附注]
    (1)联苯胺溶液明显变色发绿应重新配制
    (2)亚硝基铁氰化钠溶液前取0.368溶解1ml蒸馏水中加热助溶应
    (3)双氧水浓度高抑制酶作双氧水浓度太高制片太厚涂片洗净粒细胞破坏造成假阳性涂片中粒细胞见阳性颗粒红细胞呈棕色绿色示双氧水浓双氧水加血片产生气泡示失效应重做试验
    (4)涂片两液混匀时动作轻免阳性颗粒吹散阴性细胞 
    (5)制片太厚涂片新鲜
    D5苏丹黑B(SBB)染色
    [原理]
    苏丹黑种溶解脂肪中色素细胞中性脂肪碘脂类固醇着色
    [试剂]
    (1)40%福尔马林
    (2)苏丹黑B备液取苏丹黑B粉剂068溶200ml纯酒精中研钵慢慢研溶室温搁置12天充分溶解冰箱保存1年苏丹黑B苏丹黑代
    (3)缓液苯酚16g加纯酒精30m1碘酸氢二钠(Na:HPO12HIO)0.38加蒸馏水100m1两份溶液相混制成保存1年
    (4)染色液苏丹黑B备液30m1缓液20ml两液混合滤配成保存数周
    [操作]
    (2) 血片骨髓片干福尔马林蒸气固定10分钟(直接染色)
    (3) 浸入苏丹黑B染液中37℃水浴3060分钟
    (4) 求出立70%酒精洗片约10秒钟水洗
    (5) 然干燥瑞氏染液复染2030分钟
    [结果观察]
    阴性:胞浆棕色颗粒
    弱阳性:细分布稀硫棕黑色颗粒
    强阳性:颗粒粗呈黑色充满整细胞常盖核
    [床意义]
    (1)试验POX反应行POx染色求涂片新鲜苏丹黑B染色求床意义POX染色相似相互弥补
    (2)尼曼匹克细胞高雪细胞苏丹黑B染色均呈阳性反应
    [附注]
    (1)苏丹黑B备液缓液保存放长时间避光密封减少蒸发染色液放盐水瓶中加盖保存染色欠理想时应时更换
    (2)70%酒精洗时时间太长否会阳性颗粒脱
    (3)冬天冰箱取出染色液应先放37℃水浴预温5分钟进行涂片染色
    (4)骨髓制片厚薄太厚涂片会影响细胞观察
    (5)放置时间较长涂片应选SBB染色宜作POX染色脂类较稳定存细胞中
    D6中性粒细胞碱性磷酸积分(NAP)染色改良GOmorI氏钙钴法
    [原理]
    细胞碱性磷酸酶碱性环境中水解β甘油磷酸钠释放磷酸根离子钙离子作生成磷酸钙沉淀硝酸钴作生成磷酸钻硫化铵作生成黑色稳定硫化钴原粒定位胞浆中
    [试剂]
    (1)孵育液20gL巴妥钠1Oml20gLMgSO4 2ml30g/L甘油磷酸铀10ml20g/LCaCl2 20ml加蒸馏水20ml配成Mg2+起酶激活作巴妥钠提供碱性环境PH8486
    (2)20gL硝酸钴重复长期保存
    (3)硫化铵溶液硫化铵1—2ml加水100ml配成
    (4)10g/L伊红作复染红细胞粒细胞核显红色利结果观察
    [操作]
    (2) 新鲜干燥涂片95%乙醇固定10分钟
    (3) 水洗涂片浸孵育液中37℃水浴4时水洗
    (4) 20gL硝酸钴溶液作4分钟
    (5) 流水充分洗净余硝酸钴浸入硫化铵溶液中3分钟
    (6) 流水洗硫化铵10gL伊红水溶液复染5分钟
    (7) 流水洗干燥油镜观察
    [结果观察]
    ():胞浆灰黑色成分
    (十):胞浆呈浅灰色部分胞浆灰色沉淀
    (++):脑浆呈均匀棕色棕黑色沉淀着色较淡
    (+++):胞浆充满黑色颗粒
    (++++):胞浆充满黑色颗粒沉淀掩盖核
    [报告方法]
    报告阳性率积分值
    阳性率:计数100成熟中性粒细胞求阳性细胞百分率 
    积分值:阳性反应细胞均换算1(十)强度总
    例:(十)20细胞(++)10细胞(+++)5细胞(++++)2细胞积分值(20×1)十(10×2)十(5×3)十(2×4)=63分
    [参考值]
    正常参考值实验室条件体差异等素影响变化较般界线阳性串2040%均积分20—60分
    [床意义]
    NAP列组疾病鉴:①恶性组织细胞病反应性网状细胞增②慢性粒细胞性白血病类白血病反应③病毒性感染细菌性感染④急性非淋巴细胞性白血病急性淋巴细胞性白血病⑥阵发性睡眠性血红蛋白尿生障碍性贫血5组病中前者病情者重更复杂NAP活性减低者相反 NAP活性升高分组鉴便记忆
    [附注]
    见NAP染色偶氮偶联法
    D7中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)染色偶氮偶联法
    [原理]
    中性粒细胞胞浆中碱性磷酸酶碱性环境中水解磷酸萘酚钠释放萘酚重氮盐作生成溶性色偶氮染料定位胞浆中
    [试剂]
    (1)固定剂40%甲醛25m1加水乙醇100m1
    (2)丙二醇缓液①贮备液(0.2molL 2—氨基2甲基13丙二醇液)2氨基2甲基13丙二醇10.5g蒸馏水加500ml②应液(005molL pH975)0.2molL贮备液25m1 o1molL盐酸 5m1蒸馏水加100m1
    (3)基质孵育液pH959.6(前时配制)α—磷酸萘酚钠20mg溶005molL丙二醇缓液20m1加坚牢蓝RR(坚牢紫酱)20mg混合滤纸滤立应
    (4)10gl亮绿
    [操作]
    (1) 新鲜血片骨髓片410℃固定剂固定30秒
    (2) 涂片滴加新配滤孵育液室温作1015分钟
    (3) 水洗10gL亮绿复染2分钟
    (4) 水洗晾干镜检
    [结果观察]
    ():阴性反应
    (+):胞浆中含少量紫黑色紫黑色颗粒红色物质
    (++):胞浆中含中等量紫黑色颗粒呈弥漫红色
    (+++):胞浆中丰富紫黑色颗粒弥漫较深红色
    (++++):极丰富紫黑色颗粒弥漫深红色
    [参考值]
    中性粒细胞碱性磷酸酶活性积分值10—50分
    [床意义]
    基改良Gomor氏钙钻法
    [附注]
    (1)涂片时测定固定干燥放冰箱4℃保存
    (2)甘油磷酸钠巴妥钠应前称取分0.380.28加蒸馏水20m1配成配 制β甘油磷酸钠宜久放
    (3)涂片孵育液出水洗直接加硝酸钻硝酸钴作应反复水洗免残留硝酸钻硫化胺作整涂片变黑造成假阳性
    (4)次染色时应时做1份感染思者血片阳性增加结果性片1次涂十片固定干燥放冰箱保存月
    (5)硫化胺试剂身黄色谈变深黄色应时更换试剂放置时间越长黄色越深说明硫量析出硫离子浓度减少易引起假阴性试验成功否关键操作时释放H2S较臭应注意室通风
    (6)送检时应送血片骨髓片少两张备复查涂片厚薄均匀太厚涂片会造成NAP积分偏高
    (7)生化碱性磷酸酶(AKP)混淆错送静脉血
    D8糖原(PAS)染色
    [原理]
    含乙二醇基糖类碘酸氧化产生醛基醛基雪夫氏试剂(Schiff’s液)作色品红变成紫红色染料沉积含糖类细胞
    [试剂]
    1.雪夫氏试剂:400m1蒸馏水煮沸C02逐渐加碱性品红2.08溶解冷60℃加1mm01HCl40ml加偏重亚硫酸钠(NaHSO:)4g次日加活性碳1.5g放置半天滤配液体色透明保存4℃冰箱中
    2.碘酸作液:碘酸1g溶蒸馏水100ml中取碘酸钾(1tI04)0698加蒸馏水100ml微加热溶解加浓硝酸0.3m1置冰箱中保存
    3.固定液:95%乙醇90ml甲醛10m1混匀
    4.20gl甲基绿:甲基绿2g溶100m1蒸馏水
    [操作]
    (1) 新鲜陈旧血片骨髓片固定液10分钟
    (2) 水洗数次片先唾液消化30分钟片中间蜡笔划界半做半做测定
    (3) 水洗滴加碘酸数滴涂片作10分钟水洗数次
    (4) 浸入Schiff's液30分钟
    (5) 水洗约2分钟然208甲基绿复染20分钟水洗晾干
    [结果观察]
    糖原细胞浆染成红色判断标准细胞异
    核红细胞判断:
    ():红色阳性颗粒浅红色物质
    (+):胞浆中少数分散红色阳性颗粒呈浅红色反应正常红细胞色深
    (++):胞浆中12浓红色颗粒环胞浆中110中等颗粒弥漫红色物
    (+++):脑浆中11—20红色中粗颗粒染深红色
    (++++):胞浆中红色颗粒明显增较粗致密呈紫红色物质
    淋巴细胞判断
    ():胞浆粉红色颗粒
    (十):胞浆110红色颗粒弥漫浅红色物质
    (++):10红色颗粒
    (+++):脑浆中含较红色颗粒块紫红色物质
    (++++):脑浆中含许红色颗粒块紫红色物质
    [床意义]
    (2) 营养性巨幼细胞贫血红(白)血病鉴前者正常红细胞核红细胞常阴性者呈强阳性反应
    (3) 鉴急性淋巴细胞性白血病急性非淋巴细胞性白血病前者原淋巴细胞幼稚淋巴细胞见块红色物质者原始阶段细胞常阴性
    (4) 高雪氏细胞呈强阳性尼曼匹克氏细胞呈微弱阳9.49g溶解1L水中80ml加0.07MKH2PO4(9.08g溶解1L水中)20ml混匀
    [附注]
    (1) Schiff’s液变红免细胞出现假阳性
    (2) 配制 Schiff’s液器具需十分清洁干燥配Schiff's液应棕色瓶暗处保存
    (3) 唾液水解明确阳性物质否糖原致水解阴性证明糖原物质阳性糖
    (4) 已染色标久置应早观察结果
    (5) 报告阳性率积分值计数方法NAP相
    D9酯酶染色中性非特异性脂酶(α—NAE)染色
    [方法学]
    酯酶染色方法根pH底物等作常酯酶染色法分两类特异性酯酶染色非特异性酯酶染色者分3类:①中性非特异性酯酶染色法:α—乙酸菜酚酯酶乙酸菜酚酯酶乙酸菜酚ASD酯酶②酸性非特异性酯酶染色法:α—乙酸菜酯酶α—丁酸菜酯酶②碱性非特异性酯酶染色法:α—丁酸菜酯酶中性非特异性酯酶染色单核细胞粒细胞白血病区重方法般实验室选法
    [原理]
    α—乙酸萘酚酯酶水解产生萘酚萘酚重氮盐偶联生成灰黑棕黑色沉淀物定位胞浆中
    [试剂]
    1.α—醋酸萘酯丙酮液:α—醋酸萘酯1g加丙酮蒸馏水混合液100m1溶解贮磨口带塞三角瓶4℃保存半年
    2pH7.4磷酸盐缓液:0.07MNa2HPO4(Na2HPO4)
    3.基质液:磷酸盐缓液82ml缓慢滴加α醋酸萘酯丙酮液1.6ml(滴速约分钟40滴)边加边力振摇根5分钟加坚牢蓝B80mg剧烈振摇10分钟立滤滤液两杯40ml
    4.氟化钠基质液:称取氟化钠(NaF)61mg加入述中基质液1杯混匀标标记
    [操作]
    (1)新鲜涂片两张分标NSENaF记号滴加10%甲醛生理盐水固定5分钟水轻轻洗心血膜脱落晾干
    (2)两张涂片时放入染色杯37℃水浴1时
    (3)取出水洗晾干镜检复染
    [结果观察]
    胞浆棕黑色灰黑色弥漫性颗粒沉淀者阳性细胞脑浆黄色者阴性
    [床意义]
    1.阳性:单核细胞组织细胞呈强阳性氟化钠抑制巨核细胞血板呈阳性早幼粒细胞白血病时早幼粒细胞阳性受氟化钠抑制
    2.弱阳性阴性:粒细胞淋巴细胞般阴性弱阳性氟化钠抑制
    3.床鉴:鉴急性单核细胞性白血病急性粒细胞性白血病前者NSE阳性受氟化钠(NaF)抑制者NSE阴性阳性受氟化钠抑制
    [附注]
    (1)坚牢蓝B氟化钠包分装干燥器保存
    (2)基质液配制程中振摇促基质溶解冬天配制时应适加温(置37℃水箱操作)基质液现配现保存滤应快试验免量沉淀物析出影响染色效果
    D10铁染色
    [原理]
    骨髓细胞外铁核红细胞中铁粒酸性环境亚铁氰化钾作呈阳性普鲁士蓝反应
    [试剂]
    (1)200gL亚铁氰化钾溶液溶液保存数周明显发绿较沉渣时应重配
    (2)浓盐酸取少量贮存油瓶备放置时间太长时未见烟现象应更换
    (3)铁染色应液加浓盐酸约20滴干净10mL离心(量杯)中加200g亚铁氰化钾溶液少量混合液变泥浊然缓慢滴加双铁氰化钾溶液’混浊消失液必滤离心应现配现保存
    [操作]
    (1)取骨髓粒较涂片1张铅笔写姓名时间蜡笔涂片体尾部划两条线防做细胞铁染料复染时液体渗出
    (2)应液盖满涂片室温作30分钟冬天适延长水轻轻洗免髓膜脱落
    (3)干蜡笔线中间区加0.5%伊红乙醇溶液复染2分钟水洗干
    (4)骨髓粒观察细跑外铁伊红复染区镜检红细胞铁
    [结果观察]
    1.细胞外铁:常低倍镜观察

    ():骨髓粒呈黄色蓝龟成分
    (+):粒网架中分布较淡蓝色成分
    (++):较蓝色铁粒深蓝色圆形珠
    (+++):肉.眼观察粒变蓝色镜许铁粒珠少数蓝色块
    (++++):肉眼观察粒明显变蓝色量铁粒珠许蓝色块
    2.细胞铁:
    计数100核红细胞记录阳性细胞(胞浆中蓝色颗粒)百分率时注意细胞铁颗粒数目染色深浅特应注意环状铁粒幼红细胞
    [参考值]
    细胞铁:变化较般O.10—0.80(10—80%)
    换算系数:%×001
    细胞外铁:(+)(++)
    [床意义]
    (1)缺铁性贫血外铁阴性:铁均6%铁粒细数目4—2类贫血约占总贫血病80%
    (2)铁粒幼细胞性贫血环形铁粒(环核排列粗铁粒5铁粒排列核周1/3)幼红细胞占总核红细胞15%
    (3)贫血铁染色情况巨幼细胞性贫血伴缺铁出现正常增
    [附注]
    (1)铁染色玻片杯子试剂等应避免受铁剂污染玻片事先应作铁处理放铁锈烤箱烘烤
    (2)亚铁氰化钾消混浊时反应较慢期滴加速度宜太快
    (3)反应时间宜太长否析出结晶会沉积涂片较难洗
    (4)伊红易结晶析出复染时间太长浓度太高均会影响细胞铁观察
    (5)铁染色作种简便常规组化助种贫血诊断鉴诊断涂片骨髓粒法观察外铁铁观察贫血诊断起决定性作
    D11酸性磷酸酶(ACP)染色
    [原理]
    酸性磷酸酶酸性环境中水解甘油磷酸钠产生磷酸根磷酸根硝酸铅作生成磷酸铅定位胞浆中磷酸铅硫化铵反应生成棕黑色硫化铅沉淀
    [试剂]
    1. 2molL乙酸缓液(pH4.7):1mol/L乙酸100ml加1molL氢氧化钠54.4ml加蒸馏水500mL
    2. 孵育液:乙酸缓液12m1508/L硝酸铅2m132g/L β—甘油磷酸钠4ml蒸馏水74ml
    3. 硫化铵溶液:硫化铵1—2ml加蒸馏水100m1
    4. 4.28/L甲基绿:甲基绿2g加蒸馏水100ml
    [操作]
    (1) 新鲜涂片滴加95%乙醇10滴固定10分钟
    (2) 水洗晾干放入孵育液37℃2—4时
    (3) 水洗数次置10gL硫化铵染色3分钟
    (4) 水洗20gL甲基绿复染10分钟水洗干镜检
    [床意义]
    (1) 单核细胞组织细胞呈阳性反应
    (2) Gaucher3细胞呈强阳性反应尼曼—匹克(NiemannPicks)氏细胞阴性
    (3) 毛细胞性白血病常阳性反应(加1—酒石酸抑制)
    (4) T淋巴细胞阳性酒石酸抑制B淋巴细胞阴性
    [附注]
    (1)涂片新鲜应早固定染色时测定应固定放冰箱保存
    (2)硫化铵试剂出现深黄色提示量硫离子消耗染色效果佳应先考虑硫化铵试剂变质应予更换做试验
    D12红细胞渗透脆性试验
    [原理]
    试验测定红细胞浓度低渗盐水溶解抵抗力红细胞置低渗盐水中水逐渐渗入细胞红细胞膨胀成球形达定限度细胞血红蛋白便开始漏出抵抗力红细胞表面积体积值密切关系表面积体积者低渗盐水抵抗力较(渗透性减低)反抵抗力较(渗透性增强)球形细胞表面积体积值减渗透脆性增强球形细胞表面积体积值增渗透脆性明显降低
    [试剂]
    1.双草酸盐抗凝剂:草酸铵1.28.草酸钾0.88加蒸馏水100ml加O.2ml100℃烘干备
    2.18/d1氯化钠溶液(NaCl):准确称取100℃烘干分析纯氯化钠置100m1容量瓶先加少量蒸馏水溶解加双蒸馏水刻度
    [操作]
    (1)取12支清洁干燥试编号排列然分取1gdlNaCl溶液蒸馏水表131加入试中
    (2)取静脉血’2m1双草酸盐抗凝抗凝剂直接原针头加血浓度氯化钠试中1滴(约0.05ml)轻轻摇匀然置室温2时离心沉淀观察清液开始溶血细胞完全溶血
    (3)需作孵育红细胞渗透脆性试验取血2ml置双草酸盐抗凝试加塞置37℃孵箱培育24时取出述操作程序胁定开始溶血完全溶血氯化钠浓度
    (4)次试验应时作正常
    [结果观察]
    室温静置2时离心观察结果高浓度开始逐观察:层溶液开始出现透明红色底红细胞开始溶血溶液透明红色底完全红细胞完全溶血
    [ 参考值]
    开始溶血:0.0044—0.0048(0.44—0.48%)
    完全溶血:0.00240.0028(0.24—0.28%)
    换算系数:=%×0.01
    [床意义]
    1.红细胞渗透脆性增高:见遗传性球形红细胞增症见身免硅性溶血性贫血伴球形红细胞增症
    2红细胞渗透脆性降低:见种中海贫血包括轻型重型中海贫血血红蛋白H病外见缺铁性贫血红细胞表面积/体积值赂增情况肝病等
    3.孵育红细胞渗透脆性增高:见轻型遗传性红细胞增症遗传性椭圆型细胞增症遗传性非球形细胞溶血性血 
    [附注]
    (1)1 g/dl氯化钠溶液配制必须准确次配制量宜二月应更换1次试剂水蒸发致氯化钠浓度增加
    (2)取血时应防止红细胞破坏取耳血求血液流出通畅取静脉血应注意注射器干燥
    (3)严重贫血者(Hb<58)应加血2滴黄疽较探者生理盐水洗涤红细胞配制5g/dl悬液试验
    (4)开始完全溶血结果易判断离心沉淀进行判断
    (5)中海贫血病入红细胞渗透脆性降低应进行低浓度氯化钠溶液检查
    D13体溶血试验
    [原理]
    血液37℃孵育果红细胞存酶缺陷糖酵解发生障碍导致溶血通否葡萄糖ATP纠正进步予分型
    [试剂]
    (1) 100gL菌葡萄糖 
    (2) 菌等渗盐水
    (3) 0.48/L氨水(浓氨水0.16m1加蒸馏水100m1HiCN转化液
    (4) 04molL ATP生理盐水溶液
    [操作]
    (1) 取4支试加1gL肝素0.02m18磅5分钟高压灭菌置50℃烘干
    (2) 抽静脉血4m1菌手续表1—3—2操作血液加入稍振摇混匀
    冷藏离心血浆0.2ml加0.4gL氨水(转化液)4.8ml作空白540nm色求吸光度A
    测定溶血A测定×(1红细胞压积)/(A溶血×4)
    [结果观察]
    计算测定溶血率(相空白100%值)公式: 
    测定溶血率=测定A×(1红细胞压积)/溶血A×4 
    式中分测定A值血浆值换算成稀释全血量时吸光度分母4溶血稀释100倍测定稀释25倍系数溶血明显A值增加稀释倍数
    [参考值]
    正常血液菌条件孵育24时(48时)溶血率低般<4.0%加葡萄糖ATP溶血率更低(<O.6%)类溶血性贫血
    [床意义]
    遗传性球形红细胞增症身溶血加快够葡萄糖纠正遗传性非球形红细胞溶血性贫血身溶血增快中I型6磷酸葡萄糖脱氢酶活性降葡萄糖ATP纠正 Ⅲ型丙酮酸激酶缺乏溶血葡萄糖纠正ATP纠正PNH身免疫性溶血性贫血药物性溶血等均葡萄糖纠正
    [附注]
    应严格遵守菌操作
    D14血清酸化溶血试验(Ham试验)
    [原理]
    阵发性睡眠性血红蛋白尿症患者红细胞身缺陷补体敏感性增高酸化身血清中37℃孵育易破坏产生溶血法较敏感特异性高
    [试剂]
    (1)0.2mol盐酸(盐酸1.4m1蒸馏水加100m1成应新鲜配制)
    (2)8.5gL氯化钠溶液
    (3)50%红细胞悬液制备10ml离心1支加入8.5g/L氯化钠溶液4—5ml直接加入患者血液3—4滴混匀离心弃清液反复洗涤红细胞2次配成50%红细胞悬液
    (4)抽取思考静脉血3—5ml然凝固分离出血清
    [操作]
    (1)取2支清洁干燥试编号表1—3—4步骤进行操作
    表13—4 酸化血清溶血试验操作
    加入物(ml)
    第1
    第2
    患者血清
    O.5
    0.5
    0.2mol/LHCl
    0.05

    8.5g/LNaCL 

      0.05
    50%患者红细胞
    0.05
      0.05
    (2)轻轻混匀加塞置37℃水浴中24时
    [结果观察]
    第1溶血第2溶血者阳性
    [床意义]
    阳性见阵发性睡眠性血红蛋白尿症某严重发作身免疫性溶血性贫血
    [附注]
    (1)器皿必须清洁干燥操作程避免发生溶血否导致假阳性
    (2)血清酸化试必须塞紧否二氧化碳逸出血清酸度降
    D15热溶血试验(定性)
    [原理]
    患者红细胞血清中(含补体)37℃孵育葡萄糖分解产酸血清酸化导致缺陷红细胞溶解产生溶血现象
    [操作]
    取患者静脉血2ml取针头缓慢血壁注入洁净试中避免产生气泡然加塞置37℃孵箱中保温24时时取出离心观察清液产生溶血现象
    [结果观察]
    观察清液颜色出现溶血者阳性正常阴性
    [床意义]
    阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)者阳性
    [附注]
    (1) 注射器必须干燥试清洁整操作程应避免操作引起溶血造成假阳性
    (2) 置保温箱24时血块未退缩玻棒试壁轻轻分离然离心观察结果
    D16蔗糖溶血试验(糖水试验)
    [原理]
    阵发性睡眠性血红蛋白尿症患者红细胞膜缺陷补体较敏感量血清存时蔗糖发酵改变氢离子浓度加强补体红细胞膜结合致红细胞膜出现孔发生溶血
    [试剂]
    100gL蔗糖溶液[结果判断]清波呈红色者阳性(溶血)清液色者阴性
    [操作]
    取新鲜抗凝血(枸橼酸盐草酸盐抗凝)0.5m1加入4.5m1 100gL蔗糖溶液中混匀置37℃孵箱中30分钟取出离心观察结果
    [床意义]
    (1)阵发性睡眠性血红蛋白尿症阳性该病简易筛试验
    (2)生障碍性贫血巨幼红细胞性贫血免疫性溶血性贫血思者偶阳性
    [附注]
    器皿应清洁干燥免溶血造成假阳性结果
    D17变性珠蛋白体检查(Heinz体染色)
    [原理]
    变性珠蛋白体实际种变性血红蛋白颗粒(称血红蛋白包涵体)附着红细胞膜红细胞缺乏G—6PD转变原三磷嘧啶核苷酸生成减少导致红细胞原型谷胱甘肽(GSH)减少量代谢障碍变稳定患者血液体外孵育珠蛋白变性生成Heinz体碱性染料染成蓝紫色蓝黑色点
    [试剂]
    (1)O5%耐尔蓝乙醇溶液
    (2)10gL结晶紫生理盐水液取结晶紫1.0gNaC1 0.85g加蒸馏水100ml研钵研磨溶解滤配成备
    [操作]
    耐尔蓝法
    (1)置0.5%耐尔蓝乙醇溶液1滴洁净玻片干
    (2)取患者血液1滴置已干染料玻片推玻片角轻轻搅拌混匀
    (3)加薄盖玻片静置58分钟
    (4)油镜镜检见红细胞呈黄绿色变性珠蛋白染成蓝黑色点Heinz体呈圆形角形等数目:分布匀直径0.3—2um般位红细胞边缘
    (5)计数1000红细胞记Heinz体阳性红细胞数百分率报告
    结晶紫法
    (1)吸取1滴结晶紫液洁净玻片加血液1滴染料混匀覆盖玻片5分钟油镜检查
    (2)取结晶紫盐水液0.5ml置试中加末梢血(静脉血)35滴混匀置37℃水浴5分钟取出1滴玻片加盖玻片油镜观察结果
    (3)计数1000红细胞记录Heinz体阳性红细胞数百分率报告结果
    [参考值]
    正常红细胞含Heinz体仅偶见细量少变性珠蛋白体(提高检出率必时采乙酰苯肼体外生成法)
    [床意义]
    增见G—6PD缺乏致蚕豆病伯氨喹啉类药物引起溶血性贫血血红蛋白H病等
    D18血浆游离血红蛋白测定
    [原理]
    血红蛋白中亚铁血红素具类似氧化物酶作联苯胺(邻甲苯胺)氧化醋酸溶液中变成绿色黄色紫红色血溶血时血浆游离血红蛋白明显增高
    [试剂]
    (1)联苯胺(邻甲苯胺)0.1g加冰醋酸2ml加蒸馏水3ml溶解加95%乙醇10ml置4℃冰箱保存12周
    (2)取30%H2O2 0.5ml加蒸馏水14.5ml(新鲜配制)
    (3)10%(v/v)醋酸溶液
    (4)Hb标准液HiCN法精确测Hb含量然配成100mgLHb水溶液
    [操作]
    取试(容量30—50m1)3支次加入列液见表(1—3—5)
    表135 血浆游离血红蛋白测定
    加入物(m1) 
    U(测定) )
    S(标准) 
    B(空白)
    血浆(清)
     O.02 
     
    0.02(水)
    标准液 
     
    0.02
     
    联苯胺试剂
     1 
    1
     
    1%H202 
    1
     1
     

    混匀37℃水浴10分钟
    1O%醋酸 
    10
     10 
    10
    波长515nm色空白调零读取吸光度
    [计算]
    游离血红蛋白(mg/L)=测定吸光度/标准吸光度×100
    [参考值]
    正常血浆游离血红蛋白<100mgL(10mg/dl)
    换算系数:mg/Lmg/d1×10
    [床意义]
    血溶血性贫血PNH输合型血液均明显增高尤者高达5000mg/L
    [附注]
    (1)法系测定细胞溶解抽血分离程应特注意红细胞破坏导致结果升高
    (2)显色受温度干扰严格遵守测定条件注意标准测定色时间
    (3)灵敏度较高肉眼见溶血现象时标应稀释必时时应作1稀释5倍标
    (4)联苯胺具毒性测定时邻甲苯胶四甲基联苯胺代
    (5)纯品联苯胺色结晶纯度提纯联苯胺10g溶 lmolHCl 200ml中加活性炭1—2g力振摇(稍加热)滤滤液般色否继续振摇1—2分钟滤液中加入浓HCl 30ml混匀置冰箱夜见量白色结晶析出滤纸滤乙醇—乙醚等量混合液洗涤结晶数次乙醚洗2次
    (6)测定U测定吸光度UA标准S标准吸光度SA空白B空白吸光度BA均说明
    D19淋巴细胞亚群测定
    (1)试剂
    1) CD4 F CD8 P Cat NO 0747
    2) CD3 F CD16+56 P Cat NO 2076
    3) CD19 P Cat NO 1285
    4) 型 F IgG1IgG1 P Cat NO 1203
    (2)方法
    1) 取试加述单抗10ul底
    2) 加50ul EDTA K2抗凝血混匀
    3) 室温暗处放置15分钟
    4) QPREP仪溶血固定
    5) FCMW仪分析10000细胞

    (3)参考范围
    CD3 60 — 85
    CD4 245 — 488
    CD8 185 — 421
    NK 80 — 200
    CD19 70 — 230
    D20HLA B27 HLA B7 测定
    (1)试剂
    1HLA B27 F HLA B7 P Cat NO 1502
    2型 IgG 2a F PIgG1 P Cat NO 1255
    (2)方法
    1 取试加述单抗10ul底
    2 加EDTA K2抗凝血50ul混匀
    3 室温暗放置15分钟
    4 QPREP仪溶血固定
    5 PBS洗涤细胞2次
    6 FCM仪数细胞10000设门淋巴区域
    7 记录阳性百分度相应均荧光强度荧光峰值
    (1) 参考范围
    阴性
    D21活化细胞亚群测定
    (1)试剂
    1CD3 P Cat NO 1282
    2CD3 p Cat NO 0449
    3CD3 p Cat NO 0452
    4HLA DR F Cat NO 1638
    5型 F IgG1P IgG1 Cat NO 1203

    (2)方法

    1)加试剂列:
    CD3HLADR CD3 5ul + HLADR 5ul
    CD4HLADR CD4 5ul + HLADR 5ul
    CD8HLADR CD8 5ul + HLADR 5ul
    型 10ul
    2)加50ul ESTA K2抗凝血细胞悬液25×105细胞混匀
    3)室温暗处放置15分钟
    4)QPREP仪溶血固定
    5)FCM仪进行分析10000细胞
    (3)参考范围
    CD3HLADR 41 — 177
    CD4HLADR 18 — 70
    CD8HLADR 13 — 134
    HLADR 154 — 386
    D22活化血板测定
    (1)试剂
    1CD62p P Cat NO 1759
    2CD63 P Cat NO 1165
    3型IgG1 FIgG1 P Cat NO 1203
    (2)方法
    1)固定血板:
    EDTA K2抗凝血 500转分钟离心35分钟取富含血板血浆200ul加入1ml TEN缓液中混匀吸取200ul加入200ul 2聚甲醛中室温暗入放置15分钟
    2)加入述单抗10ul试底部
    3)加入50ul固定血板混匀室温暗处放置15分钟
    4)加入1ml TEN缓液
    5)FCM仪计数10000血板记录阳性百分度均荧光强度荧光峰值(阴性控制04左右)
    (3)参考范围
    CD62p 01 – 141
    CD63 06 – 52
    D23APO 27测定
    (1)试剂
    1)APO 27 P Cat No 2088
    2)型 IgG1 P
    3)PBSF PBS含25FCS001NaN3
    (2)方法
    1. 取检标25ul05*106细胞试底部加100ul 100ugml洋黄(digitonin)轻轻摇匀冰浴20分钟
    2.加2ml冷(4°C)PBSF200g离心6分钟
    3.弃清液分加入10ul单抗型混匀室温放置5分钟
    4. 加2mlPBSF200g离心6分钟
    5. 弃层加1mlPBSF
    6. FCM仪计数10000细胞记录百分率均荧光强度荧光峰值
    (3)参考范围
    0 — 249
    D24CD25CD3 测定
    (1)试剂
    1)D25 F Cat No 0478
    2)CD3 P Cat No 128
    3)型 IgG 2a F IgG1 P
    (2)方法
    1) 取试加述单抗底:
    <1> CD25 5ul CD3 5ul
    <2> IgG 2a F 5ul IgG1 p 5ul
    2) 加EDTA K2抗凝全血50ul25×105细胞混匀室温暗处放置15分钟
    3) Q—PREP仪溶血固定PBS洗两遍
    4) FCM仪计数10000细胞记录百分率均荧光强度荧光峰值强度
    (3)参考范围
    CD25 06 — 51
    CD25CD3 04 — 25
    D25MDR(P—gP)药耐药基)测定
    (1)试剂
    1) P—gP P Cat No 2370
    2)型 IgG 2a P Cat No 0617
    (2)方法
    1)取试加述单抗型 10ul
    2)加50ul全血25×105 细胞混匀室温放置15分钟
    3)加3ml含牛血PBS 1200转分离心5分钟弃清液
    4)Q—PREP仪溶血固定
    5)FCM仪计数10000细胞记录百分率均荧光强度荧光峰值
    (3) 参考范围
    全血 58—220
    D26TdT(MRD白血病残留病灶)测定
    (1)试剂
    1)TdT (pool) F Cat No 1136
    2)型 F IgG 2a + F IgG1
    (2)方法
    1) 取50ul全血5×105细胞测定
    2) 加入透膜剂 I (Intraprtp Reagent I)100ul混匀(18OC25OC)室温放置15分钟
    3) BS4ml洗次(300g离心5分钟)弃层
    4) 加入透膜剂II (Intraprep Reagent II)100ul室温放置5分钟轻摇12秒钟
    5)分加10ul TdTF 单抗型测定中轻轻摇匀室温避光放置15分钟
    6)加入PBS 4ml 300g离心5分钟洗次弃层
    7)加入PBS 05mlFCM仪计数10000细胞记录百分率均荧光强度荧光峰值强度
    8)必时结合白血病免疫标志双色分析(方法见膜膜时直标法)
    (3)参考范围
    0 — 086
    D27血板糖蛋白测定

    CD41 CD61 (GPⅡb Ⅲa复合物)
    CD42a CD42b (GP Ⅰb Ⅸ 复合物)
    CD36 TSP (GPⅣ 凝血酶敏感蛋白)
    CD31 (GPⅡa)
    (1)试剂
    1)CD41 P Cat NO 1416
    2)CD61 F Cat NO 1758
    3)CD42a F Cat NO 1757
    4)CD42b P Cat NO 1417
    5)CD31 F Cat NO 1431
    6)CD36 F Cat NO 0765
    7)TSP P Cat NO 1499
    8)型 F IgG1 P IgG1 (CD42AIgG 2a F)
    (2)方法
    1)血板固定:
    EDTA K2 抗凝全血500转分钟离心35分钟取富 含血板血浆200μl加入1ml TEN 中吸取200μ2聚甲醛中室温放置15分钟
    2)加单抗列试底部
    <1> CD41 P CD61 F 加5μl
    <2> CD42b P CD42a F 加5μl
    <3> TSP P CD36 F 加5μl
    <4> cd31 F 加5μl
    <5> 型 10μl
    必时加IgG2a fIgG P 10μl(CD42aCD42b)
    3)加固定血板50μl述试中室温暗处放置15分钟
    4)加TEN缓液ml述试中混匀
    5)FCM仪计数10000血板记录百分率均荧光强度荧光峰值(阴性 控制05左右)
    (3)参考范围
    CD41 871 — 100 CD61 925 — 100
    CD42a 849 — 100 CD42b 920 — 100
    CD42aCD42b 841— 100 CD36 733 — 913
    CD41 CD61 921 — 100 TSP 610 — 78
    CD31
    D28CD23(Ige低亲力受体)测定
    (1)试剂
    1)CD23 F Cat NO 0529
    2)型 IgG1 F
    (2)方法
    1) 取述单抗10μl加入试底部
    2) 加50μl全血25×105ml混匀室温暗处放置15分钟
    3) QPREP仪溶血固定
    4) PBS洗涤两次加1ml PBS 机
    5) FCM仪计数10000细胞记录百分率均荧光强度荧光峰强度
    6) 需检测TB细胞CD23表达CD3 PE CD19 PE 配色分析
    (3)参考范围
    1.9 44
    D29CD95 Fas 测定
    (1)试剂
    1)CD95 P Cat NO 2446
    2)型 IgM PE Cat NO 1269
    (2)方法
    1) 取试加述单抗10μl底
    2) 加EDTA K2抗凝血50μl25×105细胞 室温暗处放置15分钟
    3) QPREP仪溶血固定
    4) PBS洗涤两次加1ml PBS 机
    5) FCM仪计数10000细胞记录百分率均荧光强度峰值(设门淋巴细胞)
    6) 需研究种淋巴细胞Fas表达结合 F CD4 F CD8 等双色分析
    (3)参考范围
    全血 187 – 499
    D30FCM试剂配制
    (1) PB贮存液 (PH 74 01 molL)
    KH2PO4 261 g
    Na2HPO4·12H2O 2894 g
    H2O 1000 ml
    贮存冰箱保存
    (2) PBS (PH 74 001molL)
    100ml PB贮存液
    900ml 生理盐水
    (3) TEN缓液 PH 74
    Tris (50mmolL) 3 g
    Nacl (150mmolL) 45 g
    EDTA K2 121 g
    H2O 500ml
    1molLHCL调节PH (约25ml)
    (4) 标抗凝剂
    10 EDTA K2
    (5) Q – prep 处理剂
    A
    甲酸 12 ml
    H2O 1 L
    B
    碳酸钠 60 g
    氯化钠 145 g
    硫酸钠 315 g
    H2O 1 L
    C
    10 聚甲醛
    述试剂冰箱保存
    (6) Digitonin (洋黄试剂)
    1)贮存液 500μlml
    Digitonin 5 mg
    PBS 10 ml
    微微加热溶解置冰箱贮存半衰期3月
    2)应液 100μlml
    PBSF 稀释 5 倍
    (7) 25 PBSF
    PBS 965 ml
    牛血清规戒律 25 ml
    1NaN3 10 ml
    (8) PBS – 蔗糖 (Bcl – 2)
    蔗糖 1 g
    PBS 99 ml
    1NaN3 1 ml
    D31Bcl2 测定
    (1)试剂
    1) Rat Bcl2 单抗   Cat NO   2207
    2)羊抗鼠 IgG(H+L)FITC   Cat NO 0819
    3)含 1 %蔗糖 PBS (含 0 . 01 % NaN3)
    4)透膜试剂   Cat NO 2388
    (2)方法
    1)测定中加 5 - 10 * 10 5 细胞(实体组织骨髓细胞等)离心弃层
    2)加 100ul 透膜试剂 I 轻轻混匀室温 18 - 25 15分钟
    3)加 PBS -蔗溶液 4ml 300g 离心 5 分钟弃层
    4)加 100ul 透膜剂 II 轻轻混匀室瘟 18 - 25 5 分钟
    5)轻轻摇匀 1 - 2 秒
    6)测定加 10ul  Rat  Bcl2 单抗工作液(原液放低温冰箱中时 PBS -蔗糖 1 : 10 稀释)轻轻混匀室温 18 - 25 15 分钟
    7)测定加 4ml  PBS -蔗糖 300g 离心 5 分钟弃层
    8)加 30ul 单抗鼠  IgGFITC 工作液( PBS -蔗糖 1 : 20 稀释)室温 18 - 25 暗处放置 15 分钟
    9)加 4ml PBS 蔗糖 300g 离心 5 分钟弃层
    10)加 PBS -蔗糖 600ul FCM 仪计数 10000 细胞记录阳性百分率均荧光峰值荧光峰值
    D32ANNEXIN  V   测定
    (1) 试剂
    1)ANNEXIN  V     F    Cat NO 2375
    2)10× 浓缩结合缓液
    3)PI 冻干粉     1ml 蒸馏水复溶
    4)羊抗鼠 IgG(H+L)FITC   Cat NO 0279   说明书复溶置- 30 贮存
    (2)方法
    1) 冰 PBS 培养基洗涤样细胞 4 2000 转/分离心 5 分钟
    2) 弃清悬浮冰稀释结合缓液(蒸馏水 1 : 10 稀释)调整细胞浓度 10 5 - 10 6 / ml
    3)取 490ml 述细胞悬液测定底部测定加 5ul ANNEXIN VFITC 5ul PI 混匀避光冰浴 10 分钟
    4) FCM 计数 10000 细胞记录 ANNEXIN + / PI + ANNEXIN + / PI - 细胞百分率
    D33P53 测定
    (1)试剂
    1) p53 冻干粉 Cat NO2553 1ml 蒸馏水复溶
    2)羊抗鼠 IgG(H+L)FITC Cat NO0279 说明书复溶置- 30 贮存
    3)纯甲醇 - 20℃ 保存
    (2)方法
    1)PBS 洗涤细胞离心弃清冰甲醇悬浮细胞(边加边摇免形成絮状沉淀)冰浴 5 分钟
    2)2000 转/分离心 5 分钟弃清 3ml  PBS / BSA / NaN3 洗涤次
    3)PBS / BSA / NaN3 调整细胞 107 / ml
    4)吸 100ul 述细胞悬液测定底部
    5)测定加 10ul p53 单抗混匀室温 15 分钟加 3mlPBS / BSA / NaN3 洗涤次
    6)测定中加入羊抗鼠荧光单抗( PBS  1 : 20 稀释) 30ul 室温避光 20 分钟 PBS / BSA / NaN3   离心 5 分钟洗涤次加 05 mlPBS / BSA / NaN3
    D34λ链测定
    (1)试剂
    1)鼠抗λ链 Cat NO 0174 蒸馏水复溶分装支5ul置30℃贮存
    2)羊抗鼠IgG(H+L)FITC cat NO O279 说明书复溶置30℃贮存
    (2)方法
    测定加510*105细胞加50ul全血
    测定加10ul鼠抗λ链单抗(原液放低温冰箱中时PBS1:50稀释液)轻轻混匀室温放置15分钟加2mlPBS离心5分钟弃清液
    测定加30ul羊抗鼠IgGFITC工作液(PBS1:20稀释)室温避光15分钟
    QPREP仪溶血固定
    PBS洗涤次弃清
    加PBS 800 ulFCM仪计数10000细胞记录阳性百分率均荧光峰值荧光峰值
    D35CD55 测 定
    (1)试剂
    1)CD55 P Cat NO 2726
    2)型 IgG1 P
    (2)方法
    取5 ul全血2ml生理盐水洗涤2次(1500转分离心35分钟)1ml生理盐水悬浮细胞
    分加10ul CD55单抗型试
    加50 ul细胞悬液混匀室温避光放置15分钟
    加1ml生理盐水
    FCM仪计数10000细胞记录百分率均荧光强度荧光峰值
    (3)参考范围
    CD55 383 — 859
    D36血板抗体测定(PAIgGPAIgMPAIgA)
    (1)试剂
    1)鼠抗IgG抗 cat NO 0279 蒸馏水复溶分装支50ul置30℃贮存
    2)鼠抗IgM抗 cat NO 0285
    3)鼠抗IgA抗 cat NO 0278
    4)FITC羊抗鼠荧光单抗 cat NO 0279 说明书复溶置30℃贮存
    (2)方法
    血板固定:取富含血板血浆04ml加1mlTEN缓液中取述稀释血浆04ml加等量2聚甲醛室温固定15分钟
    洗涤:已固定血板试中加2mlTEN缓液3000转分离心5分钟洗涤2次弃清液加TEN缓液04ml
    测定:测定中分加入IgGIgMIgA单抗50ul固定血板50ul分加入测定室温20分钟2mlTEN 3000转分离心5分钟洗涤次加06mlTEN
    机:阴性阴性值10左右计数1万血板
    ( 3 ) 参考范围
    PAIgG 63203
    PAIgM 26145
    D37DNA测定
    (1)试剂
    1)DNAPrep LPR PN 6607055
    2)DNAPrep stain
    (2)方法1
    1)方法1
    取试加50ul EDTA K2 抗凝全血底加100ul DNAPrep LPR混匀秒钟加DNAPrep stain 1ml混匀室温避光15分钟FCM仪检测
    2)方法2
    <1>0.510*106ml细胞70酒精固定夜
    <2>PBS洗涤细胞两次
    <3>加1mlDNAPrep stain混匀
    <4>室温避光放置15分钟
    <5>FCN仪检测
    D38干细胞CD34测定
    (1)试剂
    1.CD34 PE Cat NO 1871
    2.型 PE IgG1
    (2)方法
    取试加述单抗10ul底
    加EDTA K2抗凝全血50ul0510*106细胞
    混匀
    室温避光放置15分钟
    PBS洗涤两次
    FCM仪计数细胞10000(设门淋巴细胞单核细胞交界区域
    记录阳性百分率
    D39CD34+ 细胞绝计数
    1试剂
    1) StemTrol CD34+ 细胞绝计数参
    2) CD45FITC CatNO 0782
    3) CD34PE CatNO 1871
    4) IgG1FITC CatNO 0639
    5) FlowCount荧光微球瓶
    2方法
    1) 标记3全血表:Tube1(Trol4534)加10 ul CD45FITC10 ul CD34PE Tube2(4534)加10 ul CD45FITC10 ul CD34PE Tube3(Trol4534)加10 ul CD45FITC10 ul IgG1FITC三加50 ul全血标然Tube1Tube2中加入10 ul StemTrol混匀室温避光15minQPrep溶血
    2) 振荡混匀FlowCount加100 ul FlowCount三反应注意带入气泡混匀机前必须重复振荡混匀次
    3) FCM分析计算类CD34+ 细胞包括参全血标
    4) StemTrol结果标准化子(100 ul20 ul5)校正StemTrol提供标准值较差异±15通样Tube2测CD34+ 细胞数全血标绝CD34+ 细胞数
    D40纤溶酶原激活剂抑制物(PAI)活性测定(发色底物法)
    (1) 原理:
    定量tPA加测血浆中血浆中PAI作形成活性复合物剩余tPA 作纤溶酶原(Plg)激活纤溶酶(Plm)
    者水解发色底物S2251释放出硝基苯胺(PNA)405nm强吸收峰测出剩余tPA量间接测出PAI活性
    PAI活性单位定义:25℃20分钟抑制10国际单位tPAPAI酶量10 AU
    (2) 标处理:
    静脉采血2ml置含200ul抗凝剂(0109molL枸橼酸钠)塑料硅化 中3000 rpm离心10分钟收集清液置2~8℃保存12时20℃保存月
    (3)方法:
    1) 准:第步11ml稀缓液溶解标准品第二步稀释100倍(取50ul加稀缓液4950ul)第三步稀缓液等量稀释第二步
    2) 释血浆制备:测血浆50ul+稀缓液950ul( 稀20倍)—取200ul+等量第二步稀释标准液——混匀(稀2倍)25℃放置20分钟
    3) 测定:









    孔号
    1
    2
    3
    4
    5
    6
    7测定
    第三步标准液(ul)
    0
    20
    40
    60
    80
    100

    稀缓液(ul)
    100
    80
    60
    40
    20
    0

    PAI相活(AUml)
    0025
    0020
    0015
    0010
    0005
    0

    稀释测血浆(ul)






    100
    发色底物(ul)
    100
    37℃湿盒中保温150~180分钟
    终止液( ul)
    20

    1号孔调零点酶标仪测定孔A405值
    (4)数处理:

    A405






    PAI相活性
    标准曲线查出PAI相活性×40×11
    [正常值] 035~08AUml

    D41组织型纤溶酶原激活剂(tPA)活性测定(发色底物法)
    (1) 原理:
    纤溶酶原———————→纤溶酶
    tPA ↓ 水解 释放
    发色底物(S2251)→ 硝基苯胺(PNA)—405nm
    (2) 标处理:
    2ml血置含200ul抗凝剂(0109 molL枸橼酸钠)硅化塑料中3000rpm离心×10分钟—立取200ul血浆+等量酸化剂—混匀—置28℃(保存12时)置20℃保存月
    (3)方法:
    标准品制备:tPA标准品22ml稀释缓液溶解然稀释100倍(取50ul加稀缓液4950ul)时tPA标准品活性25×102IUml表加入底酶标板(浓缓液24ml蒸馏水稀释)
    稀释血浆制备:缓液酸化测血浆稀释15倍(50ul酸化血浆加700ul稀缓液)
    发色底物制备:2ml稀缓液 发色底物价物纤溶酶原混合溶解起
    孔号
    1
    2
    3
    4
    5
    6
    测定孔
    tPA标准品(ul)
    0
    20
    40
    60
    80
    100

    稀缓液(ul)
    100
    80
    60
    40
    20
    0

    tPA浓度(IUml)
    0
    0005
    0010
    0015
    0020
    0025

    稀释血浆(ul)






    100
    发色底物液(ul)
    100
    37℃湿盒中保温约150180分钟
    终止液(ul)
    20

    1号孔调零点酶标仪测定孔A405值
    (4)数处理:
    A405tPA标准品活性作标准曲线测样品tPA活性标准曲线查出15211

    A405







    tPA活性(×102IUml)
    [正常值]
    0 3~06IUml

    D42血性假血友病子(vWF)含量测定(ELISA)
    (1)原理:
    双抗体夹心法抗vWF测血浆中vWF结合加入酶标抗体形成复合物者底 物作呈现色反应
    (2)标处理:
    静脉采血2 ml置含200 ul抗凝剂(0109molL枸橼酸钠)塑料试中3000rpm 离心10分钟取清液2~8℃保存24时20℃保存月
    (3)标准制备:
    1)浓稀释液蒸馏水稀释150ml
    2)浓稀涤液蒸馏水稀释500ml
    3)酶标抗体2ml稀释应液溶解
    4)底物配制(前)瓶+5ml蒸馏水溶解——加入35ulH2O2——混匀
    5)标准血浆+2ml稀释应液准确复溶——120然取500ul稀释应液作5次倍稀释140180116013201640六标准点
    (4)测定:
    测血浆140稀释(25ul测血浆+975ul稀释应液)
    孔号
    1
    2
    3
    4
    5
    6
    7
    8
    稀释应液(ul)
    100







    标准血浆(ul)

    120
    140
    180
    1160
    1320
    1640



    100

    测稀释血浆 (ul)







    100

    37℃孵育90分钟

    洗涤三次甩干
    酶标抗体(ul)
    100


    37℃孵育60分钟
    洗涤三次甩干
    底物液(ul)
    100

    37℃ 15~20分钟
    终止液(ul)
    50
    A492色1号空白调零
    [正常值] 60~150
    117革兰氏阴性鉴定卡药敏卡GNIGNS卡操作步骤
    EOSm Methylene Blue agar
    Mac Conkey agar
    Blood agar

    ①样作划线培养分纯

    ②培养时间性18hr24hr 超防老化
    Sample



    ①革兰氏染色试验确定革兰氏阴性

    分纯菌落

    ②氧化酶试验
    GNS卡填AMSNO


    ①果氧化酶试验正反应图31处填黑
    ②果负反应填
    ③AMS NO完全GNI相








    GNI试卡填AMSNO

    ① 果氧化酶试验正反应图31处填黑
    ②果负反应填






    稀释浊


    ① 04505盐水
    ②消毒接种环 挑取纯菌落










    药敏试验
    鉴定试验


    ① 菌液(1McFarland)抽取50uL放入试
    ② 加入18mL盐水均匀



    ②消毒接种环 挑取纯菌落






    ①菌落放入18ml盐水均匀
    ②浓度:1McFarland
    ③电子色器量度



    ②消毒接种环 挑取纯菌落










    充填时间约3~5分钟

    ①封口器预热约3分钟直Ready灯亮
    ②力架子试卡推入直切割声音停
    ③检查卡片否气泡气泡摔入气孔

    ② 加入18mL盐水均匀



    ②消毒接种环 挑取纯菌落






    充 填




    切割封口


    ①放入快读数架子
    ②GNIGNS放架子
    ③放快门关
    ④资料键盘荧光幕输入
    ② 加入18mL盐水均匀



    ②消毒接种环 挑取纯菌落







    放入培养读数箱






    (革兰氏阳性鉴定卡药敏卡) GPI GPS卡操作步骤
    Tryticase Say agar
    +5 blood
    Blood agar

    ①样作划线培养分纯

    ②培养时间性18hr24hr 超防老化
    Sample


    ①革兰氏染色试验确定革兰氏阴性

    ②触酶试验

    ④催化酶试验沾blood agar
    GNS卡填AMSNO
    分纯菌落

    +反应 ③作凝固酶试验
    反应 ③作溶血酶试验(β溶血)



    GNI试卡填AMSNO

    ① 果催化酶试验正反应图31处填黑
    ② 凝固酶+反应溶血酶+反应32标记填黑






    稀释浊

    ①果催化酶试验正反应图31处填黑
    ②凝固酶+反应溶血酶+反应32标记填黑
    ③AMS NO完全GNI相













    ① 04505盐水
    ②消毒接种环 挑取纯菌落









    ①菌落放入18ml盐水均匀
    ②浓度:1McFarland
    ③电子色器量度



    ②消毒接种环 挑取纯菌落





    药敏试验
    鉴定试验



    ① 菌液(1McFarland)抽取200uL放入试
    ② 加入18mL盐水均匀



    ②消毒接种环 挑取纯菌落









    ①封口器预热约3分钟直Ready灯亮
    ②力架子试卡推入直切割声音停
    ③检查卡片否气泡气泡摔入气孔

    ② 加入18mL盐水均匀



    ②消毒接种环 挑取纯菌落





    充填时间约3分钟
    充 填



    切割封口




    ①放入快读数架子
    ②GNIGNS放架子
    ③放快门关
    ④资料键盘荧光幕输入
    ② 加入18mL盐水均匀



    ②消毒接种环 挑取纯菌落







    放入培养读数箱



    YBC卡(酵母菌)
    Sample

    ① 法国甘露醇葡萄糖琼脂马玲薯葡萄糖琼脂作划线培养


    ② 18hr48hr28~30摄氏度
    分纯选取纯菌落

    ②约23mm直径
    ①选取纯菌落34独立菌落

    ①18mL04509盐水

    ②浓度2McFarland
    稀释浊

    ① 试卡普通培养箱次24hr培养48hr培养图63148hr培养标记处填黑
    ③电子浊器量度

    充填时间约3分钟
    充 填


    ② 第次 24hr填


    放30摄氏度培养箱24hr
    放入普通培养箱


    ①读数器阅读终报告

    ②次阅读马动报告印出
    放入AMS培养读数箱




    终结果
    未显示终结果


    ①未终结果印出报告直会建议



    ①次放入30℃培养箱24hr

    ②试卡总30℃培养箱48hr
    放入普通培养箱子

    ③试卡48hr培养标记处填黑



    ①读数器阅读终结果
    放入AMS培养读数箱

    ②次阅读马动报告印出



    终结果



    第章 床输血技术规范
    第条 规范指导医疗机构科学合理血根中华民国献血法医疗机构床血理办法(试行)制定规范
    第二条 知液资源必须加发保护合理应避免浪费杜绝必输血
    第三条 床医师输血医技员应严格掌握输血适应证正确应成熟床输血技术血液保护技术包括成分输血体输血等
    第二章 输血申请
    第五条 申请输血应治医师逐填写床输血申请单治医师核准签字连受血者血样预定输血日期前送交输血科(血库)备血
    第六条 决定输血治疗前治医师应患者家属说明输种异体血良反应血传播疾病性征患者家属意输血治疗意书签字输血治疗意书入病历家属签字意识患者紧急输血应报医院职部门领导意备案记入病历
    第七条 术前身贮血输血科(血库)负责采敌国贮血治医师负责输血程医疗监护手术室身输血包括急性等容性血液稀释术野身血回输术中控制性低血血压等医疗技术麻醉科医师负责实施
    第八条 亲友互助献血治医师等患者家属进行动员输血科(血库)填写登记表血站卫生行政部门批准采血点(室)偿献血血站进行血液初复检负责调节器配合格血液
    第九条 患者治疗性血液成分血浆置换等治医师申请输血科(血库)关科室参加制定治疗方案负责实施输血科(血库)治医师负责患者治疗程监护
    第十条 Rh(D)阴性稀血型患者应采身输血型输血配合型输血
    第十条 新生溶血端正需换血疗法治医师申请治医师核准患家属监护签字意血站医院输血科(血库)提供适合血液换血治医师输敌国科(敌国库)员实施
    第三章 受血者血样采集送检
    第十二条 确定输血医护员持输血申请单巾标签试面核患者姓名性年龄病案号病室门急诊床号血型诊断采集血样
    第十三条 医护员专门员受血者血样输血申请单送交输血科(血库)双方进行逐项核
    第四章 交叉配血
    第十四条 受血者配血试验血标必须输血前3天
    第十五条 输血科(血库)逐项核输血申请单受血者供血者血样复查受血者供血者ABO血型(正反定型)常规检查患者Rh(D)血型(急诊抢救患者紧急输血时Rh(D)检查外)正确误时进行交叉配血
    第十六条 输注全血浓缩红细胞细胞古巴液光涤红细胞冰冻红细胞浓缩白细胞手工分离浓缩血板等患者应进行交叉配血试验机器单采浓缩血板应ABO血型型输注
    第十七条 遇列情况必须全国床检验操作规程关规定作抗体筛选试验:
    ① 交叉配血合时
    ② 输血史妊娠史短期需接收次输血者
    第十八条 两值班时交叉配血试验两互相核值班时操作完毕已复核填写配血试验结果
    第四章 血液入库核贮存
    第十九条 全血血液成分入库前认真核验收核验收容包括:运输条件物理外观血袋封闭包装否合格标签填写否清楚齐全(供血机构名称许证号供血者姓名条形码编号血型血液品种容量采血日期血液成分制备日期时间效期时间血袋编号条形码储存条件)等
    第二十条 输血科(血库认真做血液出入库核领发登记关资料需保存十年
    第二十条 ABOAB血型全血血液成分分贮存血库专冰箱层专冰箱明显标识
    第二十二条 保存温度保存期:
    品种
    保存温度
    保存期
    1.浓缩红细胞
    4±2℃
    ACD:21天CPD:28天CPDA:35天
    2.少白细胞红细胞(LPRC)
    4±2℃
    受血者ABO血型相
    3.红细胞悬液(CRCs)
    4±2℃
    (CRC)
    4.洗涤红细胞(WRC)
    4±2℃
    24时输注
    5.冰冻红细胞(FIRC)
    4±2℃
    解冻24时输注
    6.手工分离浓缩血板(PC1)
    22±2℃
    (轻振荡)
    24时(普通袋)5天(专袋制备)
    7.机器单采浓缩血板(PC2)
    (PC1)
    (PC1)
    8.机器单采浓缩白细胞悬液(GRANs)
    22±2℃
    24时输注
    9.新鲜液体血浆(FLP)
    4±2℃
    24时输注
    10新鲜冰冻血浆(FFP)
    20℃

    11.普通冰冻血浆(FP)
    20℃
    四年
    12.冷沉淀(Cryo)
    20℃

    13.全血
    4±℃
    (CRC)
    14.制剂相应规定执行


    贮血冰箱温度动控制记录报警装置发出报警信号时立检查原时解决记录
    第二十三条 贮血冰箱严禁存放物品周消毒次冰箱空气培养月次霉菌生长培养皿(92mm)细菌生长菌落<8CFU10分钟<200CFUm3合格
    第六章 发血
    第二十四条 配血合格医护员输血科(血库)取血
    第二十五条 取血发血双方必须查患者姓名性病案号门急诊病室床号血型血液效期配血试验结果发保存血外凤等准确误时双方签字方发出
    第二十六条 血袋列情殂律发出:
    1. 标签破损字迹清
    2. 血袋破损漏血
    3. 血液中明显凝块
    4. 血浆呈乳糜状暗灰色
    5. 血浆中明显气泡絮状物粗颗粒
    6. 未摇动时血浆层红细胞界面清交界面出现溶血
    7. 红细胞层车紫红色
    8. 期须查证明情况
    第二十七条 血液发出受血者供血者血样保存26℃冰箱少7天便输血良反应追查原
    第二十八条 血液发出退回
    第七章 输血
    第二十九条 输血前两名医护员核交叉配血报告单血袋标签项容检查血袋破损渗漏血液颜色否正常准确误码率方输血
    第三十条 输血时两名医护员带病历患者床旁核患者姓名性年龄病案号门急诊病室床号血型等确认配血报告相符次核血液符合标准输血器时行输血
    第三十条 取回血应快输行贮血输前血袋成分轻轻混匀避免剧烈震荡血液加入药物需稀释静脉注射生理盐水
    第三十二条 输血前静脉注射生理盐水洗输血器接袋血继续输注
    第三十三条 输血程中应先慢快根病情年龄调整输注速度严密观察受血者输血良反应出现异常情况应时处量:
    1. 减慢停止输血静脉注射生理盐水维持静脉通路
    2. 立通知值班医师输血科(血库)值班员时检查治疗抢救查找原做记录
    第三十四条 疑溶血性细菌污染性输血反应应立停止输血静脉注射生理盐水维护静脉通路时报告级医师积极治疗抢救时做核检查:
    1. 核血申请单血袋标签交叉配血试验记入:
    2. 核受血者供血ABO血型Rh(D)血型保存冰箱中受血者供血者血样新采集受血者血样敌国袋中血样重测ABO血型Rh(D)血型规抗体筛选交叉配血试验(包括盐水相非盐水相试验)
    3. 立抽取受血者血液加肝素抗凝剂分离血浆观察血浆颜色测定血浆游离血红蛋白含量
    4. 立抽取受血者血液检测血清担红素含量血浆游离血红蛋白含量血浆结合珠蛋白测定直接抗球蛋白试验检测相关抗体效价发现特殊抗体应作进步鉴定
    5. 怀疑细菌污染性输血反应抽取血袋中血液做细菌学检验
    6. 早检测血常规尿常规尿血红蛋白
    7. 必时溶血反应发生57时测血清胆红素含量
    第三十五条 输血完毕医护员输血反应应逐项填写患者输血反应回报单返输血科(血库)保存输血科(血库)月统计报医务处(科)
    第三十六条 输血完毕医护员输血记录单(交叉配血报告单)贴病历中血袋送回输血产(血库)少保存天
    第三十七条 规范卫生部负责解释
    第三十八条 规范2000年10月1日起实施

    附件 成分输血指南
    附件二 身输血指南
    附件三 手术创伤输血指南
    附件四 科输血指南
    附件五 术中控制性低血压技术指南
    附件六 输血治疗意书
    附件七 床输血申请单
    附件八 输血记录单
    附件九 输血良反应回报单

    附件
    成分输血指南
    成输血定义
    血液血细胞血浆组成供者血液成应科学方法分开患者病情实际需分输入关血液成分称成分输血
    二 成分输血优点
    成分输血具疗效副作节约血液资源便保存运输等优点应积极推广
    三 成分输血床应
    () 红细胞
    品名 特点 保荐期 作适应证 备注
    浓缩 袋含200ml全血中全部 4±2℃ 作:增强运氧力 交叉配合试验℃
    红细胞 RBC总量110ml~120ml ACD:21天 适:
    (CRC) 红细胞压积07~08 CPD:28天 ①种急性失血输
    含血浆30ml抗凝剂8~10ml 血
    运氧力体存活率等 ②种慢性贫血
    袋全血 ③高钾血症肝肾
    规格:110~120ml袋 心功障碍者输血
    ④老年输血
    少白细胞 滤法:白细胞率 4±2℃ 作:(CRC) 受血者ABO
    红细胞 963~996红细胞回收 24时 适: 型相
    (LPRC)率>90 1输血产生白细胞抗体
    手工洗涤法:白细胞 引起发热等输血良反应
    率79±12红细胞 患者
    回收率>74±33 2防止产生白细胞抗体输血
    机器洗涤法:白细胞血 (器官移植患者)
    率>93红细胞回收率>87
    红细胞悬 400ml200ml全血离心 (CRC) (CRC) 交叉配合试验
    液(CRCs) 血浆加入适量红
    细胞添加剂制成操
    作三联袋进行
    规格400ml200ml全血
    制备
    洗涤红细 400ml200ml全血离心 (LPRC) 作增强运氧力 侧配血试验
    胞(WRC) 心血浆白细胞 适
    菌生理盐水洗涤3~4次 ①血浆蛋白
    加150ml生理盐水悬浮 敏反应贫血患者
    白细胞率>80血浆 ②身免疫性溶血性
    率>90RBC回收率>70 贫血患者
    规格400ml200ml全血 ③阵发性睡眠性血红
    制备 蛋白尿症
    ④高备战血症肝肾
    功障碍需输血者
    冰冻红细 血冰红细胞加甘油保 作:增强运氧力 加原血浆悬浮
    胞(FTRC) 护剂80℃保存保存期 适: 红细胞做交
    10年解冻洗涤甘油 解冻 ①WRC 叉配血试验
    加入100ml菌生理盐水 4±2℃ ②稀血型患者输血加生理盐水悬
    红细胞添加剂原血冻 24时 ③新生溶血病换血浮做侧配
    白细胞率>98血冻 ④身输血 血试验
    >99RBC回收>80残余
    甘油量<1洗枸椽酸钠
    盐磷酸盐K+NH3等
    规格200ml袋

    (二)血板
    手工分离 200ml400ml全血制备22±2℃ 作:止血 需做光叉配合试验
    浓缩血 血板含量 (轻振荡) 适: 求ABO相合
    板(PC1)≥20ml×1010袋20~25ml 24时(普 ①血板减少 次足量输液注
    ≥40ml~50ml 通袋) 致出血
    规格:20 ml~25ml袋 5天(专袋 ②血板功障碍致
    40~50ml袋 制备)±±℃℃℃2 出血
    机器单采 细胞分离机单采技术
    浓缩血 单供血者循环血液中 (PC1) (PC1) ABO血型相
    板(PC2)采集袋含血
    板≥25×1011红细
    胞含量<04ml
    规格:150ml~250ml袋

    (二)白细胞
    机器单采 细胞分离机单采技术 作:提高机体抗感 必须做义叉
    浓缩白细 单供血者循环血 22±2℃ 染力 配合试验
    胞悬液( 液中采集袋含 24时 适:中性粒细胞低 ABO血型相
    GRANs) 粒细胞≥1×1010 05×10 9L 发细
    菌感染抗生素治疗
    48时效者(严掌握适症)

    (四)血浆
    新鲜液体 含新鲜血液中全部 作:补充凝血子
    血浆 凝血子 扩充血容量
    (PLP) 血浆蛋白6~8g 4±2±±℃℃适: 求受血者
    纤维蛋白原02~04g 24时 ①补充全部凝血子 ABO血型相
    凝血子07~1单 (三联袋) (包括稳定凝血 相容
    位ml 子ⅤⅧ)
    规格:根医院需定 ②面积烧伤创伤
    新鲜冰冻 含全部凝血子 作:扩充血容量 求受血者
    血浆 血浆蛋白6~8 补充凝血子 ABO血型相
    (FFP) 纤维蛋白原02~04 20℃ 适: 相容
    凝血子07~1单 年 ①补充凝血子 37℃摆动水浴
    位ml (三联袋) ②面积创伤烧伤 融化
    规格:采血68时
    (ACD抗凝剂:6时
    CPD抗凝剂:8时
    )速冻成块
    规格:200ml100ml50ml
    25ml
    普通冰冻 FFP保存年普通 作:补充稳定凝血 求受血
    血浆 冰冻血浆 20℃ 子血浆蛋白 者ABO血
    (FP) 规格:200ml100ml 四年 适: 型相
    50ml25ml ①补充稳
    定凝血子缺乏
    ⅡⅦⅨⅩ子
    缺乏
    ②手术外伤烧伤
    肠梗阻等出血血
    浆量丢失
    冷沉淀 袋200ml血浆制 适: 求受血者
    (Cryo) 成含: 20℃ ①甲型血友病 ABO血型相
    Ⅷ子80100单位 年 ②血性血友病(vWD) 相容
    纤维蛋白原约250mg ③纤维蛋白原缺乏症
    血浆20ml
    规格:20ml

    附件二
    身输血指南
    身输血避免血源传播疾病免疫抑制时法获型血患者唯血源身输血三种方法贮存式身输血急性等容血液稀释(ANH)回收式身输血
    贮存式身输血
    术前定时间采集患者身血液进行保存手术期间输
    1.患者身体般情况血红蛋白>110gl红细胞压积 >033行择期手术患者签字意适合贮存式身输血
    2. 相应血液储存条件手术前3天完成采集血液
    3. 次采血超500ml(身血容量10)两次采血间隔少3天
    4. 采血前患者铁剂维生C叶酸(条件应重组入红细胞生成素)等治疗
    5. 血红蛋白<100gL患者细菌性感染患者采集身血
    6. 冠心病严重动脉瓣狭窄等心脑血疾病重症患者慎
    二 急性等容血液稀释(ANH)
    ANH般麻醉手术出血步骤开始前抽取患者量身血室温保存备时输入胶体液等渗晶体液补充血容量血液适度稀释降低红细胞压积手术出血时血液形成份丢失减少然根术中失血患者情况身血回输患者
    1. 患者身体般情况血红蛋白≥110gL(红细胞压积≥033)估计术中量失血考虑进行ANH
    2. 手术需降低血液粘稠度改善微循环灌流时采
    3. 血液稀释程度般红细胞压积低025
    4. 术中必须密切监测血压脉搏血氧饱度红细胞压尿量变化必时应监测中收静脉压
    5. 列患者宜进行血液稀释:血红蛋白<110gL低蛋白血症凝血机障碍静脉输液通路畅具备监护条件
    三 回收式身输血
    血液回收指血液回收装置患者体腔积血手术中失血术引流血液进行回收抗凝滤洗涤等处理然回输患者血液回收必须采合格设备回收处理血必须达定质量标准体外循环机器余血应回输患者
    回收血禁忌证:
    1. 血液流出血外超6时
    2. 怀疑流出血液细菌粪便羊水消毒液污染
    3. 怀颖流出血液含癌细胞
    4. 流出血液严重溶血
    注:
    ① 身贮血采血量应根患者耐受性手术需综合考虑行身贮血患者术前存程度贫血术中应予重视
    ② 适血液稀释动脉搏氧含含量降低充分氧供会受影响代偿机制心输出量组织氧摄取率增加ANH降低血液粘稠度组织灌注改善纤维蛋白原血板浓度红细胞压积行性降低红细胞压积>020凝血会受影响身贮血相ANH方法简单耗费低适合身贮血患者麻醉医师严密监护安全进行ANH疑菌血症患者进科教片身贮血ANH会造成细菌血繁殖肿瘤手术宜进行血液回收应ANH
    ③ 回收血液然身轿血客血身贮存血差血液回收种技术方法质量高低取决回收血处理霈处理回收血输入体会造成严重果目前先进血液回收装置已达全动化程度程序动滤分离洗涤红细胞出血
    快洗耳恭听涤直接回输未洗涤抗凝血液
    ④ 术前身贮血术中ANH血液回收发联合应


    附件三
    手术创伤输血指南
    浓缩红细胞
    需提高血液携氧力血容量基正常低血容量已纠正患者低血容量患者配晶体液胶体液应
    1. 血红蛋白>100gL输
    2. 血红蛋白<70gL应考虑输
    3. 血红蛋白70~100gL间根患者贫血程度心肺代偿功代谢率增高年龄等素决定
    二 血板
    患者血板数量减少功异常伴出血倾表现
    1. 血板计数>100×109L输
    2. 血板计数<50×109L应考虑输
    3. 血板计数50~100×109L间应根否发性出血伤口渗血决定
    4. 术中出现控渗血确定血板功低输血板受述限制
    三 新鲜冰冻血浆(FFP)
    凝血子缺乏患者
    1. PTAPTT>正常15倍创面弥漫性渗血
    2. 患者急性出血输入蛳库存全血浓缩红细胞(出血量输血蛳相患者身血容量)
    3. 病史床程表现先天性获性凝血功障碍
    4. 紧急抗华法令抗凝血作(FFP:58mlkg)
    四 全血
    急生血液丢失出现低血容量休克患者患者存持续活动性出血估计失血量超身血容量30
    回输体全血受指征限制根患者血容量决定
    注:
    ①红细胞功携带氧机体组织细胞贫血血容量足会影响机体氧输送两者生理影响样失血达总血容量30会明显低血容量表现年轻体健患者补充足够液体(晶体液胶体液)完全纠正失血造成血容量足全血血浆宜作扩容光焕发剂血容量补足输血目提高血液携氧力首选红细胞制品晶体液脱胶体液扩容结晶合红细胞输注适蛳输血
    ②器官器技性病变患者血容量正常红细胞压积达020(血红蛋白>60gL)贫血会影响组织氧合急性贫血患者动脉血氧会含水量量降低心输出量增加氧离曲线右移代偿然心肺功全代谢率增高患者应保持血红蛋白浓度>100gL保证足够氧输送
    ③手术患者血板>50×109L 时般会发生出血增血板功低(继发术前阿斯匹林治疗)出血影响血板计数更重手术类型范围出血速率控制出血力出血致果影响血板功相关素(体外循环肾衰严重肝病药)等决定否输血板指征分娩妇女血板会低50×109L(妊娠性血板减少)定输板输血板峰值决定效果缓慢输入效果较差输血板时应快速输注次性足量
    ④纤维蛋白原浓度08gL凝血子正常30凝血功维持正常患者血液置换量达全身血液总量实际会三分体成分(包括凝血子)保留体然足够凝血功应注意休克没时纠正导致消耗性凝血障碍FFP必须达10~15mlkg效禁止FFP作扩容剂禁止FFP促进伤口愈合
    附件四:
    科输血指南
    红细胞:
    红细胞破坏丢失生成障碍引起电性贫血伴缺氧症状血红蛋白<60gL红细胞压积<02时考虑输注
    二 血板:
    血板计数床出血症状结合决定否输注血板血板输注指征
    血板计数>50×109L 般需输注
    血板计数1050×109L 根床妯血情况决定考虑输注
    血板计数<5×109L 应立输血板防止出血
    预防性输注滥防止产生种免疫导致输注效出血表现时应次足量输注测CCI值
    CCI(输注血板计数输注前血板计数)(1011)×体表面积(M2)输入血板总数(1011)
    注:输注血板计数输注时测定值CCI>10者输注效
    三 新鲜冰冻血浆:
    种原(先天性天获性输入量陈旧库血等)引起种凝血子ⅡⅤⅦⅨⅩⅪ抗凝血酶Ⅲ缺乏伴出血表现时输注般需输入10~15mlkg体重新鲜冰冻血浆
    四 新鲜液体血浆:
    补充种凝血子(特Ⅷ子)缺陷严重肝病患者
    五 普通冰冻血浆:
    补充稳定凝血子
    六 洗涤红细胞:
    避免引起种异型白细胞抗体避免输入血浆中某成分(补体凝集素蛋白质等)包括血浆蛋白敏身免疫性溶血性贫血患者高钾血症肝肾功障碍阵发性睡眠性血红蛋白尿症患者
    七 机器单采浓缩白细胞悬液:
    中性粒细胞缺乏(中性粒细胞<05×109L)发细菌感染抗菌素治疗难控制者充分权衡利弊输注
    八 冷沉淀:
    童成轻型甲型血友病血性血友病(vWD)纤维蛋白原缺乏症子ⅫⅠ缺乏患者严重甲型血友病需加Ⅷ子浓缩剂
    九 全血:
    科急性出血起血红蛋白血容量迅速降伴缺氧症状血红蛋白<70gL红细胞压积<022出现失血性休克时考虑输注晶体液胶体液扩容治疗失血性休克输血方案
    附件五
    术中控制性低血压技术指南
    术中控制性低血压指全身麻醉手术期间保证重脏器氧供情况均坳脉压降低定水手术野出血量血压降低相应减少避免输血输血需量降低术野清晰利手术操作提高手术精确性缩短手术时间
    术中控制性低血压应①血供丰富区域手术头颈部盆腔手术②血手术动脉瘤动脉导未闭颅血畸形③创面较出血难控制手术癌症根治髋关节断离成菜脊柱侧弯矫正巨脑膜瘤颅颌面整形④区域狭精细手术中耳成形腭咽成形
    二术中控制性低血压技术实施具较难度麻醉医师该技术熟悉时应视绝禁区忌明显机体器官组织氧运输降低患者重器官严重功全患者应仔细衡量术中控制性低血压利弊酌情
    三实施术中控制性低血压应采扩张血方法避免抑制心肌功降低心输出量
    四术中控制性低血压时必须进行实时监测容包括:动脉血压心电图呼气末CO2脉搏血氧饱度尿量出血量较患者应测定中心静脉压血电解质红细胞压积等
    五术中控制性低血压水安全限患者间较体差异应根患者术前基础血压重器官功状况手术创面出血渗血状况确定该患者适低血压水降压时间
    注:
    组织灌流量血压血径变化变化血坟降低灌流量降低组织血客蔷加灌注压组织灌流蛳变甚增加理保证毛细血前血压蜀闭合压保证组织血流灌注器官血流身调节力定血压范围发挥作器官发挥身调节血流作血压范围手术创面血流漠注降低出血蛳减少时重器官血具较强调节器节力维持足够组织血供方面器官血压
    身调节低限该器官缺血阈器官组织丧失身调节血流力低压高该组织缺血界血压果术中控制性低血压应正确安全效发挥减少出血改善手术视野优点
    附件六:
    ××××医院
    输血治疗意书

    姓名______ 性(男女)年龄:_____ 病案号:______ 科______
    输血目:_______________________ 输血史: 孕___ 产___
    输血成分:______________ 床诊断:
    输血前检查:ALT___ ULHbsAg____Anti—HBs____HbeAg______
    AntiHbe____Anti—HBc___Anti—HCV_____Anti—HIV12____
    梅毒______

    输血治疗包括输全血成分血床治疗重措施床抢救急危重患者生命行效手段
    输血存定风险发生输血反应感染血传播疾病
    然院血液均已卫生部关规定进行检测前科技水限制输血某预测防止四舍五入血反应输血传染病输血时发生情况:
    1.敏反应 2发热反应
    3.感染肝炎(乙肝丙肝等) 4感染艾滋病梅毒
    4.感染疟疾 6巨细胝民病毒EB病毒感染
    7.输血引起疾病
    您家属监护解述发生情况意输血治疗请面签字
    受血者(家属监护)签字:______________年____月____日
    医 师 签 字:______________年____月____日
    备注:



    附件七:
    ××××医院
    床输血申请单 No0000000
    预定输血日期:____________年_________月__________日_________
    受血者姓名:______________________________________________________性:(男女)
    年龄:____________病案号:____________科:_______ 病区:______ 床号:____
    床诊断:___________________________________________________________________
    输血目:___________________________________________________________________
    继输血史:(): 孕______ 产______
    受血者属:(市外)
    预定输血成分:___________________________________________
    预定输血量:____________________________________________
    受血者:
    血型:______________________ 血红蛋白:____________________
    HCT:________________________ 血板:__________________
    ALT: UL HBsAg:_________________________
    AntiHCV:_____________ AntiHIV12:______________
    梅毒:_________________________
    申请医师签字:___________
    治医师审核签字:________
    申请日期: 午 时

    (备注:请医师逐项认真准确填写请输血日前送输血科血库
    …………………………………………………………………………………

    受血者姓名:_____________________ 受血者姓名:___________________
    病 案 号:_____________________ 病 案 号: 病区 床号
    血 型: No 0000000 血 型: No 0000000


    附件八
    ××××医院输血记录单
    病案号 姓名 性 年龄
    血型 科 病区 床号
    输血性质: 常规 紧急 量 特殊

    供血者姓名: 血型:
    供血者血袋号: 血量:



    复检血型结果:
    交叉配血试验结果:
    规抗体筛选结果:
    检查结果:


    复检者:______ 配血者:______ 发血者:______ 取血者:______
    发血时间: 年 月 日 午 时

    附件九:
    ××××医院患者输血良反应回报单 No 0000000

    患者姓名________性_______年龄_________科室_________病案号_____________
    血型____________________________诊断____________________________________
    供血者________________血型______储血号__________输血量_________________ ml
    ___________________________________________________________________

    输种血:1红细胞悬液 单位 2浓缩血板 袋子 3冷沉淀 袋 4全血 ml 5血 浆 ml 6:
    良反应: (发热敏溶血细菌血红蛋白尿)
    输血史: 次数
    孕____ 产____
    —————————————————————————————————
    注回报单务必请床医师认真填写时送回输血科血库
    发血日期 年 月 日
    填报



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    文档贡献者

    z***u

    贡献于2019-07-03

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