医院检验科生化sop(2018年版)


    **市安居区人民医院检验科 SOP 标准操作程序文件 (生化篇) 撰 写 人: ** 批 准 人: ** 批准日期:2018年7月1日 启用日期:2018年7月1日 临床生化实验室管理文件 操作规程文件号:SG 第1版 共11份文件 2018年7 月 1日起实施 本规程每2年复审一次 本规程编写者:** 审核者:** 批准日期:2018年7月 1 日 文件分发部门和/个人: 医务科保管者: 院长办公室保管者: 院档案室保管者: 生化组代组长:** 检验科主任:** 目 录 001 实验室设置……………………………………………………………… 002 生化室岗位职责………………………………………………………… 003 人员档案………………………………………………………………… 004 设备档案………………………………………………………………… 005 试剂……………………………………………………………………… 006 标本管理文件…………………………………………………………… 007 检验报告发放制度……………………………………………………… 008 投诉的处理程序………………………………………………………… 009 生化室生物安全防护制度……………………………………………… 010 生化方法学或试剂盒的评价制度……………………………………… 011 记录文件………………………………………………………………… 012 BS-800生化分析仪运行条件…………………………………… 013 BS-800生化分析仪标准操作程序…………………………………… 014 BS-800生化分析仪维护保养程序…………………………… 015 自动生化分析仪的评价程序…………………………………………… 016 生化项目测定方法……………………………………………………… 017 生化室质量自检措施…………………………………………………… 018 室内质量控制的操作程序……………………………………………… 019 失控后的处理程序……………………………………………………… 020 室间质量评价操作程序………………………………………………… 021 生化实验室校准程序…………………………………………………… 实验室设置 房屋: 1.标本前处理室(血液室): 30m2,功能:标本的分离,核对等。 2.仪器室:40 m2,功能:生化标本的测定全部在此进行。 3、 试剂储存室:15 m2,功能::耗材储存。 4、 冷藏室:15 m2,功能:试剂冰箱放置处。 设备: 见设备一览表 人员: 1人,见工作人员一览表 工作范围: 常规生化检查,涵盖41项,又根据功能和特点分为多个功能范围,如肝功、肾功、血脂、特种蛋白、体液免疫、风湿、胰腺炎指标、血糖、心肌酶谱,浆膜腔积液生化组合等。全部检测项目和组合项目均列于附表中。 生化室检测项目一览表 附表1. 项目名称 项目缩写 项目名称 项目缩写 项目名称 项目缩写 谷丙转氨酶 ALT 前白蛋白 PA C反应蛋白 CRP 谷草转氨酶 AST 总蛋白 TP 胱抑素C CySC 碱性磷酸酶 ALP 白蛋白 ALB 类风湿因子 RF r-谷氨酰转肽酶 GGT 总胆红素 TB 抗O ASO 乳酸脱氢酶 LDH 直接胆红素 DB 免疫球蛋白G IgG 肌酸激酶 CK 总胆汁酸 TBA 免疫球蛋白A IgA MB型肌酸激酶 CKMB 葡萄糖 GLU 免疫球蛋白M IgM 淀粉酶 AMY 尿素 UREA 钾 K 总胆固醇 TC 肌酐 CREA 钠 Na 甘油三酯 TG 尿酸 UA 氯 Cl 高密度脂蛋白 HDL-C 钙 CA 腺苷脱氨酶 ADA 低密度脂蛋白 LDL-C 镁 MG 胆碱酯酶 CHE 载脂蛋白A APOA 磷 P 脂蛋白(a) LP(a) 载脂蛋白B APOB 生化室组合项目一览表 附表2 . 组合项目 包含项目 包含项目 组合项目 包含项目 包含项目 免疫生化项目 IgG 生化全套 ALT RF IgA AST ASO IgM ALT/AST IgG CRP ALP IgA RF GGT IgM ASO LDH K PA CK Na CKMB Cl CRP CA TC MG TG P 生化一 ALT HDL-C HDL-C 离子钙nCa AST LDL-C LDL-C PH ALT/AST APOA APOA CHE ALP APOB APOB GGT CRP PA TP K TP ALB Na ALB A/G Cl A/G TB CA TB DB MG DB IB P IB TBA 离子钙nCa TBA GLU PH GLU UREA CHE UREA CREA CREA CySC UA GRF CySC UA GRF 生化室组合项目一览表 附表3 . 组合项目 包含项目 组合项目 包含项目 组合项目 包含项目 肝功I TP 肾功能 Urea 血脂I TC ALB CREA TG 白/球(A/G) UA HDL-C TB CySC LDL-C DB GFR IB 血脂II TC ALT 电解质1 K TG AST Na HDL-C ALT/AST Cl LDL-C ALP Ca APOA GGT nCa APOB TBA PH ADA 电解质II K 浆膜腔积液生化组合 ADA 心肌酶谱 CK Na LDH CKMB Cl TP AST Ca GLU LDH nCa a-HBDH PH Mg 肝功II TP 血脂III TC 心肌损伤标志物三合一 MYO ALB TG CKMB 白/球(A/G) HDL-C cTnT TB LDL-C DB APOA IB APOB ALT Lp(a) AST ALT/AST ALP PA TBA CHE 生化室岗位职责 仪器岗(夜班人员): 1. 仪器的准备、每日及每周维护、仪器清洁,试剂准备,质量控制。 2. 协助编号对标本, 标本二次核对。 3.输生化申请单信息。 4、清理检验单、杂项清理。 5、标本测定签测定者姓名,审核报告的结果,签审核人章。 标本收集岗(夜班人员): 收集标本,审核标本是否合格,审核病人的姓名、年龄、性别、病房、床号、检测项目。 标本准备岗: 离心标本,对编号,审核病人的姓名、年龄、性别、病房、床号、测定项目,做杂项。 杂项岗:输报告单信息,协助标本台,做杂项。 夜班休息及补休者的工作,由大家协作完成。 工作安排 上午: ⑴ 标本的收集、处理、标本的信息录入、标本的测定等主要的工作量在上午完成。 (2)收集、分离、测定每天的门诊标本和住院标本; 中午:继续上午未完的工作,审核装订报告,并按照科室分类。 下午:仪器维护、消毒工作台及实验室台面;住院部报告在17:00前由仪器岗的同志发送至各临床护士站。 体检工作:根据工作情况插入体检标本,中午不能完成体检工作的,要发扬团结协作的精神,齐心协力完成体检标本的检测,下午在根据科室具体情况临时安排。 生化组成员档案 序号 姓 名 性别 出生时间 学历(学位) 毕业学校 职务 所学专业 职 称 1 ** 男 1994.2 大专 四川中医药高等专科学校 代理组长 临床检验 检验士 2 彭琴 女 1991.10 本科 成都医学院 组员 临床检验 检验师 3 柏凤 男 1987.9 本科 新疆医科大学厚博学院 组员 临床检验 检验师 4 成希 女 1980.3 大专 成都中医药大学 组员 临床检验 检验师 5 古贞 女 1992.5 本科 陕西中医药大学 组员 临床检验 检验师 人材培训计划 1. 建立有效的培训计划。 2. 充实组室人才储备,提升组室综合水平。 3. 支持员工参加各类学习班、学术会议。 主 要 仪 器 设 备 一 览 表 附表:4 序 号 仪器设备名称及编号 型号规格 数量 生产厂家 购买日期 备 注 1 全自动生化分析仪 BS-800 1台 迈瑞 2012.8 2 立式单温冷藏柜 LG4-209LT 1台 穗凌 2015 3 冰箱 星星LSC-218c 1台 星星集团 2012.3 4 低速离心机 LC-4016 1台 安徽中科中佳科学仪器公司 2007.2 5 37水浴箱 HH.W21.CU.600 1台 上海医疗器械七厂 不详 6 UPS JJW-3000VA 1台 上海全力 2003.4 7 纯水机 宜科 1台 四川宜科 2010.3 8 电解质仪 IMS-972 1台 希莱恒医用电子有限公司 2010.6 9 纯水机 优科源 1台 四川优科源 2012.8 10 全自动生化分析仪 TBA-2000FR 1台 东芝 2016.1 11 12 13 14 15 16 17 18 19 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 试剂管理 一、 试剂管理程序 1. 总则 试剂的管理:由设备处招标、履行合同,并由设备科验收后,下发医院试剂库房,由医院试剂库房统一管理,生化组根据需要向试剂库房领取签字的管理程序。 2. 试剂选择 根据质优、价格适度、包装适宜等原则选择预招标的试剂,并检验其资质证书,进入招标采购程序。 3. 试剂领取 组长根据使用的需要向医院试剂管理者领取。 4. 试剂保管 试剂保管均按试剂的保管要求,在特定的温度条件下保存。 5. 月结算 每月底统计本月领取和使用的试剂量及库存量。 二、 试剂使用记录 见附表 生化室试剂使用记录(一) 附表5 20 年 月 项目 上月库存 本月领取 本月使用 合计 本月库存 Ca Mg P 高(超)敏-CRP IgM IgG IgA LP(a) ASO CHE RF PA TP ALB ALT ADA AST TB DB ALP r-GT TBA Urea Cysc Cr 生化室试剂使用记录(二) 附表6 20 年 月 项目 上月库存 本月领取 本月使用 合计 本月库存 UA GLU TC TG HDL LDL APOA APOB CKMB CK LDH a-HBDH AMY ADA质控 朗道生化质控品 Cysc质控 朗道蛋白类质控品 朗道脂类质控品 去蛋白液 斜率校正液B(蓝) 斜率校正液A(蓝) CRP校准品 PA校准品 复合生化校准品 肌钙蛋白I/肌红蛋白/肌酸激酶同工酶 CD80清洗液 标本管理文件 标本要求 测定所需标本均为血清,标本量不少于3.0ml 标本收集 1. 标本的采集均用真空采血管:普通生化用普通管,急诊生化用肝素锂抗凝管或促凝管。 2. 门诊标本由本科人员在门诊抽取,定时送至生化室。时间为9:30前。 3. 病房第一批标本由专人在9:30前送至生化室;此后的标本由病房专人送。 拒收标本 1. 血糖标本量不少于1 .0 ml,其它生化标本血量少于3.0ml者拒收。 2. 其它生化标本若抽为氟化钠或枸橼酸钠抗凝者拒收。 3. 严重溶血、脂血、过于混浊或粘稠的标本,无法准确测定的在申请单上注明后退回,严重溶血的要求重新抽取血液。 处理、存放程序 1. 标本收回后,水浴30分钟后放于离心机内,3000转离心10分钟,按化验单次序对取标本,待检。 2. 分析完成及报告单签发后,所有标本放入2-8℃冰箱中,生化标本保存3天,第4天下午取出,放入专用消毒桶消毒处理。 3. 分析后的标本,每天放置在一个试管架,第一个标本上应注明当日时间,以备查询。 唯一标识 生化标本做到当日的唯一标识,无重号 检 验 报 告 发 放 制 度 一、常规报告发放制度 1. 所有标本均应核对两次后上机检测。 2. 所有生化报告单均应由检验者和审核者同时签署后方能发放。 3.检验者负责监测当日室内质控以保证检验结果准确可靠,对于过高、过低或不符合临床诊断的结果需重新核对标本、复查并电话通知临床。 4. 审核者负责核对病人姓名、病房、床号正确,检验项目齐全。 5. 门诊报告:下午4:00发出报告。住院报告下午上班时做发送到各个护士站。 二、危急报告制度 对于可能危及患者生命的指标,达到一定水平需及时通知病房,常见指标如下: 1.血钾:<2.8mmol/L或>6.0mmol/L,复查后及时通知病房。 2.血钠:成人:<120mmol/L或>160mmol/L婴儿: <125mmol/L或>155mmol/L复查后及时通知病房。 3.血氯:成人:<80mmol/L或>120mmol/L婴儿:<90mmol/L或>115mmol 复查后及时通知病房。 4.血糖:<2.8mmol/L或>22.2mmol/L,婴儿:<1.7mmol/L或>22.2mmol/L复查后及时通知病房。 5. 尿素:>30mmol/L,复查后及时通知病房。 6. 肌酐>530 mmol/L,复查后及时通知病房。 7.钙<1.5或>3.5 mmol/L,复查后及时通知病房。 8.镁<0.5或>3.0 mmol/L,复查后及时通知病房。 9. ALT:成人>500u/l,儿童 >300u/l 10. AST成人: 500u/l,儿童 >300u/l 11. 胆红素:>300ummol/l 12. CK:>1000U/L 13. 肌钙蛋白:阳性 三、报告格式 报告内容应包括测定项目的中英文标识、结果、单位、参考值、异常标记、收到标本时间、测定时间、报告时间。 附表7 生 化 危 急 值 报 告 记 录 报 告 时 间 姓 名 性 别 年 龄 科 室 病历号 床 号 检测项目 危急结果 复查后结果 临床接收人 检验科报告人 备注 月 日 时 分                         月 日 时 分                         月 日 时 分                         月 日 时 分                         月 日 时 分                         月 日 时 分                         月 日 时 分                         月 日 时 分                         月 日 时 分                         月 日 时 分                         月 日 时 分                         月 日 时 分                         月 日 时 分                         注:请按要求及时、如实记录 。 制表:蒋代金 监督:** 投诉的处理程序 1 目的:以病人为“中心”,以质量为“核心”,优质服务。基于对临床和病人(包括家属等)的返馈意见的重视,往往从中能发现实验室存在的问题或漏洞。有利于提高检验和服务质量,减少医疗差错和事故,巩固和有效改进实验室质量体系,本程序适用于检验科权限内能处理解决的问题。当科室不能妥善解决时,将移交医院医务处,遵循医院医疗纠纷处理程序。 2 适用范围:来自于患者或家属,临床医护人员和/或实验室工作人员针对检测结果质量、服务质量和/或实验室管理等问题的投诉。 3 负责人:** 4 职责 a)每个实验室人员均有责任接待申诉者,按照首问负责制的程序,根据所申诉内容给于解决,如超出本人职权范围的,交室负责人或会同科主任处理。 b)对电话投诉须作记录并及时报告室负责人,对书面或口头投诉也要作好记录,所有记录均要填写抱怨记录表。 5 处理程序 5.1接受投诉 执行者在接受投诉时应热情、友好、礼貌、严肃和认真,应记录投诉者姓名、地址、联系方式及内容(首先注意稳定投诉者情绪)。 5.2 投诉的处理 5.2.1 患者对服务态度投诉的处理方式 a)接到投诉后,及时记录,并向科室负责人汇报。 b)对患者提出的合理要求及时进行处理。 c)调查事情原委,根据调查结果对相关责任人进行处罚。 d)记录处理结果。 5.2.2 患者对结果准确性投诉的处理方式 a)为患者展示原始实验数据。 b)向患者解释相关实验程序和可能临床情况,帮助患者解除疑虑。 c)如确有实验结果不符合有效性要求或出现错误,则应及时纠正错误,重新实验以得到准确结果。同时由室负责人向患者致歉以争取得到其谅解,按有关条例对责任人进行相应处罚,并记录。 5.2.3 对患者信息(姓名、年龄、性别)的投诉 a) 首先应该为病人核查其标本号与检验号,如无错误,可更正错误。 b) 向患者解释相关实验程序和可能临床情况,帮助患者解除疑虑。如患者仍有疑问,可为患者重新测定并核实。 c) 如果属于标本核对有误,则须找到真实标本后或重新抽取标本进行测定。 d) 原则上尽量满足患者的合理要求,并只对当日的标本负责。 投诉处理记录 附表8 日期 姓名 联系方式 投诉内容 处理方式及结果 接受者 生化室生物安全防护制度 人员安全防护: 1.工作人员上班时必须穿工作服,接触传染病原标本须带一次性手套,必要时穿隔离衣和戴口罩。 2.不在工作室内吃东西。 3.下班后用肥皂洗手两次以上,清水冲洗干净即可。必要时须用消毒液浸泡消毒。 污物处理: 1. 各种盛装血液、尿液、各种体液标本试管用1500-2000mg/L有效氯(1:25的84消毒液)浸泡2-4小时后,归入医疗拉圾,由医院统一处理。 2. 尿杯、棉签、一次性吸管、真空采血针等归入医疗拉圾袋,由医院相关部门统一处理。 3. 仪器废液以有效氯浓度为500mg/L的情况下消毒后弃去。 4. 血清转移杯、加样滴头、试管盖等高压灭菌后,由医院统一处理。 5. 浸泡消毒品的容器须加盖,并在容器上注明消毒品名称及浓度。 6.废弃纸张等其它废物归入生活拉圾,由医院相关部门统一处理。 生化方法学或试剂盒的评价程序 生化方法或试剂盒评价是对方法/试剂盒的性能作出正确判断,主要内容:通过实验途径测定并评价方法的精密度、准确度,线性范围、灵敏度、稳定性和方法比较等进行测定。 一、 精密度 【目的】:考查方法随机误差,反应方法的精密度 【分析样品及分析物浓度的选择】 为减少对结果的影响因素,全部实验过程中应使用同一批号的试剂和校准品。实验标本可采用稳定的以蛋白质可模拟临床标本特性的产品。 1)样品:质控品、病人的标本、混合血清 2)浓度:分析物的浓度宜选用医学决定水平的低、中、高浓度的样品。 【方法】:同一材料多次测定或数份标本平行双份测定,判断:CV值越小越好,一般化学法应小于5%。用于描述与时间有关的不精密度的内容包括批内、批间、总精密度,其中批内和总不精密度最为重要。 1.批内重复性 方法: a.一份标本批平等测定20次,计算平均值、标准差、变异系数 b.病人标本的双份平等测定,IFCC要求10至100份标本。用下列公 式计算双份差值 2.批间重复性 一天内对一份或数份标本,间隔一定时间重复测定几次(3-4次),计算变异系数。 3.日间重复性 一天测定一次,连续测定10-20天,计算变异系数。它反应试验的稳定性,观察待测物、试剂的稳定性及方法的精密度。样品用冷冻混合血清或质控物。 4.总精密度 每天测定二次,间隔时间大于2小时,连续测定20天。计算总精密度方法参考临床实验室质量管理P.156。 二、 试剂稳定性观察 【观察对象】 试剂空白、标准品、质控品和病人标本。 【方法】 每天在常规条件下测定一次,至少测定1周或20天。对于不稳定的项目可选用适时多次,找出它的稳定时段,以利于选用最佳定标周期。 三、线性范围测定 【目的】 1)确定方法的定标方法和计算方法:线性、回归、非线性。 2)确定检验结果的可报告范围。 【方法】 1)首先确定方法或试剂盒及测定步骤 2)决定上、下限范围(正常、病理、高于文献),如糖2-50;TP 0-100(120);高值标本应高于线性上限30%,低值标本应低于线性低限 3) 确定4-6个浓度的梯度。 4) 制备标准液。 5) 按测定步骤测定,每个浓度平行测定2-3管。 【结果处理】 收集数据,绘制标准曲线:①仪器自动显示。②手工画 【判断】 1)确定是否成直线,数据观察图,回归法计算。过零点的直线-理想的;不过零点的直线,截距,两点法计算或直线回归;不呈直线,应作多点校正,对数处理。 2)再确定上、下限(线性)范围,图中呈线性的区段。 3)用高浓度、低浓度的标本证实、对线性范围内的浓度与对应吸光度作直线回归分析和相关性分析、线性回归方程拟和程度的检验。 【附注】: 1) 技术熟练,(加样准确,准确制备); 2) 曲线不可随间延长; 3) 理想的线性范围,其上或下限能含盖95%的临床标本。 四、回收实验 衡量候选方法的准确度,测定比例误差(系统),只适用于有纯品的物质 【方法】 1)待加入的标准浓度10或20倍于预加入的浓度 2)标本准备:测定管(对照) 血清:标准(蒸馏水)=9:1。 3)按测定方法进行测定,平行3管/每个浓度 4)计算 测定-对照 回收率= ×100% 加入浓度 标准液体积 加入浓度= 标准液浓度× 血清+标准体积 【附注】 1)操作熟练,正确、严密、浓度准确、加入准确。 2)测定管的浓度必须在方法的线性范围内。 3)加入物的浓度包括医学决定水平的低中高浓度。 4)最好与对比方法一起测定或制备双份回收样品。 5)血清样品不能过量稀释。 6)理想的回收率为100±5% 。 五、干扰实验 【目的】 衡量方法的准确度(恒定系统误差),反应方法的特异性。 【方法】 与回收相同,只是计算不同,计算测定值与基础值差值与基础的%,即测定的误差。干扰率=测定值-基础值/基础值×100% 干扰物及浓度:药物、胆红素、Hb、脂血、抗凝剂、防腐剂等。先测定有无干扰,再以不同的浓度测定,找出临床有意义的浓度。 【附注】 1) 凡可疑的干扰物都应做干扰试验 2) 干扰程度与分析物浓度无关,与非分析物的量有关 3) 偏差等于干扰样品测定值与基础样品值之差 4) 偏差小于允许误差的临界值,可被接受,不影响临床诊断和治疗 六、方法比较 实验室在引进新方法或用一种方法或试剂盒替代另一种方法或试剂盒时,为保证实验室检测结果的连续性,通常要进行偏差分析。这种偏差分析就是比方法比较来进行的。 【目的】 衡量方法的准确度,检测系统误差(比例和恒定),可校正候选方法 【方法】 1) 选择一组病人标本,应源于健康人或患者,无明显的干扰因素,尽量避免使用贮存标本。一般.40-100例,包括可能遇到的并在线性范围内的各种浓度,例数应均匀分布。 2)对比方法的选择;公认的有良好性能的方法,参考方法,或常规方法 3)每个标本平行测定2次,分批测定,两种方法的测定时间在同一天内,间隔应小于4小时;每天测定2-5个,约测定20天。 【结果处理】 1) 绘图 目测 候-纵座标,对比-横,有矛盾的重测定。 2) 回归分析:r = (应作t检验) y=a+bx,若≥0.975或r2=095,则认为浓度取值范围合理,数据满足要求。依据线性方程,可计算两种方法间的预期偏差芨可信范围。 七、检测能力(限)测定 【目的】 检测候选方法的最低检测量,反应方法的灵敏度。 【方法】 1)标本:空白标本是不含待测物的标本,①用透析法去除待测物的标本可全程测定。②试剂空白。③去除试剂中的决定因素,不出现待测物的显色应。 2) 测定:空白标本重复测定20次,均值+3S。 【作用】 作为一个警告线,低于此值的结果不准确或无法表示。 八、临床应用观察 1.参考值的测定 2.诊断性试验的评价:方法的灵敏度、特异性、预示值、拟然比、ROC曲线 九、结果文件化评价试验完成后 作好全面的记录 写出书面报告 作出结论。 所测各项的实验误差都应小于允许误差范围(EA),如果大于此值方法不能被接受。 有关记录文本 生化室试剂使用记录(附表5、6) 患者结果记录;均记录于LIS系统中 危急结果报告记录(附表7) 投诉处理记录(附表8) 仪器维护保养记录:不定期维护(附表8)、半年维护(附表9)、每月维护维护(附表10)、每日维护(附表11) 质控记录:室内(附表13)、室间(附表12) 冰箱温度记录表(星星)附表14 水箱温度记录表(一台)附表14 记录制度: 工作人员在完成某项工作后必须作好相关记录,填写好记录表格。 BS-800生化分析仪运行条件及注意事项 1,安装环境要求 请将仪器安装于符合以下条件的地方。否则,无法保证其分析性能。 l 仅供室内安装使用; l 安装台面(或地面)应平整(倾斜度小于1/200); l 安装台面(或地面)至少能承受约450kg的重量; l 通风良好; l 环境尽可能无尘; l 避免阳光直射; l 避免置于热源及风源附近; l 无腐蚀性和可燃性气体; l 台面(或地面)无震动; l 无大噪音源和电源干扰; l 不要靠近电刷型发动机和经常开关的电接触设备; l 不要靠近发出电磁波的设备,如手机、无线电收发器等; l 工作地点的海拔高度应小于2000米。如果高于2000米,应选配外置气泵。 2,电源要求 l 满足系统的电源要求。 l 三芯电源线,接地良好; l 需要一个良好接地的电源插座以提供所需电源; 3,温度和湿度要求 l 环境温度:15℃~30℃; l 环境湿度:35%~85%,无凝露。 必须设置零地电压 BS-800全自动生化分析仪标准操作程序 开机前检查 检查水源 1、检查水箱或其它外置储水容器有足够的去离子水,确保能连续供水; 2、检查水源、进水模块和分析仪间的水管连接是否牢固且没有松动现象; 3、检查确认导液管畅通无折弯扭曲、漏液。 检查电源 1、检查电源,确认电源有电并且能够提供正确的电压: l 电源:220V~240V 50Hz, 220/230V~ 60Hz。供电能力不小于5000VA,电源插座需支持不小于16A的承载能力。 l 电压波动范围:±10% 2、检查分析部、操作部和输出部间的通讯线和电源线,确认已连接牢固且没有松动现象。 检查废液连接 仪器的废液通过两级分流:高浓度废液和低浓度废液。高浓度废液通过废液桶排放,然后作特殊处理,或通过下水道排放;而低浓度废液则直接排放到下水道。 1、检查高浓度废液桶,查看桶内废液是否排空。若未排空,请排空废液桶; 高浓度废液量(含ISE):3.5升/小时;高浓度废液量(不含ISE):2.9升/小时。 2、检查低浓度废液连接,确保废液管无弯折,下水道排液口不高于仪器废液出口。 检查针、杆 样本针、试剂针和搅拌杆容易弄脏或受损,开机前,请仔细检查,是否有污物或弯折。 检查样本针、试剂针、样本搅拌杆和试剂搅拌杆,确认无污物,无弯折。如有污物,立即清洗;如有弯折,立即更换。 仪器的开机分四种情况: l 关闭总电源后开机 l 关闭分析部电源后开机 l 休眠状态下开机 l 定时开机 开机 关闭总电源后开机 1、打开水源开关。如果选配了进水模块,打开进水模块电源,并确保水源压力在49kPa~392kPa范围内。 2、打开分析部主电源(位于仪器背面右下角)。 开关往上拨至的位置为“开”;开关往下拨至的位置为“关”。 3、打开打印机和操作部计算机的电源。如果选配了数据管理软件或LIS,打开安装有数据管理软件或LIS的计算机电源。 4、显示“登录”对话框后,输入用户名和密码,然后点击“确定”。 关闭分析部电源后开机 1、打开分析部电源(位于仪器右前门里面上部)。 2、打开打印机和操作部计算机的电源。如果选配了数据管理软件或LIS,打开安装有数据管理软件或LIS的计算机电源。 3、显示“登录”对话框后,输入用户名和密码,然后点击“确定”。 休眠状态下开机 根据系统设置中的定时休眠时间或手动使仪器进入休眠状态后,选择“”-“仪器命令”,然后选择“仪器唤醒”命令;或直接点击 按钮唤醒仪器。 系统和项目参数设置 系统设置 根据需要进行以下系统参数的设置: 1、选择“”-“系统设置”,在“系统设置”界面设置默认样本类型、默认样本杯、样本有效期、样本针强化清洗、自动血清指数、测试温控、参考范围标记、余量报警限、报警音量和ISE开机灌注次数。 2、点击“仪器设置F1”,执行以下设置或操作:设置自动休眠和开机时间、项目遮蔽、设置样本备注、设置仪器通讯参数、选择界面语言、软件升级、版本信息查看、日期和时间设置、质控判断参数设置、设置自动释放样本时间。 3、点击“打印设置F3”,设置打印参数和项目在报告中的显示顺序。 4、点击“条码设置F4”,设置样本条码和试剂条码。 5、点击“LIS设置F5”,设置LIS相关应用和项目通道号。 6、点击“用户设置F6”,设置用户、用户组和操作权限。 参考范围 选择“”-“项目设置”,点击“参考范围F4”,选择项目,为各个样本类型、性别和年龄范围的病人设置参考范围和危急值范围。如果需要在结果超出危急值范围后重新进行测试,选中“自动重测”复选框。 设置计算项目 选择“”-“项目设置”-“计算项目F6”,选择空行,点击“设置F1”,输入计算项目名称、样本类型、单位、结果位数、打印名称和计算公式,然后点击“确定” 设置组合项目 选择“”-“项目设置”-“组合项目F7”,选择空行,点击“设置F1”,输入组合项目名称,设置组合项目类型,以及所包含的子项目,然后点击“确定”。 定标设置 新增定标液 1、选择“”-“试剂/定标”,选择“定标选项F8”-“定标液设置”。如果选配了ISE模块,点击界面右侧的向下箭头进入生化试剂定标界面,然后再选择“定标选项F8”-“定标液设置”。 2、选择空行,点击“增加F1”,输入定标液名称、有效期、批号和定标液位置,然后点击“保存”。 允许为每个定标液在不同的样本盘上设置位置,但同一个盘上只能设一个位置。 3、选中增加的定标液,为适用的项目设置定标液浓度,点击“保存F7”。 4、若要设置定标稀释参数,选中定标液和项目,点击“稀释设置F8”,输入稀释后的定标液浓度、用于测试的稀释定标液量(1.5μl~35μl)、参与稀释的定标液量(1.5μl~35μl)、以及稀释液量(15μl~300μl),然后点击“保存”。样本量和浓度必须输入,其它可以选择不输入。 ISE定标设置 1、选择“”-“试剂/定标”,选择“定标选项F8”-“定标信息”。 2、设置定标液有效期、批号、定标参数有效期和位置。 3、点击“保存F7”。 质控设置 新增质控液 1、选择“”-“质控设置”。 2、选择空行,点击“设置质控液F1”,输入质控液名称、编号、批号、样本类型、有效期和质控液位置,然后点击“确定”。 允许为每个质控液在不同的样本盘上设置位置,但同一个盘上只能设一个位置 3、选中增加的质控液,点击“项目选择F2”设置适用的项目。 4、选中增加的质控液,为各个项目设置质控液浓度均值和标准差,点击“确定F8”。 生化项目定标 一般定标测试 当发生以下任何一种情况时,应进行定标测试: l 新建项目; l 更换试剂批号和瓶号; l 修改了定标规则,包括:定标方法、重复次数、定标液浓度和使用的定标液; l 更换了光源灯、注射器、样本针等; l 修改了项目参数,包括:主波长、次波长、空白时间、反应时间、试剂量、样本量、正常测试稀释倍数、分析方法、反应方向、样本空白和结果单位。 1、选择“”-“试剂/定标”,点击向下箭头进入生化试剂定标界面。 2、选择需要定标的项目。 3、点击“定标申请F5”,然后选择“定标”,点击“确定”。 4、点击“定标液列表F4”,然后点击“打印F7”。所有已申请的定标液显示在定标液列表中。 5、对照定标液列表将需要使用的定标液装载到样本盘上。 6、点击 开始测试。 ISE定标测试 1、选择“”-“试剂/定标” 2、选中“ISE血清”和“ISE尿液”。 3、点击“定标申请F5”。 4、将定标液放置在样本盘上设定的位置上。 5、点击 开始测试 申请质控测试 1、选择“”-“质控 2、在下拉列表中选择质控液、质控液位置和样本杯类型。 3、选择进行质控测试的项目。 4、点击“确定F8”。 5、选择“”-“样本”-“列表F6”,点击“打印F7”打印质控申请列表。 6、根据打印质控申请列表将质控液装载到样本盘上。 7、点击 开始测试。 样本测试 手工申请单个样本测试 1、选择“”-“样本”。 2、输入以下样本信息: l 编号:范围为1~9000,长度不能超过10位。 l 样本盘号和位置:最多可以设置10个虚拟样本盘。已经被占用的样本位置在释放之前不能用于再次申请。 l 样本类型:选择血清、血浆、尿液、脑脊液和其它。 l 备注:输入或选择备注信息。输入长度不能超过30个字符。 3、选择进行测试的项目和组合项目。 4、点击“项目选项F2”设置项目稀释倍数和重复次数。 5、点击“确定F8”完成申请。 6、重复步骤2~5申请更多样本。 7、点击“列表F6”,然后点击“打印F7”打印样本列表 8、对照样本列表将样本放置在样本盘对应的位置上。 9、点击 开始测试。 手工批量申请样本测试 1、选择“”-“样本”。 2、在“编号”中输入第一个样本的编号。 3、输入以下样本信息: l 样本盘号和位置:输入起始样本将要放置的样本盘和位置。 l 样本类型:选择血清、血浆、尿液、脑脊液和其它。 l 备注:输入或选择备注信息。输入长度不能超过30个字符。 4、选择进行测试的项目和组合项目。 5、点击“项目选项F2”设置项目稀释倍数和重复次数。 6、点击“批量F3”,输入最后一个样本的编号,然后点击“申请”。 7、点击“列表F6”,然后点击“打印F7”打印样本列表。 8、对照样本列表将样本放置在样本盘对应的位置上。 9、点击 开始测试。 手工申请急诊样本测试 一般急诊 可以申请单个急诊样本,也可以批量申请急诊样本。除了需要勾选“急诊”复选框,其它申请步骤与常规样本相同。 申请完成后,点击“列表F6”,然后点击“打印F7”打印样本列表。对照样本列表将样本放置在样本盘对应的位置上,然后点击 开始测试。 快捷急诊 申请快捷急诊样本前,请确保已设置了默认项目。 1、在界面右上角点击 按钮。 2、输入以下样本信息: l 编号:输入样本编号,默认从9001开始。 l 样本盘号和位置:最多可以设置10个虚拟样本盘。已经被占用的样本位置在释放之前不能用于再次申请。 l 样本类型:选择血清、血浆、尿液、脑脊液和其它。 l 样本杯:选择样本杯类型,标准杯或微量杯。 3、确认默认测试项目。 4、点击“项目选项F2”设置项目稀释倍数和重复次数。 5、点击“保存F7”完成申请。 6、将样本放置在样本盘对应的位置上。 7、点击 开始测试。 申请条码样本测试 连接LIS的条码样本测试 将贴有条码标签的样本放在样本盘的空闲位置上,点击 开始测试。系统开始扫描样本盘上的样本,并自动根据从LIS获取的申请信息进行测试。 未连接LIS的条码样本测试 1、将待测的条码样本按顺序放置在样本盘上。 2、选择“”-“状态”,点击“扫描F5”。 3、选择样本扫描范围: l 扫描全部位置:扫描样本盘上的所有位置; l 扫描指定范围位置:扫描的指定的位置范围。输入扫描起始位和终止位。 4、点击“确定”。 如果设置了默认组合项目,扫描后样本的申请项目为默认组合项目,否则需要另外申请项目 5、选择“”-“样本”。 6、按照上文所述步骤申请单个或批量常规样本测试或急诊样本测试。 7、点击 开始测试。 追加样本测试 1、按照上文所述步骤追加新的样本申请。 2、点击 按钮申请加样暂停。 3、观察系统状态区的等待加样暂停时间,等待倒计时变为0。系统将弹出提示框,提醒加载样本。 4、观察样本盘指示灯,当指示灯灭时,将追加的样本放在样本盘设定的位置上。 l 如果系统正在测试中,将自动开始测试追加的样本。 l 如果系统处于非测试状态,点击 开始测试。 样本重测 手动重测 可以通过“样本”界面和“当前结果”或“历史结果”界面申请手动重测。 在“样本”界面点击“重测F4”,输入重测样本编号,点击“选择”,输入样本信息。确认所有重测申请信息后,将样本放置在样本盘上,然后点击 开始测试。 选择“”-“当前结果”或“历史结果”,选中需要重测的项目,点击“重测F5”。修改重测样本所在的盘号和位置,设置样本量和稀释倍数(4~201)。将样本放置在样本盘上,然后点击 开始测试。 自动重测 系统支持判断测试结果是否超出危急值范围或线性范围,对项目进行自动重测。 根据0参考范围的步骤设置项目危急值范围,并勾选“自动重测”复选框。系统将在测试结果超出设定的危急值范围后自动执行重测。 根据错误!未找到引用源。错误!未找到引用源。的步骤设置线性范围,并勾选“自动重测”复选框。系统将在测试结果超出设定的线性范围后自动执行重测。 查看重测结果 选择“”-“当前结果”或“历史结果”,选择需要查看的样本和项目,点击“选项F6”,然病人信息录入 可以在测试前、测试过程中或测试后录入病人信息。 录入常规样本和一般急诊病人信息 选择“”-“样本”,输入样本编号,点击“病人信息F1”,然后输入病人信息。 选择“”-“当前结果”,选择样本,点击“样本信息F3”,然后输入病人信息。 选择“”-“历史结果”,点击“查询F1”查找样本,选中样本,点击“样本信息F3”,然后输入病人信息。 录入快捷急诊样本病人信息 点击 按钮,输入样本编号,点击“病人信息F1”,然后输入病人信息。 选择“”-“当前结果”,选择样本,点击“样本信息F3”,然后输入病人信息。 选择“”-“历史结果”,点击“查询F1”查找样本,选中样本,点击“样本信息F3”,然后输入病人信息。 查看样本测试结果 查看当前结果 选择“”-“当前结果”,点击“查询F1”查找当天的样本结果,然后根据需要选择以下按钮进行相应的操作: l 样本信息F3:录入样本的病人信息。 l 反应曲线F4:查看样本测试反应曲线和反应数据。 l 重测F5:对选中的项目进行重测。 l 选项F6:可以删除结果,编辑结果,查看重测结果,合并打印样本,和定制结果显示内容。 l 打印F7:打印当前显示的测试结果。 l 传输F8:将选中的测试结果或当前显示的所有测试结果传输到LIS主机。 查看当前结果 选择“”-“历史结果”,点击“查询F1”查找一段时间范围内的样本结果,然后根据需要选择以下按钮进行相应的操作: l 样本信息F3:录入样本的病人信息。 l 反应曲线F4:查看样本测试反应曲线和反应数据。 l 重测F5:对选中的项目进行重测。 l 选项F6:可以删除结果,编辑结果,查看重测结果,合并打印样本,和定制结果显示内容。 l 打印F7:打印当前显示的测试结果。 l 传输F8:将选中的测试结果或当前显示的所有测试结果传输到LIS主机。 录入病人信息 在样本列表中选择样本,然后点击“样本信息 F3”打开“病人信息”界面,录入样本的病人信息。 质控结果不能录入病人信息。 紧急停止 点击主界面右上角的 按钮,然后点击“确定”。系统所有未完成的动作立即取消,所有的泵和阀被关闭,系统进入故障状态。 若要继续测试,选择 “”-“仪器命令”,然后选择“系统恢复”。恢复完成后点击 继续测试。 注意:执行紧急停止操作将停止仪器所有的测试活动,所有尚未运行完毕的测试全部作废,执行前请谨慎考虑。 日常维护 每天测试结束后,应完成以下维护项目: l 检查样本针、试剂针和搅拌杆 l 检查清洗池 l 检查样本/试剂注射器 l 检查浓缩/强化清洗液余量 l 清洗电解质电极 关机 切换登录用户 如需切换不同的操作者,当仪器状态为“空闲”时,点击“”-“注销”,然后输入用户名和密码登录系统。 关闭分析部电源 如果需要保留试剂制冷功能,则只需要关闭分析部电源即可。 当仪器状态为“空闲”时,点击“”-“关机”退出操作系统并关闭操作部电源,然后按照以下顺序关闭电源: l 打印机电源 l 操作部显示器电源 l 分析部电源 l 安装有数据管理软件或LIS的计算机显示器电源 l 进水模块电源 关闭总电源 当仪器状态为“空闲”时,点击“”-“关机”退出操作系统并关闭操作部电源,然后按照以下顺序关闭电源: l 打印机电源 l 操作部显示器电源 l 分析部电源 l 分析部主电源 l 安装有数据管理软件或LIS的计算机显示器电源 l 进水模块电源 关闭主电源后,请从试剂仓中取出试剂,并妥善保存。主电源关闭过长可能会对ISE电极有影响,关闭前,请对ISE电极执行离机保存。 关机后操作 l 打开样本盘盖,取出定标液、质控液和样本; l 检查分析部台面是否沾有污渍。如果有,请用干净软布将污渍擦拭干净; 检查高浓度废液桶。如果有废液,请将废液桶清空 BS-800生化分析仪维护保养程序 每天维护 检查样本针/试剂针/搅拌杆 选择“”-“维护”-“维护”-“生化维护指令”,选择“针内壁清洗检查”,检查样本针、试剂针和搅拌杆内壁清洗的出水情况是否正常。建议每天开始测试前执行此维护。 检查清洗池 选择“”-“维护”-“维护”-“生化维护指令”,选择“针/搅拌杆清洗灌注”,检查样本针清洗池、试剂针清洗池和搅拌杆清洗池的清洗水流出状态是否正常,流量是否合适。建议每天开始测试前执行此维护。 检查样本/试剂注射器 每天开始测试前检查样本注射器和试剂注射器是否渗漏,内部是否有气泡。 检查去离子水连接 每天开始测试前,检查分析部后面板上的进水口与进水管路的连接,确认水箱或其它外置储水容器有足够的去离子水,检查导液管畅通无弯折和漏液,检查进水模块(推荐配置)开关是否打开。 检查废液连接 每天开始测试前检查废液排放系统是否正常,确保废液导液管畅通无弯折,排出通畅,高低浓度废液处理得当,处理方法符合当地法规。 检查浓缩/强化清洗液余量 每天测试前检查浓缩清洗液和强化清洗液余量是否充足。 一瓶浓缩清洗液为2L,按照每天做4000个测试,每瓶浓缩清洗液可用4~5天。请按照此消耗量检查和添加浓缩清洗液。 每批测试结束后均有三次样本针强化清洗,每次消耗清洗液约40μl,每周反应杯强化清洗需消耗40x165/1000=6.6ml清洗液。请按照此用量添加或更换样本针强化清洗液。 清洗电解质电极 选择“”-“维护”-“维护”-“电解质维护”,选择“电极清洗”,向2 ml的样本杯中倒入约200μl的ISE清洗液,然后将样本杯加载到样本盘内盘上预设的ISE清洗液位D4。系统开始对电解质电极进行清洗。 建议每天结束ISE测试后或关机之前执行此维护。 每周维护 清洗样本针/试剂针外壁 选择“”-“维护”-“维护”-“生化维护指令”,选择“针/搅拌杆/清洗池维护”,清洗样本针和试剂针外壁,防止交叉污染。 清洗搅拌杆 选择“”-“维护”-“维护”-“生化维护指令”,选择“针/搅拌杆/清洗池维护”,清洗样本搅拌杆和试剂搅拌杆,以降低交叉污染。 强化清洗 选择“”-“维护”-“维护”-“生化维护指令”,选择“强化清洗”,使用强化清洗液对样本针、试剂针、搅拌杆、反应杯和清洗机构进行清洗,以降低交叉污染。反应杯检测 选择“”-“维护”-“维护”-“生化维护指令”,选择“反应杯检测”,通过测试每个反应杯的水空白来判断反应杯是否为脏杯,避免因此而影响测试结果。 光源灯检测 选择“”-“维护”-“维护”-“生化维护指令”,选择“光源灯检测”,通过测试5个反应杯的吸光度均值来判断光源强度,以确定是否需要更换光源灯。 每两周维护 清洗电解质电极管路 选择“”-“维护”-“维护”-“电解质维护”,选择“管路清洗”,使用ISE清洗液对ISE管路进行清洗,去除管路内的污染物,保持管路畅通。 每月维护 清洁清洗池 选择“”-“维护”-“维护”-“生化维护指令”,选择“针/搅拌杆/清洗池维护”,去除五个清洗池(第一试剂针、第二试剂针、样本针、样本搅拌杆和试剂搅拌杆)内的废液和灰尘,防止堵塞。 清洁驱动轴 选择“”-“维护”-“维护”-“生化维护指令”,选择“针/搅拌杆/清洗池维护”,清洁样本针、试剂针和搅拌杆的驱动轴,减少驱动轴运动时的噪音和磨损,以保证使用寿命。 清洁自动清洗机构 选择“”-“维护”-“维护”-“生化维护指令”,选择“自动清洗灌注”,清洁自动清洗机构,避免废液淤积和引起交叉污染。 清洗过滤器滤芯 选择“”-“维护”-“维护”-“生化维护指令”,选择“过滤器和水桶维护”,清洗过滤器滤芯,避免杂质在过滤器中淤积,提高仪器用水水质。 清洗防尘网 建议每月清洗防尘网,去除上面的灰尘,确保进风量充足。 1、确认分析部主电源已关闭。 2、打开分析部前门,取下防尘网。 3、用吸尘器、毛刷或清水清洁防尘网,并自然晾干。 4、将清洗后晾干的防尘网重新装回仪器。 5、关闭分析部前门。 每三个月维护 更换样本/试剂注射器活塞杆 选择“”-“维护”-“维护”-“生化维护指令”,选择“更换注射器”,更换样本或试剂注射器活塞组件,确保仪器测试性能正常。 清洗去离子水桶 选择“”-“维护”-“维护”-“生化维护指令”,选择“过滤器和水桶维护”,清洗去离子水桶,保证整机清洗效果。 更换过滤器滤芯 选择“”-“维护”-“维护”-“生化维护指令”,选择“过滤器和水桶维护”,更换过滤器滤芯,避免影响过滤效果。 每六个月维护 更换光源灯 选择“”-“维护”-“维护”-“生化维护指令”,选择“更换光源灯”,对光源灯进行更 更换进水过滤器 建议每六个月更换进水过滤器,避免因磨损而影响过滤效果。 1、确认仪器状态,是否处于断电、孵育或空闲状态。 2、关闭水机或其它供水设备的电源。 3、用容器接水,拧开旧过滤器出水口的排气口,释放进水管路中的压力。 4、拧松旧过滤器两端的管箍,拔掉导管,然后将导管两端切掉约15~20mm。 5、将新过滤器按方向与导管重新连接,然后拧紧管箍。 6、打开水机或其它供水设备电源,观察新过滤器1分钟以上,确保无任何泄漏。 不定期维护 清洁分析部面板 当台面积有灰尘或其它污染台面时,清洁分析部台面、盘盖、触摸屏、键盘,去除灰尘或其它污物,保持清洁。 1、确认仪器处于非测试状态,打开分析部上盖。 2、使用蘸有酒精的纱布轻轻擦拭分析部台面和盘盖。 3、使用专用清洗液清洁触摸屏和键盘。 4、盖上分析部上盖。 清洁样本盘 当发生样本意外泼洒于仓内,以及目视仓内壁积有灰尘时,清洁样本盘组件,保持工作环境和台面整洁,降低发生交叉污染的风险。 1、确认仪器处于停机或空闲状态。 2、打开样本盘盖,取下外盘和内盘,放置于安全可靠的位置。 3、用纱布蘸少量去离子水或酒精擦拭仓内壁和样本制冷锅外壁。必要时,可使用纱布蘸少量中性清洗液擦拭。 4、使用纱布蘸少量去离子水或酒精擦拭样本盘,对于样本位上的污物,可以使用棉签蘸少量酒精擦拭。 5、将样本盘装回仓内,盖上盘盖。 清洗样本针内壁 当样本针堵塞,无法进行吸样操作,或进行样本针检查发现样本针内壁出水不正常时,选择“”-“维护”-“维护”-“生化维护指令”,选择“清洗/更换针”,清洗样本针内壁,避免因堵塞而导致测试无法正常进行。 清洗第一/第二试剂针内壁 当试剂针堵塞,无法进行吸样操作,或进行试剂针检查发现试剂针内壁出水不正常时,选择“”-“维护”-“维护”-“生化维护指令”,选择“清洗/更换针”,清洗第一试剂针和第二试剂针内壁,避免因堵塞而导致测试无法正常进行。 更换样本针 当样本针发生损坏,报废,无法进行修复时,选择“”-“维护”-“维护”-“生化维护指令”,选择“清洗/更换针”,更换样本针。 更换第一/第二试剂针 当试剂针损坏或报废,无法修复;或严重堵死,无法疏通;或弯折报废时,选择“”-“维护”-“维护”-“生化维护指令”,选择“清洗/更换针”,更换第一试剂针或第二试剂针。 更换样本搅拌杆 当样本搅拌杆发生损坏、报废、无法进行修复时,选择“”-“维护”-“维护”-“生化维护指令”,选择“针/搅拌杆/清洗池维护”,对样本搅拌杆进行更换,以免影响测试。 更换试剂搅拌杆 当试剂搅拌杆发生损坏、报废、无法进行修复时,选择“”-“维护”-“维护”-“生化维护指令”,选择“针/搅拌杆/清洗池维护”,对试剂搅拌杆进行更换,以免影响测试。 去除注射器气泡 当检查发现注射器内有气泡时,选择“”-“维护”-“维护”-“生化维护指令”,选择“清除注射器气泡”,排空管路中可能存在的气泡,并对针、搅拌杆和清洗池进行清洗灌注。 冲洗反应杯 当发生以下任何一种情况时对反应杯进行冲洗: l 当发现清洗机构溢流或经过综合强化清洗之后仍然被判定为脏杯时,需要取下相应玻璃杯进行冲洗。 l 当测试过程中发生断电事故,并且在短时间内仪器不能恢复测试状态时,为防止残留液体在反应杯中挥发结晶,请冲洗杯中有残留液体的反应杯。 选择“”-“维护”-“维护”-“生化维护指令”,选择“更换反应杯”,使用稀释清洗液和去离子水对反应杯内外壁进行浸泡与清洗。 更换反应杯 当发生以下任何一种情况时对反应杯进行更换: l 执行反应杯检测后,发现杯异常。 l 执行反应杯冲洗操作后,反应杯仍然无法使用。 l 发现反应杯通光面有划痕或破裂。 选择“”-“维护”-“维护”-“生化维护指令”,选择“更换反应杯”,更换反应杯,确保反应杯正常,无污染、划痕或破裂。 针/搅拌杆强化清洗 当发现堵针或对针/搅拌杆进行清洗后,选择“”-“维护”-“维护”-“生化维护指令”,选择“针/搅拌杆强化清洗”,使用强化清洗液对样本针、试剂针和搅拌杆进行清洗,以降低交叉污染,避免废液在废液管路中淤积。 电解质稀释杯/排液口清洗 选择“”-“维护”-“维护”-“电解质维护”,选择“稀释杯/排液口清洗”,对ISE稀释杯/排液口进行清洗,去除ISE稀释杯和排液口因长时间使用而累积的污染物。建议每月对ISE稀释杯/排液口进行清洗。 更换电解质电极 当测试次数达到20,000个(约三个月)时,建议更换电极。先对电极进行预处理,然后再更换电极。 电极预处理 1、从包装盒中取出ISE电极。如果电极湿了,擦干水并晾干。 2、去掉电极盒中的海绵,将电极放入电极盒中进行预处理。 3、在电极的流动通道中滴入0.5ml的血清。滴入时确保血清能渗透过电极流动通道。 4、加入大约25ml的稀释液,使稀释液浸没整个电极,并放置一夜。 5、使用去离子水清洗电极并擦干待用。 6、从参比电极盒中取出参比电极。 7、用水冲去其表面的高浓度盐溶液,然后擦干以便使用。 更换电极 选择“”-“维护”-“维护”-“电解质维护”,选择“更换电极”,按界面向导取出需要更换的电极,然后按顺序装好新电极。 注意:电极从左至右依次为参比、Na、K和Cl。电极与接头颜色的对应关系如下: l Na:黄色 l K:红色 l Cl:蓝色 如果分析仪将要断电一至两天,建议在断电执行注水操作。 选择“”-“维护”-“维护”-“电解质维护”,选择“注水操作”,使用移液抢向ISE加样口加入750μL去离子水,确保在分析仪断电的时间内一直处于湿润状态,以免因干燥而损坏。 电极离机保存 仪器长时间断电时,ISE模块不能通过周期性灌注来保持电极湿润。电极会因为干涸而损坏,因此有必要将电极保存起来。 1、关闭分析部电源。 2、打开ISE模块的上方面壳。 3、松开固定ISE不锈钢盖板的螺钉,取出ISE不锈钢盖板。 4、断开ISE电极的连接,取出ISE电极。 5、将空电极装在ISE模块上。 6、盖上ISE不锈钢盖板并拧紧固定螺钉。 7、盖上ISE模块的上方面壳。 8、对Na和K电极进行保存处理: l 在Na,K电极的接头上盖上电极帽。 l 将电极放入电极盒中进行保存。 9、对Cl和参比电极进行保存处理: 方法一: l 给电极盖上电极帽。 l 电极盒中放上海绵,并在电极盒中注入2mL的ISE稀释液。 l 在电极盒中放上海绵和注入稀释液。 l 将电极放在海绵上。 l 在电极盒中放入电极。 l 盖上电极盒的盖子,确保电极盒的密封性。这是通过稀释液的蒸汽来保持电极的湿润,因此盒子密封性很重要。 l 盖上电极盒盖。 方法二: l 给电极盖上电极帽。 l 将棉纱蘸上ISE稀释液,并轻轻拧干。用棉纱包好电极,并把极放入电极包装盒中。 l 用蘸有稀释液的棉纱包住电极。 l 盖上电极盒的盖子,确保电极盒的密封性以保证棉纱中的稀释液不会干掉。 维护日志表 维 护 记 录 年 月 第1页 共2页 维护项目(每日) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 1 检查样本针/试剂针/搅拌杆 2 检查清洗池 3 检查样本/试剂注射器 4 检查去离子水连接 5 检查废液连接 6 检查浓缩/强化清洗液余量 7 清洗电解质电极 维护项目(每周) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 1 清洗样本针/试剂针外壁 2 清洗搅拌杆 3 强化清洗 4 反应杯检测 5 光源灯检测 维护项目(每两周) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 1 清洗电解质电极管路 维护项目(每月) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 1 清洁清洗池 2 清洁驱动轴 3 清洁自动清洗机构 4 清洗过滤器滤芯 5 清洗防尘网 维护项目(每三个月) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 1 更换样本针/试剂针注射器活塞杆 维 护 记 录 年 月 第1页 共2页 2 清洗去离子水桶 3 更换过滤器滤芯 维护项目(每六个月) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 1 更换光源灯 2 更换进水过滤器 维护项目(其它) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 1 清洁分析部面板 维护项目(其它) -续 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 2 清洁样本盘 3 清洗样本针内壁 4 清洗第一/第二试剂针内壁 5 更换样本针 6 更换第一/第二试剂针 7 更换样本搅拌杆 8 更换试剂搅拌杆 9 去除注射器内气泡 10 冲洗反应杯 11 更换反应杯 12 针/搅拌杆强化清洗 13 电解质稀释杯/排液口清洗 14 更换电解质电极 15 注水操作 16 电极离机保存 17 条码维护 艾瑞德快速免疫分析仪(HS-CRP)标准操作程序 1原理 血超敏C反应蛋白测定采用双抗体夹心免疫层析原理,使用专用测定仪(i-Reader)对样本中的HS-CRP进行定量测定。 图一. 胶体金标记免疫层析试剂条结构示意图及作用 1、 吸收垫:吸收多余液体。 2、 PVC底板:提供试剂封装外壳。 3、 C1、C2:标准质控区。羊抗鼠抗体结合于硝酸纤维膜上。 4、 T:检测区。鼠源性单克隆二抗。 5、 硝酸纤维素膜:提供抗原抗体反应的固相载体。 6、 胶体金垫:含胶体金标记的鼠源性单克隆抗体。 7、 样品吸收垫:吸收样品液体。 图二. 免疫反应原理图 样品加入样品吸收垫,样品中的液体首先溶解胶体金垫中含有的胶体金标记的鼠源性抗人CRP单克隆抗体,其次样品中待测CRP抗原与溶解的抗体结合,形成抗原-抗体*胶体金复合物,并靠毛细作用向检测线移动。当样品层析至检测区时,在硝酸纤维薄膜的检测线上固定有另一鼠源性抗人CRP单克隆二抗。可以进一步形成抗体-抗原-抗体*胶体金双抗体夹心复合物,并在检测线上聚积显现出一条可见的显色反应。无显色反应则表示样品中无抗原存在。而胶体金的量反应了待测抗原的量。从加样垫中泳动过来的过量胶体金标记的单克隆抗体是鼠源性的,无论携带抗原与否,均可被固定于标准的羊抗鼠抗体所捕获,形成显色反应,这种显色反应,既代表了整个反应体系是正确的,同时C1、C2区的显色反应的深浅,与检测区中被测抗原的量呈对应关系。胶体金颗粒在特定波长下,对光的吸收和散射与胶体金颗粒的量相关,通过专用测定仪(i-Reader)的光电感应器检测胶体金颗粒对光的吸收和散射,从而获得待测抗原的量。 1. 标本采集与处理 本检测可用于血液中CRP的检测,适用的样本类型有全血、血浆、血清。 1.1 血液的采集 1.1.1 静脉采血:除非是卧床的病人,一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布,因此可能影响血CRP水平。如采用全血或血浆作检验应采用抗凝。 1.1.2 末梢血采集:常用选择无名指,先用酒精棉球消毒,然后用一次性采血针穿刺,让血液自然流出,用消毒棉球轻拭去第一滴后,将血液收集在0.5毫升离心管(抗凝管),样本量应大于40微升,并在微型震荡器使血液与抗凝剂充分混匀,马上送检。 全血样本 1.2 样本处理 1.2.1 全血:全血样本无需处理,但应尽快检测不宜在室温中久存。 1.2.2 血浆和血清样本:全血样本以300-500g离心力离心5分钟,分离血浆或血清。4℃保存可稳定4天。置-70℃可长期保存,但不可反复冻融。 2. 试剂 2.1 HS-CRP检测试剂条:内含抗人CRP鼠单克隆抗体、标记抗人CRP单克隆鼠抗体胶体金物质、抗兔IgG羊多克隆抗体、标记兔IgG胶体金物质。 稀释液粉末:(0.1%BSA/PBS ,NaCl  ,Na2HPO4無水   ,KCL    ,KH2PO4   ,BSA  ,NaN3  ,D.W.   )临用前用蒸馏水复溶即可使用。每份稀释液粉用水15L蒸馏水复溶。 3. 仪器: 3.1 艾瑞得(i-Reader)快速测定仪。 3.2 快德行POCT样本前处理仪。 4. 操作 4.1 根据检测的样本类型,在快德行POCT样本前处理仪选择相对应的“模式”和稀释比率。 4.2 将HS-CRP试剂条至于样本前处理仪的干片台上,并向内插到底。 4.3 待检样本放在吸样针下,按下启动开关,前处理仪吸取样本并稀释混匀。 4.4 前处理仪的样品针自动将100微升稀释样本加入干片台上的试纸条。 4.5 待反应5分钟以后,将试纸条插入艾瑞得(i-Reader)快速测定仪的试剂插口,仪器测定并打印传输结果。 5. 计算 艾瑞德快速测定仪采用光学检测原理,通过光电管检测到试剂条检测区域的散射光后,自动计算成待测样本浓度。 6. 操作性能 6.1 精密度:对同一个样本重复测定5次,其CV值≤20%。 6.2 准确度:用已知标准液测定时,相对偏倚±20%以内 6.3 灵敏度: 6.3.1 用浓度为0 mg/L的标准液测得结果为检测线不显色。 6.3.2 用浓度为5mg/L的CRP标准液测得结果为4~5 mg/L。 6.4 分析测量范围:0.25~160mg/L。 6.5 临床可报告范围: 7.52 全血 2.5-160 mg/L 7.52 血清 0.25-12 mg/L 7. 参考区间 < 3 mg/L。 8. 临床意义 C-反应蛋白(C-Reactive protein,简称CRP)。早于1930年发现,是一种能与肺炎球菌C多糖体反应形成复合物的急性时相反应蛋白。 CRP由肝细胞所合成。含5个多肽链亚单位,非共价地结合为盘形多聚体。分子量为11.5万-14万。CRP不仅结合多种细胞、真菌及原虫等体内的多糖物质,在钙离子存在下,还可以结合卵磷脂和核酸。结合后的复合体具有对补体系统的激活作用,作用于C1q。CRP可以引发对侵入细胞的免疫调理作用和吞噬作用,而表现炎症反应。 CRP作为急性时相反应的一个极灵敏的指标,血浆中CRP浓度在急性心肌梗死、创伤、感染、炎症、外科手术、肿癌浸润时迅速显著地增高,可达正常水平的2000倍。 CRP作为急性时相蛋白在各种急性炎症、组织损伤、心肌梗塞、手术创伤、放射性损伤等疾病发作后数小时迅速升高,并有成倍增长之势。病变好转时,又迅速降至正常,其升高幅度与感染的程度呈正相关。 CRP与其它炎症因子的相关性: CRP与其它炎症因子如白细胞总数、红细胞沉降率和多形核白细胞等具有密切相关性。CRP与WBC存在正相关。在炎症反应中起着积极作用,使人体具有非特异性抵抗力。在患者疾病发作时,CRP可早于WBC而上升,回复正常也很快。故具有极高的敏感性。 CRP可用于细菌和病毒感染的鉴别诊断:一旦发生炎症,CRP水平即升高,而病毒性感染CRP大都正常。脓毒血症CRP迅速升高,而依赖血培养则至少需要48小时,且其阳性率不高。又如CRP能快速有效地检测细菌性脑膜炎,其阳性率达99%。 恶性肿瘤患者CRP大都升高。如CRP与AFP的联合检测,可用于肝癌与肝脏良性疾病的鉴别诊断。CRP测定用于肿瘤的治疗和预后有积极意义。手术前CRP上升,手术后则下降,且其反应不受放疗、化疗和皮质激素治疗的影响,有助于临床估价肿瘤的进程。 CRP用于评估急性胰腺炎的严重程度。当CRP高于250㎎╱L时,则可提示为广泛坏死性胰腺炎。 超敏CRP检验可检测出低水平(0.1~10mg/L)的CRP浓度,在急性冠状动脉综合征中的临床意义具体来讲,首先它可以作为一个预测指标。(CRP)是一种非常敏感、非特异性、全身性的炎症、组织损伤、感染的标志物,几个大范围的前瞻性流行病学调查研究显示血清CRP水平是心肌梗死、中风、外周动脉疾病、无明显心血管疾病、急性冠脉综合征患者及稳定型冠状动脉疾病(CAD)患者的强有力的、独立的、预测性的危险因子。在过去的6年里,许多前瞻性研究已证实在已确诊的心血管疾病个体中,HS-CRP是将来发生心血管疾病发病率和死亡率的预测指标。其次它也是一个很好的预后指标,动脉粥样硬化损伤、局部炎症的程度和范围引起的刺激反应可导致血清HS-CRP水平升高,急性心肌局部缺血患者可见CRP增高,随后心肌梗死,峰值在症状发作后36~96h,CRP>15mg/L是不稳定型心绞痛患者90天内病情恶化的强有力预测因子。 9. 参考文献 中华人民共和国卫生部医政司编.《全国临床检验操作规程(第二版)》.南京:东南大学出版社,1997.268 自动生化分析仪的评价程序 自动生化分析仪是一种高度自动化、高精度、高准确度、设计更为完善的分析仪器,一般不需要调节和校正。但在仪器开始使用之前,有必要进行一些技术指标的评价,如精密度,互染率、波长准确性、线性以及与其它仪器的相关性等。 (一) 精密度评价 仪器的精密度测试主要有批内重复性和总精密度两个方面,反应仪器的测定结果的精密度。 1. 批内重复性 测定批内重复性就是对样品的某一个或几个项目各重复测定20次,计算它的CV值即不精密度,然后与厂家的该项技术指标进行比较。 2. 总精密度 以血糖为例,选择两个浓度(有医学决定水平的正常和异常值),每天测定2批,每个浓度各平行两次,两批之间的时间间隔不少于2小时,连续20天,要求每天必须做室内质量控制。然后计算总精密度(ST)。 (二)互染率  互染率的测定方法是选择在任一波长有特异吸收的溶液,如配制浓度相差5-10倍的两个不同浓度的重铬酸钾溶液,在340nm处比色。在用蒸馏水调零后,先用低浓度的连续比色三次(L1,L2,L3),然后用高浓度的比色三次(H1,H2,H3),再用低浓度的比色三次(L4,L5,L6)。互染率计算方法: [( H3-H1)/H3]*100%=互染率%(高浓度对低浓度) [(L4-L6)/L6]*100%=互染率%(低浓度对高浓度) 互染率越小越好,应小于厂商估计的互染率。目前自动生化分析仪的互染率一般都小于1%,有些近乎于0%。 (三)波长检查 波长检查包括线性和准确性的检查。线性检查方法是用系列标准溶液在最大吸收处读取吸光度,然后绘制标准曲线或用回归法计算线性相关。准确性检查的方法有两种:①用已知准确摩尔浓度和摩尔消光系数(ε)的溶液在其特定波长比色,计算ε=A值/摩尔浓度,然后与标准ε比较。②与已知准确波长的仪器比较,如有漂移,应进行适当的校正。 (四)相关性  因为不同的仪器的测定结果之间不可必免地存在着一定的差别,为了取得一致的结果,有两台仪器以上的实验室,应该进行仪器间的结果的比较。在仅有一台仪器时,为了得到实验室之间的一致性,也可以用参考实验室的仪器进行比较。方法是相同的试验项目在不同的仪器上测定,然后用线性回归进行比较和校正,一般的全自动生化分析仪都设有校正程序。 丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定 1. 预期用途 本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆样本中丙氨酸氨基转移酶(ALT)的含量。 2. 临床意义 ALT活性增高: (1) 肝胆疾病:传染性肝炎、肝癌、中毒性肝炎、脂肪肝、胆管炎等。 (2)心血管疾病:心肌梗死、心肌炎、心力衰竭时的肝淤血和脑出血等。 (3)药物好毒物:氯丙嗪、喹啉、水杨酸制剂、乙醇,铅、汞、四氯化碳或有机磷等。 医学决定水平: 60U/L:高于此值对可引起ALT升高的各种疾病均应考虑,并应进行其他检查以求确诊。 300U/L:高于此值通常与急性肝细胞损伤有关,如病毒性肝炎、中毒性肝炎、肝性休克等,而酒精性肝炎的ALT往往低于此值,其他如传染性单核细胞增多症、多肌炎等也都往往低于此值。 3. 检测原理 L-丙氨酸+α-酮戊二酸丙酮酸+L-谷氨酸 NADH+丙酮酸+H+L-乳酸+NAD+ NADH的氧化速率与样本中ALT活性成正比,在340nm波长处,通过连续监测吸光度的下降速率(△A/min),即可计算出样本中ALT的活性。 4. 样品采集和处理 请使用血清或肝素抗凝血浆样本,避免溶血。样本应在采血后立即离心分离,并在当日检测。如不能即时检测,冷藏(2~8℃)可保存7天,冷冻(-20℃)可保存1个月,避免反复冻融。 5. 试剂 5.1 试剂组成 【试剂主要组成成分】 试剂 成分 浓度 R1 α-酮戊二酸 1.25g/L 还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH) 0.285g/L R2 L-丙氨酸 100g/L 乳酸脱氢酶(LDH) 25KU/L 5.2 试剂准备 R1和R2试剂为即用型液体试剂,开瓶装载即可使用,用后应及时冷藏保存。 5.3 试剂的保存及稳定性 未开瓶试剂盒(含校准品)于2~8℃密闭避光保存有效期为12个月,开瓶后2~8℃避光保存可稳定30天。 运输和保存均应在2~8℃低温条件下进行。 5.4 试剂使用中的注意事项及危险预防 1)严格按照试剂盒说明书的要求使用试剂。 2)不同批号试剂盒中各组份不能互换或混用。 3)超过有效期的试剂不能使用。 4)试剂开瓶后,会导致试剂与空气中成分有反应的可能性和水分蒸发,对检测结果有一定的影响,因此请尽快使用和减少试剂与空气的接触。 5)当试剂变混浊或被污染或空白吸光度值<1.000时,表明试剂已失效,应弃去。 6)装载试剂时防止产生气泡,否则影响试剂加注而无法保证结果。 7)使用时应避免与人体接触,当试剂误入口中或眼中,或者附着到皮肤上的时候,请立即用大量清水冲洗,如有必要,请接受医生的治疗。 5.5 废弃物处理 试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规(如WS/T249-2005《临床实验室废物处理原则》等)进行废物处理。 6. 检验操作 6.1 基本参数 测定方法:速率法 主波长:340nm 副波长:405nm 反应方向:向下   空白(B) 校准(C) 测定(U) 样 本(μl) -- -- 15 校准品(μl) -- 15 -- 蒸馏水/生理盐水(μl) 15 -- -- 试剂R1(μl) 240 240 240 混匀,37℃恒温5分钟。 试剂R2(μl) 60 60 60 混匀,37℃恒温1分钟后,340nm波长处准确测定平均每分钟吸光度变化率△A/min。 结果计算: 根据校准品的浓度值与吸光度变化率值在全自动生化分析仪上自动生成F值和校准曲线。 样本ALT活性(U/L)= ΔA/min × F 6.3 校准 6.3.1 校准品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套校准品进行校准。 6.3.2 校准品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司的校准品时,请参照校准品使用说明书进行准备。加样时应避免气泡产生。 6.3.3 校准品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3) 开瓶复溶后的校准品, -20℃保存可稳定3个月。 6.3.4 校准周期 1) 使用四川沃文特生物技术有限公司提供的校准品每隔30天进行1次校准。 2) 当试剂批号更换时,要求进行校准。 3) 当试剂瓶更换时,要求进行校准。 4) 当仪器更换零部件或者保养时,要求进行校准。 5) 当发现质控品、患者样品的测定值显示异常时,要求进行校准。 6.3.5 校准品使用注意事项 1)严格按照校准品说明书要求进行操作。 2)请不要使用我公司以外的校准品,否则结果的准确性无法保证。 3)校准品使用后请按要求妥善保管,避免污染。 4)避免反复冻融使用。 6.4 质控 6.4.1 质控品 建议使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清(水平2和/或水平3)。 6.4.2 质控品准备 使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清时,请参照质控品使用说明书进行准备。 6.4.3 质控品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的质控品在2℃~8℃或-20℃下密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3)血清复溶后,在-20℃下至少稳定30天。 6.4.4 质控可接受性判断 使用正常值和病理值生化质控品(无法满足时至少使用其中一种)进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施,如:质控品是否有质量问题,重新校准,试剂是否有质量问题,仪器运行是否正常等相关因素进行确认后解决问题,作好记录。 6.4.5 质控品使用注意事项 1)严格按照质控品说明书要求进行操作。 2)当使用质控品时,由于基质效应的影响和不同实验室测定条件的差异,测定值与标示靶值可能存在一定的偏差,建议用户建立自己实验室的控制均值和标准差。 3)避免反复冻融使用。 7. 结果处理 对超出可报告范围的结果的处理:取0.1ml样品加0.9ml蒸馏水,重复测定后结果乘以稀释倍数10进行报告。对检验结果为病危报警值的处理:应立即报告。 8. 参考值范围 建议各实验室根据CLSI C28-A3 Vol.20 No.12(How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline --Third Edition)文件建立自己的参考值范围。用于诊断时应结合患者临床表现和其他临床检查结果。 男性:5~40 U/L 女性:5~35 U/L 9. 产品性能 9.1 空白吸光度 试剂空白吸光度:≥1.000(主波长340nm,光径10mm)。 9.2 准确度 相对偏差在±10.0%范围内。 9.3 精密度 批内重复性CV≤5.0%、批间相对偏差R≤10.0% 。 9.4 分析灵敏度 ALT浓度为100U/L的吸光度变化值(△A)在0.010~0.040范围内。 9.5 线性范围 5~1000U/L,r≥0.990; 5~100U/L时,线性偏差在±10U/L范围内; 100~1000U/L时,线性偏差在±10.0%范围内。 9.6 抗干扰能力 依据CLSI EP7-A文件方案,在贝克曼AU400和日立7080全自动生化分析仪上进行研究,得出结果为: 胆红素684μmol/L 以下ALT测定结果影响为不超过10%; 甘油三酯5.65mmol/L以下对ALT测定结果影响为不超过10%; 血红蛋白2.0g/L以下对ALT测定结果影响为不超过10%。 抗坏血酸0.30g/L以下对ALT测定结果影响为不超过10%。 10. 检验注意事项 1)试剂在使用中应避免污染,否则将会导致失效; 2)试剂与样品用量可根据不同仪器的需要,在试剂样品体积比例不变的条件下,适当增加或减少试剂与样品的用量。 3)更换批号后建议重新定标。 4)准确的结果取决于样品、试剂、仪器等多个环节的控制。 5)药物、抗凝剂、促凝剂、分离胶等其他物质都可能对测定值造成无法预知的干扰。当怀疑标本存在这些干扰物质的影响时,请停药后或采用无任何添加剂的血清进行测定。 11. 安全性提示 血清等样品可能含有病毒、细菌等病源微生物,操作者有被感染的潜在危险性,操作时应采取防范措施;试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规进行废物处理。 12. 主要参考文献 1) 尚红等.全国临床检验操作规程.人民卫生出版社,2014年第4版:279-281. 2) 韩志钧等. 临床化学常用项目自动化分析法,辽宁科学技术出版社,2005年第三版:746-756. 天门冬氨酸氨基转移酶(AST) 1. 预期用途 本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆样本中天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的活性。 2. 临床意义 AST在心肌细胞内含量较多,当心肌梗死时,血清中AST活力增高,在发病后6~12小时之内显著增高,在48小时达到高峰,约在3~5天恢复正常。血清中AST也可来源于肝细胞,各种肝病可引起血清AST的升高,有时可达1200单位,中毒性肝炎还可更高。肌炎、胸膜炎、肾炎及肺炎等也可引起血清AST的轻度增高。 临床上还可通过计算AST/AST对肝病进行诊断和鉴别诊断。 医学决定水平 20U/L: 此为排除值,低于此水平时可排除多种与AST增高有关的疾病。因此应考虑其他的诊断。这个参考范围内的值还可作为病人自身对照,可与过去和(或)将来的测定值进行比较。 60U/L: 此值高于参考范围上限,当AST测定值超过此水平时,多种与AST增高有关的疾病均应加以考虑,如肝细胞损伤、心肌梗塞、肌肉与骨骼疾患,肝后胆道阻塞等,此时同时测定AST、ALP、Bili、CK等鉴别是肝脏疾病还是心肌疾患有重要意义。 300U/L: 高于此值通常为急性肝细胞损伤,如病毒性肝炎、中毒性肝炎等,而一般酒精性肝炎、心肌梗塞、进行性肌营养不良等测定值均在此水平以下。 3. 检测原理 L-天门冬氨酸+α-酮戊二酸草酰乙酸+L-谷氨酸 草酰乙酸+NADH+H+ L-苹果酸+NAD+ NADH的氧化速率与样本中AST活性成正比,在340nm波长处,通过连续监测吸光度的下降速率(ΔA/min),即可计算出样本中AST的活性。 4. 样品采集和处理 本试剂可检测血清、血浆、脑脊液、胸腹水样品,血清和血浆原则上采集空腹血(禁食12小时);正确使用抗凝剂(肝素抗凝);采血后应及时分离,防止溶血。 样品中AST在2~8℃保存可稳定7天,-20℃保存可稳定1个月。 5. 试剂 5.1 试剂组成 【试剂主要组成成分】 试剂 成分 浓度 R1 α-酮戊二酸 1.25g/L 还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH) 0.285g/L R2 乳酸脱氢酶(LDH) 15KU/L 苹果酸脱氢酶(MDH) 5KU/L L-天门冬氨酸 135g/L 5.2 试剂准备 R1和R2试剂为即用型液体试剂,开瓶装载即可使用,用后应及时冷藏保存。 5.3 试剂的保存及稳定性 未开瓶试剂盒(含校准品)于2~8℃密闭避光保存有效期为12个月,开瓶后2~8℃避光保存可稳定30天。 运输和保存均应在2~8℃低温条件下进行。 5.4 试剂使用中的注意事项及危险预防 1)严格按照试剂盒说明书的要求使用试剂。 2)不同批号试剂盒中各组份不能互换或混用。 3)超过有效期的试剂不能使用。 4)试剂开瓶后,会导致试剂与空气中成分有反应的可能性和水分蒸发,对检测结果有一定的影响,因此请尽快使用和减少试剂与空气的接触。 5)当试剂变混浊或被污染或空白吸光度值<1.000时,表明试剂已失效,应弃去。 6)装载试剂时防止产生气泡,否则影响试剂加注而无法保证结果。 7)使用时应避免与人体接触,当试剂误入口中或眼中,或者附着到皮肤上的时候,请立即用大量清水冲洗,如有必要,请接受医生的治疗。 5.5 废弃物处理 试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规(如WS/T249-2005《临床实验室废物处理原则》等)进行废物处理。 6. 检验操作 6.1 基本参数 测定方法:速率法 主波长:340nm 副波长:405nm 反应方向:向下   空白(B) 校准(C) 测定(U) 样 本(μl) -- -- 15 校准品(μl) -- 15 -- 蒸馏水/生理盐水(μl) 15 -- -- 试剂R1(μl) 240 240 240 混匀,37℃恒温5分钟。 试剂R2(μl) 60 60 60 混匀,37℃恒温1分钟后,340nm波长处准确测定平均每分钟吸光度变化率△A/min,绘制校准曲线图。 结果计算: 根据校准品的浓度值与吸光度变化率值在全自动生化分析仪上自动生成F值和校准曲线。 样本AST活性(U/L)= ΔA/min  × F 6.3 校准 6.3.1 校准品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套校准品进行校准。 6.3.2 校准品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司的校准品时,请参照校准品使用说明书进行准备。加样时应避免气泡产生。 6.3.3 校准品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3) 开瓶复溶后的校准品, -20℃保存可稳定3个月。 6.3.4 校准周期 1) 使用四川沃文特生物技术有限公司提供的校准品每隔30天进行1次校准。 2) 当试剂批号更换时,要求进行校准。 3) 当试剂瓶更换时,要求进行校准。 4) 当仪器更换零部件或者保养时,要求进行校准。 5) 当发现质控品、患者样品的测定值显示异常时,要求进行校准。 6.3.5 校准品使用注意事项 1)严格按照校准品说明书要求进行操作。 2)请不要使用我公司以外的校准品,否则结果的准确性无法保证。 3)校准品使用后请按要求妥善保管,避免污染。 4)避免反复冻融使用。 6.4 质控 6.4.1 质控品 建议使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清(水平2和/或水平3)。 6.4.2 质控品准备 使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清时,请参照质控品使用说明书进行准备。 6.4.3 质控品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的质控品在2℃~8℃或-20℃下密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3)血清复溶后,在-20℃下至少稳定30天。 6.4.4 质控可接受性判断 使用正常值和病理值生化质控品(无法满足时至少使用其中一种)进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施,如:质控品是否有质量问题,重新校准,试剂是否有质量问题,仪器运行是否正常等相关因素进行确认后解决问题,作好记录。 6.4.5 质控品使用注意事项 1)严格按照质控品说明书要求进行操作。 2)当使用质控品时,由于基质效应的影响和不同实验室测定条件的差异,测定值与标示靶值可能存在一定的偏差,建议用户建立自己实验室的控制均值和标准差。 3)避免反复冻融使用。 7. 结果处理 对超出可报告范围的结果的处理:取0.1ml样品加0.9ml蒸馏水,重复测定后结果乘以稀释倍数10进行报告。对检验结果为病危报警值的处理:应立即报告。 8. 参考值范围 建议各实验室根据CLSI C28-A3 Vol.20 No.12(How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline --Third Edition)文件建立自己的参考值范围。用于诊断时应结合患者临床表现和其他临床检查结果。 血清/血浆: 8~40U/L ; 9. 产品性能 9.1 空白吸光度 试剂空白吸光度:≥1.000(主波长340nm,光径10mm)。 9.2 准确度 相对偏差在±10.0%范围内。 9.3 精密度 批内重复性CV≤5.0%、批间相对偏差R≤10.0% 。 9.4 分析灵敏度 AST活性为100U/L的吸光度变化率(△A/min)绝对值应在0.010~0.040之间。 9.5 线性范围 5~1000 U/L,r≥0.990; 5~100 U/L时,线性绝对偏差应在±10 U/L范围内; 100~1000 U/L时,线性相对偏差应在±10.0%范围内。 9.6 抗干扰能力 依据CLSI EP7-A文件方案,在贝克曼AU400和日立7080全自动生化分析仪上进行研究,得出结果为: 胆红素684μmol/L 以下AST测定结果影响为不超过10%; 甘油三酯5.65mmol/L以下对AST测定结果影响为不超过10%; 血红蛋白1.0g/L以下对AST测定结果影响为不超过10%。 10. 检验注意事项 1)试剂在使用中应避免污染,否则将会导致失效; 2)试剂与样品用量可根据不同仪器的需要,在试剂样品体积比例不变的条件下,适当增加或减少试剂与样品的用量。 3)更换批号后建议重新定标。 4)准确的结果取决于样品、试剂、仪器等多个环节的控制。 5)药物、抗凝剂、促凝剂、分离胶等其他物质都可能对测定值造成无法预知的干扰。当怀疑标本存在这些干扰物质的影响时,请停药后或采用无任何添加剂的血清进行测定。 11. 安全性提示 血清等样品可能含有病毒、细菌等病源微生物,操作者有被感染的潜在危险性,操作时应采取防范措施;试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规进行废物处理。 12. 主要参考文献 1)尚红等.全国临床检验操作规程.人民卫生出版社,2014年第4版:281. 2.)韩志钧等. 临床化学常用项目自动化分析法,辽宁科学技术出版社,2005年第三版:759-768. L-γ-谷氨酰基转移酶(GGT) 1. 预期用途 本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆样本中L-γ-谷氨酰基转移酶(GGT)的活性。 2. 临床意义 γ-谷氨酰转肽酶分布于肾、肝、胰等实质性脏器,肝脏中γ-GT主要局限于毛细 胆管和肝细胞的微粒体中,可用于对占位性肝病,肝实质损伤 (慢性肝炎和肝硬变) 的诊断及观察乙醇肝损害的过程。 1) 轻度和中度增高者为传染性肝炎、肝硬化、胰腺炎等。 2) 明显增高者如原发或继发性癌、肝阻塞性黄疸、胆汁性肝硬化、胆管炎、胰头癌、肝外胆道癌等。特别在诊断恶性肿瘤患者有无肝转移和肝癌术后有无复发时,阳性率可达90%。 3) 嗜酒或长期接受某些药物如苯巴比妥、苯妥英钠、安替比林者,血清GGT活性常升高,口服避孕药会使GGT值增高20%。 但是,GGT作为肝癌标志物的特异性欠高,急性肝炎、慢性肝炎活动期、阻塞性黄疸、胆道感染、胆石症、急性胰腺炎时都可以升高。 医学决定水平 20U/L:此值在参考范围以内,低于此值可排除部分与GGT升高有关的疾病。此值并可作为病人以前或将来的对照值。 60U/L:高于此值应考虑GGT升高的各种可能情况,测定值在60~150U/L范围内,且ALP在正常范围的病人,很可能在测定前有服药和饮酒的情况。 150U/L:高于此值常有肝胆管疾病,应采取各种确诊措施,并进行积极治疗。 3. 检测原理 L-γ-谷氨羟基-4-苯基重氮酸+甘氨酰甘氨酸L-γ-谷氨酰甘氨酰甘氨酸+5-氨基-2-硝基苯甲酸 5-氨基-2-硝基苯甲酸生成的速率与样本中GGT活性成正比,在405nm波长处,通过连续监测吸光度上升速率,即可计算出样本中GGT的活性。 4. 样品采集和处理 请使用血清或肝素抗凝血浆样本,避免溶血。样本应在采血后立即离心分离,并在当日检测。如不能即时检测,冷藏(2~8℃)可保存7天,冷冻(-20℃)可保存2个月,避免反复冻融。 5. 试剂 5.1 试剂组成 【试剂主要组成成分】 试剂 成分 浓度 R1 甘氨酰甘氨酸 16.43g/L R2 L-γ-谷氨羟基-4-苯基重氮酸(Glupa-c) 6g/L 5.2 试剂准备 R1和R2试剂为即用型液体试剂,开瓶装载即可使用,用后应及时冷藏保存。 5.3 试剂的保存及稳定性 未开瓶试剂盒于2~8℃密闭避光保存有效期为12个月,开瓶后2~8℃避光保存可稳定30天。 运输和保存均应在2~8℃低温条件下进行。 5.4 试剂使用中的注意事项及危险预防 1)严格按照试剂盒说明书的要求使用试剂。 2)不同批号试剂盒中各组份不能互换或混用。 3)超过有效期的试剂不能使用。 4)试剂开瓶后,会导致试剂与空气中成分有反应的可能性和水分蒸发,对检测结果有一定的影响,因此请尽快使用和减少试剂与空气的接触。 5)当试剂变混浊或被污染或空白吸光度值>1.100时,表明试剂已失效,应弃去。 6)装载试剂时防止产生气泡,否则影响试剂加注而无法保证结果。 7)使用时应避免与人体接触,当试剂误入口中或眼中,或者附着到皮肤上的时候,请立即用大量清水冲洗,如有必要,请接受医生的治疗。 5.5 废弃物处理 试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规(如WS/T249-2005《临床实验室废物处理原则》等)进行废物处理。 6.1 基本参数 测定方法:终点法 主波长:405nm 副波长:505nm 反应方向:向上   空白(B) 校准(C) 测定(U) 样 本(μl) -- -- 15 校准品(μl) -- 15 -- 蒸馏水/生理盐水(μl) 15 -- -- 试剂R1(μl) 240 240 240 混匀,37℃恒温5分钟。 试剂R2(μl) 60 60 60 混匀,37℃恒温1分钟后,405nm波长处准确测定平均每分钟吸光度变化率△A/min,绘制校准曲线图。 结果计算: 根据校准品的浓度值与吸光度变化率值在全自动生化分析仪上自动生成F值和校准曲线。 样本GGT活性(U/L)= ΔA/min ×F 6.3 校准 6.3.1 校准品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套校准品进行校准。 6.3.2 校准品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司的校准品时,请参照校准品使用说明书进行准备。加样时应避免气泡产生。 6.3.3 校准品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3) 开瓶复溶后的校准品, -20℃保存可稳定3个月。 6.3.4 校准周期 1) 使用四川沃文特生物技术有限公司提供的校准品每隔30天进行1次校准。 2) 当试剂批号更换时,要求进行校准。 3) 当试剂瓶更换时,要求进行校准。 4) 当仪器更换零部件或者保养时,要求进行校准。 5) 当发现质控品、患者样品的测定值显示异常时,要求进行校准。 6.3.5 校准品使用注意事项 1)严格按照校准品说明书要求进行操作。 2)请不要使用我公司以外的校准品,否则结果的准确性无法保证。 3)校准品使用后请按要求妥善保管,避免污染。 4)避免反复冻融使用。 6.4 质控 6.4.1 质控品 建议使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清(水平2和/或水平3)。 6.4.2 质控品准备 使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清时,请参照质控品使用说明书进行准备。 6.4.3 质控品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的质控品在2℃~8℃或-20℃下密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3)血清复溶后,在-20℃下至少稳定30天。 6.4.4 质控可接受性判断 使用正常值和病理值生化质控品(无法满足时至少使用其中一种)进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施,如:质控品是否有质量问题,重新校准,试剂是否有质量问题,仪器运行是否正常等相关因素进行确认后解决问题,作好记录。 6.4.5 质控品使用注意事项 1)严格按照质控品说明书要求进行操作。 2)当使用质控品时,由于基质效应的影响和不同实验室测定条件的差异,测定值与标示靶值可能存在一定的偏差,建议用户建立自己实验室的控制均值和标准差。 3)避免反复冻融使用。 6. 结果处理 对超出可报告范围的结果的处理:取0.1ml样品加0.9ml蒸馏水,重复测定后结果乘以稀释倍数10进行报告。对检验结果为病危报警值的处理:应立即报告。 7. 参考值范围 建议各实验室根据CLSI C28-A3 Vol.20 No.12(How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline --Third Edition)文件建立自己的参考值范围。用于诊断时应结合患者临床表现和其他临床检查结果。 男性:11~50U/L 女性:7~32U/L 8. 产品性能 9.1 空白吸光度 试剂空白吸光度≤1.100(主波长405nm,光径10mm); 9.2 准确度 相对偏差在±10.0%范围内。 6.3 校准 6.3.1 校准品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套校准品进行校准。 6.3.2 校准品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司的校准品时,请参照校准品使用说明书进行准备。加样时应避免气泡产生。 6.3.3 校准品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3) 开瓶复溶后的校准品, -20℃保存可稳定3个月。 6.3.4 校准周期 1) 使用四川沃文特生物技术有限公司提供的校准品每隔30天进行1次校准。 2) 当试剂批号更换时,要求进行校准。 3) 当试剂瓶更换时,要求进行校准。 4) 当仪器更换零部件或者保养时,要求进行校准。 5) 当发现质控品、患者样品的测定值显示异常时,要求进行校准。 6.3.5 校准品使用注意事项 1)严格按照校准品说明书要求进行操作。 2)请不要使用我公司以外的校准品,否则结果的准确性无法保证。 3)校准品使用后请按要求妥善保管,避免污染。 4)避免反复冻融使用。 6.4 质控 6.4.1 质控品 建议使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清(水平2和/或水平3)。 6.4.2 质控品准备 使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清时,请参照质控品使用说明书进行准备。 6.4.3 质控品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的质控品在2℃~8℃或-20℃下密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3)血清复溶后,在-20℃下至少稳定30天。 6.4.4 质控可接受性判断 使用正常值和病理值生化质控品(无法满足时至少使用其中一种)进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施,如:质控品是否有质量问题,重新校准,试剂是否有质量问题,仪器运行是否正常等相关因素进行确认后解决问题,作好记录。 6.4.5 质控品使用注意事项 1)严格按照质控品说明书要求进行操作。 2)当使用质控品时,由于基质效应的影响和不同实验室测定条件的差异,测定值与标示靶值可能存在一定的偏差,建议用户建立自己实验室的控制均值和标准差。 3)避免反复冻融使用。 9. 结果处理 对超出可报告范围的结果的处理:取0.1ml样品加0.9ml蒸馏水,重复测定后结果乘以稀释倍数10进行报告。对检验结果为病危报警值的处理:应立即报告。 10. 参考值范围 建议各实验室根据CLSI C28-A3 Vol.20 No.12(How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline --Third Edition)文件建立自己的参考值范围。用于诊断时应结合患者临床表现和其他临床检查结果。 男性:11~50U/L 女性:7~32U/L 11. 产品性能 9.1 空白吸光度 试剂空白吸光度≤1.100(主波长405nm,光径10mm); 9.2 准确度 相对偏差在±10.0%范围内。 9.3 精密度 精密度:批内重复性CV≤5.0%、批间相对极差R≤10.0%。 9.4 分析灵敏度 分析灵敏度:L-γ-谷氨酰基转移酶(GGT)活性为50U/L的吸光度变化率(△A/min)应在0.008~0.032之间。 9.5 线性范围 5~1000 U/L,r≥0.990; 5~50 U/L时,线性绝对偏差应在±5 U/L范围内; 50~1000 U/L时,线性相对偏差应在±10.0%范围内。 9.6 抗干扰能力 依据CLSI EP7-A文件方案,在贝克曼AU400和日立7080全自动生化分析仪上进行研究,得出结果为: 胆红素684μmol/L 以下GGT测定结果影响为不超过10%; 甘油三酯11.3mmol/L以下对GGT测定结果影响为不超过10%; 血红蛋白4.0g/L以下对GGT测定结果影响为不超过10%。 抗坏血酸0.30g/L以下对GGT测定结果影响为不超过10%。 12. 检验注意事项 1)试剂在使用中应避免污染,否则将会导致失效; 2)试剂与样品用量可根据不同仪器的需要,在试剂样品体积比例不变的条件下,适当增加或减少试剂与样品的用量。 3)更换批号后建议重新定标。 4)准确的结果取决于样品、试剂、仪器等多个环节的控制。 5)药物、抗凝剂、促凝剂、分离胶等其他物质都可能对测定值造成无法预知的干扰。当怀疑标本存在这些干扰物质的影响时,请停药后或采用无任何添加剂的血清进行测定。 13. 安全性提示 血清等样品可能含有病毒、细菌等病源微生物,操作者有被感染的潜在危险性,操作时应采取防范措施;试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规进行废物处理。 14. 主要参考文献 1)、尚红等.全国临床检验操作规程.人民卫生出版社,2014年第4版:286-287. 2)、韩志钧等. 临床化学常用项目自动化分析法,辽宁科学技术出版社,2005年第三版:736-743. 腺苷脱氨酶 Adenosine Deaminase (ADA) 1. 预期用途 本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆样本中腺苷脱氨酶(ADA)的活性。 2. 临床意义 腺苷脱氨酶(ADA)是一种与机体细胞免疫活性有重要关系的嘌呤核苷代谢中重要的酶类,属于巯基酶,每分子至少含2个活性巯基,其活性能对氯汞甲酸完全抑制。ADA能催化腺嘌呤核苷转变为次黄嘌呤核苷,再经核苷磷酸化酶作用生成次黄嘌呤,其代谢终产物为尿酸。 测定血液、体液中的ADA及其同工酶水平对很多疾病的诊断、鉴别诊断、治疗及免疫功能有重要意义: 1) 用于肝脏疾病的诊断 ADA活性是反映肝损伤的敏感指标,可作为肝功能常规检查项目之一,与 ALT或GGT等组成肝酶谱能较全面地反映肝脏病的酶学改变,能有效的对急慢性肝脏疾病及肝脏肿瘤进行鉴别诊断。 2) 用于重症联合免疫缺陷病(SCID) A D A作为核酸代谢重要的酶类, 其缺乏可导致核酸代 谢障碍影响到胸腺的发育, 从而引起免疫功能缺陷。 3) 用于血液病诊断 慢性溶血患者红细胞 A D A活性显著升高,为正常人的 4 5﹀7 0倍。由于腺苷的过度消耗,使ATP生成减少,导致红细胞提前破坏而出现贫血症状。先天性再生障碍性贫血患者红细胞ADA明显高于正常对照,其酶活性高于溶血性贫血及获得性再障。 4) 用于肿瘤的诊断 肿瘤患者血清及组织中 A D A活性均升高, 但前者阳性率仅为 1 5 %﹀4 0 %。肺癌和结肠癌组织中A D A活性均明显高于正常肺和结肠组织。 5) 用于伤寒的辅助诊断 ADA用于对伤寒的辅助诊断其变化早于肥达实验,在伤寒发病初期可高于正常人的2-4倍,恢复期及缓解期仍处于高水平,至病程第四周逐渐降低。 6) 用于系统性红斑狼疮(SLE)的病情评价 SLE是一种常见的自身免疫疾病,其免疫异常特征是T淋巴细胞活性增加,B细胞多克隆活化并产生多种狼疮性自身抗体,而ADA是一种与机体细胞免疫系统有重要关联的核酸代谢酶,可用于评价淋巴细胞的成熟程度和功能以及血单核细胞向巨噬细胞转化程度。 7) 用于白血病的分期和分型 测定患者ADA活性,有助于临床分期和分型的判断,有助于白血病的鉴别诊断和慢性或慢性急变的早期诊断。 8) 用于结核性疾病的诊断 血清、胸腹水、脑脊液(CSF)、支气管肺泡灌洗液的ADA活性在结核性患者中均有增高,此外,针对肿瘤、结核产生的胸腹水,联合检测癌胚抗原(CEA)及ADA可提高恶性胸腔积液的鉴别诊断水平。 3. 检测原理 腺苷+H2O肌苷+NH3 肌苷+Pi次黄嘌呤+1-磷酸核糖 次黄嘌呤+2H2O+2O2尿酸+2H2O2 H2O2+4-AAP+TOPS4H2O+苯醌类 醌类化合物生成速率与样本中ADA活性成正比,在546nm波长处,通过连续监测吸光度的上升速率(△A/min),即可计算出样本中ADA的活性。 4. 样品采集和处理 请使用血清或肝素抗凝血浆样本,避免溶血。样本中ADA在2~8℃保存可稳定7天。 5. 试剂 5.1 试剂组成 【试剂主要组成成分】 试剂 成分 浓度 R1 4-氨基安替比林(4-AAP) 0.41g/L 嘌呤核苷磷酸化酶(PNP) 0.6KU/L 黄嘌呤氧化酶(XOD) 2.4KU/L 过氧化物酶(POD) 0.6KU/L R2 腺苷 2.14g/L N-乙基-N-(3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐(TOPS) 0.56g/L 5.2 试剂准备 R1和R2试剂为即用型液体试剂,开瓶装载即可使用,用后应及时冷藏保存。 5.3 试剂的保存及稳定性 未开瓶试剂盒于2~8℃密闭避光保存有效期为12个月,开瓶后2~8℃避光保存可稳定30天。运输和保存均应在2~8℃低温条件下进行。 5.4 试剂使用中的注意事项及危险预防 1)严格按照试剂盒说明书的要求使用试剂。 2)不同批号试剂盒中各组份不能互换或混用。 3)超过有效期的试剂不能使用。 4)试剂开瓶后,会导致试剂与空气中成分有反应的可能性和水分蒸发,对检测结果有一定的影响,因此请尽快使用和减少试剂与空气的接触。 5)当试剂变混浊或被污染或空白吸光度值>0.300时,表明试剂已失效,应弃去。 6)装载试剂时防止产生气泡,否则影响试剂加注而无法保证结果。 7)使用时应避免与人体接触,当试剂误入口中或眼中,或者附着到皮肤上的时候,请立即用大量清水冲洗,如有必要,请接受医生的治疗。 5.5 废弃物处理 试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规(如WS/T249-2005《临床实验室废物处理原则》等)进行废物处理。 6. 检验操作 6.1 基本参数 测定方法:速率法 主波长:546nm 副波长:700nm 反应方向:向上   空白(B) 校准(C) 测定(U) 样 本(μl) -- -- 6 校准品(μl) -- 6 -- 蒸馏水/生理盐水(μl) 6 -- -- 试剂R1(μl) 225 225 225 混匀,37℃恒温5分钟 试剂R2(μl) 75 75 75 混匀,37℃恒温3分钟,546nm波长处准确测定平均每分钟吸光度变化率△A/min,绘制校准曲线图。 结果计算: 样本ADA含量(U/L)= △Au/min × Cc △Ac/min △AU/min为测定管相对空白管吸光度变化值 △Ac/min为校准管相对空白管吸光度变化值 Cc为校准品浓度值 6.3 校准 6.3.1 校准品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套校准品进行校准。 6.3.2 校准品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司的校准品时,请参照校准品使用说明书进行准备。加样时应避免气泡产生。 6.3.3 校准品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3) 开瓶后的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定30天。 6.3.4 校准周期 1) 使用四川沃文特生物技术有限公司提供的校准品每隔30天进行1次校准。 2) 当试剂批号更换时,要求进行校准。 3) 当试剂瓶更换时,要求进行校准。 4) 当仪器更换零部件或者保养时,要求进行校准。 5) 当发现质控品、患者样品的测定值显示异常时,要求进行校准。 6.3.5 校准品使用注意事项 1)严格按照校准品说明书要求进行操作。 2)请不要使用我公司以外的校准品,否则结果的准确性无法保证。 3)校准品使用后请按要求妥善保管,避免污染。 4)避免反复冻融使用。 6.4 质控 6.4.1 质控品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套质控品(水平1和/或水平2)。 6.4.2 质控品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司配套质控品时,请参照质控品使用说明书进行准备。 6.4.3 质控品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的质控品在2℃~8℃或-20℃下密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3)质控品开瓶后,在-20℃下密闭避光贮存至少稳定30天。 6.4.4 质控可接受性判断 使用正常值和病理值生化质控品(无法满足时至少使用其中一种)进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施,如:质控品是否有质量问题,重新校准,试剂是否有质量问题,仪器运行是否正常等相关因素进行确认后解决问题,作好记录。 6.4.5 质控品使用注意事项 1)严格按照质控品说明书要求进行操作。 2)当使用质控品时,由于基质效应的影响和不同实验室测定条件的差异,测定值与标示靶值可能存在一定的偏差,建议用户建立自己实验室的控制均值和标准差。 3)避免反复冻融使用。 7. 结果处理 对超出可报告范围的结果的处理:取0.1ml样品加0.9ml蒸馏水,重复测定后结果乘以稀释倍数10进行报告。对检验结果为病危报警值的处理:应立即报告。 8. 参考值范围 建议各实验室根据CLSI C28-A3 Vol.20 No.12(How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline --Third Edition)文件建立自己的参考值范围。用于诊断时应结合患者临床表现和其他临床检查结果。 血清/血浆:4~22 U/L。 9. 产品性能 9.1 空白吸光度 试剂空白吸光度:≤0.300;试剂空白吸光度变化率(△A/min)≤0.010 (主波长546nm,光径10mm)。 9.2 准确度 相对偏差在±10.0%范围内。 9.3 精密度 批内重复性CV≤5.0%、批间相对偏差R≤10.0% 。 9.4 分析灵敏度 腺苷脱氨酶(ADA)活性为50U/L的吸光度变化率(△A /min)应在0.010~0.040之间。 9.5 线性范围 3~200 U/L,r≥0.990; 3~50 U/L时,线性偏差在±0.15 U/L范围内; 50~200 U/L时,线性偏差在±10.0%范围内。 9.6 抗干扰能力 依据CLSI EP7-A文件方案,在贝克曼AU400和日立7080全自动生化分析仪上进行研究,得出结果为: 胆红素684μmol/L 以下对ADA测定结果影响为不超过10%; 甘油三酯11.3mmol/L以下对ADA测定结果影响为不超过10%; 抗坏血酸0.30g/L以下对ADA测定结果影响为不超过10%; 血红蛋白5.0g/L以下对ADA测定结果影响为不超过10%。 10. 检验注意事项 1)试剂在使用中应避免污染,否则将会导致失效; 2)试剂与样品用量可根据不同仪器的需要,在试剂样品体积比例不变的条件下,适当增加或减少试剂与样品的用量。 3)更换批号后建议重新定标。 4)准确的结果取决于样品、试剂、仪器等多个环节的控制。 5)药物、抗凝剂、促凝剂、分离胶等其他物质都可能对测定值造成无法预知的干扰。当怀疑标本存在这些干扰物质的影响时,请停药后或采用无任何添加剂的血清进行测定。 11. 安全性提示 血清等样品可能含有病毒、细菌等病源微生物,操作者有被感染的潜在危险性,操作时应采取防范措施;试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规进行废物处理。 12. 主要参考文献 1)尚红等.全国临床检验操作规程.人民卫生出版社,2014年第4版:291-292. 2)韩志钧等. 临床化学常用项目自动化分析法,辽宁科学技术出版社,2005年第三版:845-848. 白蛋白 Albumin diagnostic(ALB) 1. 预期用途 本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆样本中白蛋白(ALB)的含量。 2. 临床意义 白蛋白(Alb)是血浆中含量最多的蛋白质,占血浆蛋白质总量的40-60%。其主要生理功能是营养作用、维持血浆的胶体渗透压、维持血浆的正常pH和运输作用。 血清白蛋白在肝脏合成。血清白蛋白浓度增高常见于严重失水,血浆浓缩所致,此时并非蛋白质绝对量增多。临床上尚未发现单纯白蛋白浓度增高的疾病,而以白蛋白浓度降低为多见。 白蛋白浓度降低与总蛋白浓度降低的原因相同。但有时总蛋白浓度接近正常,而白蛋白浓度降低,同时又伴有球蛋白浓度增高。急性白蛋白浓度降低主要由于急性大量出血或严重灼伤时血浆大量丢失。慢性白蛋白浓度降低主要由于肝脏合成白蛋白功能障碍、腹水形成时白蛋白的丢失和肾病时尿液中的丢失,严重时白蛋白浓度可低于10g/L。白蛋白浓度低于20g/L时,由于胶体渗透压的下降,常可见到水肿等现象。妊娠,尤其是妊娠晚期,由于体内对蛋白质需要量增加,又同时伴有血浆容量增高,血清白蛋白可明显下降,但分娩后可迅速恢复正常。 医学决定水平: (1)20g/L:低于此值在肝病病人提示严重预后不良,还应测定尿蛋白,以查明有无过多的蛋白丢失。 (2)35g/L:等于或低于此值,各种引起白蛋白降低因素均应列入考虑范围。 (3)57g/L:高于此值,应考虑脱水的可能性,并进行红细胞比积测定,以检查其是否增高。 3. 检测原理 在pH4.2缓冲液中,溴甲酚绿(BCG)与白蛋白结合形成蓝绿色复合物,其颜色深浅与白蛋白浓度成正比。与同样处理的白蛋白校准品进行比较,即可计算样本中白蛋白的含量。 4. 样品采集和处理 请使用血清或肝素抗凝血浆样本,避免溶血。样本应在采血后立即离心分离,并在当日检测。如不能即时检测,冷藏(2~8℃)可保存14天,冷冻(-20℃)可保存6个月,避免反复冻融。 5.1 试剂组成 【试剂主要组成成分】 试剂 成分 浓度 R 溴甲酚绿(BCG) 0.105g/L 5.2 试剂准备 R试剂为即用型液体试剂,开瓶装载即可使用,用后应及时冷藏保存。 5.3 试剂的保存及稳定性 未开瓶试剂盒于2~8℃密闭避光保存有效期为12个月,开瓶后2~8℃避光保存可稳定30天。运输和保存均应在2~8℃低温条件下进行。 5.4 试剂使用中的注意事项及危险预防 1)严格按照试剂盒说明书的要求使用试剂。 2)不同批号试剂盒中各组份不能互换或混用。 3)超过有效期的试剂不能使用。 4)试剂开瓶后,会导致试剂与空气中成分有反应的可能性和水分蒸发,对检测结果有一定的影响,因此请尽快使用和减少试剂与空气的接触。 5)当试剂变混浊或被污染或空白吸光度值>0.300时,表明试剂已失效,应弃去。 6)装载试剂时防止产生气泡,否则影响试剂加注而无法保证结果。 7)使用时应避免与人体接触,当试剂误入口中或眼中,或者附着到皮肤上的时候,请立即用大量清水冲洗,如有必要,请接受医生的治疗。 5.5 废弃物处理 试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规(如WS/T249-2005《临床实验室废物处理原则》等)进行废物处理。 5. 检验操作 6.1 基本参数 测定方法:终点法 主波长:628nm 副波长:none 反应方向:向上   空白(B) 校准(C) 测定(U) 样 本(μl) -- -- 2 校准品(μl) -- 2 -- 蒸馏水/生理盐水(μl) 2 -- -- 试剂R1(μl) 250 250 250 混匀,37℃孵育2分钟以空白管调零,测定吸光度A,计算吸光度A与零点的差值ΔA。 结果计算: 样本ALB含量(g/l)= △Au × Cc △Ac △AU/min为测定管相对空白管吸光度值 △Ac/min为校准管相对空白管吸光度值 Cc为校准品浓度值 6.3 校准 6.3.1 校准品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套校准品进行校准。 6.3.2 校准品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司的校准品时,请参照校准品使用说明书进行准备。加样时应避免气泡产生。 6.3.3 校准品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3) 开瓶后的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定30天。 6.3.4 校准周期 1) 使用四川沃文特生物技术有限公司提供的校准品每隔30天进行1次校准。 2) 当试剂批号更换时,要求进行校准。 3) 当试剂瓶更换时,要求进行校准。 4) 当仪器更换零部件或者保养时,要求进行校准。 5) 当发现质控品、患者样品的测定值显示异常时,要求进行校准。 6.3.5 校准品使用注意事项 1)严格按照校准品说明书要求进行操作。 2)请不要使用我公司以外的校准品,否则结果的准确性无法保证。 3)校准品使用后请按要求妥善保管,避免污染。 4)避免反复冻融使用。 6.4 质控 6.4.1 质控品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套质控品(水平1和/或水平2)。 6.4.2 质控品准备 使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清时,请参照质控品使用说明书进行准备。 6.4.3 质控品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的质控品在2℃~8℃或-20℃下密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3)血清复溶后,在-20℃下至少稳定30天。 6.4.4 质控可接受性判断 使用正常值和病理值生化质控品(无法满足时至少使用其中一种)进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施,如:质控品是否有质量问题,重新校准,试剂是否有质量问题,仪器运行是否正常等相关因素进行确认后解决问题,作好记录。 6.4.5 质控品使用注意事项 1)严格按照质控品说明书要求进行操作。 2)当使用质控品时,由于基质效应的影响和不同实验室测定条件的差异,测定值与标示靶值可能存在一定的偏差,建议用户建立自己实验室的控制均值和标准差。 3)避免反复冻融使用。 6. 结果处理 对超出可报告范围的结果的处理:取0.1ml样品加0.9ml蒸馏水,重复测定后结果乘以稀释倍数10进行报告。对检验结果为病危报警值的处理:应立即报告。 7. 参考值范围 建议各实验室根据CLSI C28-A3 Vol.20 No.12(How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline --Third Edition)文件建立自己的参考值范围。用于诊断时应结合患者临床表现和其他临床检查结果。 血清/血浆: 35.0g/L~55.0g/L。 8. 产品性能 9.1 空白吸光度 试剂空白吸光度:≤0.300(主波长628nm,光径10mm)。 9.2 准确度 相对偏差在±6.0%范围内。 9.3 精密度 批内重复性CV≤2.0%、批间相对偏差R≤5.0% 。 9.4 分析灵敏度 白蛋白(ALB)浓度为40.0 g/L的吸光度变化值(△A)应在0.400~1.200之间。 9.5 线性范围 2.0~70.0 g/L,r≥0.990; 2.0~20.0 g/L时,线性绝对偏差应在±4.0g/L范围内; 20.0~70.0 g/L时,线性相对偏差应在±10.0%范围内。 9.6 抗干扰能力 依据CLSI EP7-A文件方案,在贝克曼AU400和日立7080全自动生化分析仪上进行研究,得出结果为: 胆红素684μmol/L 以下对ALB测定结果影响为不超过10%; 抗坏血酸0.50g/L以下对ALB测定结果影响为不超过10%; 血红蛋白5.0g/L以下对ALB测定结果影响为不超过10%。 甘油三酯11.3mmol/L以下对ALB测定结果影响为不超过10%。 9. 检验注意事项 1)试剂在使用中应避免污染,否则将会导致失效; 2)试剂与样品用量可根据不同仪器的需要,在试剂样品体积比例不变的条件下,适当增加或减少试剂与样品的用量。 3)更换批号后建议重新定标。 4)准确的结果取决于样品、试剂、仪器等多个环节的控制。 5)药物、抗凝剂、促凝剂、分离胶等其他物质都可能对测定值造成无法预知的干扰。当怀疑标本存在这些干扰物质的影响时,请停药后或采用无任何添加剂的血清进行测定。 10. 安全性提示 血清等样品可能含有病毒、细菌等病源微生物,操作者有被感染的潜在危险性,操作时应采取防范措施;试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规进行废物处理。 11. 主要参考文献 1)尚红等.全国临床检验操作规程.人民卫生出版社,2014年第4版:203-206. 2)韩志钧等. 临床化学常用项目自动化分析法,辽宁科学技术出版社,2005年第三版:888-893. 碱性磷酸酶 Alkaline Phosphatase(ALP) 1. 预期用途 本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆样本中碱性磷酸酶(ALP)的活性。 2. 临床意义 ALP广泛存在于人体的各个组织中,以骨骼、肾脏中含量较多。正常人血清中ALP主要来自骨骼。骨骼疾病时,血液的ALP活性增高。由于该酶在肝脏排泄,在肝胆疾病,特别是胆道阻塞时ALP活性增高。 ALP活力测定常作为肝胆疾病和骨骼疾病辅助诊断的指标。 ALP活力增高见于: (1)肝胆疾病:阻塞性黄疸、急性或慢性黄疸性肝炎、肝癌等; (2)骨骼疾病:纤维性骨炎、成骨不全症、佝偻病、骨软化病、骨转移癌和骨折修复愈合期等。 医学决定水平: 60U/L:此水平在参考范围以内,低于此水平时可以排除许多与ALP升高有关的病种,而考虑其它的诊断。此值可作为病人自身ALP的对照值,可与过去和(或)将来的值进行比较. 200U/L:此水平高于成人参考值范围上限,高于此值时,应考虑能引起ALP升高的多种疾病的可能性,如肝脏病变、胆管结石、肿瘤等引起肝外胆汗积郁、成骨细胞瘤、肿瘤等。为进一步鉴别肝胆或骨骼病变,可进行血中r-GT测定。 400U/L:此为儿童参考值范围的上限值,高于此值时,多种可引起ALP升高的病变均应列入考虑范围,但为进一步明确诊断,还应同时进行其他项目的测试。 3. 检测原理 磷酸对硝基苯酚+H2O对硝基苯酚+磷酸 对硝基苯酚(4-NP)生成的速率与样本中ALP活性成正比,在405nm波长处,通过连续监测吸光度上升速率,即可计算出样本中ALP的活性。 4. 样品采集和处理 请使用血清或肝素抗凝血浆样本,避免溶血。样本应在采血后立即离心分离,并在当日检测。如不能即时检测,冷藏(2~8℃)可保存2天,冷冻(-20℃)可保存1个月,避免反复冻融。 5.1 试剂组成 【试剂主要组成成分】 试剂 成分 浓度 R1 2-氨基-2-甲基-1-丙醇(AMP) 40ml/L 硫酸镁 0.16g/L R2 磷酸对硝基苯酚(4-NPP) 30g/L 5.2 试剂准备 R1和R2试剂为即用型液体试剂,开瓶装载即可使用,用后应及时冷藏保存。 5.3 试剂的保存及稳定性 未开瓶试剂盒于2~8℃密闭避光保存有效期为12个月,开瓶后2~8℃避光保存可稳定30天。 5.4 试剂使用中的注意事项及危险预防 1)严格按照试剂盒说明书的要求使用试剂。 2)不同批号试剂盒中各组份不能互换或混用。 3)超过有效期的试剂不能使用。 4)试剂开瓶后,会导致试剂与空气中成分有反应的可能性和水分蒸发,对检测结果有一定的影响,因此请尽快使用和减少试剂与空气的接触。 5)当试剂变混浊或被污染或空白吸光度值>1.100时,表明试剂已失效,应弃去。 6)装载试剂时防止产生气泡,否则影响试剂加注而无法保证结果。 7)使用时应避免与人体接触,当试剂误入口中或眼中,或者附着到皮肤上的时候,请立即用大量清水冲洗,如有必要,请接受医生的治疗。 5.5 废弃物处理 试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规(如WS/T249-2005《临床实验室废物处理原则》等)进行废物处理。 5. 检验操作 6.1 基本参数 测定方法:速率法 主波长:405nm 副波长:505nm 反应方向:向上   空白(B) 校准(C) 测定(U) 样 本(μl) -- -- 5 校准品(μl) -- 5 -- 蒸馏水/生理盐水(μl) 5 -- -- 试剂R1(μl) 200 200 200 混匀,37℃恒温5分钟。 试剂R2(μl) 50 50 50 混匀,37℃恒温1分钟后,405nm波长处准确测定平均每分钟吸光度变化率△A/min,绘制校准曲线图。 结果计算: 根据校准品的浓度值与吸光度变化率值在全自动生化分析仪上自动生成F值和校准曲线。 样本ALP活性(U/L)= ΔA/min  × F 6.3 校准 6.3.1 校准品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套校准品进行校准。 6.3.2 校准品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司的校准品时,请参照校准品使用说明书进行准备。加样时应避免气泡产生。 6.3.3 校准品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3) 开瓶复溶后的校准品, -20℃保存可稳定3个月。 6.3.4 校准周期 1) 使用四川沃文特生物技术有限公司提供的校准品每隔30天进行1次校准。 2) 当试剂批号更换时,要求进行校准。 3) 当试剂瓶更换时,要求进行校准。 4) 当仪器更换零部件或者保养时,要求进行校准。 5) 当发现质控品、患者样品的测定值显示异常时,要求进行校准。 6.3.5 校准品使用注意事项 1)严格按照校准品说明书要求进行操作。 2)请不要使用我公司以外的校准品,否则结果的准确性无法保证。 3)校准品使用后请按要求妥善保管,避免污染。 4)避免反复冻融使用。 6.4 质控 6.4.1 质控品 建议使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清(水平2和/或水平3)。 6.4.2 质控品准备 使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清时,请参照质控品使用说明书进行准备。 6.4.3 质控品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的质控品在2℃~8℃或-20℃下密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3)血清复溶后,在-20℃下至少稳定30天。 6.4.4 质控可接受性判断 使用正常值和病理值生化质控品(无法满足时至少使用其中一种)进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施,如:质控品是否有质量问题,重新校准,试剂是否有质量问题,仪器运行是否正常等相关因素进行确认后解决问题,作好记录。 6.4.5 质控品使用注意事项 1)严格按照质控品说明书要求进行操作。 2)当使用质控品时,由于基质效应的影响和不同实验室测定条件的差异,测定值与标示靶值可能存在一定的偏差,建议用户建立自己实验室的控制均值和标准差。 3)避免反复冻融使用。 6. 结果处理 对超出可报告范围的结果的处理:取0.1ml样品加0.9ml蒸馏水,重复测定后结果乘以稀释倍数10进行报告。对检验结果为病危报警值的处理:应立即报告。 7. 参考值范围 建议各实验室根据CLSI C28-A3 Vol.20 No.12(How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline --Third Edition)文件建立自己的参考值范围。用于诊断时应结合患者临床表现和其他临床检查结果。 血清/血浆:40~160U/L ; 8. 产品性能 9.1 空白吸光度 试剂空白吸光度:≥1.100(主波长405nm,光径10mm)。 9.2 准确度 相对偏差在±10.0%范围内。 9.3 精密度 批内重复性CV≤5.0%、批间相对偏差R≤10.0% 。 9.4 分析灵敏度 ALP浓度为120U/L 的吸光度变化值(△A)在0.015~0.060范围内。 9.5 线性范围 8~1000U/L,r≥0.990; 8~100U/L时,线性绝对偏差应在±10 U/L范围内; 100~1000U/L时,线性相对偏差应在±10.0%范围内。 9.6 抗干扰能力 依据CLSI EP7-A文件方案,在贝克曼AU400和日立7080全自动生化分析仪上进行研究,得出结果为: 胆红素684μmol/L 以下ALP测定结果影响为不超过10%; 甘油三酯11.3mmol/L以下对ALP测定结果影响为不超过10%; 血红蛋白2.0g/L以下对ALP测定结果影响为不超过10%。 抗坏血酸0.30g/L以下对ALP测定结果影响为不超过10%。 9. 检验注意事项 1)试剂在使用中应避免污染,否则将会导致失效; 2)试剂与样品用量可根据不同仪器的需要,在试剂样品体积比例不变的条件下,适当增加或减少试剂与样品的用量。 3)更换批号后建议重新定标。 4)准确的结果取决于样品、试剂、仪器等多个环节的控制。 5)药物、抗凝剂、促凝剂、分离胶等其他物质都可能对测定值造成无法预知的干扰。当怀疑标本存在这些干扰物质的影响时,请停药后或采用无任何添加剂的血清进行测定。 10. 安全性提示 血清等样品可能含有病毒、细菌等病源微生物,操作者有被感染的潜在危险性,操作时应采取防范措施;试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规进行废物处理。 11. 主要参考文献 1)尚红等.全国临床检验操作规程.人民卫生出版社,2014年第4版:282-283. 2)韩志钧等. 临床化学常用项目自动化分析法,辽宁科学技术出版社,2005年第三版:726-733. α-淀粉酶 α-Amylase (AMY) 1. 预期用途 本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆样本中α-淀粉酶(AMY)的含量。 2. 临床意义 1) 淀粉酶活性增高: 急性胰腺炎:急性胰腺炎发病后2~12h,血液中AMY开始升高,12~72h达高峰,可达参考范围上限的4~6倍或更高,一般2~5d可下降至参考范围;若持续升高,则提示病变有反复或出现并发症。尿液AMY在发病后12~72h开始升高,下降比血清缓慢。因此急性胰腺炎的后期或恢复期测定尿液AMY更有价值。AMY升高的幅度与胰腺损伤程度不一定成比例,但升高越是显著,患急性胰腺炎的可能性越大。坏死性胰腺炎时,原来升高的AMY可出现降低;慢性胰腺炎:血液AMY中度或轻度升高,尿液AMY可增高或变化不大; 胰腺癌:癌早期即可增高,尤其是胰头癌; 腮腺炎:血清AMY升高,同工酶S升高,说明AMS来源于腮腺,同时血脂肪酶不高,可与胰腺炎鉴别; 急腹症:消化道溃疡穿孔、肠梗阻、胆石症、急性胆囊炎等; 服用镇静剂:如注射吗啡、海洛因中毒等;酒精中毒;肾功能不全;巨淀粉酶血症:AMY可与免疫球蛋白等形成复合物,或酶分子本身聚合成为巨淀粉酶分子,这种分子不能通过肾小球,血清中AMY升高,尿AMY不增高,可见于少数健康人及乙醇中毒、糖尿病、肝病、恶性肿瘤和自身免疫疾病、艾滋病等。 2) 淀粉酶活性降低:慢性胰腺炎:血液AMY亦可降低,显著减低表示胰组织受到严重破坏;胰腺癌:若癌组织引起梗阻时间过长,可导致腺体组织纤维化而引起AMY分泌减少;严重肾功能不全,排泻淀粉酶障碍,尿液AMY可降低;巨淀粉酶血症时,尿液AMY降低。 3) 尿淀粉酶清除率(Cam)和肌酐清除率(Ccr)的比值(Cam /Ccr) ⑴ 约85%的急性胰腺炎Cam/Ccr比值增高,可达7%~15%;约90%的慢性复发性胰腺炎患者升高。 ⑵ 胆结石患者如血清AMY活性升高的同时伴有Cam /Ccr比值增高,则常提示并发急性胰腺炎。 ⑶ 血淀粉酶不增高的急性胰腺炎患者,Cam /Ccr比值可增高,因此,对血淀粉酶正常的急性胰腺炎患者测定Cam /Ccr比值将更有意义。 ⑷ 慢性胰腺炎、胰腺癌患者Cam /Ccr均在4%以下,巨淀粉酶血症的Cam /Ccr减低,可低于1%以下。 ⑸ Cam /Ccr比值增高还可见于糖尿病酸中毒、烧伤、肾功能衰竭、腹部手术等。 ⑹如标本采集时间不合适,患者病情较轻,或有淀粉酶活性抑制剂存在时,急性胰腺炎患者Cam /Ccr亦可正常。 ⑺ Cam /Ccr比值与年龄有关,20岁以下年龄组低于30~50岁年龄组。 3. 检测原理 采用4,6-亚乙基-对硝基苯-α-D-麦芽七糖苷(EPS-PNP-G7)色原底物。EPS-PNP-G7经淀粉酶水解,然后以α-葡萄糖苷酶为辅助酶水解中间产物释放出对硝基酚,从而引起405nm处吸光度的上升,此种变化与样本中的α-淀粉酶活性成正比。 在405 nm处连续监测吸光度的上升反应速率,反应速率与样本中α-淀粉酶的活性成正比,即可计算出样本中α-淀粉酶的活性。 4. 样品采集和处理 本试剂可检测血清、血浆样品,血清和血浆原则上采集空腹血(禁食12小时);正确使用抗凝剂(肝素抗凝);采血后应及时分离,防止溶血。 血清或血浆中淀粉酶在15~25℃保存可稳定1周,2-8℃保存可稳定1个月。尿中淀粉酶活性在4℃可保存1天,在无菌条件下甚至可保存1个月,但尿液标本不可以冷冻。 5. 试剂 5.1 试剂组成 【试剂主要组成成分】 试剂 成分 浓度 R1 α-葡萄糖苷酶(AGH) 8.75KU/L 硫酸镁 1.204g/L R2 4,6–亚乙基–对硝基苯–α-D-麦芽七糖(EPS) 7.64g/L 5.2 试剂准备 R1和R2试剂为即用型液体试剂,开瓶装载即可使用,用后应及时冷藏保存。 5.3 试剂的保存及稳定性 未开瓶试剂盒于2~8℃密闭避光保存有效期为12个月,开瓶后2~8℃避光保存可稳定30天。运输和保存均应在2~8℃低温条件下进行。 5.4 试剂使用中的注意事项及危险预防 1)本试剂盒仅限用于体外诊断,请勿用于其它目的。 2)使用试剂时应遵守实验室操作规范,做好防护措施,避免与皮肤及粘膜接触。若有误入请迅速用水充分冲洗,必要时就医治疗。 同批号试剂盒中各组份不能互换或混用。 3)请将样本当作潜在感染源对待,为降低检测过程中被感染的风险,请使用一次性手套或采取其它措施。 4)请按规定条件储存试剂。不同批号试剂请勿混用,建议用户使用后应及时盖上瓶盖,避免污染。如试剂外观等指标与标称不符,表明试剂被污染或已失效,应停止使用。请不要使用过效期的试剂。 5)当试剂变混浊或被污染或空白吸光度值>0.350时,表明试剂已失效,应弃去。 6)需配套使用的本公司临床生化复合校准品禁止反复冻融, 建议复溶后小包装分装使用。 7)人口中含高浓度淀粉酶,实验过程中注意避免飞沫对试剂的污染。 5.5 废弃物处理 试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规(如WS/T249-2005《临床实验室废物处理原则》等)进行废物处理。 6. 检验操作 6.1 基本参数 测定方法:终点法 主波长:405nm 副波长:505nm 反应方向:向上   空白(B) 校准(C) 测定(U) 样 本(μl) -- -- 5 校准品(μl) -- 5 -- 蒸馏水/生理盐水(μl) 5 -- -- 试剂R1(μl) 200 200 200 混匀,37℃孵育5分钟。 试剂R2(μl) 50 50 50 混匀,37℃恒温1分钟后,405nm波长处准确测定平均每分钟吸光度变化率△A/min,绘制校准曲线图。 结果计算: 根据校准品的浓度值与吸光度变化率值在全自动生化分析仪上自动生成F值和校准曲线。 样本AMY活性(U/L)= △A/min ×F 6.3 校准 6.3.1 校准品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套校准品进行校准。 6.3.2 校准品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司的校准品时,请参照校准品使用说明书进行准备。加样时应避免气泡产生。 6.3.3 校准品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3) 开瓶复溶后的校准品,在-20℃密闭避光贮存可稳定30天。 6.3.4 校准周期 1) 使用四川沃文特生物技术有限公司提供的校准品每隔30天进行1次校准。 2) 当试剂批号更换时,要求进行校准。 3) 当试剂瓶更换时,要求进行校准。 4) 当仪器更换零部件或者保养时,要求进行校准。 5) 当发现质控品、患者样品的测定值显示异常时,要求进行校准。 6.3.5 校准品使用注意事项 1)严格按照校准品说明书要求进行操作。 2)请不要使用我公司以外的校准品,否则结果的准确性无法保证。 3)校准品使用后请按要求妥善保管,避免污染。 4)避免反复冻融使用。 6.4 质控 6.4.1 质控品 建议使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清(水平2和/或水平3)。 6.4.2 质控品准备 使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清时,请参照质控品使用说明书进行准备。 6.4.3 质控品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的质控品在2℃~8℃或-20℃下密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3)血清复溶后,在-20℃下至少稳定30天。 6.4.4 质控可接受性判断 使用正常值和病理值生化质控品(无法满足时至少使用其中一种)进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施,如:质控品是否有质量问题,重新校准,试剂是否有质量问题,仪器运行是否正常等相关因素进行确认后解决问题,作好记录。 6.4.5 质控品使用注意事项 1)严格按照质控品说明书要求进行操作。 2)当使用质控品时,由于基质效应的影响和不同实验室测定条件的差异,测定值与标示靶值可能存在一定的偏差,建议用户建立自己实验室的控制均值和标准差。 3)避免反复冻融使用。 7. 结果处理 对超出可报告范围的结果的处理:取0.1ml样品加0.9ml蒸馏水,重复测定后结果乘以稀释倍数10进行报告。对检验结果为病危报警值的处理:应立即报告。 8. 参考值范围 建议各实验室根据CLSI C28-A3 Vol.20 No.12(How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline --Third Edition)文件建立自己的参考值范围。用于诊断时应结合患者临床表现和其他临床检查结果。 血清/血浆:28-100U/L 尿液: <460U/L 9. 产品性能 9.1 空白吸光度 试剂空白吸光度:≤0.350(主波长405nm,光径10mm)。 试剂空白吸光度变化率(∆A/min)≤0.002 (主波长405nm,光径10mm)。 9.2 准确度 相对偏差在±10.0%范围内。 9.3 精密度 批内重复性CV≤5.0%、批间相对偏差R≤10.0% 。 9.4 分析灵敏度 α-淀粉酶活性为100U/L的吸光度变化率(△A/min)应在0.010~0.040之间。 9.5 线性范围 5~1500 U/L,r≥0.990; 5~50 U/L时,线性绝对偏差应在±5U/L范围内; 50~1500 U/L时,线性相对偏差应在±10.0%范围内。 9.6 抗干扰能力 依据CLSI EP7-A文件方案,在贝克曼AU400和日立7080全自动生化分析仪上进行研究,得出结果为: 胆红素684μmol/L 以下AMY测定结果影响为不超过10%; 甘油三酯11.3mmol/L以下对AMY测定结果影响为不超过10%; 抗坏血酸0.50g/L以下对AMY测定结果影响为不超过10%; 血红蛋白5.0g/L以下对AMY测定结果影响为不超过10%。 10. 检验注意事项 1)试剂在使用中应避免污染(尤其如唾液污染),否则将会导致失效; 2)试剂与样品用量可根据不同仪器的需要,在试剂样品体积比例不变的条件下,适当增加或减少试剂与样品的用量。 3)更换批号后建议重新定标。 4)准确的结果取决于样品、试剂、仪器等多个环节的控制。 5)药物、抗凝剂、促凝剂、分离胶等其他物质都可能对测定值造成无法预知的干扰。当怀疑标本存在这些干扰物质的影响时,请停药后或采用无任何添加剂的血清进行测定。 6)严重脂血、溶血对测定有干扰。 11. 安全性提示 血清等样品可能含有病毒、细菌等病源微生物,操作者有被感染的潜在危险性,操作时应采取防范措施;试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规进行废物处理。 12. 主要参考文献 1)尚红等.全国临床检验操作规程.人民卫生出版社,2014年第4版:289-290。 2)韩志钧等. 临床化学常用项目自动化分析法,辽宁科学技术出版社,2005年第三版:826-835. 载脂蛋白A1 Apolipoprotein A1(ApoA1) 1. 预期用途 本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆样本中载脂蛋白A1(ApoA1)的含量。 2. 临床意义 (1)ApoA1缺乏病 (Tangier病) 属常染色体隐形遗传,血清中几乎无ApoA1和HDL,中年后发生冠心病多见。 (2) 脑血管病变时ApoA1可明显下降。 (3) 降低见于冠心病、未控制的糖尿病,肾病综合征、活动性肝炎和肝功能低下。急性心肌梗死发病期ApoA1 下降。 3. 检测原理 利用抗原抗体反应,人血清或血浆中载脂蛋白A1与其相应抗体(抗人载脂蛋白A1抗体)在液相中相遇发生免疫反应,产生凝集,引起浊度上升。通过测定特定波长吸光度变化值,与同样处理的校准品比较,即可计算出样本中载脂蛋白A1的浓度。。 4. 样品采集和处理 本试剂可检测血清、血浆、脑脊液、胸腹水样品,血清和血浆原则上采集空腹血(禁食12小时);正确使用抗凝剂(肝素抗凝);采血后应及时分离,防止溶血。 样品中APOA1在2~8℃保存可稳定3天,-20℃保存可稳定2个月。 5. 试剂 5.1 试剂组成 【试剂主要组成成分】 试剂 成分 浓度 R1 三羟甲基氨基甲烷(Tris) 5g/L R2 羊抗人ApoA1抗体 63ml/L 5.2 试剂准备 R1和R2试剂为即用型液体试剂,开瓶装载即可使用,用后应及时冷藏保存。 5.3 试剂的保存及稳定性 未开瓶试剂盒(含校准品)于2~8℃密闭避光保存有效期为12个月,开瓶后2~8℃避光保存可稳定30天。 5.4 试剂使用中的注意事项及危险预防 1)严格按照试剂盒说明书的要求使用试剂。 2)不同批号试剂盒中各组份不能互换或混用。 3)超过有效期的试剂不能使用。 4)试剂开瓶后,会导致试剂与空气中成分有反应的可能性和水分蒸发,对检测结果有一定的影响,因此请尽快使用和减少试剂与空气的接触。 5)当试剂变混浊或被污染或空白吸光度值>0.200时,表明试剂已失效,应弃去。 6)装载试剂时防止产生气泡,否则影响试剂加注而无法保证结果。 7)使用时应避免与人体接触,当试剂误入口中或眼中,或者附着到皮肤上的时候,请立即用大量清水冲洗,如有必要,请接受医生的治疗。 5.5 废弃物处理 试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规(如WS/T249-2005《临床实验室废物处理原则》等)进行废物处理。 6. 检验操作 6.1 基本参数 测定方法:终点法 主波长:340nm 副波长:700nm 反应方向:向上   空白(B) 校准(C) 测定(U) 样 本(μl) -- -- 3 校准品(μl) -- 3 -- 蒸馏水/生理盐水(μl) 3 -- -- 试剂R1(μl) 240 240 240 混匀,37℃孵育5分钟,测定吸光度A1。 试剂R2(μl) 60 60 60 混匀,37℃孵育5分钟后读取各管吸光度A2,计算ΔA=A2-A1。 结果计算: 各型全自动生化分析仪会根据校准曲线和检测样本的吸光度变化值自动计算出检测样本的浓度值。 6.3 校准 6.3.1 校准品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套校准品进行校准。 6.3.2 校准品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司的校准品时,请参照校准品使用说明书进行准备。加样时应避免气泡产生。 6.3.3 校准品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3) 开瓶复溶后的校准品, -20℃保存可稳定3个月。 6.3.4 校准周期 1) 使用四川沃文特生物技术有限公司提供的校准品每隔14天进行1次校准。 2) 当试剂批号更换时,要求进行校准。 3) 当试剂瓶更换时,要求进行校准。 4) 当仪器更换零部件或者保养时,要求进行校准。 5) 当发现质控品、患者样品的测定值显示异常时,要求进行校准。 6.3.5 校准品使用注意事项 1)严格按照校准品说明书要求进行操作。 2)请不要使用我公司以外的校准品,否则结果的准确性无法保证。 3)校准品使用后请按要求妥善保管,避免污染。 4)避免反复冻融使用。 6.4 质控 6.4.1 质控品 建议使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清(水平2和/或水平3)。 6.4.2 质控品准备 使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清时,请参照质控品使用说明书进行准备。 6.4.3 质控品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的质控品在2℃~8℃或-20℃下密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3)血清复溶后,在-20℃下至少稳定30天。 6.4.4 质控可接受性判断 使用正常值和病理值生化质控品(无法满足时至少使用其中一种)进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施,如:质控品是否有质量问题,重新校准,试剂是否有质量问题,仪器运行是否正常等相关因素进行确认后解决问题,作好记录。 6.4.5 质控品使用注意事项 1)严格按照质控品说明书要求进行操作。 2)当使用质控品时,由于基质效应的影响和不同实验室测定条件的差异,测定值与标示靶值可能存在一定的偏差,建议用户建立自己实验室的控制均值和标准差。 3)避免反复冻融使用。 7. 结果处理 对超出可报告范围的结果的处理:取0.1ml样品加0.9ml蒸馏水,重复测定后结果乘以稀释倍数10进行报告。对检验结果为病危报警值的处理:应立即报告。 8. 参考值范围 建议各实验室根据CLSI C28-A3 Vol.20 No.12(How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline --Third Edition)文件建立自己的参考值范围。用于诊断时应结合患者临床表现和其他临床检查结果。 血清/血浆: 1.0~1.60g/L ; 9. 产品性能 9.1 空白吸光度 试剂空白吸光度:≤0.200(主波长340nm,光径10mm)。 9.2 准确度 相对偏差在±10.0%范围内。 9.3 精密度 批内重复性CV≤4.0%、批间相对偏差R≤5.0% 。 9.4 分析灵敏度 ApoA1浓度为1.00g/L的吸光度变化值(△A)在0.400~1.500范围内。 9.5 线性范围 0.10~2.60g/l,r≥0.990; 0.10~1.00g/l时,线性偏差在±0.15g/l范围内; >1.00g/l时,线性偏差在±10.0%范围内。 9.6 抗干扰能力 依据CLSI EP7-A文件方案,在贝克曼AU400和日立7080全自动生化分析仪上进行研究,得出结果为: 胆红素342μmol/L 以下ApoA1测定结果影响为不超过10%; 甘油三酯5.65mmol/L以下对ApoA1测定结果影响为不超过10%; 血红蛋白5.0g/L以下对ApoA1测定结果影响为不超过10%。 10. 检验注意事项 1)试剂在使用中应避免污染,否则将会导致失效; 2)试剂与样品用量可根据不同仪器的需要,在试剂样品体积比例不变的条件下,适当增加或减少试剂与样品的用量。 3)更换批号后建议重新定标。 4)准确的结果取决于样品、试剂、仪器等多个环节的控制。 5)药物、抗凝剂、促凝剂、分离胶等其他物质都可能对测定值造成无法预知的干扰。当怀疑标本存在这些干扰物质的影响时,请停药后或采用无任何添加剂的血清进行测定。 11. 安全性提示 血清等样品可能含有病毒、细菌等病源微生物,操作者有被感染的潜在危险性,操作时应采取防范措施;试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规进行废物处理。 12. 主要参考文献 1)叶应妩等. 全国临床检验操作规程,东南大学出版社,2006年第三版:463. 2)韩志钧等. 全国临床化学常用项目自动化分析法. 辽宁技术出版社,2005年第三版:963. 载脂蛋白B Apolipoprotein B(ApoB) 1. 预期用途 本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆样本中载脂蛋白B(ApoB)的含量。 2. 临床意义 (1)ApoB大部分分布在低密度脂蛋白 (LDL) 中,血清LDL-C增高被认为是动脉粥样硬化的主要危险因素,而测定ApoB比测定LDL-C更有意义。ApoA1/ApoB比值降低<1可视为心血管疾病的危险指标。比单独测定ApoA1或ApoB更有意义。 (2) 肾病综合征,活动性肝炎,肝实质损伤,糖尿病等也可见ApoA1降低,ApoB增高。 3. 检测原理 血清中的载脂蛋白B,可与试剂中特异抗体结合形成不溶性复合物而产生浊度,浊度的高低与标本中载脂蛋白B的浓度成正比。因此,可在波长340nm处,通过多点定标法来测得标本中载脂蛋白B的含量。 4. 样品采集和处理 本试剂可检测血清、血浆、脑脊液、胸腹水样品,血清和血浆原则上采集空腹血(禁食12小时);正确使用抗凝剂(肝素抗凝);采血后应及时分离,防止溶血。 样品中APOB在2~8℃保存可稳定3天,-20℃保存可稳定2个月。 5. 试剂 5.1 试剂组成 【试剂主要组成成分】 试剂 成分 浓度 R1 三羟甲基氨基甲烷(Tris) 5g/L R2 羊抗人ApoB抗体 115ml/L 5.2 试剂准备 R1和R2试剂为即用型液体试剂,开瓶装载即可使用,用后应及时冷藏保存。 5.3 试剂的保存及稳定性 未开瓶试剂盒(含校准品)于2~8℃密闭避光保存有效期为12个月,开瓶后2~8℃避光保存可稳定30天。 5.4 试剂使用中的注意事项及危险预防 1)严格按照试剂盒说明书的要求使用试剂。 2)不同批号试剂盒中各组份不能互换或混用。 3)超过有效期的试剂不能使用。 4)试剂开瓶后,会导致试剂与空气中成分有反应的可能性和水分蒸发,对检测结果有一定的影响,因此请尽快使用和减少试剂与空气的接触。 5)当试剂变混浊或被污染或空白吸光度值>0.200时,表明试剂已失效,应弃去。 6)装载试剂时防止产生气泡,否则影响试剂加注而无法保证结果。 7)使用时应避免与人体接触,当试剂误入口中或眼中,或者附着到皮肤上的时候,请立即用大量清水冲洗,如有必要,请接受医生的治疗。 5.5 废弃物处理 试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规(如WS/T249-2005《临床实验室废物处理原则》等)进行废物处理。 6. 检验操作 6.1 基本参数 测定方法:终点法 主波长:340nm 副波长:700nm 反应方向:向上   空白(B) 校准(C) 测定(U) 样 本(μl) -- -- 3 校准品(μl) -- 3 -- 蒸馏水/生理盐水(μl) 3 -- -- 试剂R1(μl) 240 240 240 混匀,37℃孵育5分钟,测定吸光度A1。 试剂R2(μl) 60 60 60 混匀,37℃孵育5分钟后读取各管吸光度A2,计算ΔA=A2-A1。 结果计算: 各型全自动生化分析仪会根据校准曲线和检测样本的吸光度变化值自动计算出检测样本的浓度值。 6.3 校准 6.3.1 校准品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套校准品进行校准。 6.3.2 校准品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司的校准品时,请参照校准品使用说明书进行准备。加样时应避免气泡产生。 6.3.3 校准品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3) 开瓶复溶后的校准品, -20℃保存可稳定3个月。 6.3.4 校准周期 1) 使用四川沃文特生物技术有限公司提供的校准品每隔14天进行1次校准。 2) 当试剂批号更换时,要求进行校准。 3) 当试剂瓶更换时,要求进行校准。 4) 当仪器更换零部件或者保养时,要求进行校准。 5) 当发现质控品、患者样品的测定值显示异常时,要求进行校准。 6.3.5 校准品使用注意事项 1)严格按照校准品说明书要求进行操作。 2)请不要使用我公司以外的校准品,否则结果的准确性无法保证。 3)校准品使用后请按要求妥善保管,避免污染。 4)避免反复冻融使用。 6.4 质控 6.4.1 质控品 建议使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清(水平2和/或水平3)。 6.4.2 质控品准备 使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清时,请参照质控品使用说明书进行准备。 6.4.3 质控品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的质控品在2℃~8℃或-20℃下密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3)血清复溶后,在-20℃下至少稳定30天。 6.4.4 质控可接受性判断 使用正常值和病理值生化质控品(无法满足时至少使用其中一种)进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施,如:质控品是否有质量问题,重新校准,试剂是否有质量问题,仪器运行是否正常等相关因素进行确认后解决问题,作好记录。 6.4.5 质控品使用注意事项 1)严格按照质控品说明书要求进行操作。 2)当使用质控品时,由于基质效应的影响和不同实验室测定条件的差异,测定值与标示靶值可能存在一定的偏差,建议用户建立自己实验室的控制均值和标准差。 3)避免反复冻融使用。 7. 结果处理 对超出可报告范围的结果的处理:取0.1ml样品加0.9ml蒸馏水,重复测定后结果乘以稀释倍数10进行报告。对检验结果为病危报警值的处理:应立即报告。 8. 参考值范围 建议各实验室根据CLSI C28-A3 Vol.20 No.12(How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline --Third Edition)文件建立自己的参考值范围。用于诊断时应结合患者临床表现和其他临床检查结果。 血清/血浆: 0.60~1.10g/L ; 9. 产品性能 9.1 空白吸光度 试剂空白吸光度:≤0.200(主波长340nm,光径10mm)。 9.2 准确度 相对偏差在±10.0%范围内。 9.3 精密度 批内重复性CV≤4.0%、批间相对偏差R≤5.0% 。 9.4 分析灵敏度 ApoB浓度为1.00g/L的吸光度变化值(△A)在0.150~0.600范围内。 9.5 线性范围 0.20~2.60g/l,r≥0.990; 0.20~1.00g/l时,线性偏差在±0.15g/l范围内; >1.00g/l时,线性偏差在±10.0%范围内。 9.6 抗干扰能力 依据CLSI EP7-A文件方案,在贝克曼AU400和日立7080全自动生化分析仪上进行研究,得出结果为: 胆红素342μmol/L 以下ApoB测定结果影响为不超过10%; 甘油三酯5.65mmol/L以下对ApoB测定结果影响为不超过10%; 血红蛋白5.0g/L以下对ApoB测定结果影响为不超过10%。 10. 检验注意事项 1)试剂在使用中应避免污染,否则将会导致失效; 2)试剂与样品用量可根据不同仪器的需要,在试剂样品体积比例不变的条件下,适当增加或减少试剂与样品的用量。 3)更换批号后建议重新定标。 4)准确的结果取决于样品、试剂、仪器等多个环节的控制。 5)药物、抗凝剂、促凝剂、分离胶等其他物质都可能对测定值造成无法预知的干扰。当怀疑标本存在这些干扰物质的影响时,请停药后或采用无任何添加剂的血清进行测定。 11. 安全性提示 血清等样品可能含有病毒、细菌等病源微生物,操作者有被感染的潜在危险性,操作时应采取防范措施;试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规进行废物处理。 12. 主要参考文献 1)叶应妩等. 全国临床检验操作规程,东南大学出版社,2006年第三版:463. 2)韩志钧等. 全国临床化学常用项目自动化分析法. 辽宁技术出版社,2005年第三版:963. 抗链球菌溶血素O Antistreptolysin O(ASO) 1. 预期用途 本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆样本中抗链球菌溶血素“O”的含量。 2. 临床意义 (1)ASO增高,常见于急性咽炎等上呼吸道感染,儿童多见。还可见于皮肤急软组织感染。 (2)活动性风湿热,猩红热,丹毒、风湿性心肌炎、心包炎、风湿性关节炎,急性肾小球肾炎,ASO滴度升高。多次检验所呈现的趋势与病情平行,如渐渐下降提示病情好转。 (3)A组溶血性链球菌所致败血症、菌血症心内膜炎等ASO均可升高。 3. 检测原理 利用抗原抗体反应,人血清或血浆中抗链球菌溶血素“O”与其相应抗体(抗人抗链球菌溶血素“O”抗体)在液相中相遇发生免疫反应,产生凝集,引起浊度上升。通过测定特定波长吸光度变化值,与同样处理的校准品比较,即可计算出样本中抗链球菌溶血素“O”的浓度。 4. 样品采集和处理 本试剂可检测血清或肝素抗凝血浆样本,避免溶血,血清和血浆原则上采集空腹血(禁食12小时);样本应在采血后立即离心分离,并在当日检测。如不能即时检测,冷藏(2~8℃)可保存2天,-20℃保存可稳定7天,避免反复冻融。 5. 试剂 5.1 试剂组成 【试剂主要组成成分】 试剂 成分 浓度 R1 三羟甲基氨基甲烷(Tris) 5 g/L R2 抗链球菌溶血素“O”致敏胶乳 200 ml/L 5.2 试剂准备 R1和R2试剂为即用型液体试剂,开瓶装载即可使用,用后应及时冷藏保存。 5.3 试剂的保存及稳定性 应在2~8℃密闭避光贮存,稳定期为瓶签标示的有效期。开瓶后的试剂应在2~8℃保存,稳定期为30天。严禁放置0℃以下保存。 5.4 试剂使用中的注意事项及危险预防 1)严格按照试剂盒说明书的要求使用试剂。 2)不同批号试剂盒中各组份不能互换或混用。 3)超过有效期的试剂不能使用。 4)试剂开瓶后,会导致试剂与空气中成分有反应的可能性和水分蒸发,对检测结果有一定的影响,因此请尽快使用和减少试剂与空气的接触。 5)当试剂变混浊或被污染或空白吸光度值>1.000时,表明试剂已失效,应弃去。 6)装载试剂时防止产生气泡,否则影响试剂加注而无法保证结果。 7)使用时应避免与人体接触,当试剂误入口中或眼中,或者附着到皮肤上的时候,请立即用大量清水冲洗,如有必要,请接受医生的治疗。 5.5 废弃物处理 试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规(如WS/T249-2005《临床实验室废物处理原则》等)进行废物处理。 6. 检验操作 6.1 基本参数 测定方法:终点法 主波长:570nm 副波长:none 反应方向:向上   空白(B) 校准(C) 测定(U) 样 本(μl) -- -- 3 校准品(μl) -- 3 -- 蒸馏水/生理盐水(μl) 3 -- -- 试剂R1(μl) 240 240 240 混匀,37℃孵育5分钟。 试剂R2(μl) 60 60 60 混匀,37℃恒温1分钟,以空白管调零测定吸光度A1,4分钟后测定吸光度A2, 计算∆A=A2-A1,绘制校准曲线图。 结果计算: 各型全自动生化分析仪会根据校准曲线和检测样本的吸光度变化值自动计算出检测样本的浓度值。 6.3.1 校准品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套校准品进行校准。 6.3.2 校准品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司的校准品时,请参照校准品使用说明书进行准备。加样时应避免气泡产生。 6.3.3 校准品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3) 开瓶复溶后的校准品,在-20℃密闭避光贮存可稳定30天。 6.3.4 校准周期 1) 使用四川沃文特生物技术有限公司提供的校准品每隔14天进行1次校准。 2) 当试剂批号更换时,要求进行校准。 3) 当试剂瓶更换时,要求进行校准。 4) 当仪器更换零部件或者保养时,要求进行校准。 5) 当发现质控品、患者样品的测定值显示异常时,要求进行校准。 6.3.5 校准品使用注意事项 1)严格按照校准品说明书要求进行操作。 2)请不要使用我公司以外的校准品,否则结果的准确性无法保证。 3)校准品使用后请按要求妥善保管,避免污染。 4)避免反复冻融使用。 6.4 质控 6.4.1 质控品 建议使用RANDOX公司提供的特种蛋白多项检测质控血清(水平2和/或水平3)。 6.4.2 质控品准备 使用RANDOX公司提供的特种蛋白多项检测质控血清时,请参照质控品使用说明书进行准备。 6.4.3 质控品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的质控品在2℃~8℃或-20℃下密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3)血清复溶后,在-20℃下至少稳定30天。 6.4.4 质控可接受性判断 使用正常值和病理值生化质控品(无法满足时至少使用其中一种)进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施,如:质控品是否有质量问题,重新校准,试剂是否有质量问题,仪器运行是否正常等相关因素进行确认后解决问题,作好记录。 6.4.5 质控品使用注意事项 1)严格按照质控品说明书要求进行操作。 2)当使用质控品时,由于基质效应的影响和不同实验室测定条件的差异,测定值与标示靶值可能存在一定的偏差,建议用户建立自己实验室的控制均值和标准差。 3)避免反复冻融使用。 7. 结果处理 对超出可报告范围的结果的处理:取0.1ml样品加0.9ml蒸馏水,重复测定后结果乘以稀释倍数10进行报告。对检验结果为病危报警值的处理:应立即报告。 8. 参考值范围 建议各实验室根据CLSI C28-A3 Vol.20 No.12(How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline --Third Edition)文件建立自己的参考值范围。用于诊断时应结合患者临床表现和其他临床检查结果。 血清/血浆: ≤170 IU/ml 。 9. 产品性能 9.1 空白吸光度 试剂空白吸光度:≤1.000(主波长570nm,光径10mm)。 9.2 准确度 相对偏差在±20.0%范围内。 9.3 精密度 批内重复性CV≤5.0%、批间相对偏差R≤10.0% 。 9.4 分析灵敏度 抗链球菌溶血素“O”(ASO)浓度为300IU/ml的吸光度变化值(∆A)在0.050~0.250范围内。 9.5 线性范围 10IU/ml~800IU/ml,r≥0.990; 10IU/ml~100IU/ml时,线性绝对偏差应在±15IU/ml范围内; 100IU/ml~800IU/ml时,线性相对偏差应在±15.0%范围内; 9.6 抗干扰能力 依据CLSI EP7-A文件方案,在贝克曼AU400和日立7080全自动生化分析仪上进行研究,得出结果为: 胆红素684μmol/L 以下Lp(a)测定结果影响为不超过10%; 甘油三酯11.30mmol/L以下对Lp(a)测定结果影响为不超过10%; 血红蛋白5.0g/L以下对Lp(a)测定结果影响为不超过10%。 10. 检验注意事项 1)试剂在使用中应避免污染,否则将会导致失效; 2)试剂与样品用量可根据不同仪器的需要,在试剂样品体积比例不变的条件下,适当增加或减少试剂与样品的用量。 3)更换批号后建议重新定标。 4)准确的结果取决于样品、试剂、仪器等多个环节的控制。 5)药物、抗凝剂、促凝剂、分离胶等其他物质都可能对测定值造成无法预知的干扰。当怀疑标本存在这些干扰物质的影响时,请停药后或采用无任何添加剂的血清进行测定。 11. 安全性提示 血清等样品可能含有病毒、细菌等病源微生物,操作者有被感染的潜在危险性,操作时应采取防范措施;试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规进行废物处理。 12. 主要参考文献 1)尚红等. 全国临床检验操作规程. 人民卫生出版社,2015年第4版:491~492. 2)韩志钧等. 临床化学常用项目自动化分析法,辽宁科学技术出版社,2005年第三版:1227~1229. 钙 Calcium(Ca) 1. 预期用途 本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆样本中钙(Ca)离子的含量。 2. 临床意义 钙的测定用于甲状旁腺疾病、各种骨病、慢性肾脏疾病、尿石症和手足搐搦(间歇性肌肉收缩或痉挛)的诊断和治疗。总血清钙由三部分组成:游离或离子钙,占 50%;蛋白结合钙,其中绝大部分与白蛋白结合,仅有一小部分与球蛋白结合,占 45%;络合物结合钙,主要为磷酸盐、柠檬酸盐和重碳酸盐,占 5%。离子钙在生理上最为重要,但已证实难以直接进行分析。不过,利用可知的蛋白质含量和血液pH 值(这两者对离子钙水平存在强烈影响),可以通过总钙估计离子钙。钙离子在传递神经冲动方面是几个酶反应的辅因子,此外还对保持正常的肌肉收缩和凝血过程发挥着重要作用。钙离子浓度显著降低会引起肌肉手足搐搦。高于正常浓度的钙离子则会导致神经肌肉兴奋性降低、肌肉无力和其它更复杂的症状。 3. 检测原理 在碱性条件下,样本中的钙与偶氮砷Ⅲ试剂作用形成蓝色复合物,其颜色深浅与Ca含量成正比。通过与同样处理的钙校准品比较,即可计算出样本中Ca的含量。 4. 样品采集和处理 请使用血清或肝素抗凝血浆样本,不得使用草酸盐、EDTA或枸椽酸盐抗凝血浆样本。样本中Ca在2~8℃保存可稳定7天。 5. 试剂 5.1 试剂组成 【试剂主要组成成分】 试剂 成分 浓度 R MES: 4.27g/L 偶氮胂III 0.132g/L 5.2 试剂准备 R试剂为即用型液体试剂,开瓶装载即可使用,用后应及时冷藏保存。 5.3 试剂的保存及稳定性 未开瓶试剂盒(含校准品)于2~8℃密闭避光保存有效期为12个月,开瓶后2~8℃避光保存可稳定30天。 运输和保存均应在2~8℃低温条件下进行。 5.4 试剂使用中的注意事项及危险预防 1)严格按照试剂盒说明书的要求使用试剂。 2)不同批号试剂盒中各组份不能互换或混用。 3)超过有效期的试剂不能使用。 4)试剂开瓶后,会导致试剂与空气中成分有反应的可能性和水分蒸发,对检测结果有一定的影响,因此请尽快使用和减少试剂与空气的接触。 5)当试剂变混浊或被污染或空白吸光度值>0.800时,表明试剂已失效,应弃去。 6)装载试剂时防止产生气泡,否则影响试剂加注而无法保证结果。 7)使用时应避免与人体接触,当试剂误入口中或眼中,或者附着到皮肤上的时候,请立即用大量清水冲洗,如有必要,请接受医生的治疗。 5.5 废弃物处理 试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规(如WS/T249-2005《临床实验室废物处理原则》等)进行废物处理。 6. 检验操作 6.1 基本参数 测定方法:终点法 主波长:660nm 副波长:none 反应方向:向上   空白(B) 校准(C) 测定(U) 样 本(μl) -- -- 2 校准品(μl) -- 2 -- 蒸馏水/生理盐水(μl) 2 -- -- 试剂R1(μl) 200 200 200 混匀,37℃恒温10分钟,,以空白管调零测定吸光度A,计算吸光度A与零点的差值ΔA。 结果计算: 样本Ca含量(mmol/L)= AU-AB ×Cc AC-AB Cc为校准品浓度值 6.3 校准 6.3.1 校准品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套校准品进行校准。 6.3.2 校准品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司的校准品时,请参照校准品使用说明书进行准备。加样时应避免气泡产生。 6.3.3 校准品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3) 开瓶复溶后的校准品,在-20℃密闭避光贮存可稳定30天。 6.3.4 校准周期 1) 使用四川沃文特生物技术有限公司提供的校准品每隔14天进行1次校准。 2) 当试剂批号更换时,要求进行校准。 3) 当试剂瓶更换时,要求进行校准。 4) 当仪器更换零部件或者保养时,要求进行校准。 5) 当发现质控品、患者样品的测定值显示异常时,要求进行校准。 6.3.5 校准品使用注意事项 1)严格按照校准品说明书要求进行操作。 2)请不要使用我公司以外的校准品,否则结果的准确性无法保证。 3)校准品使用后请按要求妥善保管,避免污染。 4)避免反复冻融使用。 6.4 质控 6.4.1 质控品 建议使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清(水平2和/或水平3)。 6.4.2 质控品准备 使用使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清,请参照质控品使用说明书进行准备。 6.4.3 质控品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的质控品在2℃~8℃下密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3)复溶后,2~8℃可保存7天,-20℃再次冷冻可保存4周,只能冻融1次。 6.4.4 质控可接受性判断 使用正常值和病理值生化质控品(无法满足时至少使用其中一种)进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施,如:质控品是否有质量问题,重新校准,试剂是否有质量问题,仪器运行是否正常等相关因素进行确认后解决问题,作好记录。 6.4.5 质控品使用注意事项 1)严格按照质控品说明书要求进行操作。 2)当使用质控品时,由于基质效应的影响和不同实验室测定条件的差异,测定值与标示靶值可能存在一定的偏差,建议用户建立自己实验室的控制均值和标准差。 3)避免反复冻融使用。 7. 结果处理 对超出可报告范围的结果的处理:取0.1ml样品加0.9ml蒸馏水,重复测定后结果乘以稀释倍数10进行报告。对检验结果为病危报警值的处理:应立即报告。 8. 参考值范围 建议各实验室根据CLSI C28-A3 Vol.20 No.12(How to Define and Determine Reference Intervals in the CliniCal Laboratory; Approved Guideline --Third Edition)文件建立自己的参考值范围。用于诊断时应结合患者临床表现和其他临床检查结果。 健康成人:2.08~2.60mmol/L 儿童:2.23~2.80mmol/L 9. 产品性能 9.1 空白吸光度 试剂空白吸光度:≤0.800(主波长660nm,光径10mm)。 9.2 准确度 相对偏差在±5.0%范围内。 9.3 精密度 批内重复性CV≤3.0%、批间相对偏差R≤5.0% 。 9.4 分析灵敏度 Ca浓度为2.50mmol/l的吸光度变化值 (△A)在0.150~0.600范围内。 9.5 线性范围 0.20mmol/L~5.00mmol/L,r≥0.990; 0.20mmol/L~1.00mmol/L时,线性绝对偏差应在±0.10mmol/L范围内; 1.00mmol/L~5.00mmol/L时,线性相对偏差应在±10.0%范围内。 9.6 抗干扰能力 依据CLSI EP7-A文件方案,在贝克曼AU400和日立7080全自动生化分析仪上进行研究,得出结果为: 胆红素682μmol/L 以下Ca测定结果影响为不超过10%; 抗坏血酸0.40g/L以下对Ca测定结果影响为不超过10%; 血红蛋白5.0g/L以下对Ca测定结果影响为不超过10%。 甘油三酯≤11.3mmol/L以下对Ca测定结果影响为不超过10%。 10. 检验注意事项 1)试剂在使用中应避免污染,否则将会导致失效; 2)试剂与样品用量可根据不同仪器的需要,在试剂样品体积比例不变的条件下,适当增加或减少试剂与样品的用量。 3)更换批号后建议重新定标。 4)准确的结果取决于样品、试剂、仪器等多个环节的控制。 5)药物、抗凝剂、促凝剂、分离胶等其他物质都可能对测定值造成无法预知的干扰。当怀疑标本存在这些干扰物质的影响时,请停药后或采用无任何添加剂的血清进行测定。 11. 安全性提示 血清等样品可能含有病毒、细菌等病源微生物,操作者有被感染的潜在危险性,操作时应采取防范措施;试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规进行废物处理。 12. 主要参考文献 1、叶应妩等. 全国临床检验操作规程. 东南大学出版社,2006年第三版:383-385. 2、韩志钧等. 临床化学常用项目自动化分析法,辽宁科学技术出版社,2005年第三版:1130-1135. 胆碱酯酶 Cholinesterase determination(CHE) 1. 预期用途 本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆样本中胆碱酯酶(CHE)的含量。 2. 临床意义 (1)病理性升高:肾病综合征,甲状腺功能亢进,糖尿病,脂肪肝,原发性家族性高CHE血症,血清CHE变异,原发性肝癌等。 (2)病理性降低:重症肝炎,慢性肝炎活动型,肝硬化,肝脓肿,各种癌,低蛋白血症(营养不良,贫血,感染,皮肌炎,急性心肌梗死),遗传性血清CHE异常症,溃疡性结肠炎,肾功能不全,天疱疮,烧伤等。 (3)有机磷中毒(轻度中毒降低30%,中度中毒降低50%,重度中毒降低70%)。 3. 检测原理 丁酰硫代胆碱丁酸 +硫代胆碱 DTNB + 硫代胆碱 5-巯基-2-硝基苯甲酸 + 2-硝基苯甲酸-5-硫基硫代胆碱 通过检测5-巯基-2-硝基苯甲酸在405nm处的增高速率,可计算出ChE活性。 4. 样品采集和处理 本试剂可检测血清、血浆样品,血清和血浆原则上采集空腹血(禁食12小时);正确使用抗凝剂(肝素);采血后应及时分离,防止溶血。 样品中CHE应及时测定。 不能使用EDTA抗凝剂的标本。 5. 试剂 5.1 试剂组成 【试剂主要组成成分】 试剂 成分 浓度 R1 磷酸二氢钾 5.3g/L 磷酸氢二钠 21.44 g/L R2 5,5-二硫代-2-硝基苯甲酸(DTNB) 0.52g/L S-碘化丁酰硫代胆碱 4.758g/L 5.2 试剂准备 R1和R2试剂为即用型液体试剂,开瓶装载即可使用,用后应及时冷藏保存。 5.3 试剂的保存及稳定性 未开瓶试剂盒于2~8℃密闭避光保存有效期为12个月,开瓶后2~8℃避光保存可稳定30天。运输和保存均应在2~8℃低温条件下进行。 5.4 试剂使用中的注意事项及危险预防 1)本试剂盒仅限用于体外诊断,请勿用于其它目的。 2)使用试剂时应遵守实验室操作规范,做好防护措施,避免与皮肤及粘膜接触。若有误入请迅速用水充分冲洗,必要时就医治疗。 同批号试剂盒中各组份不能互换或混用。 3)请将样本当作潜在感染源对待,为降低检测过程中被感染的风险,请使用一次性手套或采取其它措施。 4)请按规定条件储存试剂。不同批号试剂请勿混用,建议用户使用后应及时盖上瓶盖,避免污染。如试剂外观等指标与标称不符,表明试剂被污染或已失效,应停止使用。请不要使用过效期的试剂。 5)当试剂变混浊或被污染或空白吸光度值>1.000时,表明试剂已失效,应弃去。 6)需配套使用的本公司临床生化复合校准品禁止反复冻融, 建议复溶后小包装分装使用。 5.5 废弃物处理 试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规(如WS/T249-2005《临床实验室废物处理原则》等)进行废物处理。 6. 检验操作 6.1 基本参数 测定方法:终点法 主波长:405nm 副波长:505nm 反应方向:向上   空白(B) 校准(C) 测定(U) 样 本(μl) -- -- 3 校准品(μl) -- 3 -- 蒸馏水/生理盐水(μl) 3 -- -- 试剂R1(μl) 240 240 240 混匀,37℃孵育5分钟。 试剂R2(μl) 60 60 60 混匀,37℃恒温1分钟后,405nm波长处准确测定平均每分钟吸光度变化率△A/min,绘制校准曲线图。 结果计算: 根据校准品的浓度值与吸光度变化率值在全自动生化分析仪上自动生成F值和校准曲线。 样本CHE活性(U/L)= △A/min ×F 6.3 校准 6.3.1 校准品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套校准品进行校准。 6.3.2 校准品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司的校准品时,请参照校准品使用说明书进行准备。加样时应避免气泡产生。 6.3.3 校准品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3) 开瓶复溶后的校准品,在-20℃密闭避光贮存可稳定30天。 6.3.4 校准周期 1) 使用四川沃文特生物技术有限公司提供的校准品每隔30天进行1次校准。 2) 当试剂批号更换时,要求进行校准。 3) 当试剂瓶更换时,要求进行校准。 4) 当仪器更换零部件或者保养时,要求进行校准。 5) 当发现质控品、患者样品的测定值显示异常时,要求进行校准。 6.3.5 校准品使用注意事项 1)严格按照校准品说明书要求进行操作。 2)请不要使用我公司以外的校准品,否则结果的准确性无法保证。 3)校准品使用后请按要求妥善保管,避免污染。 4)避免反复冻融使用。 6.4 质控 6.4.1 质控品 建议使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清(水平2和/或水平3)。 6.4.2 质控品准备 使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清时,请参照质控品使用说明书进行准备。 6.4.3 质控品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的质控品在2℃~8℃或-20℃下密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3)血清复溶后,在-20℃下至少稳定30天。 6.4.4 质控可接受性判断 使用正常值和病理值生化质控品(无法满足时至少使用其中一种)进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施,如:质控品是否有质量问题,重新校准,试剂是否有质量问题,仪器运行是否正常等相关因素进行确认后解决问题,作好记录。 6.4.5 质控品使用注意事项 1)严格按照质控品说明书要求进行操作。 2)当使用质控品时,由于基质效应的影响和不同实验室测定条件的差异,测定值与标示靶值可能存在一定的偏差,建议用户建立自己实验室的控制均值和标准差。 3)避免反复冻融使用。 7. 结果处理 对超出可报告范围的结果的处理:取0.1ml样品加0.9ml蒸馏水,重复测定后结果乘以稀释倍数10进行报告。对检验结果为病危报警值的处理:应立即报告。 8. 参考值范围 建议各实验室根据CLSI C28-A3 Vol.20 No.12(How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline --Third Edition)文件建立自己的参考值范围。用于诊断时应结合患者临床表现和其他临床检查结果。 血清/血浆:4000-11000U/L 9. 产品性能 9.1 空白吸光度 试剂空白吸光度:≤1.000(主波长405nm,光径10mm)。 试剂空白吸光度变化率(∆A/min)≤0.020 (主波长405nm,光径10mm)。 9.2 准确度 相对偏差在±10.0%范围内。 9.3 精密度 批内重复性CV≤5.0%、批间相对偏差R≤10.0% 。 9.4 分析灵敏度 胆碱酯酶(CHE)活性为5000U/L的吸光度变化率(△A/min)应在0.200~0.800之间。 9.5 线性范围 200~20000 U/L,r≥0.990; 200~2000 U/L时,线性绝对偏差应在±200U/L范围内; 2000~20000 U/L时,线性相对偏差应在±15.0%范围内。 9.6 抗干扰能力 依据CLSI EP7-A文件方案,在贝克曼AU400和日立7080全自动生化分析仪上进行研究,得出结果为: 胆红素684μmol/L 以下CHE测定结果影响为不超过10%; 甘油三酯11.3mmol/L以下对CHE测定结果影响为不超过10%; 抗坏血酸0.50g/L以下对CHE测定结果影响为不超过10%; 血红蛋白5.0g/L以下对CHE测定结果影响为不超过10%。 10. 检验注意事项 1)试剂在使用中应避免污染,否则将会导致失效; 2)试剂与样品用量可根据不同仪器的需要,在试剂样品体积比例不变的条件下,适当增加或减少试剂与样品的用量。 3)更换批号后建议重新定标。 4)准确的结果取决于样品、试剂、仪器等多个环节的控制。 5)药物、抗凝剂、促凝剂、分离胶等其他物质都可能对测定值造成无法预知的干扰。当怀疑标本存在这些干扰物质的影响时,请停药后或采用无任何添加剂的血清进行测定。 11. 安全性提示 血清等样品可能含有病毒、细菌等病源微生物,操作者有被感染的潜在危险性,操作时应采取防范措施;试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规进行废物处理。 12. 主要参考文献 1)尚红等.全国临床检验操作规程.人民卫生出版社,2014年第4版:291。 2)韩志钧等. 临床化学常用项目自动化分析法,辽宁科学技术出版社,2005年第三版:811-816. 肌酸激酶 CK 1. 预期用途 本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆样本中肌酸激酶(CK)的活性。 2. 临床意义 肌酸激酶(CK)是一种二聚酶,有4种不同形式(线性体同工酶、CK-MM、CK-BB、CK-MB)。主要存在于骨骼肌和心肌,是临床常用的心肌酶谱之一。其升高常见于急性心肌梗死、病毒性心肌炎、进行性肌萎缩、脑血管意外、脑膜炎、甲低等患者。CK对心肌梗死的辅助诊断特异性较AST、LDH高。测定方法有酶偶联法、速率法、胶体金法、免疫抑制法、磷酸肌酸底物法、荧光层析法等。 3. 检测原理 磷酸肌酸 + ADP肌酸 + ATP ATP + 葡萄糖葡萄糖-6-磷酸 + ADP 葡萄糖-6-磷酸 + NADP6-磷酸-葡萄糖 + NADPH + H+ NADPH生成的速率与样本中CK活性成正比,在340nm波长处,通过连续监测 吸光度的上升速率(△A/min),即可计算出样本中CK的活性。 4. 样品采集和处理 请使用血清或肝素抗凝血浆样本,严格避免溶血。样本应在采血后立即离心分离,并在当日检测。如不能即时检测,冷藏(2~8℃)可保存8~12个小时,-20℃避光保存可稳定2~3天。 5. 试剂 5.1 试剂组成 【试剂主要组成成分】 试剂 成分 浓度 R1 已糖激酶(HXK) 10KU/L 氧化型辅酶Ⅰ(NAD) 2.65g/L R2 磷酸肌酸(CrP) 51g/L 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH) 30KU/L 葡萄糖 6g/L 二磷酸腺苷(ADP) 7.5g/L 5.2 试剂准备 R1和R2试剂为即用型液体试剂,开瓶装载即可使用,用后应及时冷藏保存。 5.3 试剂的保存及稳定性 应在2~8℃密闭避光贮存,稳定期为瓶签标示的有效期。开瓶后的试剂应在2~8℃保存,稳定期为30天。严禁放置0℃以下保存。 5.4 试剂使用中的注意事项及危险预防 1)严格按照试剂盒说明书的要求使用试剂。 2)不同批号试剂盒中各组份不能互换或混用。 3)超过有效期的试剂不能使用。 4)试剂开瓶后,会导致试剂与空气中成分有反应的可能性和水分蒸发,对检测结果有一定的影响,因此请尽快使用和减少试剂与空气的接触。 5)当试剂变混浊或被污染或空白吸光度值>0.500时,表明试剂已失效,应弃去。 6)装载试剂时防止产生气泡,否则影响试剂加注而无法保证结果。 7)使用时应避免与人体接触,当试剂误入口中或眼中,或者附着到皮肤上的时候,请立即用大量清水冲洗,如有必要,请接受医生的治疗。 5.5 废弃物处理 试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规(如WS/T249-2005《临床实验室废物处理原则》等)进行废物处理。 6. 检验操作 6.1 基本参数 测定方法:速率法 主波长:340nm 副波长:405nm 反应方向:向上   空白(B) 校准(C) 测定(U) 样 本(μl) -- -- 10 校准品(μl) -- 10 -- 蒸馏水/生理盐水(μl) 10 -- -- 试剂R1(μl) 200 200 200 混匀,37℃恒温5分钟 试剂R2(μl) 50 50 50 混匀,37℃恒温2分钟后,340nm波长处准确测定平均每分钟吸光度变化率△A/min,绘制校准曲线图。 结果计算: CK(U/L)=(ΔAU/min)×K, ΔAU/min为测定管相对空白管的每分钟吸光度变化值。 6.3 校准 6.3.1 校准品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套校准品进行校准。 6.3.2 校准品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司的校准品时,请参照校准品使用说明书进行准备。加样时应避免气泡产生。 6.3.3 校准品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3) 开瓶复溶后的校准品,在-20℃密闭避光贮存可稳定30天。 6.3.4 校准周期 1) 使用四川沃文特生物技术有限公司提供的校准品每隔30天进行1次校准。 2) 当试剂批号更换时,要求进行校准。 3) 当试剂瓶更换时,要求进行校准。 4) 当仪器更换零部件或者保养时,要求进行校准。 5) 当发现质控品、患者样品的测定值显示异常时,要求进行校准。 6.3.5 校准品使用注意事项 1)严格按照校准品说明书要求进行操作。 2)请不要使用我公司以外的校准品,否则结果的准确性无法保证。 3)校准品使用后请按要求妥善保管,避免污染。 4)避免反复冻融使用。 6.4 质控 6.4.1 质控品 建议使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清(水平2和/或水平3)。 6.4.2 质控品准备 使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清时,请参照质控品使用说明书进行准备。 6.4.3 质控品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的质控品在2℃~8℃或-20℃下密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3)血清复溶后,在-20℃下至少稳定30天。 6.4.4 质控可接受性判断 使用正常值和病理值生化质控品(无法满足时至少使用其中一种)进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施,如:质控品是否有质量问题,重新校准,试剂是否有质量问题,仪器运行是否正常等相关因素进行确认后解决问题,作好记录。 6.4.5 质控品使用注意事项 1)严格按照质控品说明书要求进行操作。 2)当使用质控品时,由于基质效应的影响和不同实验室测定条件的差异,测定值与标示靶值可能存在一定的偏差,建议用户建立自己实验室的控制均值和标准差。 3)避免反复冻融使用。 7. 结果处理 对超出可报告范围的结果的处理:取0.1ml样品加0.9ml生理盐水,重复测定后结果乘以稀释倍数10进行报告。对检验结果为病危报警值的处理:应立即报告。 8. 参考值范围 建议各实验室根据CLSI C28-A3 Vol.20 No.12(How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline --Third Edition)文件建立自己的参考值范围。用于诊断时应结合患者临床表现和其他临床检查结果。 男性:38~174U/L 女性:26~140U/L 9. 产品性能 9.1 空白吸光度 试剂空白吸光度:≤0.500;试剂空白吸光度变化率(△A/min)≤0.002 (主波长340nm,光径10mm)。 9.2 准确度 相对偏差在±10.0%范围内。 9.3 精密度 批内重复性CV≤5.0%、批间相对偏差R≤10.0% 。 9.4 分析灵敏度 肌酸激酶(CK)活性为100U/L的吸光度变化率(△A/min)应在0.010~0.040之间。 9.5 线性范围 6~1500 U/L,r≥0.990; 6~100 U/L时,线性绝对偏差应在±10 U/L范围内; 100~1500 U/L时,线性相对偏差应在±10.0%范围内。 9.6 抗干扰能力 依据CLSI EP7-A文件方案,在贝克曼AU400和日立7080全自动生化分析仪上进行研究,得出结果为: 胆红素684μmol/L 以下CK测定结果影响为不超过10%; 甘油三酯11.3mmol/L以下对CK测定结果影响为不超过10%; 抗坏血酸0.50g/L以下对CK测定结果影响为不超过10%; 10. 检验注意事项 1)试剂在使用中应避免污染,否则将会导致失效; 2)试剂与样品用量可根据不同仪器的需要,在试剂样品体积比例不变的条件下,适当增加或减少试剂与样品的用量。 3)更换批号后建议重新定标。 4)准确的结果取决于样品、试剂、仪器等多个环节的控制。 5)药物、抗凝剂、促凝剂、分离胶等其他物质都可能对测定值造成无法预知的干扰。当怀疑标本存在这些干扰物质的影响时,请停药后或采用无任何添加剂的血清进行测定。 11. 安全性提示 血清等样品可能含有病毒、细菌等病源微生物,操作者有被感染的潜在危险性,操作时应采取防范措施;试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规进行废物处理。 12. 主要参考文献 1) 尚红等.全国临床检验操作规程.人民卫生出版社,2014年第4版:287-288. 2) 韩志钧等. 临床化学常用项目自动化分析法,辽宁科学技术出版社,2005年第三版:773-783. 肌酸激酶同工酶 CKMB 1. 预期用途 本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆样本中肌酸激酶同工酶(CKMB)的活性。 2. 临床意义 肌酸激酶(CK)由M和B两个亚单位组成三种的二聚体—CK-BB、CK-MB、CK-MM。CK-MB主要存在于心肌,因此是临床公认的诊断心肌梗死和确定有无心肌坏死的重要指标,是临床重要的心肌酶谱指标之一。测定方法有速率法、免疫抑制法等。 3. 检测原理 本试剂采用免疫抑制法,用特异的抗CK-M抗体抑制 M亚单位,通过下述反应,在340nm波长处,连续监测吸光度的上升速率(△A/min),测定剩余的B亚单位活性,结果乘2即得CK-MB活性。 磷酸肌酸 + ADP肌酸 + ATP ATP + 葡萄糖葡萄糖-6-磷酸 + ADP 葡萄糖-6-磷酸 + NADP6-磷酸-葡萄糖 + NADPH + H+ 4. 样品采集和处理 请使用血清或肝素抗凝血浆样本,严格避免溶血。样本应在采血后立即离心分离,并在当日检测。如不能即时检测,冷藏(2~8℃)可保存8~12个小时,-20℃避光保存可稳定2~3天。 5. 试剂 5.1 试剂组成 【试剂主要组成成分】 试剂 成分 浓度 R1 已糖激酶(HXK) 10KU/L 氧化型辅酶Ⅰ(NAD) 2.65g/L 鼠抗人CK-MM单抗 1.8ml/L R2 磷酸肌酸(CrP) 51g/L 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH) 30KU/L 葡萄糖 6g/L 二磷酸腺苷(ADP) 7.5g/L 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH) 30KU/L 5.2 试剂准备 R1和R2试剂为即用型液体试剂,开瓶装载即可使用,用后应及时冷藏保存。 5.3 试剂的保存及稳定性 应在2~8℃密闭避光贮存,稳定期为瓶签标示的有效期。开瓶后的试剂应在2~8℃保存,稳定期为30天。严禁放置0℃以下保存。 5.4 试剂使用中的注意事项及危险预防 1)严格按照试剂盒说明书的要求使用试剂。 2)不同批号试剂盒中各组份不能互换或混用。 3)超过有效期的试剂不能使用。 4)试剂开瓶后,会导致试剂与空气中成分有反应的可能性和水分蒸发,对检测结果有一定的影响,因此请尽快使用和减少试剂与空气的接触。 5)当试剂变混浊或被污染或空白吸光度值>0.700时,表明试剂已失效,应弃去。 6)装载试剂时防止产生气泡,否则影响试剂加注而无法保证结果。 7)使用时应避免与人体接触,当试剂误入口中或眼中,或者附着到皮肤上的时候,请立即用大量清水冲洗,如有必要,请接受医生的治疗。 5.5 废弃物处理 试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规(如WS/T249-2005《临床实验室废物处理原则》等)进行废物处理。 6. 检验操作 6.1 基本参数 测定方法:速率法 主波长:340nm 副波长:405nm 反应方向:向上   空白(B) 校准(C) 测定(U) 样 本(μl) -- -- 10 校准品(μl) -- 10 -- 蒸馏水/生理盐水(μl) 10 -- -- 试剂R1(μl) 200 200 200 混匀,37℃恒温5分钟 试剂R2(μl) 50 50 50 混匀,37℃恒温3分钟后,340nm波长处准确测定平均每分钟吸光度变化率△A/min,绘制校准曲线图。 结果计算: 样本CK-MB活性(U/L)=ΔA/min × F 理论F值=8360 6.3 校准 6.3.1 校准品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套校准品进行校准。 6.3.2 校准品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司的校准品时,请参照校准品使用说明书进行准备。加样时应避免气泡产生。 6.3.3 校准品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3) 开瓶复溶后的校准品,在-20℃密闭避光贮存可稳定30天。 6.3.4 校准周期 1) 使用四川沃文特生物技术有限公司提供的校准品每隔30天进行1次校准。 2) 当试剂批号更换时,要求进行校准。 3) 当试剂瓶更换时,要求进行校准。 4) 当仪器更换零部件或者保养时,要求进行校准。 5) 当发现质控品、患者样品的测定值显示异常时,要求进行校准。 6.3.5 校准品使用注意事项 1)严格按照校准品说明书要求进行操作。 2)请不要使用我公司以外的校准品,否则结果的准确性无法保证。 3)校准品使用后请按要求妥善保管,避免污染。 4)避免反复冻融使用。 6.4 质控 6.4.1 质控品 建议使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清(水平2和/或水平3)。 6.4.2 质控品准备 使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清时,请参照质控品使用说明书进行准备。 6.4.3 质控品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的质控品在2℃~8℃或-20℃下密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3)血清复溶后,在-20℃下至少稳定30天。 6.4.4 质控可接受性判断 使用正常值和病理值生化质控品(无法满足时至少使用其中一种)进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施,如:质控品是否有质量问题,重新校准,试剂是否有质量问题,仪器运行是否正常等相关因素进行确认后解决问题,作好记录。 6.4.5 质控品使用注意事项 1)严格按照质控品说明书要求进行操作。 2)当使用质控品时,由于基质效应的影响和不同实验室测定条件的差异,测定值与标示靶值可能存在一定的偏差,建议用户建立自己实验室的控制均值和标准差。 3)避免反复冻融使用。 7. 结果处理 对超出可报告范围的结果的处理:取0.1ml样品加0.9ml生理盐水,重复测定后结果乘以稀释倍数10进行报告。对检验结果为病危报警值的处理:应立即报告。 8. 参考值范围 建议各实验室根据CLSI C28-A3 Vol.20 No.12(How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline --Third Edition)文件建立自己的参考值范围。用于诊断时应结合患者临床表现和其他临床检查结果。 ≤24U/L 9. 产品性能 9.1 空白吸光度 试剂空白吸光度:≤0.700;试剂空白吸光度变化率(△A/min)≤0.010 (主波长340nm,光径10mm)。 9.2 准确度 相对偏差在±10.0%范围内。 9.3 精密度 批内重复性CV≤5.0%、批间相对偏差R≤10.0% 。 9.4 分析灵敏度 肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性为100U/L的吸光度变化率(△A/min)应在0.005~0.020之间。 9.5 线性范围 6~1000 U/L,r≥0.990; 6~100 U/L时,线性绝对偏差应在±10 U/L范围内; 100~1000 U/L时,线性相对偏差应在±10.0%范围内。 9.6 抗干扰能力 依据CLSI EP7-A文件方案,在贝克曼AU400和日立7080全自动生化分析仪上进行研究,得出结果为: 胆红素684μmol/L 以下CKMB测定结果影响为不超过10%; 甘油三酯11.3mmol/L以下对CKMB测定结果影响为不超过10%; 抗坏血酸0.50g/L以下对CKMB测定结果影响为不超过10%; 10. 检验注意事项 1)试剂在使用中应避免污染,否则将会导致失效; 2)试剂与样品用量可根据不同仪器的需要,在试剂样品体积比例不变的条件下,适当增加或减少试剂与样品的用量。 3)更换批号后建议重新定标。 4)准确的结果取决于样品、试剂、仪器等多个环节的控制。 5)药物、抗凝剂、促凝剂、分离胶等其他物质都可能对测定值造成无法预知的干扰。当怀疑标本存在这些干扰物质的影响时,请停药后或采用无任何添加剂的血清进行测定。 11. 安全性提示 血清等样品可能含有病毒、细菌等病源微生物,操作者有被感染的潜在危险性,操作时应采取防范措施;试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规进行废物处理。 12. 主要参考文献 1) 尚红等.全国临床检验操作规程.人民卫生出版社,2014年第4版:289. 2) 韩志钧等. 临床化学常用项目自动化分析法,辽宁科学技术出版社,2005年第三版:786-793. 肌酐 Creatinine(Crea) 1. 预期用途 本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆样本中肌酐(Crea)的含量。 2. 临床意义 肌酐是小分子物质,经血循环到达肾脏,主要通过肾小球滤过,不被肾小管重吸收,随尿液排除到体外。血浆肌酐浓度及尿液肌酐排泄量的肾小球滤过功能的有效指标。因此,在控制外源性肌酐摄入时,测定血清肌酐可作为肾滤过功能的指标。 虽然血肌酐浓度和血尿素浓度对肾脏疾病诊断有一定帮助,但只有在肾脏病变较为严重 (GFR下降至正常的50%以下) 时才会升高。由于肌酐摄入及生成量较稳定,故测定血清肌酐浓度较血清尿素浓度更能准确地反映肾小球的功能。在临床上同时测定血清肌酐浓度和血清尿素浓度,在鉴别肾前性或肾后性尿毒症上有一定意义。以mg/dl计算,在正常情况下血清尿素/肌酐比值为15~20∶1。比值下降伴血清肌酐水平正常多见于急性肾小管损害 (其比值可降至10∶1),以及低蛋白摄人和严重肝脏疾病等;比值升高伴血清肌酐水平正常多见于肾前性氮质血症如肾血流灌注不足、蛋白质分解代谢旺盛、高蛋白饮食、药物治疗等使血清尿素水平增高的疾病,比值可高达40∶1;比值升高同时伴血清肌酐水平升高见于肾性病变,尿素增高水平比肌酐更显著;而肾后性因素引起氮滞留时,血清尿素与肌酐水平同时升高,故比值变化不大。由于正常人血清尿素/肌酐比值波动较大,因此它只能作为一个粗略的参考。 样品Crea含量测定主要用于急性肾小球肾炎、慢性肾小球肾炎(失代偿期)、急性或慢性肾功能不全、肢端肥大症、巨人症、肌肉萎缩性疾病的辅助诊断。 医学决定水平 40umol/L:在婴幼儿超过此值,应考虑肾功能不全的可能性,因此必须进一步作肾脏功能的检查和评价。 141umol/L:测定值若超过此水平,应考虑进一步进行其他肾功能检查实验,如肌酐清除率实验。 530umol/L:高于此水平,几乎肯定有肾功能受损,所以此值具有重要的诊断及评估意义,应及时采取必要的治疗措施。 3. 检测原理 肌酐+H2O肌酸 肌酸+H20+O2肌氨酸+尿素 肌氨酸+H20+O2甘氨酸+HCHO+H2O2 2H2O2+4-AAP+TOPS 醌亚胺+4H20 醌亚胺的生成使波长546nm处吸光度上升,吸光度的变化与Crea含量成正比。通过与同样处理的肌酐校准品比较,即可计算出样本中Crea的含量。 4. 样品采集和处理 本试剂可检测血清、血浆样品,血清和血浆原则上采集空腹血(禁食12小时);正确使用抗凝剂(肝素抗凝);采血后应及时分离,防止溶血。 样品中CREA在2~8℃保存可稳定4天,-20℃保存可稳定3个月以上。 5. 试剂 5.1 试剂组成 【试剂主要组成成分】 试剂 成分 浓度 R1 肌氨酸氧化酶(SAO) 10.0KU/l 肌酸脒基水解酶 (CRH) 50.0KU/l N-乙基-N-(3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠(TOPS) 0.21g/l R2 肌酐酰氨基水解酶(CNH) 300KU/l 过氧化物酶(POD) 10KU/l 4-氨基安替比林 0.6g/l 5.2 试剂准备 R1和R2试剂为即用型液体试剂,开瓶装载即可使用,用后应及时冷藏保存。 5.3 试剂的保存及稳定性 应在2~8℃密闭避光贮存,稳定期为瓶签标示的有效期。开瓶后的试剂应在2~8℃保存,稳定期为30天。严禁放置0℃以下保存。 5.4 试剂使用中的注意事项及危险预防 1)严格按照试剂盒说明书的要求使用试剂。 2)不同批号试剂盒中各组份不能互换或混用。 3)超过有效期的试剂不能使用。 4)试剂开瓶后,会导致试剂与空气中成分有反应的可能性和水分蒸发,对检测结果有一定的影响,因此请尽快使用和减少试剂与空气的接触。 5)当试剂变混浊或被污染或空白吸光度值>0.050时,表明试剂已失效,应弃去。 6)装载试剂时防止产生气泡,否则影响试剂加注而无法保证结果。 7)使用时应避免与人体接触,当试剂误入口中或眼中,或者附着到皮肤上的时候,请立即用大量清水冲洗,如有必要,请接受医生的治疗。 5.5 废弃物处理 试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规(如WS/T249-2005《临床实验室废物处理原则》等)进行废物处理。 6. 检验操作 6.1 基本参数 测定方法:终点法 主波长:546nm 副波长:700nm 反应方向:向上   空白(B) 校准(C) 测定(U) 样 本(μl) -- -- 4 校准品(μl) -- 4 -- 蒸馏水/生理盐水(μl) 4 -- -- 试剂R1(μl) 180 180 180 混匀,37℃孵育5分钟,测定吸光度A1。 试剂R2(μl) 60 60 60 混匀,37℃孵育5分钟后读取各管吸光度A2,计算ΔA=A2-A1。 结果计算: 样本Crea含量(μmol/l)= △Au  × Cc △Ac △AU/min为测定管相对空白管吸光度值 △Ac/min为校准管相对空白管吸光度值 Cc为校准品浓度值 6.2 检验程序设置 6.3 校准 6.3.1 校准品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套校准品进行校准。 6.3.2 校准品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司的校准品时,请参照校准品使用说明书进行准备。加样时应避免气泡产生。 6.3.3 校准品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3) 开瓶复溶后的校准品,在-20℃密闭避光贮存可稳定30天。 6.3.4 校准周期 1) 使用四川沃文特生物技术有限公司提供的校准品每隔14天进行1次校准。 2) 当试剂批号更换时,要求进行校准。 3) 当试剂瓶更换时,要求进行校准。 4) 当仪器更换零部件或者保养时,要求进行校准。 5) 当发现质控品、患者样品的测定值显示异常时,要求进行校准。 6.3.5 校准品使用注意事项 1)严格按照校准品说明书要求进行操作。 2)请不要使用我公司以外的校准品,否则结果的准确性无法保证。 3)校准品使用后请按要求妥善保管,避免污染。 4)避免反复冻融使用。 6.4 质控 6.4.1 质控品 建议使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清(水平2和/或水平3)。 6.4.2 质控品准备 使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清时,请参照质控品使用说明书进行准备。 6.4.3 质控品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的质控品在2℃~8℃或-20℃下密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3)血清复溶后,在-20℃下至少稳定30天。 6.4.4 质控可接受性判断 使用正常值和病理值生化质控品(无法满足时至少使用其中一种)进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施,如:质控品是否有质量问题,重新校准,试剂是否有质量问题,仪器运行是否正常等相关因素进行确认后解决问题,作好记录。 6.4.5 质控品使用注意事项 1)严格按照质控品说明书要求进行操作。 2)当使用质控品时,由于基质效应的影响和不同实验室测定条件的差异,测定值与标示靶值可能存在一定的偏差,建议用户建立自己实验室的控制均值和标准差。 3)避免反复冻融使用。 7. 结果处理 对超出可报告范围的结果的处理:取0.1ml样品加0.9ml蒸馏水,重复测定后结果乘以稀释倍数10进行报告。对检验结果为病危报警值的处理:应立即报告。 8. 参考值范围 建议各实验室根据CLSI C28-A3 Vol.20 No.12(How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline --Third Edition)文件建立自己的参考值范围。用于诊断时应结合患者临床表现和其他临床检查结果。 血清/血浆: 儿童:8.5~90.2μmol/l 成人:男性 21.5~104.0μmol/l 女性19.8~87.1μmol/l 9. 产品性能 9.1 空白吸光度 试剂空白吸光度:≤0.050(主波长546nm,光径10mm)。 9.2 准确度 相对偏差在±10.0%范围内。 9.3 精密度 批内重复性CV≤4.0%、批间相对偏差R≤5.0% 。 9.4 分析灵敏度 肌酐浓度为442.0μmol/l的吸光度变化值(△A)在0.060~0.240范围内。 9.5 线性范围 8.0~8840.0μmol/l,r≥0.990; 8.0~70.0μmol/l时,线性偏差在±7.0μmol/l范围内; >70.0μmol/l时,线性偏差在±10.0%范围内。 9.6 抗干扰能力 依据CLSI EP7-A文件方案,在贝克曼AU400和日立7080全自动生化分析仪上进行研究,得出结果为: 胆红素684μmol/L 以下Crea测定结果影响为不超过10%; 甘油三酯11.3mmol/L以下对Crea测定结果影响为不超过10%; 抗坏血酸0.30g/L以下对Crea测定结果影响为不超过10%; 血红蛋白4.5g/L以下对Crea测定结果影响为不超过10%。 10. 检验注意事项 1)试剂在使用中应避免污染,否则将会导致失效; 2)试剂与样品用量可根据不同仪器的需要,在试剂样品体积比例不变的条件下,适当增加或减少试剂与样品的用量。 3)更换批号后建议重新定标。 4)准确的结果取决于样品、试剂、仪器等多个环节的控制。 5)药物、抗凝剂、促凝剂、分离胶等其他物质都可能对测定值造成无法预知的干扰。当怀疑标本存在这些干扰物质的影响时,请停药后或采用无任何添加剂的血清进行测定。 11. 安全性提示 血清等样品可能含有病毒、细菌等病源微生物,操作者有被感染的潜在危险性,操作时应采取防范措施;试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规进行废物处理。 12. 主要参考文献 1)叶应妩等. 全国临床检验操作规程,东南大学出版社,2006年第三版:463. 2)林其燧等. 临床化学诊断方法大全,北京大学出版社,1990年第一版:17. 胱抑素C Cystatin C[(Cys-C)] 1. 预期用途 本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆样本中胱抑素C(Cys-C)的含量。 2. 临床意义 Cys C可广泛应用于所有与肾功能受损相关的疾病GFR的评价与监测: 1) 用于评价GFR的功能 Cys C 的生物学特性使它成为基本满足理想内源性GFR标志物要求的内源性物质。大量研究证实Cys C 是优于血肌酐(Scr) 的内源性标记物。 2) 用于肾移植术的监测 Cys C在肾移植术后对检测肾小球滤过率而言,比肌酐和肌酐清除率都敏感,可作为肾移植中肾功能的重要监测指标,快速诊断出急性排斥反应或药物治疗可能造成的肾损害。有利于及时采取有效的治疗措施,大大提高手术的成功率。 3) 用于糖尿病肾病的监测 血清Cys C是一个比较敏感和实用的指标。在刚患糖尿病而无证据证明有无肾脏损害时,定期开展血清Cys C检测以观察其与糖尿病肾脏的关系是必要的,Cys C 检出糖尿病肾病的灵敏度为40 % ,特异性为100 % 。 4) 用于高血压肾病的监测 临床定期监测高血压病患者的血清CysC水平对高血压病所导致的早期肾功能损伤的观察与早期预防、诊断和治疗具有很重要的临床意义。 5) 用于心血管病肾功能监测 大量研究认为,在老年患者尤其心血管疾病患者Cys C水平明显升高,往往提示预后不良,是可靠的死亡预测风险因子。 6) 用于儿童肾病的判断 以Cys C来评价GFR是儿童更为理想的GFR标志物,更能被患者及儿科医师接受。 7) 用于癌症化疗肾功能监测 许多研究都比较一致地认为对化疗病人检测Cys C 比检测SCr 更有意义。 8) 用于急性心衰肾功能监测 多项研究表明,胱抑素C浓度水平的升高会导致心血管疾病的致死率、如心肌梗死、心脏衰竭、周围性动脉疾病、代谢综合征等。 9) 用于肝硬化的肾功能监测 用Cys C来鉴别肝硬化患者肾功能正常或轻度受损是较好的指标。 3. 检测原理 利用抗原抗体反应,人血清或血浆中胱抑素C与其相应抗体(抗人胱抑素C抗体)致敏的胶乳颗粒在液相中相遇发生免疫反应,产生凝集,引起浊度上升。通过测定特定波长吸光度变化值,与同样处理的校准品比较,即可计算出样本中胱抑素C的浓度。 4. 样品采集和处理 本试剂可检测新鲜无溶血的血清、血浆(肝素抗凝)样本。血清和血浆原则上采集空腹血(禁食12小时);样本应在采血后立即离心分离,并在当日检测。如不能即时检测,冷藏(2~8℃)可保存8天,-20℃保存可稳定1个月,避免反复冻融。样本混浊或有可见絮状纤维蛋白,需3000转/分钟离心3分钟,吸取上清使用。严重的脂血、溶血、微生物污染的样本对测定结果有影响。 5. 试剂 5.1 试剂组成 【试剂主要组成成分】 试剂 成分 浓度 R1 2-(N-吗啡啉)乙磺酸(MES) 9.76 g/L R2 聚苯乙烯胶乳 20 ml/L 兔抗人Cys-C抗体 10 mg/L 5.2 试剂准备 R1和R2试剂为即用型液体试剂,开瓶装载即可使用,用后应及时冷藏保存。 5.3 试剂的保存及稳定性 应在2~8℃密闭避光贮存,稳定期为瓶签标示的有效期。开瓶后的试剂应在2~8℃保存,稳定期为30天。严禁放置0℃以下保存。 5.4 试剂使用中的注意事项及危险预防 1)严格按照试剂盒说明书的要求使用试剂。 2)不同批号试剂盒中各组份不能互换或混用。 3)超过有效期的试剂不能使用。 4)试剂开瓶后,会导致试剂与空气中成分有反应的可能性和水分蒸发,对检测结果有一定的影响,因此请尽快使用和减少试剂与空气的接触。 5)当试剂变混浊或被污染或空白吸光度值>1.000时,表明试剂已失效,应弃去。 6)装载试剂时防止产生气泡,否则影响试剂加注而无法保证结果。 7)使用时应避免与人体接触,当试剂误入口中或眼中,或者附着到皮肤上的时候,请立即用大量清水冲洗,如有必要,请接受医生的治疗。 5.5 废弃物处理 试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规(如WS/T249-2005《临床实验室废物处理原则》等)进行废物处理。 6. 检验操作 6.1 基本参数 测定方法:终点法 主波长:540nm 副波长:none 反应方向:向上   空白(B) 校准(C) 测定(U) 样 本(μl) -- -- 4 校准品(μl) -- 4 -- 蒸馏水/生理盐水(μl) 4 -- -- 试剂R1(μl) 200 200 200 混匀,37℃孵育5分钟,测定吸光度A1。 试剂R2(μl) 40 40 40 混匀,37℃恒温1分钟,以空白管调零测定吸光度A1,4分钟后测定吸光度A2, 计算∆A=A2-A1,绘制校准曲线图。 结果计算: 各型全自动生化分析仪会根据校准曲线和检测样本的吸光度变化值自动计算出检测样本的浓度值。 6.3 校准 6.3.1 校准品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套校准品进行校准。 6.3.2 校准品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司的校准品时,请参照校准品使用说明书进行准备。加样时应避免气泡产生。 6.3.3 校准品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3) 开瓶复溶后的校准品,在-20℃密闭避光贮存可稳定30天。 6.3.4 校准周期 1) 使用四川沃文特生物技术有限公司提供的校准品每隔14天进行1次校准。 2) 当试剂批号更换时,要求进行校准。 3) 当试剂瓶更换时,要求进行校准。 4) 当仪器更换零部件或者保养时,要求进行校准。 5) 当发现质控品、患者样品的测定值显示异常时,要求进行校准。 6.3.5 校准品使用注意事项 1)严格按照校准品说明书要求进行操作。 2)请不要使用我公司以外的校准品,否则结果的准确性无法保证。 3)校准品使用后请按要求妥善保管,避免污染。 4)避免反复冻融使用。 6.4 质控 6.4.1 质控品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套质控品(水平1和/或水平2)。 6.4.2 质控品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司配套质控品时,请参照质控品使用说明书进行准备。 6.4.3 质控品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的质控品在2℃~8℃或-20℃下密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3)血清复溶后,在-20℃下至少稳定30天。 6.4.4 质控可接受性判断 使用正常值和病理值生化质控品(无法满足时至少使用其中一种)进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施,如:质控品是否有质量问题,重新校准,试剂是否有质量问题,仪器运行是否正常等相关因素进行确认后解决问题,作好记录。 6.4.5 质控品使用注意事项 1)严格按照质控品说明书要求进行操作。 2)当使用质控品时,由于基质效应的影响和不同实验室测定条件的差异,测定值与标示靶值可能存在一定的偏差,建议用户建立自己实验室的控制均值和标准差。 3)避免反复冻融使用。 7. 结果处理 对超出可报告范围的结果的处理:取0.1ml样品加0.9ml蒸馏水,重复测定后结果乘以稀释倍数10进行报告。对检验结果为病危报警值的处理:应立即报告。 8. 参考值范围 建议各实验室根据CLSI C28-A3 Vol.20 No.12(How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline --Third Edition)文件建立自己的参考值范围。用于诊断时应结合患者临床表现和其他临床检查结果。 血清/血浆: 0.51~1.09 mg/l 9. 产品性能 9.1 空白吸光度 试剂空白吸光度:≤1.000(主波长540nm,光径10mm)。 9.2 准确度 相对偏差在±15.0%范围内。 9.3 精密度 批内重复性CV≤4.0%、批间相对偏差R≤5.0% 。 9.4 分析灵敏度 胱抑素C浓度为1.00mg/l的吸光度变化值(△A)在0.030~0.120范围内。 9.5 线性范围 0.20~9.00mg/l,r≥0.990; 0.20~2.00mg/l时,线性偏差在±0.20mg/l范围内; >2.00mg/l时,线性偏差在±10.0%范围内。 9.6 抗干扰能力 依据CLSI EP7-A文件方案,在贝克曼AU400和日立7080全自动生化分析仪上进行研究,得出结果为: 胆红素513μmol/L 以下Cys-C测定结果影响为不超过10%; 抗坏血酸0.50g/L以下对Cys-C测定结果影响为不超过10%; 血红蛋白5.0g/L以下对Cys-C)测定结果影响为不超过10%。 抗类风湿因子120IU/mL以下对Cys-C测定结果影响为不超过10%。 10. 检验注意事项 1)试剂在使用中应避免污染,否则将会导致失效; 2)试剂与样品用量可根据不同仪器的需要,在试剂样品体积比例不变的条件下,适当增加或减少试剂与样品的用量。 3)更换批号后建议重新定标。 4)准确的结果取决于样品、试剂、仪器等多个环节的控制。 5)药物、抗凝剂、促凝剂、分离胶等其他物质都可能对测定值造成无法预知的干扰。当怀疑标本存在这些干扰物质的影响时,请停药后或采用无任何添加剂的血清进行测定。 11. 安全性提示 血清等样品可能含有病毒、细菌等病源微生物,操作者有被感染的潜在危险性,操作时应采取防范措施;试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规进行废物处理。 12. 主要参考文献 1). 叶应妩等. 全国临床检验操作规程,东南大学出版社,2006年第三版:470. 2). Rule AD, Bergstralh EJ, Slezak JM, et al. Glomerular filtration rate estimated by cystatin C among different clinical p resentations. Kidney Int, 2006, 69: 399 - 405. 葡萄糖Glucose(GLU) 1. 预期用途 本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆样本中葡萄糖(GLU)的含量。 2. 临床意义 分为生理性或病理性升高和降低。 1).生理性或暂时性高血糖:餐后1~2小时、注射葡萄糖或通过输液输入葡萄糖后、情绪紧张时,血糖会升高。 2).生理性或暂时性低血糖:运动后和饥饿时、注射胰岛素后、妊娠、哺乳期和服降 糖药后,血糖会降低。 3).病理性高血糖: (1)糖尿病:因为胰岛素分泌不足。当空腹血糖水平达7.2—1lmmol/L(130--200mg/dl)时,临床可疑为糖尿病;当血糖水平超过11mmol/L(200mg/dl)时,临床可诊断为糖尿病。 (2)能使血糖升高的激素分泌增加:如垂体前叶机能亢进、肾上腺皮质机能亢进、甲亢、嗜铬细胞瘤等。 3)脑外伤、脑出血、脑膜炎等,由于使颅内压增高,刺激了血糖中枢,从而引起血糖升高。 (4)脱水:如呕吐、腹泻、发高烧等,引起血糖轻度增高(7.2—7.8mmol/L)。 (5)麻醉、窒息、肺炎等急性传染病、癫痫、紫痫等疾病由于加速肝糖原分解,使血糖增高。 4).病理性低血糖: (1)胰岛素分泌过多:如胰岛β细胞瘤。 (2)升高血糖激素分泌减少:如垂体机能减退、肾上腺机能减退和CTkey=甲状腺 target=_blank>甲状腺机能减退。 (3)血糖来源减少,肝糖原贮存不足:如长期营养不良、肝炎、肝坏死、肝癌、糖原累积病等。 医学决定水平 2.8mmol/L: 禁食后12小时血糖测定值低于此值,则为低血糖症,可出现焦虑、出汗、颤抖和虚弱等症状,若反应发生较慢,且以易怒、嗜睡、头痛为主要症状,则应作其他试验,以查找原因。 7mmol/L:等空腹血糖达到或超过此值,可考虑糖尿病的诊断,但应加作糖耐量试验 11mmol/L:高于此值,饭后1小时测得此值或高于此值,则可高度怀疑为糖尿病。 危急值 成人:<2.5 mmol/L; >15.0 mmol/L。 3. 检测原理 β-D-葡萄糖+O2+H2OD-葡萄糖酸+H2O2 H2O2+4-AAP+对羟基苯甲酸钠2H2O+醌亚胺 醌亚胺的生成使505nm波长处吸光度上升,吸光度的变化与Glu的含量成正比。通过与同样处理的葡萄糖校准品比较,即可计算出样本中Glu的含量。 4. 样品采集和处理 本试剂可检测血清、血浆样品,空腹葡萄糖血清和血浆的采集要求前一天晚上晚餐后不再进食,空腹过夜(8~14小时)后进行;口服葡萄糖耐量试验则按要求口服葡萄糖后准确计时0.5h、1h、2h、3h分别进行采集;正确使用抗凝剂(肝素);采血后应及时分离(1小时以内进行),防止溶血。血清、血浆冷藏(2~8℃)可保存2小时,-20℃保存可稳定3天。 5. 试剂 5.1 试剂组成 【试剂主要组成成分】 试剂 成分 浓度 R1 对羟基苯甲酸钠 1.5g/L R2 葡萄糖氧化酶(GOD) 139KU/L 过氧化物酶(POD) 25KU/L 4-氨基安替比林(4-AAP) 0.75g/L 5.2 试剂准备 R1和R2试剂为即用型液体试剂,开瓶装载即可使用,用后应及时冷藏保存。 5.3 试剂的保存及稳定性 未开瓶试剂盒(含校准品)于2~8℃密闭避光保存有效期为12个月,开瓶后2~8℃避光保存可稳定30天。运输和保存均应在2~8℃低温条件下进行。 5.4 试剂使用中的注意事项及危险预防 1)严格按照试剂盒说明书的要求使用试剂。 2)不同批号试剂盒中各组份不能互换或混用。 3)超过有效期的试剂不能使用。 4)试剂开瓶后,会导致试剂与空气中成分有反应的可能性和水分蒸发,对检测结果有一定的影响,因此请尽快使用和减少试剂与空气的接触。 5)当试剂变混浊或被污染或空白吸光度值>0.150时,表明试剂已失效,应弃去。 6)装载试剂时防止产生气泡,否则影响试剂加注而无法保证结果。 7)使用时应避免与人体接触,当试剂误入口中或眼中,或者附着到皮肤上的时候,请立即用大量清水冲洗,如有必要,请接受医生的治疗。 5.5 废弃物处理 试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规(如WS/T249-2005《临床实验室废物处理原则》等)进行废物处理。 6. 检验操作 6.1 基本参数 测定方法:终点法 主波长:505nm 副波长:700nm 反应方向:向上   空白(B) 校准(C) 测定(U) 样 本(μl) -- -- 3 校准品(μl) -- 3 -- 蒸馏水/生理盐水(μl) 3 -- -- 试剂R1(μl) 240 240 240 混匀,37℃孵育2~5分钟,读取吸光度值A1 试剂R2(μl) 60 60 60 混匀,37℃孵育8分钟后读取各管吸光度A2,计算ΔA=A2-A1。 结果计算: 样本GLU含量(mmol/L)= △Au  × Cc △Ac △AU/min为测定管相对空白管吸光度值 △Ac/min为校准管相对空白管吸光度值 Cc为校准品浓度值 6.3 校准 6.3.1 校准品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套校准品进行校准。 6.3.2 校准品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司的校准品时,请参照校准品使用说明书进行准备。加样时应避免气泡产生。 6.3.3 校准品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3) 开瓶复溶后的校准品,在-20℃密闭避光贮存可稳定30天。 6.3.4 校准周期 1) 使用四川沃文特生物技术有限公司提供的校准品每隔30天进行1次校准。 2) 当试剂批号更换时,要求进行校准。 3) 当试剂瓶更换时,要求进行校准。 4) 当仪器更换零部件或者保养时,要求进行校准。 5) 当发现质控品、患者样品的测定值显示异常时,要求进行校准。 6.3.5 校准品使用注意事项 1)严格按照校准品说明书要求进行操作。 2)请不要使用我公司以外的校准品,否则结果的准确性无法保证。 3)校准品使用后请按要求妥善保管,避免污染。 4)避免反复冻融使用。 6.4 质控 6.4.1 质控品 建议使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清(水平2和/或水平3)。 6.4.2 质控品准备 使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清时,请参照质控品使用说明书进行准备。 6.4.3 质控品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的质控品在2℃~8℃或-20℃下密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3)血清复溶后,在-20℃下至少稳定30天。 6.4.4 质控可接受性判断 使用正常值和病理值生化质控品(无法满足时至少使用其中一种)进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施,如:质控品是否有质量问题,重新校准,试剂是否有质量问题,仪器运行是否正常等相关因素进行确认后解决问题,作好记录。 6.4.5 质控品使用注意事项 1)严格按照质控品说明书要求进行操作。 2)当使用质控品时,由于基质效应的影响和不同实验室测定条件的差异,测定值与标示靶值可能存在一定的偏差,建议用户建立自己实验室的控制均值和标准差。 3)避免反复冻融使用。 7. 结果处理 对超出可报告范围的结果的处理:取0.1ml样品加0.9ml蒸馏水,重复测定后结果乘以稀释倍数10进行报告。对检验结果为病危报警值的处理:应立即报告。 8. 参考值范围 建议各实验室根据CLSI C28-A3 Vol.20 No.12(How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline --Third Edition)文件建立自己的参考值范围。用于诊断时应结合患者临床表现和其他临床检查结果。 血清/血浆: 3.90-6.10 mmol/L 9. 产品性能 9.1 空白吸光度 试剂空白吸光度:≤0.150(主波长505nm,光径10mm)。 9.2 准确度 相对偏差在±10.0%范围内。 9.3 精密度 批内重复性CV≤5.0%、批间相对偏差R≤10.0% 。 9.4 分析灵敏度 葡萄糖浓度为5.55mmol/L的吸光度变化值(△A)应在0.150~0.600之间。 9.5 线性范围 0.50~27.80mmol/L,r≥0.990; 0.50~4.16mmol/L时,线性绝对偏差应在±0.50 mmol/L范围内; 4.16~27.80 mmol/L时,线性相对偏差应在±10.0%范围内。 9.6 抗干扰能力 依据CLSI EP7-A文件方案,在贝克曼AU400和日立7080全自动生化分析仪上进行研究,得出结果为: 胆红素684μmol/L 以下GLU测定结果影响为不超过10%; 甘油三酯11.3mmol/L以下对GLU测定结果影响为不超过10%; 抗坏血酸0.30g/L以下对GLU测定结果影响为不超过10%; 血红蛋白4.5g/L以下对GLU测定结果影响为不超过10%。 10. 检验注意事项 1)试剂在使用中应避免污染,否则将会导致失效; 2)试剂与样品用量可根据不同仪器的需要,在试剂样品体积比例不变的条件下,适当增加或减少试剂与样品的用量。 3)更换批号后建议重新定标。 4)准确的结果取决于样品、试剂、仪器等多个环节的控制。 5)药物、抗凝剂、促凝剂、分离胶等其他物质都可能对测定值造成无法预知的干扰。当怀疑标本存在这些干扰物质的影响时,请停药后或采用无任何添加剂的血清进行测定。 11. 安全性提示 血清等样品可能含有病毒、细菌等病源微生物,操作者有被感染的潜在危险性,操作时应采取防范措施;试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规进行废物处理。 12. 主要参考文献 1)尚红等.全国临床检验操作规程.人民卫生出版社,2014年第4版:230-233. 2)韩志钧等. 临床化学常用项目自动化分析法,辽宁科学技术出版社,2005年第三版:977-985. 总胆红素 Total Bilirubin (TBIL) 1. 预期用途 本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆样本中总胆红素(TBil)的含量。 2. 临床意义 1).判断有无黄疸及黄疸的程度 血清总胆红素 (serumtotalbilirubin,STB)17~34μmol/L为隐性黄疸;4~170μmol/L为轻度黄疸;170~340μmol/L为中度黄疸;>340μmol/L为重度黄疸。 2).判断黄疸的类型 STB在340~510μrhol/L者为阻塞性 (完全梗阻) 黄疸;不完全性梗阻为170~ 265μmol/L。肝细胞性黄疸为17~200μmol/L;溶血性黄疸很少超过85μmol/L 3).结合血清胆红素分类判断黄疸类型 STB和非结合胆红素增高为溶血性黄疸;STB和结合胆红素增高为阻塞性黄疸; STB、结合胆红素及非结合胆红素皆增高为肝细胞性黄疸。 医学决定水平 24umol/L:此水平在参考值范围以上,若测定值超过此水平,各种可能引起Bili增高的原因均应考虑,包括肝功能不全、肝外阻塞、溶血、Gilbert综合征(家族性非溶血性黄疸)。此时进行ALT、AST凝血酶原时间和ALP测定,可帮助确认或排除肝脏疾病 43umol/L:测定值高于此水平往往出现黄疸,当出现黄疸,但Bili测定值又在此水平以下的,则提示应根据这一情况查找原因。 340umol/L:婴胆红素超过这一水平,往往与脑损伤(核黄疸)有关,治疗时应根据临床及其他实验结果考虑换血。 3. 检测原理 样本中总胆红素在pH3.0附近,在氧化剂和反应促进剂作用下,被氧化成胆绿素。与此同时,胆红素特有的黄色也随之消失。测定反应前后吸光度的差,即可计算出样本中总胆红素的浓度。 4. 样品采集和处理 请使用血清或肝素抗凝血浆样本,避免溶血。样本应在采血后立即离心分离,并在当日检测。如不能即时检测,冷藏(2~8℃)可保存12小时,冷冻(-20℃)可保存15天,避免反复冻融。 5. 试剂 5.1 试剂组成 【试剂主要组成成分】 试剂 成分 浓度 R1 表面活性剂 2.0g/L R2 胆固醇氧化酶(COO) 0.8g/L 5.2 试剂准备 R1和R2试剂为即用型液体试剂,开瓶装载即可使用,用后应及时冷藏保存。 5.3 试剂的保存及稳定性 未开瓶试剂盒于2~8℃密闭避光保存有效期为12个月,开瓶后2~8℃避光保存可稳定30天。产品校准品复溶后-20℃密闭避光保存可稳定14天。运输和保存均应在2~8℃低温条件下进行。 5.4 试剂使用中的注意事项及危险预防 1)严格按照试剂盒说明书的要求使用试剂。 2)不同批号试剂盒中各组份不能互换或混用。 3)超过有效期的试剂不能使用。 4)试剂开瓶后,会导致试剂与空气中成分有反应的可能性和水分蒸发,对检测结果有一定的影响,因此请尽快使用和减少试剂与空气的接触。 5)当试剂变混浊或被污染或空白吸光度值>0.050时,表明试剂已失效,应弃去。 6)装载试剂时防止产生气泡,否则影响试剂加注而无法保证结果。 7)使用时应避免与人体接触,当试剂误入口中或眼中,或者附着到皮肤上的时候,请立即用大量清水冲洗,如有必要,请接受医生的治疗。 5.5 废弃物处理 试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规(如WS/T249-2005《临床实验室废物处理原则》等)进行废物处理。 6. 检验操作 6.1 基本参数 测定方法:终点法 主波长:450nm 副波长:546nm 反应方向:向下   空白(B) 校准(C) 测定(U) 样 本(μl) -- -- 8 校准品(μl) -- 8 -- 蒸馏水/生理盐水(μl) 8 -- -- 试剂R1(μl) 240 240 240 混匀,37℃孵育5分钟,以空白管调零,测定吸光度A1。 试剂R2(μl) 60 60 60 混匀,37℃孵育5分钟后读取各管吸光度A2,计算ΔA=A2-A1。 结果计算: 样本TBIL含量(umol/l)= △Au × Cc △Ac △AU/min为测定管相对空白管吸光度值 △Ac/min为校准管相对空白管吸光度值 Cc为校准品浓度值 6.3 校准 6.3.1 校准品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套校准品进行校准。 6.3.2 校准品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司的校准品时,请参照校准品使用说明书进行准备。加样时应避免气泡产生。 6.3.3 校准品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3) 开瓶后的校准品,在-20℃密闭避光贮存可稳定30天。 6.3.4 校准周期 1) 使用四川沃文特生物技术有限公司提供的校准品每隔30天进行1次校准。 2) 当试剂批号更换时,要求进行校准。 3) 当试剂瓶更换时,要求进行校准。 4) 当仪器更换零部件或者保养时,要求进行校准。 5) 当发现质控品、患者样品的测定值显示异常时,要求进行校准。 6.3.5 校准品使用注意事项 1)严格按照校准品说明书要求进行操作。 2)请不要使用我公司以外的校准品,否则结果的准确性无法保证。 3)校准品使用后请按要求妥善保管,避免污染。 4)避免反复冻融使用。 6.4 质控 6.4.1 质控品 建议使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清(水平2和/或水平3)。 6.4.2 质控品准备 使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清时,请参照质控品使用说明书进行准备。 6.4.3 质控品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的质控品在2℃~8℃或-20℃下密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3)血清复溶后,在-20℃下至少稳定30天。 6.4.4 质控可接受性判断 使用正常值和病理值生化质控品(无法满足时至少使用其中一种)进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施,如:质控品是否有质量问题,重新校准,试剂是否有质量问题,仪器运行是否正常等相关因素进行确认后解决问题,作好记录。 6.4.5 质控品使用注意事项 1)严格按照质控品说明书要求进行操作。 2)当使用质控品时,由于基质效应的影响和不同实验室测定条件的差异,测定值与标示靶值可能存在一定的偏差,建议用户建立自己实验室的控制均值和标准差。 3)避免反复冻融使用。 7. 结果处理 对超出可报告范围的结果的处理:取0.1ml样品加0.9ml蒸馏水,重复测定后结果乘以稀释倍数10进行报告。对检验结果为病危报警值的处理:应立即报告。 8. 参考值范围 建议各实验室根据CLSI C28-A3 Vol.20 No.12(How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline --Third Edition)文件建立自己的参考值范围。用于诊断时应结合患者临床表现和其他临床检查结果。 血清/血浆: 3.4~20.5μmol/L 。 9. 产品性能 9.1 空白吸光度 试剂空白吸光度:≤0.050(主波长450nm,光径10mm)。 9.2 准确度 相对偏差在±10.0%范围内。 9.3 精密度 批内重复性CV≤5.0%、批间相对偏差R≤10.0% 。 9.4 分析灵敏度 总胆红素(TBil)浓度为50.0μmol/L的吸光度变化值(△A)绝对值应在0.030~0.120之间。 9.5 线性范围 0.7~684.0μmol/L,r≥0.990; 0.7~10.0μmol/L时,线性绝对偏差应在±1.6μmol/L范围内; 10.0~684.0μmol/L时,线性相对偏差应在±10.0%范围内。 9.6 抗干扰能力 依据CLSI EP7-A文件方案,在贝克曼AU400和日立7080全自动生化分析仪上进行研究,得出结果为: 甘油三酯11.3mmol/L以下对TBIL测定结果影响为不超过10%; 抗坏血酸0.50g/L以下对TBIL测定结果影响为不超过10%; 血红蛋白2.0g/L以下对TBIL测定结果影响为不超过10%。 10. 检验注意事项 1)试剂在使用中应避免污染,否则将会导致失效; 2)试剂与样品用量可根据不同仪器的需要,在试剂样品体积比例不变的条件下,适当增加或减少试剂与样品的用量。 3)更换批号后建议重新定标。 4)准确的结果取决于样品、试剂、仪器等多个环节的控制。 5)药物、抗凝剂、促凝剂、分离胶等其他物质都可能对测定值造成无法预知的干扰。当怀疑标本存在这些干扰物质的影响时,请停药后或采用无任何添加剂的血清进行测定。 11. 安全性提示 血清等样品可能含有病毒、细菌等病源微生物,操作者有被感染的潜在危险性,操作时应采取防范措施;试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规进行废物处理。 12. 主要参考文献 1)尚红等.全国临床检验操作规程.人民卫生出版社,2014年第4版:296-302. 2)韩志钧等. 临床化学常用项目自动化分析法,辽宁科学技术出版社,2005年第三版:1066-1094. 直接胆红素 Direct Bilirubin(DBIL) 1. 预期用途 本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆样本中直接胆红素(DBil)的含量。 2. 临床意义 1).判断有无黄疸及黄疸的程度 血清总胆红素 (serum total bilirubin,STB)17~34μmol/L为隐性黄疸;4~170μmol/L为轻度黄疸;170~340μmol/L为中度黄疸;>340μmol/L为重度黄疸。 2).判断黄疸的类型 STB在340~510μrhol/L者为阻塞性 (完全梗阻) 黄疸;不完全性梗阻为170~ 265μmol/L。肝细胞性黄疸为17~200μmol/L;溶血性黄疸很少超过85μmol/L 3).结合血清胆红素分类判断黄疸类型 STB和非结合胆红素(IBIL)增高为溶血性黄疸;STB和结合胆红素(DBIL)增高为阻塞性黄疸;STB、结合胆红素(DBIL)及非结合胆红素(IBIL)皆增高为肝细胞性黄疸。 医学决定水平 24umol/L:此水平在参考值范围以上,若测定值超过此水平,各种可能引起Bili增高的原因均应考虑,包括肝功能不全、肝外阻塞、溶血、Gilbert综合征(家族性非溶血性黄疸)。此时进行ALT、AST凝血酶原时间和ALP测定,可帮助确认或排除肝脏疾病 43umol/L:测定值高于此水平往往出现黄疸,当出现黄疸,但Bili测定值又在此水平以下的,则提示应根据这一情况查找原因。 340umol/L:婴胆红素超过这一水平,往往与脑损伤(核黄疸)有关,治疗时应根据临床及其他实验结果考虑换血。 3. 检测原理 样本中直接胆红素在pH3.0附近,在氧化剂和表面活性剂作用下,被氧化成胆绿素。与此同时,胆红素特有的黄色也随之消失。测定反应前后吸光度的差,即可计算出样本中直接胆红素的浓度。 4. 样品采集和处理 请使用血清或肝素抗凝血浆样本,避免溶血。样本应在采血后立即离心分离,并在当日检测。如不能即时检测,冷藏(2~8℃)可保存12小时,密闭避光冷冻(-20℃)可保存15天,避免反复冻融。 5. 试剂 5.1 试剂组成 【试剂主要组成成分】 试剂 成分 浓度 R1 表面活性剂 2.0g/L 硫酸羟胺 2.475g/L R2 偏钒酸钠 0.8g/L 5.2 试剂准备 R1和R2试剂为即用型液体试剂,开瓶装载即可使用,用后应及时冷藏保存。 5.3 试剂的保存及稳定性 未开瓶试剂盒于2~8℃密闭避光保存有效期为12个月,开瓶后2~8℃避光保存可稳定30天。产品校准品复溶后-20℃密闭避光保存可稳定14天。 5.4 试剂使用中的注意事项及危险预防 1)严格按照试剂盒说明书的要求使用试剂。 2)不同批号试剂盒中各组份不能互换或混用。 3)超过有效期的试剂不能使用。 4)试剂开瓶后,会导致试剂与空气中成分有反应的可能性和水分蒸发,对检测结果有一定的影响,因此请尽快使用和减少试剂与空气的接触。 5)当试剂变混浊或被污染或空白吸光度值>0.100时,表明试剂已失效,应弃去。 6)装载试剂时防止产生气泡,否则影响试剂加注而无法保证结果。 7)使用时应避免与人体接触,当试剂误入口中或眼中,或者附着到皮肤上的时候,请立即用大量清水冲洗,如有必要,请接受医生的治疗。 5.5 废弃物处理 试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规(如WS/T249-2005《临床实验室废物处理原则》等)进行废物处理。 6.1 基本参数 测定方法:终点法 主波长:450nm 副波长:546nm 反应方向:向下   空白(B) 校准(C) 测定(U) 样 本(μl) -- -- 8 校准品(μl) -- 8 -- 蒸馏水/生理盐水(μl) 8 -- -- 试剂R1(μl) 240 240 240 混匀,37℃孵育5分钟,以空白管调零,测定吸光度A1。 试剂R2(μl) 60 60 60 混匀,37℃孵育5分钟后读取各管吸光度A2,计算ΔA=A2-A1。 结果计算: 样本DBIL含量(umol/l)= △Au × Cc △Ac △AU/min为测定管相对空白管吸光度值 △Ac/min为校准管相对空白管吸光度值 Cc为校品浓度值 6.3.1 校准品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套校准品进行校准。 6.3.2 校准品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司的校准品时,请参照校准品使用说明书进行准备。加样时应避免气泡产生。 6.3.3 校准品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3) 开瓶后的校准品,在-20℃密闭避光贮存可稳定30天。 6.3.4 校准周期 1) 使用四川沃文特生物技术有限公司提供的校准品每隔30天进行1次校准。 2) 当试剂批号更换时,要求进行校准。 3) 当试剂瓶更换时,要求进行校准。 4) 当仪器更换零部件或者保养时,要求进行校准。 5) 当发现质控品、患者样品的测定值显示异常时,要求进行校准。 6.3.5 校准品使用注意事项 1)严格按照校准品说明书要求进行操作。 2)请不要使用我公司以外的校准品,否则结果的准确性无法保证。 3)校准品使用后请按要求妥善保管,避免污染。 4)避免反复冻融使用。 6.4 质控 6.4.1 质控品 建议使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清(水平2和/或水平3)。 6.4.2 质控品准备 使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清时,请参照质控品使用说明书进行准备。 6.4.3 质控品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的质控品在2℃~8℃或-20℃下密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3)血清复溶后,在-20℃下至少稳定30天。 6.4.4 质控可接受性判断 使用正常值和病理值生化质控品(无法满足时至少使用其中一种)进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施,如:质控品是否有质量问题,重新校准,试剂是否有质量问题,仪器运行是否正常等相关因素进行确认后解决问题,作好记录。 6.4.5 质控品使用注意事项 1)严格按照质控品说明书要求进行操作。 2)当使用质控品时,由于基质效应的影响和不同实验室测定条件的差异,测定值与标示靶值可能存在一定的偏差,建议用户建立自己实验室的控制均值和标准差。 3)避免反复冻融使用。 6. 结果处理 对超出可报告范围的结果的处理:取0.1ml样品加0.9ml蒸馏水,重复测定后结果乘以稀释倍数10进行报告。对检验结果为病危报警值的处理:应立即报告。 7. 参考值范围 建议各实验室根据CLSI C28-A3 Vol.20 No.12(How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline --Third Edition)文件建立自己的参考值范围。用于诊断时应结合患者临床表现和其他临床检查结果。 血清/血浆: ≤6.8 umol/L 。 8. 产品性能 9.1 空白吸光度 试剂空白吸光度:≤0.100(主波长450nm,光径10mm)。 9.2 准确度 相对偏差在±15.0%范围内。 9.3 精密度 批内重复性CV≤5.0%、批间相对偏差R≤10.0% 。 9.4 分析灵敏度 直接胆红素(DBil)浓度为20.0μmol/L的吸光度变化值(△A)绝对值应在0.010~0.040之间。 9.5 线性范围 0.5~342.0μmol/L,r≥0.990; 0.5~10.0μmol/L时,线性绝对偏差应在±1.0μmol/L范围内; 10.0~342.0μmol/L时,线性相对偏差应在±10.0%范围内。 9.6 抗干扰能力 依据CLSI EP7-A文件方案,在贝克曼AU400和日立7080全自动生化分析仪上进行研究,得出结果为: 甘油三酯11.3mmol/L以下对DBIL测定结果影响为不超过10%; 抗坏血酸0.50g/L以下对DBIL测定结果影响为不超过10%; 血红蛋白2.0g/L以下对DBIL测定结果影响为不超过10%。 9. 检验注意事项 1)试剂在使用中应避免污染,否则将会导致失效; 2)试剂与样品用量可根据不同仪器的需要,在试剂样品体积比例不变的条件下,适当增加或减少试剂与样品的用量。 3)更换批号后建议重新定标。 4)准确的结果取决于样品、试剂、仪器等多个环节的控制。 5)药物、抗凝剂、促凝剂、分离胶等其他物质都可能对测定值造成无法预知的干扰。当怀疑标本存在这些干扰物质的影响时,请停药后或采用无任何添加剂的血清进行测定。 10. 安全性提示 血清等样品可能含有病毒、细菌等病源微生物,操作者有被感染的潜在危险性,操作时应采取防范措施;试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规进行废物处理。 11. 主要参考文献 1)尚红等.全国临床检验操作规程.人民卫生出版社,2014年第4版:296-302. 2)韩志钧等. 临床化学常用项目自动化分析法,辽宁科学技术出版社,2005年第三版:1066-1094. α-羟丁酸脱氢酶 α-Hydroxybutyrate Dehydrogenase diagnostic (α-HBDH) 1. 预期用途 本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆样本中α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)的活性。 2. 临床意义 α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)作为乳酸脱氢酶(LDH)的同工酶之一主要反映的是LDH1和LDH2的活性,主要来源于心脏、肾脏和红细胞。α-HBDH升高常见于心肌梗死、活动性风湿性关节炎、急性病毒性心肌炎、溶血性贫血等。目前,α-HBDH与LDH、AST、CK、CKMB等一起组成心肌酶谱,对于辅助诊断心肌梗死具有重要意义。测定方法主要有底物法、速率法和连续监测法。 3. 检测原理 α-酮丁酸+NADH+H+ α-羟丁酸+NAD+ NADH的氧化速率与样本中α-HBDH活性成正比,在340nm波长处,通过连续监测吸光度的下降速率(-△A/min),即可计算出样本中α-HBDH的活性。 4. 样品采集和处理 请使用血清或肝素抗凝血浆样本,严格避免溶血。样本应在采血后立即离心分离,并在当日检测。如不能即时检测,冷藏(2~8℃)可保存2天。 5. 试剂 5.1 试剂组成 【试剂主要组成成分】 试剂 成分 浓度 R1 α-酮丁酸钠盐 0.512g/L R2 还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH) 1.0g/L 5.2 试剂准备 R1和R2试剂为即用型液体试剂,开瓶装载即可使用,用后应及时冷藏保存。 5.3 试剂的保存及稳定性 应在2~8℃密闭避光贮存,稳定期为瓶签标示的有效期。开瓶后的试剂应在2~8℃保存,稳定期为30天。严禁放置0℃以下保存。 5.4 试剂使用中的注意事项及危险预防 1)严格按照试剂盒说明书的要求使用试剂。 2)不同批号试剂盒中各组份不能互换或混用。 3)超过有效期的试剂不能使用。 4)试剂开瓶后,会导致试剂与空气中成分有反应的可能性和水分蒸发,对检测结果有一定的影响,因此请尽快使用和减少试剂与空气的接触。 5)当试剂变混浊或被污染或空白吸光度值<1.100时,表明试剂已失效,应弃去。 6)装载试剂时防止产生气泡,否则影响试剂加注而无法保证结果。 7)使用时应避免与人体接触,当试剂误入口中或眼中,或者附着到皮肤上的时候,请立即用大量清水冲洗,如有必要,请接受医生的治疗。 5.5 废弃物处理 试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规(如WS/T249-2005《临床实验室废物处理原则》等)进行废物处理。 6. 检验操作 6.1 基本参数 测定方法:速率法 主波长:340nm 副波长:405nm 反应方向:向下   空白(B) 校准(C) 测定(U) 样 本(μl) -- -- 8 校准品(μl) -- 8 -- 蒸馏水/生理盐水(μl) 8 -- -- 试剂R1(μl) 200 200 200 混匀,37℃恒温5分钟 试剂R2(μl) 50 50 50 混匀,37℃恒温1分钟后,340nm波长处准确测定平均每分钟吸光度变化率△A/min,绘制校准曲线图。 结果计算: α-HBDH(U/L)=(ΔAU/min)×K, ΔAU/min为测定管相对空白管的每分钟吸光度变化值。 6.3 校准 6.3.1 校准品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套校准品进行校准。 6.3.2 校准品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司的校准品时,请参照校准品使用说明书进行准备。加样时应避免气泡产生。 6.3.3 校准品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3) 开瓶复溶后的校准品,在-20℃密闭避光贮存可稳定30天。 6.3.4 校准周期 1) 使用四川沃文特生物技术有限公司提供的校准品每隔30天进行1次校准。 2) 当试剂批号更换时,要求进行校准。 3) 当试剂瓶更换时,要求进行校准。 4) 当仪器更换零部件或者保养时,要求进行校准。 5) 当发现质控品、患者样品的测定值显示异常时,要求进行校准。 6.3.5 校准品使用注意事项 1)严格按照校准品说明书要求进行操作。 2)请不要使用我公司以外的校准品,否则结果的准确性无法保证。 3)校准品使用后请按要求妥善保管,避免污染。 4)避免反复冻融使用。 6.4 质控 6.4.1 质控品 建议使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清(水平2和/或水平3)。 6.4.2 质控品准备 使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清时,请参照质控品使用说明书进行准备。 6.4.3 质控品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的质控品在2℃~8℃或-20℃下密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3)血清复溶后,在-20℃下至少稳定30天。 6.4.4 质控可接受性判断 使用正常值和病理值生化质控品(无法满足时至少使用其中一种)进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施,如:质控品是否有质量问题,重新校准,试剂是否有质量问题,仪器运行是否正常等相关因素进行确认后解决问题,作好记录。 6.4.5 质控品使用注意事项 1)严格按照质控品说明书要求进行操作。 2)当使用质控品时,由于基质效应的影响和不同实验室测定条件的差异,测定值与标示靶值可能存在一定的偏差,建议用户建立自己实验室的控制均值和标准差。 3)避免反复冻融使用。 7. 结果处理 对超出可报告范围的结果的处理:取0.1ml样品加0.9ml生理盐水,重复测定后结果乘以稀释倍数10进行报告。对检验结果为病危报警值的处理:应立即报告。 8. 参考值范围 建议各实验室根据CLSI C28-A3 Vol.20 No.12(How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline --Third Edition)文件建立自己的参考值范围。用于诊断时应结合患者临床表现和其他临床检查结果。 72~182U/L 9. 产品性能 9.1 空白吸光度 试剂空白吸光度:≥1.100;试剂空白吸光度变化率(△A/min)≤0.002 (主波长340nm,光径10mm)。 9.2 准确度 相对偏差在±10.0%范围内。 9.3 精密度 批内重复性CV≤5.0%、批间相对偏差R≤10.0% 。 9.4 分析灵敏度 α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)活性为100U/L的吸光度变化率(△A/min)绝对值应在0.008~0.030之间。 9.5 线性范围 8~1200 U/L,r≥0.990; 8~100 U/L时,线性绝对偏差应在±10 U/L范围内; 100~1200 U/L时,线性相对偏差应在±10.0%范围内。 9.6 抗干扰能力 依据CLSI EP7-A文件方案,在贝克曼AU400和日立7080全自动生化分析仪上进行研究,得出结果为: 胆红素684μmol/L 以下α-HBDH测定结果影响为不超过10%; 甘油三酯11.3mmol/L以下对α-HBDH测定结果影响为不超过10%; 抗坏血酸0.30g/L以下对α-HBDH测定结果影响为不超过10%。 10. 检验注意事项 1)试剂在使用中应避免污染,否则将会导致失效。 2)试剂与样品用量可根据不同仪器的需要,在试剂样品体积比例不变的条件下,适当增加或减少试剂与样品的用量。 3)更换批号后建议重新定标。 4)准确的结果取决于样品、试剂、仪器等多个环节的控制。 5)药物、抗凝剂、促凝剂、分离胶等其他物质都可能对测定值造成无法预知的干扰。当怀疑标本存在这些干扰物质的影响时,请停药后或采用无任何添加剂的血清进行测定。 11. 安全性提示 血清等样品可能含有病毒、细菌等病源微生物,操作者有被感染的潜在危险性,操作时应采取防范措施;试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规进行废物处理。 12. 主要参考文献 1) 尚红等.全国临床检验操作规程.人民卫生出版社,2014年第4版:286. 2) 韩志钧等. 临床化学常用项目自动化分析法,辽宁科学技术出版社,2005年第三版:806-811. 高密度脂蛋白胆固醇 High Density Lipoprotein Cholesterol(HDL-C) 1. 预期用途 本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆样本中高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的含量。 2. 临床意义 样品HDL-C含量测定主要用于冠心病、脑血管病、糖尿病、肝炎、肝硬化等疾病的辅助诊断。 (1) HDL-C<0.9mmol/L,胆固醇>6.2mmol/L是导致冠心病、心肌梗死、动脉粥样硬化的危险因素之一。 (2)慢性肝病、肝硬化、冠心病、慢性肾功能不全等病症时,HDL-C降低。 医学决定水平: 0.91mmol/L(男);1.03mmol/L(女):低于此值提示易发生冠状动脉性心脏病的危险增加。 1.42mmol/L(男);1.68mmol/L(女):高于此水平发生冠状动脉性心脏病的可能性很小。 3. 检测原理 使用经化学修饰后胆固醇酯酶及胆固醇氧化酶对不同脂蛋白胆固醇具有不同的反应选择性,其中CM、VLDL、LDL与酶的反应性延迟低下,而HDL不受影响从而可直接测定出样品中高密度脂蛋白胆固醇的含量。 HDL-C+COE+COO胆甾烯酮+H202 H202+4-AAP+TOPS 醌亚胺+H2O 醌亚胺的生成使600nm波长处吸光度上升,吸光度的变化与HDL-C的含量成正比。通过与同样处理的高密度脂蛋白胆固醇校准品比较,即可计算出样本中HDL-C的含量。 4. 样品采集和处理 本试剂可检测血清或肝素抗凝血浆样本,避免溶血,血清和血浆原则上采集空腹血(禁食12小时);样本应在采血后立即离心分离,并在当日检测。如不能即时检测,冷藏(2~8℃)可保存7天,-20℃保存可稳定1个月。 5.1 试剂组成 【试剂主要组成成分】 试剂 成分 浓度 R1 胆固醇氧化酶(COO) 1.67KU/L N-乙基-N-(3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠(TOPS) 1.0g/L 过氧化物酶(POD) 5.0KU/L R2 胆固醇酯酶(COE) 2.02KU/L 4-氨基安替比林(4-AAP) 0.45g/L 5.2 试剂准备 R1和R2试剂为即用型液体试剂,开瓶装载即可使用,用后应及时冷藏保存。 5.3 试剂的保存及稳定性 应在2~8℃密闭避光贮存,稳定期为瓶签标示的有效期。开瓶后的试剂应在2~8℃保存,稳定期为30天。严禁放置0℃以下保存。 5.4 试剂使用中的注意事项及危险预防 1)严格按照试剂盒说明书的要求使用试剂。 2)不同批号试剂盒中各组份不能互换或混用。 3)超过有效期的试剂不能使用。 4)试剂开瓶后,会导致试剂与空气中成分有反应的可能性和水分蒸发,对检测结果有一定的影响,因此请尽快使用和减少试剂与空气的接触。 5)当试剂变混浊或被污染或空白吸光度值>0.100时,表明试剂已失效,应弃去。 6)装载试剂时防止产生气泡,否则影响试剂加注而无法保证结果。 7)使用时应避免与人体接触,当试剂误入口中或眼中,或者附着到皮肤上的时候,请立即用大量清水冲洗,如有必要,请接受医生的治疗。 5.5 废弃物处理 试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规(如WS/T249-2005《临床实验室废物处理原则》等)进行废物处理。 5. 检验操作 6.1 基本参数 测定方法:终点法 主波长:600nm 副波长:700nm 反应方向:向上   空白(B) 校准(C) 测定(U) 样 本(μl) -- -- 3 校准品(μl) -- 3 -- 蒸馏水/生理盐水(μl) 3 -- -- 试剂R1(μl) 225 225 225 混匀,37℃恒温5分钟,以空白管调零,测定吸光度A1。 试剂R2(μl) 75 75 75 混匀,37℃恒温5分钟,以空白管调零,测定吸光度A2。计算ΔA=A2-A1。 结果计算: 样本HDL-C含量(mmol/l)= △Au  × Cc △Ac △AU/min为测定管相对空白管吸光度值 △Ac/min为校准管相对空白管吸光度值 Cc为校准品浓度值 6.3 校准 6.3.1 校准品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套校准品进行校准。 6.3.2 校准品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司的校准品时,请参照校准品使用说明书进行准备。加样时应避免气泡产生。 6.3.3 校准品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3) 开瓶复溶后的校准品,在-20℃密闭避光贮存可稳定30天。 6.3.4 校准周期 1) 使用四川沃文特生物技术有限公司提供的校准品每隔30天进行1次校准。 2) 当试剂批号更换时,要求进行校准。 3) 当试剂瓶更换时,要求进行校准。 4) 当仪器更换零部件或者保养时,要求进行校准。 5) 当发现质控品、患者样品的测定值显示异常时,要求进行校准。 6.3.5 校准品使用注意事项 1)严格按照校准品说明书要求进行操作。 2)请不要使用我公司以外的校准品,否则结果的准确性无法保证。 3)校准品使用后请按要求妥善保管,避免污染。 4)避免反复冻融使用。 6.4 质控 6.4.1 质控品 建议使用RANDOX公司提供的脂类多项检测用质控品(水平2和/或水平3)。 6.4.2 质控品准备 使用使用RANDOX公司提供的脂类多项检测用质控品时,请参照质控品使用说明书进行准备。 6.4.3 质控品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的质控品在2℃~8℃下密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3)复溶后,2~8℃可保存7天,-20℃再次冷冻可保存4周,只能冻融1次。 6.4.4 质控可接受性判断 使用正常值和病理值生化质控品(无法满足时至少使用其中一种)进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施,如:质控品是否有质量问题,重新校准,试剂是否有质量问题,仪器运行是否正常等相关因素进行确认后解决问题,作好记录。 6.4.5 质控品使用注意事项 1)严格按照质控品说明书要求进行操作。 2)当使用质控品时,由于基质效应的影响和不同实验室测定条件的差异,测定值与标示靶值可能存在一定的偏差,建议用户建立自己实验室的控制均值和标准差。 3)避免反复冻融使用。 6. 结果处理 对超出可报告范围的结果的处理:取0.1ml样品加0.9ml蒸馏水,重复测定后结果乘以稀释倍数10进行报告。对检验结果为病危报警值的处理:应立即报告。 7. 参考值范围 建议各实验室根据CLSI C28-A3 Vol.20 No.12(How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline --Third Edition)文件建立自己的参考值范围。用于诊断时应结合患者临床表现和其他临床检查结果。 血清/血浆: 0.83~1.96 mmol/l 8. 产品性能 9.1 空白吸光度 试剂空白吸光度:≤0.100(主波长600nm,光径10mm)。 9.2 准确度 相对偏差在±10.0%范围内。 9.3 精密度 批内重复性CV≤4.0%、批间相对偏差R≤5.0% 。 9.4 分析灵敏度 HDL-C浓度为1.50mmol/l的吸光度变化值 (△A)在0.100~0.400范围内。 9.5 线性范围 0.09~3.00mmol/l,r≥0.990; 0.09~1.00mmol/l时,线性偏差在±0.15mmol/l范围内; >1.00mmol/l时,线性偏差在±10.0%范围内。 9.6 抗干扰能力 依据CLSI EP7-A文件方案,在贝克曼AU400和日立7080全自动生化分析仪上进行研究,得出结果为: 胆红素342μmol/L 以下HDL-C测定结果影响为不超过10%; 抗坏血酸0.40g/L以下对HDL-C测定结果影响为不超过10%; 血红蛋白4.5g/L以下对HDL-C测定结果影响为不超过10%。 9. 检验注意事项 1)试剂在使用中应避免污染,否则将会导致失效; 2)试剂与样品用量可根据不同仪器的需要,在试剂样品体积比例不变的条件下,适当增加或减少试剂与样品的用量。 3)更换批号后建议重新定标。 4)准确的结果取决于样品、试剂、仪器等多个环节的控制。 5)药物、抗凝剂、促凝剂、分离胶等其他物质都可能对测定值造成无法预知的干扰。当怀疑标本存在这些干扰物质的影响时,请停药后或采用无任何添加剂的血清进行测定。 10. 安全性提示 血清等样品可能含有病毒、细菌等病源微生物,操作者有被感染的潜在危险性,操作时应采取防范措施;试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规进行废物处理。 11. 主要参考文献 1)叶应妩等. 全国临床检验操作规程,东南大学出版社,2006年第三版:484-488. 2)韩志钧等. 临床化学常用项目自动化分析法,辽宁科学技术出版社,2005年第三版:935-942. 低密度脂蛋白胆固醇 Low Density Lipoprotein Cholesterol(LDL-C) 1. 预期用途 本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆样本中低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的含量。 2. 临床意义 增高:动脉粥样硬化、冠心病、脑血管疾病。文献报道LDL-C≥4.14mmol/L 即为冠心病发生的高度危险因素之一。 3. 检测原理 利用不同脂蛋白与表面活性剂亲和力的差异,选择性地抑制HDL,VLDL及CM颗粒,使它们以脂蛋白的形式留在反应液中,而促使LDL脂蛋白分解,使其中的胆固醇与酶反应,达到直接测定LDL-C的目的。 LDL-C + H2O 胆固醇 + 游离脂肪酸 胆固醇 + O2 胆淄烯酮 + H2O2 2H2O2 + 4-AAP + TOPS 醌系色素 + 5H2O 醌亚胺的生成使600nm波长处吸光度上升,吸光度的变化与LDL-C的含量成正比。通过与同样处理的低密度脂蛋白胆固醇校准品比较,即可计算出样本中LDL-C的含量。 4. 样品采集和处理 本试剂可检测血清或肝素抗凝血浆样本,避免溶血,血清和血浆原则上采集空腹血(禁食12小时);样本应在采血后立即离心分离,并在当日检测。如不能即时检测,冷藏(2~8℃)可保存7天,-20℃保存可稳定1个月。 5. 试剂 5.1 试剂组成 【试剂主要组成成分】 试剂 成分 浓度 R1 胆固醇酯酶(COE) 0.67KU/L 胆固醇氧化酶(COO) 1.67KU/L 过氧化物酶(POD) 5.0KU/L 4-氨基安替比林(4-AAP) 0.15g/L R2 N-乙基-N-(3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠(TOPS) 3.0g/L 5.2 试剂准备 R1和R2试剂为即用型液体试剂,开瓶装载即可使用,用后应及时冷藏保存。 5.3 试剂的保存及稳定性 应在2~8℃密闭避光贮存,稳定期为瓶签标示的有效期。开瓶后的试剂应在2~8℃保存,稳定期为30天。严禁放置0℃以下保存。 5.4 试剂使用中的注意事项及危险预防 1)严格按照试剂盒说明书的要求使用试剂。 2)不同批号试剂盒中各组份不能互换或混用。 3)超过有效期的试剂不能使用。 4)试剂开瓶后,会导致试剂与空气中成分有反应的可能性和水分蒸发,对检测结果有一定的影响,因此请尽快使用和减少试剂与空气的接触。 5)当试剂变混浊或被污染或空白吸光度值>0.500时,表明试剂已失效,应弃去。 6)装载试剂时防止产生气泡,否则影响试剂加注而无法保证结果。 7)使用时应避免与人体接触,当试剂误入口中或眼中,或者附着到皮肤上的时候,请立即用大量清水冲洗,如有必要,请接受医生的治疗。 5.5 废弃物处理 试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规(如WS/T249-2005《临床实验室废物处理原则》等)进行废物处理。 6. 检验操作 6.1 基本参数 测定方法:终点法 主波长:600nm 副波长:700nm 反应方向:向上   空白(B) 校准(C) 测定(U) 样 本(μl) -- -- 3 校准品(μl) -- 3 -- 蒸馏水/生理盐水(μl) 3 -- -- 试剂R1(μl) 225 225 225 混匀,37℃恒温5分钟,以空白管调零,测定吸光度A1。 试剂R2(μl) 75 75 75 混匀,37℃恒温5分钟,以空白管调零,测定吸光度A2。计算ΔA=A2-A1。 结果计算: 样本LDL-C含量(mmol/l)= △Au  × Cc △Ac △AU/min为测定管相对空白管吸光度值 △Ac/min为校准管相对空白管吸光度值 Cc为校准品浓度值 6.3 校准 6.3.1 校准品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套校准品进行校准。 6.3.2 校准品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司的校准品时,请参照校准品使用说明书进行准备。加样时应避免气泡产生。 6.3.3 校准品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3) 开瓶复溶后的校准品,在-20℃密闭避光贮存可稳定30天。 6.3.4 校准周期 1) 使用四川沃文特生物技术有限公司提供的校准品每隔30天进行1次校准。 2) 当试剂批号更换时,要求进行校准。 3) 当试剂瓶更换时,要求进行校准。 4) 当仪器更换零部件或者保养时,要求进行校准。 5) 当发现质控品、患者样品的测定值显示异常时,要求进行校准。 6.3.5 校准品使用注意事项 1)严格按照校准品说明书要求进行操作。 2)请不要使用我公司以外的校准品,否则结果的准确性无法保证。 3)校准品使用后请按要求妥善保管,避免污染。 4)避免反复冻融使用。 6.4 质控 6.4.1 质控品 建议使用RANDOX公司提供的脂类多项检测用质控品(水平2和/或水平3)。 6.4.2 质控品准备 使用使用RANDOX公司提供的脂类多项检测用质控品时,请参照质控品使用说明书进行准备。 6.4.3 质控品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的质控品在2℃~8℃下密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3)复溶后,2~8℃可保存7天,-20℃再次冷冻可保存4周,只能冻融1次。 6.4.4 质控可接受性判断 使用正常值和病理值生化质控品(无法满足时至少使用其中一种)进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施,如:质控品是否有质量问题,重新校准,试剂是否有质量问题,仪器运行是否正常等相关因素进行确认后解决问题,作好记录。 6.4.5 质控品使用注意事项 1)严格按照质控品说明书要求进行操作。 2)当使用质控品时,由于基质效应的影响和不同实验室测定条件的差异,测定值与标示靶值可能存在一定的偏差,建议用户建立自己实验室的控制均值和标准差。 3)避免反复冻融使用。 7. 结果处理 对超出可报告范围的结果的处理:取0.1ml样品加0.9ml蒸馏水,重复测定后结果乘以稀释倍数10进行报告。对检验结果为病危报警值的处理:应立即报告。 8. 参考值范围 建议各实验室根据CLSI C28-A3 Vol.20 No.12(How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline --Third Edition)文件建立自己的参考值范围。用于诊断时应结合患者临床表现和其他临床检查结果。 血清/血浆: <3.12mmol/l。 9. 产品性能 9.1 空白吸光度 试剂空白吸光度:≤0.500(主波长600nm,光径10mm)。 9.2 准确度 相对偏差在±10.0%范围内。 9.3 精密度 批内重复性CV≤4.0%、批间相对偏差R≤5.0% 。 9.4 分析灵敏度 LDL-C浓度为3.00mmol/l的吸光度变化值 (△A)在0.200~0.800范围内。 9.5 线性范围 0.11~12.00mmol/l,r≥0.990; 0.11~1.00mmol/l时,线性偏差在±0.15mmol/L范围内; >1.00mmol/l时,线性偏差在±10.0%范围内。 9.6 抗干扰能力 依据CLSI EP7-A文件方案,在贝克曼AU400和日立7080全自动生化分析仪上进行研究,得出结果为: 胆红素342μmol/L 以下LDL-C测定结果影响为不超过10%; 抗坏血酸0.40g/L以下对LDL-C测定结果影响为不超过10%; 血红蛋白4.5g/L以下对LDL-C测定结果影响为不超过10%。 10. 检验注意事项 1)试剂在使用中应避免污染,否则将会导致失效; 2)试剂与样品用量可根据不同仪器的需要,在试剂样品体积比例不变的条件下,适当增加或减少试剂与样品的用量。 3)更换批号后建议重新定标。 4)准确的结果取决于样品、试剂、仪器等多个环节的控制。 5)药物、抗凝剂、促凝剂、分离胶等其他物质都可能对测定值造成无法预知的干扰。当怀疑标本存在这些干扰物质的影响时,请停药后或采用无任何添加剂的血清进行测定。 11. 安全性提示 血清等样品可能含有病毒、细菌等病源微生物,操作者有被感染的潜在危险性,操作时应采取防范措施;试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规进行废物处理。 12. 主要参考文献 1)叶应妩等. 全国临床检验操作规程,东南大学出版社,2006年第三版:488-491. 2)韩志钧等. 临床化学常用项目自动化分析法,辽宁科学技术出版社,2005年第三版:951-959. 超敏C-反应蛋白 high sensitivity C­reactive Protein [hs-CRP] 1. 预期用途 本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆样本中C-反应蛋白(CRP)的含量。 2. 临床意义 C-反应蛋白(CRP)是急性时相反应蛋白,急性时相反应高峰时肝合成蛋白质能力的20%是CRP的合成。C-反应蛋白能激活补体,引发调理作用,增强细胞的吞噬功能,对血小板凝集和血块收缩有抑制作用。 (1) 全量程CRP与心血管疾病 1) 全量程CRP可作为ACS的预后指标 重度不稳定心绞痛(UAP)患者入院时,若CRP浓度≥3mg/L,其心绞痛的复发、冠状动脉血管置换术、心肌梗死和心血管疾病致死等心血管事件发生率比CRP<3mg/L的患者高. CRP≥3mg/L的UAP患者出院时有较高的再住院及发生心肌梗死的危险。出院时测定全量程CRP比入院时测定能更好地预测90天的不良后果. 此外,全量程CRP有助于鉴别出心肌肌钙蛋白(cTn)阴性而死亡率增高的患者。因此Morrow等认为,应当考虑联合使用cTn和全量程CRP来评估 ACS危险程度。 2) 全量程CRP是未来发生冠脉事件的预测指标 前瞻性研究显示,全量程CRP是已知冠心病患者未来心血管病发病和死亡的预测指标。 高水平的全量程CRP患者未来发生卒中危险增加2倍,未来发生心肌梗死危险增加3倍,未来发生周围血管疾病的危险增加4倍。 3) 全量程CRP与其他生化指标对冠心病危险的预测价值 全量程CRP对冠心病的预测价值明显高于的传统的冠心病危险因素如血脂、脂蛋白和载脂蛋白.如总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白AI和B(apoAI、apoB) 。 诸多冠心病危险因素,如肥胖、高血压、糖尿病、冠心病家族史及各种生化指标,仅仅只有全量程CRP和TC/HDL-C有单独的预测价值 . 另有研究发现,全量程CRP能鉴别那些血脂水平在合适范围的个体冠心病发生的危险性。 4) 在冠心病的危险性评估时,全量程CRP与血脂指标均是独立的变量,如将两者同时检测并进行联合分析,其意义更大 。 与TC和全量程CRP在正常值75%以下的人相比,单独TC增高的人危险性增加2.3倍,单独全量程CRP增高的人危险性增加1.5倍,而TC和全量程CRP均增高的人群,发生冠心病的危险性增加5倍。 因此TC和全量程CRP两个危险因素的联合作用远远大于单个危险因素所产生的影响。 (2) 全量程CRP与糖尿病 近年的研究发现,在2型糖尿病的患者中,血清CRP水平明显增高,且与大血管病变、微血管病变等并发症密切相关. 2型糖尿病患者中CRP水平增高,且与尿白蛋白排泄相关,而微量白蛋白尿目前认为是筛选早期DN的主要指标,亦是T1DM和T2DM患者心血管疾病发生率及死亡率显著升高的标志。因而,CRP水平可作为DN发生、发展及心血管疾病等终点事件发生的预测指标之一。 因此CRP水平较BUN和SCr可更及时地反应糖尿病肾脏损害的程度,对糖尿病肾病发生、发展的早期预测具有重要意义。 (3) 全量程CRP与炎症 1) CRP作为急性时相蛋白在各种急性炎症、组织损伤、心肌梗塞、手术创伤、放射性损伤等疾病发作后数小时迅速升高,并有成倍增长之势。病变好转时,又迅速降至正常,其升高幅度与感染的程度呈正相关。 2) CRP与其它炎症因子的相关性: CRP与其它炎症因子如白细胞总数、红细胞沉降率和多形核白细胞等具有密切相关性。CRP与WBC存在正相关。在炎症反应中起着积极作用,使人体具有非特异性抵抗力。在患者疾病发作时,CRP可早于WBC而上升,恢复正常也很快。故具有极高的敏感性。 3) CRP可用于细菌和病毒感染的鉴别诊断:一旦发生炎症,CRP水平即升高,而病毒性感染CRP大都正常。 脓毒血症CRP迅速升高,而依赖血培养则至少需要48小时,且其阳性率不高。又如CRP能快速有效地检测细菌性脑膜炎,其阳性率达99%。 4) 恶性肿瘤患者CRP大都升高。如CRP与AFP的联合检测,可用于肝癌与肝脏良性疾病的鉴别诊断。CRP测定用于肿瘤的治疗和预后有积极意义。手术前CRP上升,手术后则下降,且其反应不受放疗、化疗和皮质激素治疗的影响,有助于临床评估肿瘤的进程。 。 5) 用于评估急性胰腺炎的程度。当CRP高于250mg/L时,则可提示广泛坏死性胰腺炎。 医学决定水平 (1)、当CRP浓度在3到10mg/L时,可作为心血管危险因素评估 (2)、当CRP浓度在10到20mg/L时,可作为儿科医院判断儿童病毒还是细菌感染的指标 (3)、当CRP浓度>20mg/L时,可作为炎症反应的监测。 3. 检测原理 利用抗原抗体反应,人血清或血浆中C-反应蛋白与其相应抗体(抗人C-反应蛋白抗体)致敏的胶乳颗粒在液相中相遇发生免疫反应,产生凝集,引起浊度上升。通过测定特定波长吸光度变化值,与同样处理的校准品比较,即可计算出样本中C-反应蛋白的浓度。 4. 样品采集和处理 本试剂可检测血清或肝素抗凝血浆样本,避免溶血,样本应在采血后立即离心分离,并在当日检测。如不能即时检测,冷藏(2~8℃)可保存3天,冷冻(-20℃)可保存2个月,避免反复冻融。 5. 试剂 5.1 试剂组成 【试剂主要组成成分】 试剂 成分 浓度 R1 聚苯乙烯胶乳 5ml/l 兔抗人C-反应蛋白抗体 25mg/l R2 聚苯乙烯胶乳 15ml/l 兔抗人C-反应蛋白抗体 75 mg/L 5.2 试剂准备 R1和R2试剂为即用型液体试剂,开瓶装载即可使用,用后应及时冷藏保存。 5.3 试剂的保存及稳定性 应在2~8℃密闭避光贮存,稳定期为瓶签标示的有效期。开瓶后的试剂应在2~8℃保存,稳定期为30天。严禁放置0℃以下保存。 5.4 试剂使用中的注意事项及危险预防 1)严格按照试剂盒说明书的要求使用试剂。 2)不同批号试剂盒中各组份不能互换或混用。 3)超过有效期的试剂不能使用。 4)试剂开瓶后,会导致试剂与空气中成分有反应的可能性和水分蒸发,对检测结果有一定的影响,因此请尽快使用和减少试剂与空气的接触。 5)当试剂变混浊或被污染或空白吸光度值>1.400时,表明试剂已失效,应弃去。 6)装载试剂时防止产生气泡,否则影响试剂加注而无法保证结果。 7)使用时应避免与人体接触,当试剂误入口中或眼中,或者附着到皮肤上的时候,请立即用大量清水冲洗,如有必要,请接受医生的治疗。 5.5 废弃物处理 试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规(如WS/T249-2005《临床实验室废物处理原则》等)进行废物处理。 6. 检验操作 6.1 基本参数 测定方法:终点法 主波长:570nm 副波长:800nm 反应方向:向上   空白(B) 校准(C) 测定(U) 样 本(μl) -- -- 5 校准品(μl) -- 5 -- 蒸馏水/生理盐水(μl) 5 -- -- 试剂R1(μl) 210 210 210 混匀,37℃恒温1分钟,以空白管调零测定吸光度A1,37℃恒温4分钟。 试剂R2(μl) 70 70 70 混匀,37℃恒温5分钟,测定吸光度A2,计算△A=A2-A1。 结果计算: 各型全自动生化分析仪会根据校准曲线和检测样本的吸光度变化值自动计算出检测样本的浓度值。 6.3 校准 6.3.1 校准品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套校准品进行校准。 6.3.2 校准品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司的校准品时,请参照校准品使用说明书进行准备。加样时应避免气泡产生。 6.3.3 校准品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3) 开瓶复溶后的校准品,在-20℃密闭避光贮存可稳定30天。 6.3.4 校准周期 1) 使用四川沃文特生物技术有限公司提供的校准品每隔14天进行1次校准。 2) 当试剂批号更换时,要求进行校准。 3) 当试剂瓶更换时,要求进行校准。 4) 当仪器更换零部件或者保养时,要求进行校准。 5) 当发现质控品、患者样品的测定值显示异常时,要求进行校准。 6.3.5 校准品使用注意事项 1)严格按照校准品说明书要求进行操作。 2)请不要使用我公司以外的校准品,否则结果的准确性无法保证。 3)校准品使用后请按要求妥善保管,避免污染。 4)避免反复冻融使用。 6.4 质控 6.4.1 质控品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套质控品(水平1和/或水平2)。 6.4.2 质控品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司配套质控品时,请参照质控品使用说明书进行准备。 6.4.3 质控品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的质控品在2℃~8℃或-20℃下密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3)血清复溶后,在-20℃下至少稳定30天。 6.4.4 质控可接受性判断 使用正常值和病理值生化质控品(无法满足时至少使用其中一种)进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施,如:质控品是否有质量问题,重新校准,试剂是否有质量问题,仪器运行是否正常等相关因素进行确认后解决问题,作好记录。 6.4.5 质控品使用注意事项 1)严格按照质控品说明书要求进行操作。 2)当使用质控品时,由于基质效应的影响和不同实验室测定条件的差异,测定值与标示靶值可能存在一定的偏差,建议用户建立自己实验室的控制均值和标准差。 3)避免反复冻融使用。 7. 结果处理 对超出可报告范围的结果的处理:取0.1ml样品加0.9ml蒸馏水,重复测定后结果乘以稀释倍数10进行报告。对检验结果为病危报警值的处理:应立即报告。 8. 参考值范围 建议各实验室根据CLSI C28-A3 Vol.20 No.12(How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline --Third Edition)文件建立自己的参考值范围。用于诊断时应结合患者临床表现和其他临床检查结果。 血清/血浆: <3.0mg/l 9. 产品性能 9.1 空白吸光度 试剂空白吸光度:≤1.400(主波长570nm,光径10mm)。 9.2 准确度 相对偏差在±15.0%范围内。 9.3 精密度 批内重复性CV≤6.0%、批间相对偏差R≤8.0% 。 9.4 分析灵敏度 C-反应蛋白浓度为20.0mg/l的吸光度变化值(△A)在0.150~0.600范围内。 9.5 线性范围 0.1~300.0mg/l,r≥0.990; 0.1~10.0mg/l时,线性偏差在±1.5mg/l范围内; >10.0mg/l时,线性偏差在±15.0%范围内。 9.6 抗干扰能力 依据CLSI EP7-A文件方案,在贝克曼AU400和日立7080全自动生化分析仪上进行研究,得出结果为: 胆红素855μmol/L 以下hs-CRP结果影响为不超过10%; 抗坏血酸0.40g/L以下对hs-CRP测定结果影响为不超过10%; 血红蛋白5.0g/L以下对hs-CRP测定结果影响为不超过10%。 抗类风湿因子150IU/mL以下对hs-CRP测定结果影响为不超过10%。 10. 检验注意事项 1)试剂在使用中应避免污染,否则将会导致失效; 2)试剂与样品用量可根据不同仪器的需要,在试剂样品体积比例不变的条件下,适当增加或减少试剂与样品的用量。 3)更换批号后建议重新定标。 4)准确的结果取决于样品、试剂、仪器等多个环节的控制。 5)药物、抗凝剂、促凝剂、分离胶等其他物质都可能对测定值造成无法预知的干扰。当怀疑标本存在这些干扰物质的影响时,请停药后或采用无任何添加剂的血清进行测定。 11. 安全性提示 血清等样品可能含有病毒、细菌等病源微生物,操作者有被感染的潜在危险性,操作时应采取防范措施;试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规进行废物处理。 12. 主要参考文献 1)叶应妩等. 全国临床检验操作规程,东南大学出版社,2006年第三版:590-591. 2)韩志钧等. 临床化学常用项目自动化分析法,辽宁科学技术出版社,2005年第三版:1206-1214. 免疫球蛋白 IgA Immunoglobulin A(IgA) 1. 预期用途 本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆样本中免疫球蛋白IgA)的含量。 2. 临床意义 血清中免疫球蛋白约有10%为IgA,它的单体形式结构和IgG相似,但是血清中的10-15%的IgA是聚合体。IgA的另一种形式称作分泌型IgA,它在眼泪、汗、唾液、牛奶、初乳和胃肠道、支气管分泌液中被发现。血清中的免疫球蛋白A的测定对慢性肝病、感染性疾病、淋巴细胞增多症、原发性和继发性免疫缺陷等疾病的辅助诊断、监控和预后判断是非常重要的。临床检测IgA主要有免疫比浊法、免疫散射比浊法、磁微粒化学发光法等。 3. 检测原理 利用抗原抗体反应,人血清或血浆中免疫球蛋白IgA与其相应抗体(羊抗人免疫球蛋白IgA抗体)在液相中相遇发生免疫反应,产生凝集,引起浊度上升。通过测定特定波长吸光度变化值,与同样处理的校准品比较,即可计算出样本中免疫球蛋白IgA的浓度。 4. 样品采集和处理 请使用血清或肝素抗凝血浆样本,避免溶血。样本于-20℃可稳定90天;室温或2~8℃冰箱保存可稳定7天。 5. 试剂 5.1 试剂组成 【试剂主要组成成分】 试剂 成分 浓度 R1 磷酸氢二钠 14.5g/L R2 羊抗人IgA抗体 250ml/L 5.2 试剂准备 R1和R2试剂为即用型液体试剂,开瓶装载即可使用,用后应及时冷藏保存。 5.3 试剂的保存及稳定性 未开瓶试剂盒(含校准品)于2~8℃密闭避光保存有效期为12个月,开瓶后2~8℃避光保存可稳定30天。 5.4 试剂使用中的注意事项及危险预防 1)严格按照试剂盒说明书的要求使用试剂。 2)不同批号试剂盒中各组份不能互换或混用。 3)超过有效期的试剂不能使用。 4)试剂开瓶后,会导致试剂与空气中成分有反应的可能性和水分蒸发,对检测结果有一定的影响,因此请尽快使用和减少试剂与空气的接触。 5)当试剂变混浊或被污染或空白吸光度值>0.200时,表明试剂已失效,应弃去。 6)装载试剂时防止产生气泡,否则影响试剂加注而无法保证结果。 7)使用时应避免与人体接触,当试剂误入口中或眼中,或者附着到皮肤上的时候,请立即用大量清水冲洗,如有必要,请接受医生的治疗。 5.5 废弃物处理 试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规(如WS/T249-2005《临床实验室废物处理原则》等)进行废物处理。 6. 检验操作 6.1 基本参数 测定方法:终点法 主波长:340nm 副波长:700nm 反应方向:向上   空白(B) 校准(C) 测定(U) 样 本(μl) -- -- 3 校准品(μl) -- 3 -- 蒸馏水/生理盐水(μl) 3 -- -- 试剂R1(μl) 240 240 240 混匀,37℃孵育5分钟,测定吸光度A1。 试剂R2(μl) 60 60 60 混匀,37℃孵育5分钟后读取各管吸光度A2,计算ΔA=A2-A1。 结果计算: 各型全自动生化分析仪会根据校准曲线和检测样本的吸光度变化值自动计算出检测样本的浓度值。 6.3.1 校准品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套校准品进行校准。 6.3.2 校准品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司的校准品时,请参照校准品使用说明书进行准备。加样时应避免气泡产生。 6.3.3 校准品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3) 开瓶复溶后的校准品, -20℃保存可稳定3个月。 6.3.4 校准周期 1) 使用四川沃文特生物技术有限公司提供的校准品每隔14天进行1次校准。 2) 当试剂批号更换时,要求进行校准。 3) 当试剂瓶更换时,要求进行校准。 4) 当仪器更换零部件或者保养时,要求进行校准。 5) 当发现质控品、患者样品的测定值显示异常时,要求进行校准。 6.3.5 校准品使用注意事项 1)严格按照校准品说明书要求进行操作。 2)请不要使用我公司以外的校准品,否则结果的准确性无法保证。 3)校准品使用后请按要求妥善保管,避免污染。 4)避免反复冻融使用。 6.4 质控 6.4.1 质控品 建议使用RANDOX公司提供的多项液相蛋白检测质控品(水平2和/或水平3)。 6.4.2 质控品准备 使用RANDOX公司提供的多项液相蛋白检测质控品时,请参照质控品使用说明书进行准备。 6.4.3 质控品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的质控品在2℃~8℃或-20℃下密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3)血清复溶后,在-20℃下至少稳定30天。 6.4.4 质控可接受性判断 使用正常值和病理值生化质控品(无法满足时至少使用其中一种)进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施,如:质控品是否有质量问题,重新校准,试剂是否有质量问题,仪器运行是否正常等相关因素进行确认后解决问题,作好记录。 6.4.5 质控品使用注意事项 1)严格按照质控品说明书要求进行操作。 2)当使用质控品时,由于基质效应的影响和不同实验室测定条件的差异,测定值与标示靶值可能存在一定的偏差,建议用户建立自己实验室的控制均值和标准差。 3)避免反复冻融使用。 7. 结果处理 对超出可报告范围的结果的处理:取0.1ml样品加0.9ml蒸馏水,重复测定后结果乘以稀释倍数10进行报告。对检验结果为病危报警值的处理:应立即报告。 8. 参考值范围 建议各实验室根据CLSI C28-A3 Vol.20 No.12(How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline --Third Edition)文件建立自己的参考值范围。用于诊断时应结合患者临床表现和其他临床检查结果。 血清/血浆: 0.70~3.30g/L ; 9. 产品性能 9.1 空白吸光度 试剂空白吸光度:≤0.200(主波长340nm,光径10mm)。 9.2 准确度 相对偏差在±15.0%范围内。 9.3 精密度 批内重复性CV≤5.0%、批间相对偏差R≤10.0% 。 9.4 分析灵敏度 免疫球蛋白IgA浓度为2.00g/L的吸光度变化化值(∆A)在0.200~0.800范围内。 9.5 线性范围 0.15~6.00g/l,r≥0.990; 0.15~1.00g/l时,线性偏差在±0.15g/l范围内; 1.00g/L~6.00g/L时,线性相对偏差应在±15.0%范围内。 9.6 抗干扰能力 依据CLSI EP7-A文件方案,在贝克曼AU400和日立7080全自动生化分析仪上进行研究,得出结果为: 胆红素342μmol/L 以下IgA测定结果影响为不超过10%; 甘油三酯5.65mmol/L以下对IgA测定结果影响为不超过10%; 血红蛋白5.0g/L以下对IgA测定结果影响为不超过10%。 10. 检验注意事项 1)试剂在使用中应避免污染,否则将会导致失效; 2)试剂与样品用量可根据不同仪器的需要,在试剂样品体积比例不变的条件下,适当增加或减少试剂与样品的用量。 3)更换批号后建议重新定标。 4)准确的结果取决于样品、试剂、仪器等多个环节的控制。 5)药物、抗凝剂、促凝剂、分离胶等其他物质都可能对测定值造成无法预知的干扰。当怀疑标本存在这些干扰物质的影响时,请停药后或采用无任何添加剂的血清进行测定。 11. 安全性提示 血清等样品可能含有病毒、细菌等病源微生物,操作者有被感染的潜在危险性,操作时应采取防范措施;试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规进行废物处理。 12. 主要参考文献 1)尚红等. 全国临床检验操作规程. 人民卫生出版社,2015年第4版:415~417. 2)韩志钧等. 临床化学常用项目自动化分析法,辽宁科学技术出版社,2005年第三版:1230~1236. 免疫球蛋白IgG Immunoglobulin G(IgG) 1. 预期用途 本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆样本中免疫球蛋白IgG的含量。 2. 临床意义 免疫球蛋白IgG(Immunoglobulin G,IgG)是体内的主要免疫球蛋白,占总免疫球蛋白的70~75%。血清中的免疫球蛋白的定量测定,对慢性肝病、感染性疾病、淋巴细胞增多症、原发性和继发性免疫缺陷等疾病的辅助诊断、监控和预后判断是非常重要。临床检测IgG主要有免疫比浊法、化学发光法、磁微粒化学发光法等。 3. 检测原理 利用抗原抗体反应,人血清或血浆中免疫球蛋白IgG与其相应抗体(羊抗人免疫球蛋白IgG抗体)在液相中相遇发生免疫反应,产生凝集,引起浊度上升。通过测定特定波长吸光度变化值,与同样处理的校准品比较,即可计算出样本中免疫球蛋白IgG的浓度。 4. 样品采集和处理 请使用血清或肝素抗凝血浆样本,避免溶血。样本于-20℃可保存可稳定7天;室温或2~8℃冰箱可保存可稳定2天。 5. 试剂 5.1 试剂组成 【试剂主要组成成分】 试剂 成分 浓度 R1 磷酸氢二钠 14.5g/L R2 羊抗人IgG抗体 571.5ml/L 5.2 试剂准备 R1和R2试剂为即用型液体试剂,开瓶装载即可使用,用后应及时冷藏保存。 5.3 试剂的保存及稳定性 未开瓶试剂盒(含校准品)于2~8℃密闭避光保存有效期为12个月,开瓶后2~8℃避光保存可稳定30天。 5.4 试剂使用中的注意事项及危险预防 1)严格按照试剂盒说明书的要求使用试剂。 2)不同批号试剂盒中各组份不能互换或混用。 3)超过有效期的试剂不能使用。 4)试剂开瓶后,会导致试剂与空气中成分有反应的可能性和水分蒸发,对检测结果有一定的影响,因此请尽快使用和减少试剂与空气的接触。 5)当试剂变混浊或被污染或空白吸光度值>0.200时,表明试剂已失效,应弃去。 6)装载试剂时防止产生气泡,否则影响试剂加注而无法保证结果。 7)使用时应避免与人体接触,当试剂误入口中或眼中,或者附着到皮肤上的时候,请立即用大量清水冲洗,如有必要,请接受医生的治疗。 5.5 废弃物处理 试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规(如WS/T249-2005《临床实验室废物处理原则》等)进行废物处理。 6. 检验操作 6.1 基本参数 测定方法:终点法 主波长:570nm 副波长:800nm 反应方向:向上   空白(B) 校准(C) 测定(U) 样 本(μl) -- -- 3 校准品(μl) -- 3 -- 蒸馏水/生理盐水(μl) 3 -- -- 试剂R1(μl) 240 240 240 混匀,37℃孵育5分钟,测定吸光度A1。 试剂R2(μl) 60 60 60 混匀,37℃孵育5分钟后读取各管吸光度A2,计算ΔA=A2-A1。 结果计算: 各型全自动生化分析仪会根据校准曲线和检测样本的吸光度变化值自动计算出检测样本的浓度值。 6.3 校准 6.3.1 校准品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套校准品进行校准。 6.3.2 校准品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司的校准品时,请参照校准品使用说明书进行准备。加样时应避免气泡产生。 6.3.3 校准品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3) 开瓶复溶后的校准品, -20℃保存可稳定3个月。 6.3.4 校准周期 1) 使用四川沃文特生物技术有限公司提供的校准品每隔14天进行1次校准。 2) 当试剂批号更换时,要求进行校准。 3) 当试剂瓶更换时,要求进行校准。 4) 当仪器更换零部件或者保养时,要求进行校准。 5) 当发现质控品、患者样品的测定值显示异常时,要求进行校准。 6.3.5 校准品使用注意事项 1)严格按照校准品说明书要求进行操作。 2)请不要使用我公司以外的校准品,否则结果的准确性无法保证。 3)校准品使用后请按要求妥善保管,避免污染。 4)避免反复冻融使用。 6.4 质控 6.4.1 质控品 建议使用RANDOX公司提供的多项液相蛋白检测质控品(水平2和/或水平3)。 6.4.2 质控品准备 使用RANDOX公司提供的多项液相蛋白检测质控品时,请参照质控品使用说明书进行准备。 6.4.3 质控品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的质控品在2℃~8℃或-20℃下密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3)血清复溶后,在-20℃下至少稳定30天。 6.4.4 质控可接受性判断 使用正常值和病理值生化质控品(无法满足时至少使用其中一种)进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施,如:质控品是否有质量问题,重新校准,试剂是否有质量问题,仪器运行是否正常等相关因素进行确认后解决问题,作好记录。 6.4.5 质控品使用注意事项 1)严格按照质控品说明书要求进行操作。 2)当使用质控品时,由于基质效应的影响和不同实验室测定条件的差异,测定值与标示靶值可能存在一定的偏差,建议用户建立自己实验室的控制均值和标准差。 3)避免反复冻融使用。 7. 结果处理 对超出可报告范围的结果的处理:取0.1ml样品加0.9ml蒸馏水,重复测定后结果乘以稀释倍数10进行报告。对检验结果为病危报警值的处理:应立即报告。 8. 参考值范围 建议各实验室根据CLSI C28-A3 Vol.20 No.12(How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline --Third Edition)文件建立自己的参考值范围。用于诊断时应结合患者临床表现和其他临床检查结果。 血清/血浆: 8.00~16.00g/L ; 9. 产品性能 9.1 空白吸光度 试剂空白吸光度:≤0.200(主波长570nm,光径10mm)。 9.2 准确度 相对偏差在±15.0%范围内。 9.3 精密度 批内重复性CV≤5.0%、批间相对偏差R≤10.0% 。 9.4 分析灵敏度 免疫球蛋白IgG浓度为10.00g/L的吸光度变化值(∆A)在0.200~0.800范围内。 9.5 线性范围 0.20 g/L~35.00g/L,r≥0.990; 0.20 g/L~8.00 g/L时,线性绝对偏差应在±1.00 g/L范围内; 8.00 g/L~35.00 g/L时,线性相对偏差应在±15.0%范围内。 9.6 抗干扰能力 依据CLSI EP7-A文件方案,在贝克曼AU400和日立7080全自动生化分析仪上进行研究,得出结果为: 胆红素342μmol/L 以下IgG测定结果影响为不超过10%; 甘油三酯5.65mmol/L以下对IgG测定结果影响为不超过10%; 血红蛋白5.0g/L以下对IgG测定结果影响为不超过10%。 10. 检验注意事项 1)试剂在使用中应避免污染,否则将会导致失效; 2)试剂与样品用量可根据不同仪器的需要,在试剂样品体积比例不变的条件下,适当增加或减少试剂与样品的用量。 3)更换批号后建议重新定标。 4)准确的结果取决于样品、试剂、仪器等多个环节的控制。 5)药物、抗凝剂、促凝剂、分离胶等其他物质都可能对测定值造成无法预知的干扰。当怀疑标本存在这些干扰物质的影响时,请停药后或采用无任何添加剂的血清进行测定。 11. 安全性提示 血清等样品可能含有病毒、细菌等病源微生物,操作者有被感染的潜在危险性,操作时应采取防范措施;试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规进行废物处理。 12. 主要参考文献 1)尚红等. 全国临床检验操作规程. 人民卫生出版社,2015年第4版:426~428. 2)韩志钧等. 临床化学常用项目自动化分析法,辽宁科学技术出版社,2005年第三版:1199~1206. 免疫球蛋白IgM Immunoglobulin M(IgM) 1. 预期用途 本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆样本中免疫球蛋白IgM的含量。 2. 临床意义 免疫球蛋白M(IgM)是一种最早期的免疫球蛋白,是新生儿合成的唯一的免疫球蛋白。在成年人的血清中,占总循环免疫球蛋白的5~10%。血清中的大多数IgM是五个单体组成的五聚体。每一个单体的分子量是185,000,每个单体通过J链结合。IgM是有效的补体激活物,对细菌和红细胞有强的亲和力,在防止G- 细菌感染上起着重要的作用。血清中的免疫球蛋白的定量对慢性肝病、感染性疾病、淋巴细胞增多症、原发性和继发性免疫缺陷等疾病的辅助诊断、监控和预后判断是非常重要的。临床检测IgM主要有免疫比浊法、化学发光法、磁微粒化学发光法等。 3. 检测原理 利用抗原抗体反应,人血清或血浆中免疫球蛋白IgM与其相应抗体(羊抗人免疫球蛋白IgM抗体)在液相中相遇发生免疫反应,产生凝集,引起浊度上升。通过测定特定波长吸光度变化值,与同样处理的校准品比较,即可计算出样本中免疫球蛋白IgM的浓度。 4. 样品采集和处理 请使用血清或肝素抗凝血浆样本,避免溶血。样本于-20℃保存可稳定90天;室温或2~8℃冰箱保存可稳定7天。 5. 试剂 5.1 试剂组成 【试剂主要组成成分】 试剂 成分 浓度 R1 磷酸氢二钠 14.5g/L R2 羊抗人IgM抗体 166.65ml/L 5.2 试剂准备 R1和R2试剂为即用型液体试剂,开瓶装载即可使用,用后应及时冷藏保存。 5.3 试剂的保存及稳定性 未开瓶试剂盒(含校准品)于2~8℃密闭避光保存有效期为12个月,开瓶后2~8℃避光保存可稳定30天。 5.4 试剂使用中的注意事项及危险预防 1)严格按照试剂盒说明书的要求使用试剂。 2)不同批号试剂盒中各组份不能互换或混用。 3)超过有效期的试剂不能使用。 4)试剂开瓶后,会导致试剂与空气中成分有反应的可能性和水分蒸发,对检测结果有一定的影响,因此请尽快使用和减少试剂与空气的接触。 5)当试剂变混浊或被污染或空白吸光度值>0.200时,表明试剂已失效,应弃去。 6)装载试剂时防止产生气泡,否则影响试剂加注而无法保证结果。 7)使用时应避免与人体接触,当试剂误入口中或眼中,或者附着到皮肤上的时候,请立即用大量清水冲洗,如有必要,请接受医生的治疗。 5.5 废弃物处理 试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规(如WS/T249-2005《临床实验室废物处理原则》等)进行废物处理。 6. 检验操作 6.1 基本参数 测定方法:终点法 主波长:340nm 副波长:700nm 反应方向:向上   空白(B) 校准(C) 测定(U) 样 本(μl) -- -- 3 校准品(μl) -- 3 -- 蒸馏水/生理盐水(μl) 3 -- -- 试剂R1(μl) 240 240 240 混匀,37℃孵育5分钟,测定吸光度A1。 试剂R2(μl) 60 60 60 混匀,37℃孵育5分钟后读取各管吸光度A2,计算ΔA=A2-A1。 结果计算: 各型全自动生化分析仪会根据校准曲线和检测样本的吸光度变化值自动计算出检测样本的浓度值。 6.3 校准 6.3.1 校准品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套校准品进行校准。 6.3.2 校准品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司的校准品时,请参照校准品使用说明书进行准备。加样时应避免气泡产生。 6.3.3 校准品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3) 开瓶复溶后的校准品, -20℃保存可稳定3个月。 6.3.4 校准周期 1) 使用四川沃文特生物技术有限公司提供的校准品每隔14天进行1次校准。 2) 当试剂批号更换时,要求进行校准。 3) 当试剂瓶更换时,要求进行校准。 4) 当仪器更换零部件或者保养时,要求进行校准。 5) 当发现质控品、患者样品的测定值显示异常时,要求进行校准。 6.3.5 校准品使用注意事项 1)严格按照校准品说明书要求进行操作。 2)请不要使用我公司以外的校准品,否则结果的准确性无法保证。 3)校准品使用后请按要求妥善保管,避免污染。 4)避免反复冻融使用。 6.4 质控 6.4.1 质控品 建议使用RANDOX公司提供的多项液相蛋白检测质控品(水平2和/或水平3)。 6.4.2 质控品准备 使用RANDOX公司提供的多项液相蛋白检测质控品时,请参照质控品使用说明书进行准备。 6.4.3 质控品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的质控品在2℃~8℃或-20℃下密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3)血清复溶后,在-20℃下至少稳定30天。 6.4.4 质控可接受性判断 使用正常值和病理值生化质控品(无法满足时至少使用其中一种)进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施,如:质控品是否有质量问题,重新校准,试剂是否有质量问题,仪器运行是否正常等相关因素进行确认后解决问题,作好记录。 6.4.5 质控品使用注意事项 1)严格按照质控品说明书要求进行操作。 2)当使用质控品时,由于基质效应的影响和不同实验室测定条件的差异,测定值与标示靶值可能存在一定的偏差,建议用户建立自己实验室的控制均值和标准差。 3)避免反复冻融使用。 7. 结果处理 对超出可报告范围的结果的处理:取0.1ml样品加0.9ml蒸馏水,重复测定后结果乘以稀释倍数10进行报告。对检验结果为病危报警值的处理:应立即报告。 8. 参考值范围 建议各实验室根据CLSI C28-A3 Vol.20 No.12(How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline --Third Edition)文件建立自己的参考值范围。用于诊断时应结合患者临床表现和其他临床检查结果。 血清/血浆: 0.40~2.30g/L ; 9. 产品性能 9.1 空白吸光度 试剂空白吸光度:≤0.200(主波长340nm,光径10mm)。 9.2 准确度 相对偏差在±15.0%范围内。 9.3 精密度 批内重复性CV≤5.0%、批间相对偏差R≤10.0% 。 9.4 分析灵敏度 免疫球蛋白IgM浓度为2.00g/L的吸光度变化值(∆A)在0.100~0.400范围内。 9.5 线性范围 0.10 g/L~6.00 g/L,r≥0.990; 0.10 g/L~1.00 g/L时,线性绝对偏差应在±0.15 g/L范围内; 1.00 g/L~6.00 g/L时,线性相对偏差应在±15.0%范围内; 空白限(LoB)≤0.10g/L。 9.6 抗干扰能力 依据CLSI EP7-A文件方案,在贝克曼AU400和日立7080全自动生化分析仪上进行研究,得出结果为: 胆红素342μmol/L 以下IgM测定结果影响为不超过10%; 甘油三酯5.65mmol/L以下对IgM测定结果影响为不超过10%; 血红蛋白5.0g/L以下对IgM测定结果影响为不超过10%。 10. 检验注意事项 1)试剂在使用中应避免污染,否则将会导致失效; 2)试剂与样品用量可根据不同仪器的需要,在试剂样品体积比例不变的条件下,适当增加或减少试剂与样品的用量。 3)更换批号后建议重新定标。 4)准确的结果取决于样品、试剂、仪器等多个环节的控制。 5)药物、抗凝剂、促凝剂、分离胶等其他物质都可能对测定值造成无法预知的干扰。当怀疑标本存在这些干扰物质的影响时,请停药后或采用无任何添加剂的血清进行测定。 11. 安全性提示 血清等样品可能含有病毒、细菌等病源微生物,操作者有被感染的潜在危险性,操作时应采取防范措施;试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规进行废物处理。 12. 主要参考文献 1)尚红等. 全国临床检验操作规程. 人民卫生出版社,2015年第4版:415~417. 2)韩志钧等. 临床化学常用项目自动化分析法,辽宁科学技术出版社,2005年第三版:1230~1236. 无机磷 Inorganic Phosphorue(IP) 1. 预期用途 本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆样本中无机磷(IP)的含量。 2. 临床意义 在血浆和血清中,大多数磷以无机形式 (Pi) 存在,大约 15% 与蛋白结合,其余以复合物和游离形式存在。血清磷浓度取决于膳食和激素(例如甲状旁腺激素)分泌的变化。在细胞内,磷主要以磷酸酯的形式存在;一小部分,但却是很重要的一部分以无机磷酸盐的形式存在,因为它是氧化磷酸化的底物,参与与代谢能量产生有关的反应。大约 85% 的细胞外磷以羟基磷灰石的无机磷形式存在,因而在骨结构中发挥了重要的作用。 在住院患者中,低磷酸盐血症(磷酸盐消耗)相对较为常见,高达 30% 的手术患者都存在该病症。低磷酸盐血症的原因包括:磷的摄入或吸收减少(例如在维生素 D 缺乏、吸收功能障碍、使用口服磷酸盐结合剂和原发性甲状旁腺激素过量);排泄增加(例如在继发性甲状旁腺激素过量,肾移植后、饥饿患者重新进食);磷的重新分布(例如静脉输入营养液,糖尿病酮症酸中毒和呼吸性碱中毒后的康复)。高磷酸盐血症的原因包括:摄入增加(例如静脉注射治疗和磷酸盐灌肠);排泄减少(例如急性和慢性肾衰竭,低甲状旁腺激素或对甲状旁腺激素抵抗以及维生素 D 中毒);磷的重新分布(例如肿瘤消散,横纹肌瘤和中暑)。 3. 检测原理 在酸性条件下,样本中无机磷与钼酸胺试剂作用形成磷钼酸化合物,其颜色的深浅与IP含量呈正比。通过与同样处理的无机磷校准品进行比较,即可计算出样本中IP含量。 4. 样品采集和处理 请使用血清或肝素抗凝血浆样本,不得使用草酸盐、EDTA或枸椽酸盐抗凝血浆样本。样本中无机磷(IP)在2~8℃保存可稳定5天。 5. 试剂 5.1 试剂组成 【试剂主要组成成分】 试剂 成分 浓度 R1 曲拉通-100 12ml/L R2 钼酸铵 1.235g/L 5.2 试剂准备 R1和R2试剂为即用型液体试剂,开瓶装载即可使用,用后应及时冷藏保存。 5.3 试剂的保存及稳定性 未开瓶试剂盒(含校准品)于2~8℃密闭避光保存有效期为12个月,开瓶后2~8℃避光保存可稳定30天。 运输和保存均应在2~8℃低温条件下进行。 5.4 试剂使用中的注意事项及危险预防 1)严格按照试剂盒说明书的要求使用试剂。 2)不同批号试剂盒中各组份不能互换或混用。 3)超过有效期的试剂不能使用。 4)试剂开瓶后,会导致试剂与空气中成分有反应的可能性和水分蒸发,对检测结果有一定的影响,因此请尽快使用和减少试剂与空气的接触。 5)当试剂变混浊或被污染或空白吸光度值>0.500时,表明试剂已失效,应弃去。 6)装载试剂时防止产生气泡,否则影响试剂加注而无法保证结果。 7)使用时应避免与人体接触,当试剂误入口中或眼中,或者附着到皮肤上的时候,请立即用大量清水冲洗,如有必要,请接受医生的治疗。 5.5 废弃物处理 试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规(如WS/T249-2005《临床实验室废物处理原则》等)进行废物处理。 6. 检验操作 6.1 基本参数 测定方法:终点法 主波长:340nm 副波长:700nm 反应方向:向上   空白(B) 校准(C) 测定(U) 样 本(μl) -- -- 6 校准品(μl) -- 6 -- 蒸馏水/生理盐水(μl) 6 -- -- 试剂R1(μl) 200 200 200 混匀,37℃恒温3~5分钟,以空白管调零,测定吸光度A1。 试剂R2(μl) 100 100 100 混匀,37℃恒温5分钟,以空白管调零,测定吸光度A2,计算ΔA=A2-A1 结果计算: 样本IP含量(mmol/l)= △Au  × Cc △Ac △AU/min为测定管相对空白管吸光度值 △Ac/min为校准管相对空白管吸光度值 Cc为校准品浓度值 6.3 校准 6.3.1 校准品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套校准品进行校准。 6.3.2 校准品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司的校准品时,请参照校准品使用说明书进行准备。加样时应避免气泡产生。 6.3.3 校准品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3) 开瓶复溶后的校准品,在-20℃密闭避光贮存可稳定30天。 6.3.4 校准周期 1) 使用四川沃文特生物技术有限公司提供的校准品每隔14天进行1次校准。 2) 当试剂批号更换时,要求进行校准。 3) 当试剂瓶更换时,要求进行校准。 4) 当仪器更换零部件或者保养时,要求进行校准。 5) 当发现质控品、患者样品的测定值显示异常时,要求进行校准。 6.3.5 校准品使用注意事项 1)严格按照校准品说明书要求进行操作。 2)请不要使用我公司以外的校准品,否则结果的准确性无法保证。 3)校准品使用后请按要求妥善保管,避免污染。 4)避免反复冻融使用。 6.4 质控 6.4.1 质控品 建议使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清(水平2和/或水平3)。 6.4.2 质控品准备 使用使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清时,请参照质控品使用说明书进行准备。 6.4.3 质控品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的质控品在2℃~8℃下密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3)复溶后,2~8℃可保存7天,-20℃再次冷冻可保存4周,只能冻融1次。 6.4.4 质控可接受性判断 使用正常值和病理值生化质控品(无法满足时至少使用其中一种)进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施,如:质控品是否有质量问题,重新校准,试剂是否有质量问题,仪器运行是否正常等相关因素进行确认后解决问题,作好记录。 6.4.5 质控品使用注意事项 1)严格按照质控品说明书要求进行操作。 2)当使用质控品时,由于基质效应的影响和不同实验室测定条件的差异,测定值与标示靶值可能存在一定的偏差,建议用户建立自己实验室的控制均值和标准差。 3)避免反复冻融使用。 7. 结果处理 对超出可报告范围的结果的处理:取0.1ml样品加0.9ml蒸馏水,重复测定后结果乘以稀释倍数10进行报告。对检验结果为病危报警值的处理:应立即报告。 8. 参考值范围 建议各实验室根据CLSI C28-A3 Vol.20 No.12(How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline --Third Edition)文件建立自己的参考值范围。用于诊断时应结合患者临床表现和其他临床检查结果。 健康成人:0.85~1.51mmol/L 儿童:1.45~2.10mmol/L 9. 产品性能 9.1 空白吸光度 试剂空白吸光度:≤0.500(主波长340nm,光径10mm)。 9.2 准确度 相对偏差在±10.0%范围内。 9.3 精密度 批内重复性CV≤5.0%、批间相对偏差R≤10.0% 。 9.4 分析灵敏度 IP浓度为1.50mmol/l的吸光度变化值 (△A)在0.150~0.600范围内。 9.5 线性范围 0.15 mmol/~6.00mmol/L,r≥0.990; 0.15 mmol/~1.00mmol/L时,线性绝对偏差应在±0.10mmol/L范围内; 1.00 mmol/~6.00mmol/L时,线性相对偏差应在±10.0%范围内。 9.6 抗干扰能力 依据CLSI EP7-A文件方案,在贝克曼AU400和日立7080全自动生化分析仪上进行研究,得出结果为: 胆红素682μmol/L 以下IP测定结果影响为不超过10%; 抗坏血酸0.40g/L以下对IP测定结果影响为不超过10%; 血红蛋白5.0g/L以下对IP测定结果影响为不超过10%。 甘油三酯≤11.3mmol/L以下对IP测定结果影响为不超过10%。 10. 检验注意事项 1)试剂在使用中应避免污染,否则将会导致失效; 2)试剂与样品用量可根据不同仪器的需要,在试剂样品体积比例不变的条件下,适当增加或减少试剂与样品的用量。 3)更换批号后建议重新定标。 4)准确的结果取决于样品、试剂、仪器等多个环节的控制。 5)药物、抗凝剂、促凝剂、分离胶等其他物质都可能对测定值造成无法预知的干扰。当怀疑标本存在这些干扰物质的影响时,请停药后或采用无任何添加剂的血清进行测定。 11. 安全性提示 血清等样品可能含有病毒、细菌等病源微生物,操作者有被感染的潜在危险性,操作时应采取防范措施;试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规进行废物处理。 12. 主要参考文献 1、尚红等. 全国临床检验操作规程. 人民卫生出版社,2015年第4版:259-262. 2、韩志钧等. 临床化学常用项目自动化分析法,辽宁科学技术出版社,2005年第三版:1140-1146. 乳酸脱氢酶 Lactate Dehydrogenase diagnostic (LDH) 1. 预期用途 本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆样本中乳酸脱氢酶(LDH)的活性。 2. 临床意义 乳酸脱氢酶(LDH)是一种细胞质酶,广泛分布于各组织特别在心、肝、肌肉和肾中。血清中的LDH用电泳方法可以分为5个不同的同工酶。LDH升高常见于心肌梗死、肝炎、肺部梗死等。目前,常用于心肌梗死、肝病的临床辅助诊断。测定方法有连续监测法、速率发、抑制法、底物法等。 3. 检测原理 L-乳酸+NAD+丙酮酸+NADH+H+ NADH的生成速率与样本中LDH活性成正比,在340nm波长处,通过连续监测吸光度的上升速率(△A/min),即可计算出样本中LDH的活性。 4. 样品采集和处理 请使用血清或肝素抗凝血浆样本,严格避免溶血。样本应在采血后立即离心分离,并在当日检测。如不能即时检测,冷藏(2~8℃)可保存2天。 5. 试剂 5.1 试剂组成 【试剂主要组成成分】 试剂 成分 浓度 R1 乳酸锂 6g/L R2 氧化型辅酶Ⅰ(NAD+) 12g/L 5.2 试剂准备 R1和R2试剂为即用型液体试剂,开瓶装载即可使用,用后应及时冷藏保存。 5.3 试剂的保存及稳定性 应在2~8℃密闭避光贮存,稳定期为瓶签标示的有效期。开瓶后的试剂应在2~8℃保存,稳定期为30天。严禁放置0℃以下保存。 5.4 试剂使用中的注意事项及危险预防 1)严格按照试剂盒说明书的要求使用试剂。 2)不同批号试剂盒中各组份不能互换或混用。 3)超过有效期的试剂不能使用。 4)试剂开瓶后,会导致试剂与空气中成分有反应的可能性和水分蒸发,对检测结果有一定的影响,因此请尽快使用和减少试剂与空气的接触。 5)当试剂变混浊或被污染或空白吸光度值>0.500时,表明试剂已失效,应弃去。 6)装载试剂时防止产生气泡,否则影响试剂加注而无法保证结果。 7)使用时应避免与人体接触,当试剂误入口中或眼中,或者附着到皮肤上的时候,请立即用大量清水冲洗,如有必要,请接受医生的治疗。 5.5 废弃物处理 试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规(如WS/T249-2005《临床实验室废物处理原则》等)进行废物处理。 6. 检验操作 6.1 基本参数 测定方法:速率法 主波长:340nm 副波长:405nm 反应方向:向上   空白(B) 校准(C) 测定(U) 样 本(μl) -- -- 5 校准品(μl) -- 5 -- 蒸馏水/生理盐水(μl) 5 -- -- 试剂R1(μl) 200 200 200 混匀,37℃恒温5分钟 试剂R2(μl) 50 50 50 混匀,37℃恒温1分钟后,340nm波长处准确测定平均每分钟吸光度变化率△A/min,绘制校准曲线图。 结果计算: LDH(U/L)=(ΔAU/min)×K, ΔAU/min为测定管相对空白管的每分钟吸光度变化值。 6.3 校准 6.3.1 校准品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套校准品进行校准。 6.3.2 校准品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司的校准品时,请参照校准品使用说明书进行准备。加样时应避免气泡产生。 6.3.3 校准品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3) 开瓶复溶后的校准品,在-20℃密闭避光贮存可稳定30天。 6.3.4 校准周期 1) 使用四川沃文特生物技术有限公司提供的校准品每隔30天进行1次校准。 2) 当试剂批号更换时,要求进行校准。 3) 当试剂瓶更换时,要求进行校准。 4) 当仪器更换零部件或者保养时,要求进行校准。 5) 当发现质控品、患者样品的测定值显示异常时,要求进行校准。 6.3.5 校准品使用注意事项 1)严格按照校准品说明书要求进行操作。 2)请不要使用我公司以外的校准品,否则结果的准确性无法保证。 3)校准品使用后请按要求妥善保管,避免污染。 4)避免反复冻融使用。 6.4 质控 6.4.1 质控品 建议使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清(水平2和/或水平3)。 6.4.2 质控品准备 使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清时,请参照质控品使用说明书进行准备。 6.4.3 质控品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的质控品在2℃~8℃或-20℃下密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3)血清复溶后,在-20℃下至少稳定30天。 6.4.4 质控可接受性判断 使用正常值和病理值生化质控品(无法满足时至少使用其中一种)进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施,如:质控品是否有质量问题,重新校准,试剂是否有质量问题,仪器运行是否正常等相关因素进行确认后解决问题,作好记录。 6.4.5 质控品使用注意事项 1)严格按照质控品说明书要求进行操作。 2)当使用质控品时,由于基质效应的影响和不同实验室测定条件的差异,测定值与标示靶值可能存在一定的偏差,建议用户建立自己实验室的控制均值和标准差。 3)避免反复冻融使用。 7. 结果处理 对超出可报告范围的结果的处理:取0.1ml样品加0.9ml生理盐水,重复测定后结果乘以稀释倍数10进行报告。对检验结果为病危报警值的处理:应立即报告。 8. 参考值范围 建议各实验室根据CLSI C28-A3 Vol.20 No.12(How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline --Third Edition)文件建立自己的参考值范围。用于诊断时应结合患者临床表现和其他临床检查结果。 109~245U/L 9. 产品性能 9.1 空白吸光度 试剂空白吸光度:≤0.500;试剂空白吸光度变化率(△A/min)≤0.002 (主波长340nm,光径10mm)。 9.2 准确度 相对偏差在±10.0%范围内。 9.3 精密度 批内重复性CV≤5.0%、批间相对偏差R≤10.0% 。 9.4 分析灵敏度 乳酸脱氢酶(LDH)活性为100U/L的吸光度变化率(△A/min)绝对值应在0.004~0.015之间。 9.5 线性范围 8~1500 U/L,r≥0.990; 8~100 U/L时,线性绝对偏差应在±10 U/L范围内; 100~1500 U/L时,线性相对偏差应在±10.0%范围内。 9.6 抗干扰能力 依据CLSI EP7-A文件方案,在贝克曼AU400和日立7080全自动生化分析仪上进行研究,得出结果为: 胆红素684μmol/L 以下LDH测定结果影响为不超过10%; 甘油三酯11.3mmol/L以下对LDH测定结果影响为不超过10%; 抗坏血酸0.30g/L以下对LDH测定结果影响为不超过10%; 10. 检验注意事项 1)试剂在使用中应避免污染,否则将会导致失效。 2)试剂与样品用量可根据不同仪器的需要,在试剂样品体积比例不变的条件下,适当增加或减少试剂与样品的用量。 3)更换批号后建议重新定标。 4)准确的结果取决于样品、试剂、仪器等多个环节的控制。 5)药物、抗凝剂、促凝剂、分离胶等其他物质都可能对测定值造成无法预知的干扰。当怀疑标本存在这些干扰物质的影响时,请停药后或采用无任何添加剂的血清进行测定。 11. 安全性提示 血清等样品可能含有病毒、细菌等病源微生物,操作者有被感染的潜在危险性,操作时应采取防范措施;试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规进行废物处理。 12. 主要参考文献 1) 尚红等.全国临床检验操作规程.人民卫生出版社,2014年第4版:284-285. 2) 韩志钧等. 临床化学常用项目自动化分析法,辽宁科学技术出版社,2005年第三版:797-803. 脂蛋白(a) Lipoprotein a [Lp(a)] 1. 预期用途 本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆样本中脂蛋白(a)[Lp(a)]的含量。 2. 临床意义 Lp(a)是一个LDL分子结合Apo(a)组成的二聚体,具有致动脉粥样硬化的作用。Lp(a)是一个独立于其它脂类参数的冠心病危险因素,对冠心病危险的预测价值很高,Lp(a)增高同时伴有LDL升高者,脑血管意外的危险性显著高于LDL正常者,Lp(a)升高患者冠心病和心肌梗死发病率高于健康者2~5倍,因此Lp(a)升高是动脉粥样硬化的危险因素之一。临床检测血脂主要用于:诊断高脂血症(高脂蛋白血症);预测患动脉粥样硬化和冠心病的危险度;监测由于上述三种疾病而进行饮食或药物治疗的病人。 因此Lp(a)的检测联合其它脂类项目的检测对于冠心病、动脉粥样硬化等疾病的辅助诊断和鉴别诊断具有较高的价值和意义。早期检测Lp(a)多用电泳法,随后相继研制开发出一些直接测定Lp(a)的免疫化学检测法,如酶联免疫吸附试验(ELISA)等,现主要采用免疫比浊法。 3. 检测原理 利用抗原抗体反应,人血清或血浆中脂蛋白(a)与其相应抗体[抗人脂蛋白(a)抗体]致敏的胶乳颗粒在液相中相遇发生免疫反应,产生凝集,引起浊度上升。通过测定特定波长吸光度变化值,与同样处理的校准品比较,即可计算出样本中脂蛋白(a)的浓度。 4. 样品采集和处理 本试剂可检测血清或肝素抗凝血浆样本,避免溶血,血清和血浆原则上采集空腹血(禁食12小时);样本应在采血后立即离心分离,并在当日检测。如不能即时检测,冷藏(2~8℃)可保存3天,-20℃保存可稳定2个月,避免反复冻融。 5. 试剂 5.1 试剂组成 【试剂主要组成成分】 试剂 成分 浓度 R1 2-(N-吗啡啉)乙磺酸(MES) 9.76 g/L R2 聚苯乙烯胶乳 20 ml/L 兔抗人Lp(a)抗体 100 mg/L 5.2 试剂准备 R1和R2试剂为即用型液体试剂,开瓶装载即可使用,用后应及时冷藏保存。 5.3 试剂的保存及稳定性 应在2~8℃密闭避光贮存,稳定期为瓶签标示的有效期。开瓶后的试剂应在2~8℃保存,稳定期为30天。严禁放置0℃以下保存。 5.4 试剂使用中的注意事项及危险预防 1)严格按照试剂盒说明书的要求使用试剂。 2)不同批号试剂盒中各组份不能互换或混用。 3)超过有效期的试剂不能使用。 4)试剂开瓶后,会导致试剂与空气中成分有反应的可能性和水分蒸发,对检测结果有一定的影响,因此请尽快使用和减少试剂与空气的接触。 5)当试剂变混浊或被污染或空白吸光度值>1.400时,表明试剂已失效,应弃去。 6)装载试剂时防止产生气泡,否则影响试剂加注而无法保证结果。 7)使用时应避免与人体接触,当试剂误入口中或眼中,或者附着到皮肤上的时候,请立即用大量清水冲洗,如有必要,请接受医生的治疗。 5.5 废弃物处理 试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规(如WS/T249-2005《临床实验室废物处理原则》等)进行废物处理。 6. 检验操作 6.1 基本参数 测定方法:终点法 主波长:600nm 副波长:none 反应方向:向上   空白(B) 校准(C) 测定(U) 样 本(μl) -- -- 3 校准品(μl) -- 3 -- 蒸馏水/生理盐水(μl) 3 -- -- 试剂R1(μl) 240 240 240 混匀,37℃孵育5分钟。  试剂R2(μl) 60 60 60 混匀,37℃恒温1分钟,以空白管调零测定吸光度A1,4分钟后测定吸光度A2, 计算∆A=A2-A1,绘制校准曲线图。 结果计算: 各型全自动生化分析仪会根据校准曲线和检测样本的吸光度变化值自动计算出检测样本的浓度值。 6.3 校准 6.3.1 校准品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套校准品进行校准。 6.3.2 校准品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司的校准品时,请参照校准品使用说明书进行准备。加样时应避免气泡产生。 6.3.3 校准品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3) 开瓶复溶后的校准品,在-20℃密闭避光贮存可稳定30天。 6.3.4 校准周期 1) 使用四川沃文特生物技术有限公司提供的校准品每隔14天进行1次校准。 2) 当试剂批号更换时,要求进行校准。 3) 当试剂瓶更换时,要求进行校准。 4) 当仪器更换零部件或者保养时,要求进行校准。 5) 当发现质控品、患者样品的测定值显示异常时,要求进行校准。 6.3.5 校准品使用注意事项 1)严格按照校准品说明书要求进行操作。 2)请不要使用我公司以外的校准品,否则结果的准确性无法保证。 3)校准品使用后请按要求妥善保管,避免污染。 4)避免反复冻融使用。 6.4 质控 6.4.1 质控品 建议使用RANDOX公司提供的脂类多项检测质控血清(水平2和/或水平3)。 6.4.2 质控品准备 使用RANDOX公司提供的脂类多项检测质控血清时,请参照质控品使用说明书进行准备。 6.4.3 质控品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的质控品在2℃~8℃或-20℃下密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3)血清复溶后,在-20℃下至少稳定30天。 6.4.4 质控可接受性判断 使用正常值和病理值生化质控品(无法满足时至少使用其中一种)进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施,如:质控品是否有质量问题,重新校准,试剂是否有质量问题,仪器运行是否正常等相关因素进行确认后解决问题,作好记录。 6.4.5 质控品使用注意事项 1)严格按照质控品说明书要求进行操作。 2)当使用质控品时,由于基质效应的影响和不同实验室测定条件的差异,测定值与标示靶值可能存在一定的偏差,建议用户建立自己实验室的控制均值和标准差。 3)避免反复冻融使用。 7. 结果处理 对超出可报告范围的结果的处理:取0.1ml样品加0.9ml蒸馏水,重复测定后结果乘以稀释倍数10进行报告。对检验结果为病危报警值的处理:应立即报告。 8. 参考值范围 建议各实验室根据CLSI C28-A3 Vol.20 No.12(How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline --Third Edition)文件建立自己的参考值范围。用于诊断时应结合患者临床表现和其他临床检查结果。 血清/血浆: <300 mg/L 。 9. 产品性能 9.1 空白吸光度 试剂空白吸光度:≤1.400(主波长600nm,光径10mm)。 9.2 准确度 相对偏差在±20.0%范围内。 9.3 精密度 批内重复性CV≤6.0%、批间相对偏差R≤8.0% 。 9.4 分析灵敏度 脂蛋白(a)浓度为300mg/l的吸光度变化值(△A)在0.150~0.600范围内。 9.5 线性范围 10~1050mg/l,r≥0.990; 10~100mg/l时,线性偏差在±20mg/l范围内; >100mg/l时,线性偏差在±20.0%范围内。 9.6 抗干扰能力 依据CLSI EP7-A文件方案,在贝克曼AU400和日立7080全自动生化分析仪上进行研究,得出结果为: 胆红素855μmol/L 以下Lp(a)测定结果影响为不超过10%; 抗坏血酸0.40g/L以下对Lp(a)测定结果影响为不超过10%; 血红蛋白5.0g/L以下对Lp(a)测定结果影响为不超过10%。 抗类风湿因子150IU/mL以下对Lp(a)测定结果影响为不超过10%。 10. 检验注意事项 1)试剂在使用中应避免污染,否则将会导致失效; 2)试剂与样品用量可根据不同仪器的需要,在试剂样品体积比例不变的条件下,适当增加或减少试剂与样品的用量。 3)更换批号后建议重新定标。 4)准确的结果取决于样品、试剂、仪器等多个环节的控制。 5)药物、抗凝剂、促凝剂、分离胶等其他物质都可能对测定值造成无法预知的干扰。当怀疑标本存在这些干扰物质的影响时,请停药后或采用无任何添加剂的血清进行测定。 11. 安全性提示 血清等样品可能含有病毒、细菌等病源微生物,操作者有被感染的潜在危险性,操作时应采取防范措施;试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规进行废物处理。 12. 主要参考文献 1)叶应妩等. 全国临床检验操作规程,东南大学出版社,2006年第三版:463. 2)林其燧等. 临床化学诊断方法大全,北京大学出版社,1990年第一版:17. 镁 Magnesium(Mg) 1. 预期用途 本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆样本中镁(Mg)的含量。 2. 临床意义 镁是许多重要酶促反应中的重要因子,作为金属酶不可分割的一部分或激活剂,在糖酵解、细胞呼吸和跨膜钙运输中发挥了重要的作用。镁主要通过肾脏镁排泄的速度调节,它和钙都受甲状旁腺激素的作用。因此,钙重吸收增加会引起镁吸收的竞争性抑制。 镁测定用于低镁血症(异常的低)和高镁血症(异常的高)的诊断和治疗。缺镁的明确表现为神经肌肉功能受损,例如应激性过度、手足搐搦、惊厥和心电图改变。在糖尿病、慢性酒精中毒、强迫性多尿、甲状腺功能亢进、甲状旁腺机能减退、低钙血症、吸收功能障碍和急性胰腺炎中,可以观察到低镁血症。在肾衰竭、脱水、严重糖尿病性酸中毒和 Addison 病中,已经发现血清镁水平升高。 3. 检测原理 在碱性条件下,样本中的镁与二甲苯胺蓝(XB)重氮盐作用形成紫红色复合物,XB在600nm波长下吸光度降低的程度与Mg离子浓度成正比。通过与同样处理的镁校准品比较,即可计算出样本中Mg的含量。 4. 样品采集和处理 请使用血清或肝素抗凝血浆样本,不得使用草酸盐、EDTA或枸椽酸盐抗凝血浆样本。样本中Mg在2~8℃保存可稳定7天。由于细胞内镁离子浓度高于血清,因此应避免使用溶血标本。 5. 试剂 5.1 试剂组成 【试剂主要组成成分】 试剂 成分 浓度 R1 碳酸胍 72g/L 乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸(EGTA) 0.019g/L R2 二甲苯胺蓝(XB) 0.1475g/L 5.2 试剂准备 R1和R2试剂为即用型液体试剂,开瓶装载即可使用,用后应及时冷藏保存。 5.3 试剂的保存及稳定性 未开瓶试剂盒(含校准品)于2~8℃密闭避光保存有效期为12个月,开瓶后2~8℃避光保存可稳定30天。 运输和保存均应在2~8℃低温条件下进行。 5.4 试剂使用中的注意事项及危险预防 1)严格按照试剂盒说明书的要求使用试剂。 2)不同批号试剂盒中各组份不能互换或混用。 3)超过有效期的试剂不能使用。 4)试剂开瓶后,会导致试剂与空气中成分有反应的可能性和水分蒸发,对检测结果有一定的影响,因此请尽快使用和减少试剂与空气的接触。 5)当试剂变混浊或被污染或空白吸光度值<1.200时,表明试剂已失效,应弃去。 6)装载试剂时防止产生气泡,否则影响试剂加注而无法保证结果。 7)使用时应避免与人体接触,当试剂误入口中或眼中,或者附着到皮肤上的时候,请立即用大量清水冲洗,如有必要,请接受医生的治疗。 5.5 废弃物处理 试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规(如WS/T249-2005《临床实验室废物处理原则》等)进行废物处理。 6. 检验操作 6.1 基本参数 测定方法:终点法 主波长:600nm 副波长:505nm 反应方向:向下   空白(B) 校准(C) 测定(U) 样 本(μl) -- -- 5 校准品(μl) -- 5 -- 蒸馏水/生理盐水(μl) 5 -- -- 试剂R1(μl) 150 150 150 混匀,37℃恒温3~5分钟1。 试剂R2(μl) 150 150 150 混匀,37℃恒温5分钟,以空白管调零,测定吸光度A。 结果计算: 样本Mg含量(mmol/l)= △Au  × Cc △Ac △AU/min为测定管相对空白管吸光度值 △Ac/min为校准管相对空白管吸光度值 Cc为校准品浓度值 6.3 校准 6.3.1 校准品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套校准品进行校准。 6.3.2 校准品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司的校准品时,请参照校准品使用说明书进行准备。加样时应避免气泡产生。 6.3.3 校准品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3) 开瓶复溶后的校准品,在-20℃密闭避光贮存可稳定30天。 6.3.4 校准周期 1) 使用四川沃文特生物技术有限公司提供的校准品每隔14天进行1次校准。 2) 当试剂批号更换时,要求进行校准。 3) 当试剂瓶更换时,要求进行校准。 4) 当仪器更换零部件或者保养时,要求进行校准。 5) 当发现质控品、患者样品的测定值显示异常时,要求进行校准。 6.3.5 校准品使用注意事项 1)严格按照校准品说明书要求进行操作。 2)请不要使用我公司以外的校准品,否则结果的准确性无法保证。 3)校准品使用后请按要求妥善保管,避免污染。 4)避免反复冻融使用。 6.4 质控 6.4.1 质控品 建议使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清(水平2和/或水平3)。 6.4.2 质控品准备 使用使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清时,请参照质控品使用说明书进行准备。 6.4.3 质控品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的质控品在2℃~8℃下密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3)复溶后,2~8℃可保存7天,-20℃再次冷冻可保存4周,只能冻融1次。 6.4.4 质控可接受性判断 使用正常值和病理值生化质控品(无法满足时至少使用其中一种)进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施,如:质控品是否有质量问题,重新校准,试剂是否有质量问题,仪器运行是否正常等相关因素进行确认后解决问题,作好记录。 6.4.5 质控品使用注意事项 1)严格按照质控品说明书要求进行操作。 2)当使用质控品时,由于基质效应的影响和不同实验室测定条件的差异,测定值与标示靶值可能存在一定的偏差,建议用户建立自己实验室的控制均值和标准差。 3)避免反复冻融使用。 7. 结果处理 对超出可报告范围的结果的处理:取0.1ml样品加0.9ml蒸馏水,重复测定后结果乘以稀释倍数10进行报告。对检验结果为病危报警值的处理:应立即报告。 8. 参考值范围 建议各实验室根据CLSI C28-A3 Vol.20 No.12(How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline --Third Edition)文件建立自己的参考值范围。用于诊断时应结合患者临床表现和其他临床检查结果。 健康成人:0.75~1.02mmol/l 儿童:0.50~0.90mmol/l 9. 产品性能 9.1 空白吸光度 试剂空白吸光度:≥1.200(主波长600nm,光径10mm)。 9.2 准确度 相对偏差在±10.0%范围内。 9.3 精密度 批内重复性CV≤5.0%、批间相对偏差R≤10.0% 。 9.4 分析灵敏度 Mg浓度为1.00mmol/l的吸光度变化值 (△A)在0.400~1.600范围内。 9.5 线性范围 0.15 mmol/L~3.00mmol/L,r≥0.990; 0.15 mmol/L~1.00mmol/L时,线性偏差应在±0.10mmol/L范围内; 1.00 mmol/L~3.00mmol/L时,线性偏差应在±10.0%范围内。 >1.00mmol/l时,线性偏差在±10.0%范围内。 9.6 抗干扰能力 依据CLSI EP7-A文件方案,在贝克曼AU400和日立7080全自动生化分析仪上进行研究,得出结果为: 胆红素682μmol/L 以下MG测定结果影响为不超过10%; 抗坏血酸0.40g/L以下对MG测定结果影响为不超过10%; 血红蛋白5.0g/L以下对MG测定结果影响为不超过10%。 甘油三酯≤11.3mmol/L以下对MG测定结果影响为不超过10%。 10. 检验注意事项 1)试剂在使用中应避免污染,否则将会导致失效; 2)试剂与样品用量可根据不同仪器的需要,在试剂样品体积比例不变的条件下,适当增加或减少试剂与样品的用量。 3)更换批号后建议重新定标。 4)准确的结果取决于样品、试剂、仪器等多个环节的控制。 5)药物、抗凝剂、促凝剂、分离胶等其他物质都可能对测定值造成无法预知的干扰。当怀疑标本存在这些干扰物质的影响时,请停药后或采用无任何添加剂的血清进行测定。 11. 安全性提示 血清等样品可能含有病毒、细菌等病源微生物,操作者有被感染的潜在危险性,操作时应采取防范措施;试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规进行废物处理。 12. 主要参考文献 1、尚红等. 全国临床检验操作规程. 人民卫生出版社,2015年第4版:262-265. 2、韩志钧等. 临床化学常用项目自动化分析法,辽宁科学技术出版社,2005年第三版:1154-1160. 前白蛋白 Prealbumin(PA) 1. 预期用途 本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆样本中前白蛋白(PA)的含量。 2. 临床意义 (1)用于炎症和恶性疾病 血清PA是一种负急性时相反应蛋白,在炎症和恶性病变时其血清水平下降,手术创伤后24h即可见血清PA水平下降,2~3天达到高峰,其下降可持续一周。 (2)用于肝病的早期诊断 PA在肝脏合成,各类肝脏、肝硬化致肝功能损害时,由于合成减少,血清PA水平降低,是肝功能障碍的一个敏感指标,对肝病的早期诊断有一定价值。 (3)作为营养不良的指标 前白蛋白的半衰期很短,对蛋白摄入的改变是非常敏感的,一旦病人营养不良,PA即迅速下降。 (4)用于肝病预后指标 亚急性肝坏死前白蛋白一直在低值,故前白蛋白可用作判断肝病预后指标。肝癌以及阻塞性黄疸患者均可降低,其降低程度与病情有密切关系。 3. 检测原理 利用抗原抗体反应,人血清或血浆中前白蛋白与其相应抗体(羊抗人前白蛋白抗体)在液相中相遇发生免疫反应,产生凝集,引起浊度上升。通过测定特定波长吸光度变化值,与同样处理的校准品比较,即可计算出样本中前白蛋白的浓度。 4. 样品采集和处理 本试剂可检测血清、血浆样品,血清和血浆原则上采集空腹血(禁食12小时);正确使用抗凝剂(肝素抗凝);采血后应及时分离,防止溶血。 样品中PA在2~8℃保存可稳定2天,-20℃保存可稳定7天。 5. 试剂 5.1 试剂组成 【试剂主要组成成分】 试剂 成分 浓度 R1 4-羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES) 11.915g/L R2 羊抗人PA抗体 120ml/L 5.2 试剂准备 R1和R2试剂为即用型液体试剂,开瓶装载即可使用,用后应及时冷藏保存。 5.3 试剂的保存及稳定性 未开瓶试剂盒(含校准品)于2~8℃密闭避光保存有效期为12个月,开瓶后2~8℃避光保存可稳定30天。 运输和保存均应在2~8℃低温条件下进行。 5.4 试剂使用中的注意事项及危险预防 1)严格按照试剂盒说明书的要求使用试剂。 2)不同批号试剂盒中各组份不能互换或混用。 3)超过有效期的试剂不能使用。 4)试剂开瓶后,会导致试剂与空气中成分有反应的可能性和水分蒸发,对检测结果有一定的影响,因此请尽快使用和减少试剂与空气的接触。 5)当试剂变混浊或被污染或空白吸光度值>0.300时,表明试剂已失效,应弃去。 6)装载试剂时防止产生气泡,否则影响试剂加注而无法保证结果。 7)使用时应避免与人体接触,当试剂误入口中或眼中,或者附着到皮肤上的时候,请立即用大量清水冲洗,如有必要,请接受医生的治疗。 5.5 废弃物处理 试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规(如WS/T249-2005《临床实验室废物处理原则》等)进行废物处理。 6. 检验操作 6.1 基本参数 测定方法:终点法 主波长:340nm 副波长:700nm 反应方向:向上   空白(B) 校准(C) 测定(U) 样 本(μl) -- -- 3 校准品(μl) -- 3 -- 蒸馏水/生理盐水(μl) 3 -- -- 试剂R1(μl) 240 240 240 混匀,37℃孵育5分钟,测定吸光度A1。 试剂R2(μl) 60 60 60 混匀,37℃孵育5分钟后读取各管吸光度A2,计算ΔA=A2-A1。 结果计算: 各型全自动生化分析仪会根据校准曲线和检测样本的吸光度变化值自动计算出检测样本的浓度值。 6.3 校准 6.3.1 校准品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套校准品进行校准。 6.3.2 校准品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司的校准品时,请参照校准品使用说明书进行准备。加样时应避免气泡产生。 6.3.3 校准品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后2~8℃保存。 2)未开瓶的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3) 开瓶后的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定30天。 6.3.4 校准周期 1) 使用四川沃文特生物技术有限公司提供的校准品每隔14天进行1次校准。 2) 当试剂批号更换时,要求进行校准。 3) 当试剂瓶更换时,要求进行校准。 4) 当仪器更换零部件或者保养时,要求进行校准。 5) 当发现质控品、患者样品的测定值显示异常时,要求进行校准。 6.3.5 校准品使用注意事项 1)严格按照校准品说明书要求进行操作。 2)请不要使用我公司以外的校准品,否则结果的准确性无法保证。 3)校准品使用后请按要求妥善保管,避免污染。 4)避免反复冻融使用。 6.4 质控 6.4.1 质控品 建议使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清(水平2和/或水平3)。 6.4.2 质控品准备 使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清时,请参照质控品使用说明书进行准备。 6.4.3 质控品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的质控品在2℃~8℃或-20℃下密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3)血清复溶后,在-20℃下至少稳定30天。 6.4.4 质控可接受性判断 使用正常值和病理值生化质控品(无法满足时至少使用其中一种)进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施,如:质控品是否有质量问题,重新校准,试剂是否有质量问题,仪器运行是否正常等相关因素进行确认后解决问题,作好记录。 6.4.5 质控品使用注意事项 1)严格按照质控品说明书要求进行操作。 2)当使用质控品时,由于基质效应的影响和不同实验室测定条件的差异,测定值与标示靶值可能存在一定的偏差,建议用户建立自己实验室的控制均值和标准差。 3)避免反复冻融使用。 7. 结果处理 对超出可报告范围的结果的处理:取0.1ml样品加0.9ml蒸馏水,重复测定后结果乘以稀释倍数10进行报告。对检验结果为病危报警值的处理:应立即报告。 8. 参考值范围 建议各实验室根据CLSI C28-A3 Vol.20 No.12(How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline --Third Edition)文件建立自己的参考值范围。用于诊断时应结合患者临床表现和其他临床检查结果。 血清/血浆: 200~400mg/L ; 9. 产品性能 9.1 空白吸光度 试剂空白吸光度:≤0.300(主波长340nm,光径10mm)。 9.2 准确度 相对偏差在±10.0%范围内。 9.3 精密度 批内重复性CV≤5.0%、批间相对偏差R≤10.0% 。 9.4 分析灵敏度 前白蛋白浓度为300mg/L的吸光度变化值(∆A)在0.050~0.200范围内。 9.5 线性范围 20 mg/L~800mg/L,r≥0.990; 20 mg/L~200mg/L时,线性绝对偏差应在±20mg/L范围内; 200 mg/L~800mg/L时,线性相对偏差应在±15.0%范围内; 9.6 抗干扰能力 依据CLSI EP7-A文件方案,在贝克曼AU400和日立7080全自动生化分析仪上进行研究,得出结果为: 胆红素342μmol/L 以下ApoB测定结果影响为不超过10%; 甘油三酯5.65mmol/L以下对ApoB测定结果影响为不超过10%; 血红蛋白5.0g/L以下对ApoB测定结果影响为不超过10%。 10. 检验注意事项 1)试剂在使用中应避免污染,否则将会导致失效; 2)试剂与样品用量可根据不同仪器的需要,在试剂样品体积比例不变的条件下,适当增加或减少试剂与样品的用量。 3)更换批号后建议重新定标。 4)准确的结果取决于样品、试剂、仪器等多个环节的控制。 5)药物、抗凝剂、促凝剂、分离胶等其他物质都可能对测定值造成无法预知的干扰。当怀疑标本存在这些干扰物质的影响时,请停药后或采用无任何添加剂的血清进行测定。 11. 安全性提示 血清等样品可能含有病毒、细菌等病源微生物,操作者有被感染的潜在危险性,操作时应采取防范措施;试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规进行废物处理。 12. 主要参考文献 1)尚红等. 全国临床检验操作规程. 人民卫生出版社,2015年第4版:210~211. 2)韩志钧等. 全国临床化学常用项目自动化分析法. 辽宁技术出版社,2005年第三版:1196~1199. 类风湿因子Rheumatoid Factor(RF) 1. 预期用途 本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆样本中类风湿因子的含量。 2. 临床意义 (1)类风湿性关节炎 :RF阳性率为52%~92%,多在70%~80%左右。特异性88.5%左右。RF阳性者疗效差且多有并发症(如周围神经炎及动脉炎等) 。RF阴性表示病症较轻,且并发症少,疗效好。持续高滴度RF常提示RA疾病活动,且骨侵蚀发生率高,常可伴有皮下结节或血管炎等全身并发症,提示预后不佳。RF主要出现在类风湿性关节炎患者,约70%~90%的血清中和约60%的滑漠液中可检出IgG类RF,这很可能是自身IgG变性所引起的一种自身免疫应答的表现。作为类风湿的诊断 ,对于稀释度的注意非常重要,一般1:32以上才有价值。但RF也象ANA一样,并不是RA独有的特异性抗体。 (2)正常人 :阳性率为2~5%,随年龄增长有增高趋势。5%正常老年人可出现阳性。75岁以上阳性率为2%~25%。 (3)自身免疫性疾病:阳性率:SLE(30%)、Ⅰ°SS(70%~90%)、SSc(20%~30%)、PM/DM(5%~10%)、MCTD(50%~60%)、IgA肾病(25%~40%)、恶性贫血为80%,自身免疫性溶血性贫血为75%,慢活肝为60%。阴性:AS、赖特综合征、OA、银屑病关节炎、肠病性关节炎。 (4)其他:慢性感染性疾病:亚急性细菌性心内膜炎、结核、麻风、梅毒、黑热病、传染性肝炎、血吸虫病等。非感染性疾病:弥漫性肺间质纤维化、肝硬化、慢性活动性肝炎、结节病、巨球蛋白血症等。 3. 检测原理 类风湿因子是一种发生于类风湿性关节炎患者体内的抗人变性IgG自身抗体。采用微粒子增强免疫比浊法。样本中抗人变性IgG自身抗体与包被有人γ-球蛋白的胶乳微粒在液相中相遇,立即形成不溶性抗原-抗体复合物,并产生一定的浊度。浊度高低反映样本中抗人变性IgG自身抗体的含量,通过与同样处理的校准品比较,即可计算出样本中类风湿因子的含量。 4. 样品采集和处理 本试剂可检测血清或肝素抗凝血浆样本,避免溶血,血清和血浆原则上采集空腹血(禁食12小时);样本应在采血后立即离心分离,并在当日检测。如不能即时检测,冷藏(2~8℃)可保存2天,-20℃保存可稳定7天,避免反复冻融。 5. 试剂 5.1 试剂组成 【试剂主要组成成分】 试剂 成分 浓度 R1 三羟甲基氨基甲烷(Tris) 5 g/L R2 人变性IgG致敏胶乳 200 ml/L 5.2 试剂准备 R1和R2试剂为即用型液体试剂,开瓶装载即可使用,用后应及时冷藏保存。 5.3 试剂的保存及稳定性 应在2~8℃密闭避光贮存,稳定期为瓶签标示的有效期。开瓶后的试剂应在2~8℃保存,稳定期为30天。严禁放置0℃以下保存。 5.4 试剂使用中的注意事项及危险预防 1)严格按照试剂盒说明书的要求使用试剂。 2)不同批号试剂盒中各组份不能互换或混用。 3)超过有效期的试剂不能使用。 4)试剂开瓶后,会导致试剂与空气中成分有反应的可能性和水分蒸发,对检测结果有一定的影响,因此请尽快使用和减少试剂与空气的接触。 5)当试剂变混浊或被污染或空白吸光度值>1.200时,表明试剂已失效,应弃去。 6)装载试剂时防止产生气泡,否则影响试剂加注而无法保证结果。 7)使用时应避免与人体接触,当试剂误入口中或眼中,或者附着到皮肤上的时候,请立即用大量清水冲洗,如有必要,请接受医生的治疗。 5.5 废弃物处理 试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规(如WS/T249-2005《临床实验室废物处理原则》等)进行废物处理。 6. 检验操作 6.1 基本参数 测定方法:终点法 主波长:700nm 副波长:none 反应方向:向上   空白(B) 校准(C) 测定(U) 样 本(μl) -- -- 5 校准品(μl) -- 5 -- 蒸馏水/生理盐水(μl) 5 -- -- 试剂R1(μl) 240 240 240 混匀,37℃孵育5分钟,测定吸光度A1。 试剂R2(μl) 60 60 60 混匀,37℃恒温5分钟后测定吸光度A2,计算∆A=A2-A1,绘制校准曲线图。 结果计算: 各型全自动生化分析仪会根据校准曲线和检测样本的吸光度变化值自动计算出检测样本的浓度值。 6.3 校准 6.3.1 校准品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套校准品进行校准。 6.3.2 校准品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司的校准品时,请参照校准品使用说明书进行准备。加样时应避免气泡产生。 6.3.3 校准品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3) 开瓶复溶后的校准品,在-20℃密闭避光贮存可稳定30天。 6.3.4 校准周期 1) 使用四川沃文特生物技术有限公司提供的校准品每隔14天进行1次校准。 2) 当试剂批号更换时,要求进行校准。 3) 当试剂瓶更换时,要求进行校准。 4) 当仪器更换零部件或者保养时,要求进行校准。 5) 当发现质控品、患者样品的测定值显示异常时,要求进行校准。 6.3.5 校准品使用注意事项 1)严格按照校准品说明书要求进行操作。 2)请不要使用我公司以外的校准品,否则结果的准确性无法保证。 3)校准品使用后请按要求妥善保管,避免污染。 4)避免反复冻融使用。 6.4 质控 6.4.1 质控品 建议使用RANDOX公司提供的特种蛋白多项检测质控血清(水平2和/或水平3)。 6.4.2 质控品准备 使用RANDOX公司提供的特种蛋白多项检测质控血清时,请参照质控品使用说明书进行准备。 6.4.3 质控品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的质控品在2℃~8℃或-20℃下密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3)血清复溶后,在-20℃下至少稳定30天。 6.4.4 质控可接受性判断 使用正常值和病理值生化质控品(无法满足时至少使用其中一种)进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施,如:质控品是否有质量问题,重新校准,试剂是否有质量问题,仪器运行是否正常等相关因素进行确认后解决问题,作好记录。 6.4.5 质控品使用注意事项 1)严格按照质控品说明书要求进行操作。 2)当使用质控品时,由于基质效应的影响和不同实验室测定条件的差异,测定值与标示靶值可能存在一定的偏差,建议用户建立自己实验室的控制均值和标准差。 3)避免反复冻融使用。 7. 结果处理 对超出可报告范围的结果的处理:取0.1ml样品加0.9ml蒸馏水,重复测定后结果乘以稀释倍数10进行报告。对检验结果为病危报警值的处理:应立即报告。 8. 参考值范围 建议各实验室根据CLSI C28-A3 Vol.20 No.12(How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline --Third Edition)文件建立自己的参考值范围。用于诊断时应结合患者临床表现和其他临床检查结果。 血清/血浆: ≤20 IU/ml 。 9. 产品性能 9.1 空白吸光度 试剂空白吸光度:≤1.200(主波长570nm,光径10mm)。 9.2 准确度 相对偏差在±20.0%范围内。 9.3 精密度 批内重复性CV≤5.0%、批间相对偏差R≤10.0% 。 9.4 分析灵敏度 类风湿因子(RF)浓度为30IU/ml的吸光度变化值(∆A)在0.040~0.200范围内。 9.5 线性范围 3 IU/ml~160IU/ml,r≥0.990; 3 IU/ml~20IU/ml时,线性绝对偏差应在±3IU/ml范围内; 20 IU/ml~160IU/ml时,线性相对偏差应在±15.0%范围内; 9.6 抗干扰能力 依据CLSI EP7-A文件方案,在贝克曼AU400和日立7080全自动生化分析仪上进行研究,得出结果为: 胆红素342μmol/L 以下RF测定结果影响为不超过10%; 甘油三酯5.65mmol/L以下对RF测定结果影响为不超过10%; 血红蛋白5.0g/L以下对RF测定结果影响为不超过10%。 10. 检验注意事项 1)试剂在使用中应避免污染,否则将会导致失效; 2)试剂与样品用量可根据不同仪器的需要,在试剂样品体积比例不变的条件下,适当增加或减少试剂与样品的用量。 3)更换批号后建议重新定标。 4)准确的结果取决于样品、试剂、仪器等多个环节的控制。 5)药物、抗凝剂、促凝剂、分离胶等其他物质都可能对测定值造成无法预知的干扰。当怀疑标本存在这些干扰物质的影响时,请停药后或采用无任何添加剂的血清进行测定。 11. 安全性提示 血清等样品可能含有病毒、细菌等病源微生物,操作者有被感染的潜在危险性,操作时应采取防范措施;试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规进行废物处理。 12. 主要参考文献 1)尚红等. 全国临床检验操作规程. 人民卫生出版社,2015年第4版:495~496. 2)Bizzaro N,Mazzanti G,Tonutti E,et al.Diagnostic accuracy of the anti citrulline antibody assay for rheumatoid arthritis [J]Clin Chem,2001,47(6):1089. 总胆汁酸 Total Bile Acid(TBA) 1. 预期用途 本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆样本中总胆汁酸(TBA)的含量。 2. 临床意义 (1)测定血清中胆汁酸可提供肝胆系统是否正常,肝、胆疾病时周围血循环中的胆汁酸水平明显升高。急性肝炎早期和肝外阻塞性黄疸时可增至正常值的100倍以上。对肝胆系统疾病的诊断具有特异性。 (2)可敏感地反映肝胆系统疾病的病变过程。肝胆疾病时血清胆汁酸浓度的升高与其他肝功能试验及肝组织学变化极为吻合,在肝细胞仅有轻微坏死时,血清胆汁酸的升高,常比其他检查更为灵敏。据报道,急性肝炎、肝硬化、原发性肝癌、急性肝内胆汁淤积、原发性胆汁性肝硬化以及肝外阻塞性黄疸,其血清胆汁酸均100%出现异常。上述疾病时均有血清胆汁酸含量的增高。 (3)应用熊脱氧胆酸(UDCA)负荷试验,即口服UDCA后测定负荷前后病人血清总胆汁酸含量,结果发现慢性活动性肝炎、肝硬化及脂肪肝病人在负荷后血清总胆汁酸显著增高,表明此类病人清除胆汁酸的能力显著下降。 3. 检测原理 胆汁酸(BA)被3α-羟类固醇脱氢酶(3α-HSD)和硫代氧化型辅酶(Thio-NAD)特异性地氧化,生成3-酮类固醇和还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)。生成的3-酮类固醇在3α-HSD和还原型β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)的作用下,生成胆汁酸和氧化型β-烟酰胺嘌呤二核苷酸(NAD)。血清或血浆中的胆汁酸在多次酶循环的过程中被放大,同时使生成的Thio-NADH扩增。测定Thio-NADH在405nm处吸光度的变化,可求得总胆汁酸(TBA)的含量。 4. 样品采集和处理 请使用血清或肝素抗凝血浆样本,避免溶血。样本应在采血后立即离心分离,并在当日检测。如不能即时检测,冷藏(2~8℃)可保存7天,-20℃冷冻保存可稳定3个月,避免反复冻融。 5. 试剂 5.1 试剂组成 【试剂主要组成成分】 试剂 成分 浓度 R1 硫代氧化型辅酶(Thio-NAD) 0.75 g/L R2 还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH) 6.0 g/L 3α-羟类固醇脱氢酶(3α-HSD) 6.5 KU/L 5.2 试剂准备 R1和R2试剂为即用型液体试剂,开瓶装载即可使用,用后应及时冷藏保存。 5.3 试剂的保存及稳定性 应在2~8℃密闭避光贮存,稳定期为瓶签标示的有效期。开瓶后的试剂应在2~8℃保存,稳定期为30天。严禁放置0℃以下保存。 5.4 试剂使用中的注意事项及危险预防 1)严格按照试剂盒说明书的要求使用试剂。 2)不同批号试剂盒中各组份不能互换或混用。 3)超过有效期的试剂不能使用。 4)试剂开瓶后,会导致试剂与空气中成分有反应的可能性和水分蒸发,对检测结果有一定的影响,因此请尽快使用和减少试剂与空气的接触。 5)当试剂变混浊或被污染或空白吸光度值>0.500时,表明试剂已失效,应弃去。 6)装载试剂时防止产生气泡,否则影响试剂加注而无法保证结果。 7)使用时应避免与人体接触,当试剂误入口中或眼中,或者附着到皮肤上的时候,请立即用大量清水冲洗,如有必要,请接受医生的治疗。 5.5 废弃物处理 试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规(如WS/T249-2005《临床实验室废物处理原则》等)进行废物处理。 6. 检验操作 6.1 基本参数 测定方法:速率法 主波长:405nm 副波长:660nm 反应方向:向上   空白(B) 校准(C) 测定(U) 样 本(μl) -- -- 3 校准品(μl) -- 3 -- 蒸馏水/生理盐水(μl) 3 -- -- 试剂R1(μl) 180 180 180 混匀,37℃恒温5分钟 试剂R2(μl) 60 60 60 混匀,37℃恒温1分钟,以空白管调零测定初始吸光度,然后准确测定平均每分钟吸光度变化率△A/min。 结果计算: 样本TBA含量(μmol/l)= △Au/min × Cc △Ac/min △AU/min为测定管相对空白管吸光度变化值 △Ac/min为校准管相对空白管吸光度变化值 Cc为校准品浓度 6.3.1 校准品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套校准品进行校准。 6.3.2 校准品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司的校准品时,请参照校准品使用说明书进行准备。加样时应避免气泡产生。 6.3.3 校准品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3) 开瓶复溶后的校准品,在-20℃密闭避光贮存可稳定30天。 6.3.4 校准周期 1) 使用四川沃文特生物技术有限公司提供的校准品每隔10天进行1次校准。 2) 当试剂批号更换时,要求进行校准。 3) 当试剂瓶更换时,要求进行校准。 4) 当仪器更换零部件或者保养时,要求进行校准。 5) 当发现质控品、患者样品的测定值显示异常时,要求进行校准。 6.3.5 校准品使用注意事项 1)严格按照校准品说明书要求进行操作。 2)请不要使用我公司以外的校准品,否则结果的准确性无法保证。 3)校准品使用后请按要求妥善保管,避免污染。 4)避免反复冻融使用。 6.4 质控 6.4.1 质控品 建议使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清(水平2和/或水平3)。 6.4.2 质控品准备 使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清时,请参照质控品使用说明书进行准备。 6.4.3 质控品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的质控品在2℃~8℃或-20℃下密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3)血清复溶后,在-20℃下至少稳定30天。 6.4.4 质控可接受性判断 使用正常值和病理值生化质控品(无法满足时至少使用其中一种)进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施,如:质控品是否有质量问题,重新校准,试剂是否有质量问题,仪器运行是否正常等相关因素进行确认后解决问题,作好记录。 6.4.5 质控品使用注意事项 1)严格按照质控品说明书要求进行操作。 2)当使用质控品时,由于基质效应的影响和不同实验室测定条件的差异,测定值与标示靶值可能存在一定的偏差,建议用户建立自己实验室的控制均值和标准差。 3)避免反复冻融使用。 7. 结果处理 对超出可报告范围的结果的处理:取0.1ml样品加0.9ml蒸馏水,重复测定后结果乘以稀释倍数10进行报告。对检验结果为病危报警值的处理:应立即报告。 8. 参考值范围 建议各实验室根据CLSI C28-A3 Vol.20 No.12(How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline --Third Edition)文件建立自己的参考值范围。用于诊断时应结合患者临床表现和其他临床检查结果。 血清/血浆:<10.0μmol/l 。 9. 产品性能 9.1 空白吸光度 试剂空白吸光度:≤0.500;试剂空白吸光度变化率(△A/min)≤0.020 (主波长410nm,光径10mm)。 9.2 准确度 相对偏差在±10.0%范围内。 9.3 精密度 批内重复性CV≤4.0%、批间相对偏差R≤5.0% 。 9.4 分析灵敏度 TBA浓度为50.0μmol/l的吸光度变化率(△A/min)在0.040~0.160范围内。 9.5 线性范围 0.9~200.0μmol/l,r≥0.990; 0.9~10.0μmol/l时,线性偏差应在±1.0μmol/l范围内; >10.0μmol/l时,线性偏差在±10.0%范围内。 9.6 抗干扰能力 依据CLSI EP7-A文件方案,在贝克曼AU400和日立7080全自动生化分析仪上进行研究,得出结果为: 胆红素684μmol/L 以下TBA测定结果影响为不超过10%; 甘油三酯11.3mmol/L以下对TBA测定结果影响为不超过10%; 抗坏血酸0.40g/L以下对TBA测定结果影响为不超过10%; 血红蛋白5.0g/L以下对TBA测定结果影响为不超过10%。 10. 检验注意事项 1)试剂在使用中应避免污染,否则将会导致失效; 2)试剂与样品用量可根据不同仪器的需要,在试剂样品体积比例不变的条件下,适当增加或减少试剂与样品的用量。 3)更换批号后建议重新定标。 4)准确的结果取决于样品、试剂、仪器等多个环节的控制。 5)药物、抗凝剂、促凝剂、分离胶等其他物质都可能对测定值造成无法预知的干扰。当怀疑标本存在这些干扰物质的影响时,请停药后或采用无任何添加剂的血清进行测定。 11. 安全性提示 血清等样品可能含有病毒、细菌等病源微生物,操作者有被感染的潜在危险性,操作时应采取防范措施;试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规进行废物处理。 12. 主要参考文献 1)叶应妩等. 全国临床检验操作规程,东南大学出版社,2006年第三版:463. 2)林其燧等. 临床化学诊断方法大全,北京大学出版社,1990年第一版:17. 总胆固醇 Total Cholesterol(TC) 1. 预期用途 本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆样本中总胆固醇(TC)的含量。 2. 临床意义 血清总胆固醇增高: 见于脂肪肝,肝脏肿瘤等,后者因其压迫胆管可使胆固醇随胆汁排出的量少,血清中含量增高。肝外疾患如甲低、严重糖尿病、动脉粥样硬化、肾病综合征等也可见总胆固醇增高。妊娠中后期总胆固醇升高。家族性高总胆固醇血症时,总胆固醇可见显著升高。 血清总胆固醇减少: 常见于严重肝实质性病变,如急性肝坏死、肝硬化,这是因为 总胆固醇肝脏合成减少。某些肝外疾患如甲抗、恶性贫血、溶血性贫血感染和营养不定也可见总胆固醇降低。 医学决定水平 1.81mmol/L:低于此值常提示有严重肝功不全,应考虑适当的诊断及治疗措施,若已知存在肝病,则低于此值提示预后不良。 5.18mmol/L:此为75%的成年男子血中胆固醇值,测定值高于此水平,提示有患冠状动脉粥样硬化的中度危险,故应采取相应措施,如采用低饱和脂肪酸、低胆固醇、高纤维素饮食。 5.70mmol/L:此为90%的成年男子血中胆固醇水平,高于此值有患冠状动脉粥样硬化的高危险,若病人不接受低胆固醇饮食,则应采用药物治疗。 7.26mmol/L:高于此值会由于患动脉粥样硬化而预后严重,必须及时采用有力的治疗措施,如饮食控制,药物治疗等。 3. 检测原理 样本中胆固醇酯被胆固醇酯水解酶(COE)水解成游离胆固醇,在胆固醇氧化酶(COO)的作用下,胆固醇被氧化为Δ4-胆甾烯酮并产生过氧化氢,再经过氧化物酶(POD)催化,使4-氨基安替比林(4-AAP)与对羟基苯甲酸钠(PHB)反应生成有色的醌亚胺色素。醌亚胺的生成使505nm波长处吸光度上升,吸光度的变化与TC的含量成正比。通过与同样处理的胆固醇校准品比较,即可计算出样本中TC的含量。 4. 样品采集和处理 本试剂可检测血清或肝素抗凝血浆样本,避免溶血,血清和血浆原则上采集空腹血(禁食12小时);样本应在采血后立即离心分离,并在当日检测。如不能即时检测,冷藏(2~8℃)可保存7天,-20℃保存可稳定6个月。 5. 试剂 5.1 试剂组成 【试剂主要组成成分】 试剂 成分 浓度 R1 胆固醇酯酶(COE) 5 KU/L 对羟基苯甲酸钠(PHB) 1.8 g/L R2 胆固醇氧化酶(COO) 2.0 KU/L 过氧化物酶(POD) 10.0 KU/L 4-氨基安替比林(4-AAP) 0.4 g/L 5.2 试剂准备 R1和R2试剂为即用型液体试剂,开瓶装载即可使用,用后应及时冷藏保存。 5.3 试剂的保存及稳定性 应在2~8℃密闭避光贮存,稳定期为瓶签标示的有效期。开瓶后的试剂应在2~8℃保存,稳定期为30天。严禁放置0℃以下保存。 5.4 试剂使用中的注意事项及危险预防 1)严格按照试剂盒说明书的要求使用试剂。 2)不同批号试剂盒中各组份不能互换或混用。 3)超过有效期的试剂不能使用。 4)试剂开瓶后,会导致试剂与空气中成分有反应的可能性和水分蒸发,对检测结果有一定的影响,因此请尽快使用和减少试剂与空气的接触。 5)当试剂变混浊或被污染或空白吸光度值>0.080时,表明试剂已失效,应弃去。 6)装载试剂时防止产生气泡,否则影响试剂加注而无法保证结果。 7)使用时应避免与人体接触,当试剂误入口中或眼中,或者附着到皮肤上的时候,请立即用大量清水冲洗,如有必要,请接受医生的治疗。 5.5 废弃物处理 试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规(如WS/T249-2005《临床实验室废物处理原则》等)进行废物处理。 6. 检验操作 6.1 基本参数 测定方法:终点法 主波长:520nm 副波长:700nm 反应方向:向上   空白(B) 校准(C) 测定(U) 样 本(μl) -- -- 3 校准品(μl) -- 3 -- 蒸馏水/生理盐水(μl) 3 -- -- 试剂R1(μl) 240 240 240 混匀,37℃孵育5分钟,测定吸光度A1。 试剂R2(μl) 60 60 60 混匀,37℃孵育5分钟后读取各管吸光度A2,计算ΔA=A2-A1。 结果计算: 样本TC含量(mmol/l)= △Au × Cc △Ac △AU/min为测定管相对空白管吸光度值 △Ac/min为校准管相对空白管吸光度值 Cc为校准品浓度值 6.3 校准 6.3.1 校准品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套校准品进行校准。 6.3.2 校准品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司的校准品时,请参照校准品使用说明书进行准备。加样时应避免气泡产生。 6.3.3 校准品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3) 开瓶复溶后的校准品,在-20℃密闭避光贮存可稳定30天。 6.3.4 校准周期 1) 使用四川沃文特生物技术有限公司提供的校准品每隔30天进行1次校准。 2) 当试剂批号更换时,要求进行校准。 3) 当试剂瓶更换时,要求进行校准。 4) 当仪器更换零部件或者保养时,要求进行校准。 5) 当发现质控品、患者样品的测定值显示异常时,要求进行校准。 6.3.5 校准品使用注意事项 1)严格按照校准品说明书要求进行操作。 2)请不要使用我公司以外的校准品,否则结果的准确性无法保证。 3)校准品使用后请按要求妥善保管,避免污染。 4)避免反复冻融使用。 6.4 质控 6.4.1 质控品 建议使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清(水平2和/或水平3)。 6.4.2 质控品准备 使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清时,请参照质控品使用说明书进行准备。 6.4.3 质控品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的质控品在2℃~8℃或-20℃下密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3)血清复溶后,在-20℃下至少稳定30天。 6.4.4 质控可接受性判断 使用正常值和病理值生化质控品(无法满足时至少使用其中一种)进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施,如:质控品是否有质量问题,重新校准,试剂是否有质量问题,仪器运行是否正常等相关因素进行确认后解决问题,作好记录。 6.4.5 质控品使用注意事项 1)严格按照质控品说明书要求进行操作。 2)当使用质控品时,由于基质效应的影响和不同实验室测定条件的差异,测定值与标示靶值可能存在一定的偏差,建议用户建立自己实验室的控制均值和标准差。 3)避免反复冻融使用。 7. 结果处理 对超出可报告范围的结果的处理:取0.1ml样品加0.9ml蒸馏水,重复测定后结果乘以稀释倍数10进行报告。对检验结果为病危报警值的处理:应立即报告。 8. 参考值范围 建议各实验室根据CLSI C28-A3 Vol.20 No.12(How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline --Third Edition)文件建立自己的参考值范围。用于诊断时应结合患者临床表现和其他临床检查结果。 血清/血浆: <5.20 mmol/L 。 9. 产品性能 9.1 空白吸光度 试剂空白吸光度:≤0.080(主波长520nm,光径10mm)。 9.2 准确度 相对偏差在±9.0%范围内。 9.3 精密度 批内重复性CV≤3.0%、批间相对偏差R≤5.0% 。 9.4 分析灵敏度 TC浓度为5.00mmol/l时,吸光度变化值(△A)在0.150~0.600范围内。 9.5 线性范围 0.09~20.00mmol/l,r≥0.990; 0.09~1.00mmol/l时,线性偏差在±0.15mmol/l范围内; >1.00mmol/l时,线性偏差在±10.0%范围内。 9.6 抗干扰能力 依据CLSI EP7-A文件方案,在贝克曼AU400和日立7080全自动生化分析仪上进行研究,得出结果为: 胆红素342μmol/L 以下UA测定结果影响为不超过10%; 抗坏血酸0.50g/L以下对UA测定结果影响为不超过10%; 血红蛋白2.0g/L以下对UA测定结果影响为不超过10%。 10. 检验注意事项 1)试剂在使用中应避免污染,否则将会导致失效; 2)试剂与样品用量可根据不同仪器的需要,在试剂样品体积比例不变的条件下,适当增加或减少试剂与样品的用量。 3)更换批号后建议重新定标。 4)准确的结果取决于样品、试剂、仪器等多个环节的控制。 5)药物、抗凝剂、促凝剂、分离胶等其他物质都可能对测定值造成无法预知的干扰。当怀疑标本存在这些干扰物质的影响时,请停药后或采用无任何添加剂的血清进行测定。 11. 安全性提示 血清等样品可能含有病毒、细菌等病源微生物,操作者有被感染的潜在危险性,操作时应采取防范措施;试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规进行废物处理。 12. 主要参考文献 1)叶应妩等. 全国临床检验操作规程,东南大学出版社,2006年第三版:463. 2)林其燧等. 临床化学诊断方法大全,北京大学出版社,1990年第一版:17. 甘油三酯 Triglycerides(TG) 1. 预期用途 本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆样本中甘油三酯(TG)的含量。 2. 临床意义 甘油三酯是最常用的高脂血症筛查指标。 甘油三酯升高常见于糖尿病、肾病综合征、脂肪肝及其他肝病、SLE、胰腺炎、糖原累积病等。妊娠中后期TG升高。先天性脂蛋白脂肪酶缺陷时TG异常升高。 甘油三酯降低见于甲状腺功能低下,肾上腺皮质功能降低和肝功能严重低下。 甘油三酯与HDL-C间呈负相关,而HDL-C和冠心病的流行呈负相关。测定血 清TG评估HDL-C降低是否由于血中TG过多引起,以制定治疗方案有意义。血清TG>2.8mmol/L时,HDL-C下降的机会增大。 医学决定水平 0.45mmol/L:此值在正常下限附近,低于此值多与营养不良有关,应进行正确的诊断和治疗。 1.69mmol/L:年轻男性此值接近参考范围上限,为动脉粥样硬化性心血管的一个危险因子,应给予病人提供合适的预防建议。 4.52mmol/L:高于此水平常预示会发生动脉粥样硬化性心血管疾病,应给予适当治疗,如控制饮食和用降脂药物等。 3. 检测原理 用脂蛋白脂酶(LPL)使血清中甘油三酯水解成甘油与脂肪酸,将生成的甘油用甘油激酶(GK)及三磷酸腺苷(ATP)磷酸化。以磷酸甘油氧化酶(GPO)氧化3-磷酸甘油,然后以过氧化物酶(POD),4-氨基安替比林(4-AAP)与N-乙基-N-(3-磺丙基)-3-甲氧基苯胺钠盐(ADPS)反应生成有色的醌亚胺色素。醌亚胺的生成使540nm波长处吸光度上升,吸光度的变化与TG的含量成正比。通过与同样处理的甘油三酯校准品比较,即可计算出样本中TG的含量。 4. 样品采集和处理 本试剂可检测血清或肝素抗凝血浆样本,避免溶血,血清和血浆原则上采集空腹血(禁食12小时);样本应在采血后立即离心分离,并在当日检测。如不能即时检测,冷藏(2~8℃)可保存3天,-20℃保存可稳定1个月,避免反复冻融。 5. 试剂 5.1 试剂组成 【试剂主要组成成分】 试剂 成分 浓度 R1 甘油激酶(GK) 1.125 KU/L 脂蛋白脂酶(LPL) 4.5 KU/L 过氧化物酶(POD) 4.375 KU/L 4-氨基安替比林(4-AAP) 2.5 g/L 三磷酸腺苷(ATP) 1.0 g/L R2 ADPS 0.4 g/L 磷酸甘油氧化酶(GPO) 20 KU/L 5.2 试剂准备 R1和R2试剂为即用型液体试剂,开瓶装载即可使用,用后应及时冷藏保存。 5.3 试剂的保存及稳定性 应在2~8℃密闭避光贮存,稳定期为瓶签标示的有效期。开瓶后的试剂应在2~8℃保存,稳定期为30天。严禁放置0℃以下保存。 5.4 试剂使用中的注意事项及危险预防 1)严格按照试剂盒说明书的要求使用试剂。 2)不同批号试剂盒中各组份不能互换或混用。 3)超过有效期的试剂不能使用。 4)试剂开瓶后,会导致试剂与空气中成分有反应的可能性和水分蒸发,对检测结果有一定的影响,因此请尽快使用和减少试剂与空气的接触。 5)当试剂变混浊或被污染或空白吸光度值>0.150时,表明试剂已失效,应弃去。 6)装载试剂时防止产生气泡,否则影响试剂加注而无法保证结果。 7)使用时应避免与人体接触,当试剂误入口中或眼中,或者附着到皮肤上的时候,请立即用大量清水冲洗,如有必要,请接受医生的治疗。 5.5 废弃物处理 试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规(如WS/T249-2005《临床实验室废物处理原则》等)进行废物处理。 6. 检验操作 6.1 基本参数 测定方法:终点法 主波长:540nm 副波长:700nm 反应方向:向上   空白(B) 校准(C) 测定(U) 样 本(μl) -- -- 3 校准品(μl) -- 3 -- 蒸馏水/生理盐水(μl) 3 -- -- 试剂R1(μl) 240 240 240 混匀,37℃孵育5分钟,测定吸光度A1。 试剂R2(μl) 60 60 60 混匀,37℃孵育5分钟后读取各管吸光度A2,计算ΔA=A2-A1。 结果计算: 样本TG含量(mmol/l)= △Au × Cc △Ac △AU/min为测定管相对空白管吸光度值 △Ac/min为校准管相对空白管吸光度值 Cc为校准品浓度值 6.3 校准 6.3.1 校准品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套校准品进行校准。 6.3.2 校准品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司的校准品时,请参照校准品使用说明书进行准备。加样时应避免气泡产生。 6.3.3 校准品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3) 开瓶复溶后的校准品,在-20℃密闭避光贮存可稳定30天。 6.3.4 校准周期 1) 使用四川沃文特生物技术有限公司提供的校准品每隔30天进行1次校准。 2) 当试剂批号更换时,要求进行校准。 3) 当试剂瓶更换时,要求进行校准。 4) 当仪器更换零部件或者保养时,要求进行校准。 5) 当发现质控品、患者样品的测定值显示异常时,要求进行校准。 6.3.5 校准品使用注意事项 1)严格按照校准品说明书要求进行操作。 2)请不要使用我公司以外的校准品,否则结果的准确性无法保证。 3)校准品使用后请按要求妥善保管,避免污染。 4)避免反复冻融使用。 6.4 质控 6.4.1 质控品 建议使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清(水平2和/或水平3)。 6.4.2 质控品准备 使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清时,请参照质控品使用说明书进行准备。 6.4.3 质控品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的质控品在2℃~8℃或-20℃下密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3)血清复溶后,在-20℃下至少稳定30天。 6.4.4 质控可接受性判断 使用正常值和病理值生化质控品(无法满足时至少使用其中一种)进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施,如:质控品是否有质量问题,重新校准,试剂是否有质量问题,仪器运行是否正常等相关因素进行确认后解决问题,作好记录。 6.4.5 质控品使用注意事项 1)严格按照质控品说明书要求进行操作。 2)当使用质控品时,由于基质效应的影响和不同实验室测定条件的差异,测定值与标示靶值可能存在一定的偏差,建议用户建立自己实验室的控制均值和标准差。 3)避免反复冻融使用。 7. 结果处理 对超出可报告范围的结果的处理:取0.1ml样品加0.9ml蒸馏水,重复测定后结果乘以稀释倍数10进行报告。对检验结果为病危报警值的处理:应立即报告。 8. 参考值范围 建议各实验室根据CLSI C28-A3 Vol.20 No.12(How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline --Third Edition)文件建立自己的参考值范围。用于诊断时应结合患者临床表现和其他临床检查结果。 血清/血浆: <1.70 mmol/L 。 9. 产品性能 9.1 空白吸光度 试剂空白吸光度:≤0.150(主波长540nm,光径10mm)。 9.2 准确度 相对偏差在±5.0%范围内。 9.3 精密度 批内重复性CV≤3.0%、批间相对偏差R≤5.0% 。 9.4 分析灵敏度 TG浓度为2.26mmol/l时,吸光度变化值(△A)在0.100~0.400范围内。 9.5 线性范围 0.11~11.30mmol/l,r≥0.990; 0.11~1.00mmol/l时,线性偏差在±0.15mmol/l范围内; >1.00mmol/l时,线性偏差在±10.0%范围内。 9.6 抗干扰能力 依据CLSI EP7-A文件方案,在贝克曼AU400和日立7080全自动生化分析仪上进行研究,得出结果为: 胆红素342μmol/L 以下TG测定结果影响为不超过10%; 抗坏血酸0.40g/L以下对TG测定结果影响为不超过10%; 血红蛋白1.5g/L以下对TG测定结果影响为不超过10%。 10. 检验注意事项 1)试剂在使用中应避免污染,否则将会导致失效; 2)试剂与样品用量可根据不同仪器的需要,在试剂样品体积比例不变的条件下,适当增加或减少试剂与样品的用量。 3)更换批号后建议重新定标。 4)准确的结果取决于样品、试剂、仪器等多个环节的控制。 5)药物、抗凝剂、促凝剂、分离胶等其他物质都可能对测定值造成无法预知的干扰。当怀疑标本存在这些干扰物质的影响时,请停药后或采用无任何添加剂的血清进行测定。 11. 安全性提示 血清等样品可能含有病毒、细菌等病源微生物,操作者有被感染的潜在危险性,操作时应采取防范措施;试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规进行废物处理。 12. 主要参考文献 1)叶应妩等. 全国临床检验操作规程,东南大学出版社,2006年第三版:463. 2)林其燧等. 临床化学诊断方法大全,北京大学出版社,1990年第一版:17. 总蛋白Total Protein(TP) 1. 预期用途 本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆样本中总蛋白(TP)的含量。 2. 临床意义 血清总蛋白浓度受到血容量变化的影响,脱水时蛋白浓度相对增加,水潴留时则降低。在生理情况下,体位、运动等也可使血蛋白浓度发生轻微变化。 血清总蛋白浓度升高: (1) 各种原因失水所致的血液浓缩:如呕吐、腹泻、烧伤、糖尿病酮症酸中毒、急性传染病、急腹症等。 (2) 网状内皮系统疾病:如多发性骨髓瘤、原发性巨球蛋白血症、单核细胞性白血病等; (3) 风湿性疾病:如系统性红斑狼疮、多发性硬化。 (4) 慢性传染病:如结核、梅毒等。 血清总蛋白浓度降低: (1) 各种原因引起的血清蛋白丢失或摄入不足:如肾病综合征、营养不良、消耗增加; (2) 蛋白质合成障碍,如肝脏疾病。 医学决定水平 45g/L:低于此值往往与水肿有关,应考虑给以相应治疗,同时可作更全面的检查,如尿蛋白、肾及肝功能检查等。 60g/L:等于或低于此值,多种可引起总蛋白偏低的原因均应考虑,可选择一些试验项目作进一步检查。 80g/L:高于此值,能引起总蛋白升高的各种原因均应加以考虑,还可通过血清蛋白电泳等项目作进一步检查。 3. 检测原理 在碱性条件下,蛋白质多肽链中的肽键与铜离子作用形成有色络合物,其颜色深浅与蛋白质含量成正比,与通过同样处理的校准品比较,即可计算出样本中总蛋白的含量。 4. 样品采集和处理 本试剂可检测血清、血浆样品,血清和血浆原则上采集空腹血(禁食12小时);正确使用抗凝剂(肝素或EDTA抗凝);采血后应及时分离,防止溶血。 样品中TP在2~8℃保存可稳定5天,-20℃保存可稳定1个月。 5. 试剂 5.1 试剂组成 【试剂主要组成成分】 试剂 成分 浓度 R 硫酸铜 3g/L 酒石酸钾钠 9g/L 碘化钾 5g/L 5.2 试剂准备 R1和R2试剂为即用型液体试剂,开瓶装载即可使用,用后应及时冷藏保存。 5.3 试剂的保存及稳定性 未开瓶试剂盒(含校准品)于2~8℃密闭避光保存有效期为12个月,开瓶后2~8℃避光保存可稳定30天。运输和保存均应在2~8℃低温条件下进行。 5.4 试剂使用中的注意事项及危险预防 1)严格按照试剂盒说明书的要求使用试剂。 2)不同批号试剂盒中各组份不能互换或混用。 3)超过有效期的试剂不能使用。 4)试剂开瓶后,会导致试剂与空气中成分有反应的可能性和水分蒸发,对检测结果有一定的影响,因此请尽快使用和减少试剂与空气的接触。 5)当试剂变混浊或被污染或空白吸光度值>0.500时,表明试剂已失效,应弃去。 6)装载试剂时防止产生气泡,否则影响试剂加注而无法保证结果。 7)使用时应避免与人体接触,当试剂误入口中或眼中,或者附着到皮肤上的时候,请立即用大量清水冲洗,如有必要,请接受医生的治疗。 5.5 废弃物处理 试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规(如WS/T249-2005《临床实验室废物处理原则》等)进行废物处理。 6. 检验操作 6.1 基本参数 测定方法:终点法 主波长:546nm 副波长:700nm 反应方向:向上   空白(B) 校准(C) 测定(U) 样 本(μl) -- -- 5 校准品(μl) -- 5 -- 蒸馏水/生理盐水(μl) 5 -- -- 试剂R1(μl) 250 250 250 混匀,37℃恒温10分钟,以空白管调零,测定吸光度A,计算吸光度A与零点的差值ΔA。 结果计算: 样本TP含量(g/L)= △Au  × Cc △Ac △AU/min为测定管相对空白管吸光度值 △Ac/min为校准管相对空白管吸光度值 Cc为校准品浓度值 6.3 校准 6.3.1 校准品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套校准品进行校准。 6.3.2 校准品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司的校准品时,请参照校准品使用说明书进行准备。加样时应避免气泡产生。 6.3.3 校准品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3) 开瓶复溶后的校准品,在-20℃密闭避光贮存可稳定30天。 6.3.4 校准周期 1) 使用四川沃文特生物技术有限公司提供的校准品每隔30天进行1次校准。 2) 当试剂批号更换时,要求进行校准。 3) 当试剂瓶更换时,要求进行校准。 4) 当仪器更换零部件或者保养时,要求进行校准。 5) 当发现质控品、患者样品的测定值显示异常时,要求进行校准。 6.3.5 校准品使用注意事项 1)严格按照校准品说明书要求进行操作。 2)请不要使用我公司以外的校准品,否则结果的准确性无法保证。 3)校准品使用后请按要求妥善保管,避免污染。 4)避免反复冻融使用。 6.4 质控 6.4.1 质控品 建议使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清(水平2和/或水平3)。 6.4.2 质控品准备 使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清时,请参照质控品使用说明书进行准备。 6.4.3 质控品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的质控品在2℃~8℃或-20℃下密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3)血清复溶后,在-20℃下至少稳定30天。 6.4.4 质控可接受性判断 使用正常值和病理值生化质控品(无法满足时至少使用其中一种)进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施,如:质控品是否有质量问题,重新校准,试剂是否有质量问题,仪器运行是否正常等相关因素进行确认后解决问题,作好记录。 6.4.5 质控品使用注意事项 1)严格按照质控品说明书要求进行操作。 2)当使用质控品时,由于基质效应的影响和不同实验室测定条件的差异,测定值与标示靶值可能存在一定的偏差,建议用户建立自己实验室的控制均值和标准差。 3)避免反复冻融使用。 7. 结果处理 对超出可报告范围的结果的处理:取0.1ml样品加0.9ml蒸馏水,重复测定后结果乘以稀释倍数10进行报告。对检验结果为病危报警值的处理:应立即报告。 8. 参考值范围 建议各实验室根据CLSI C28-A3 Vol.20 No.12(How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline --Third Edition)文件建立自己的参考值范围。用于诊断时应结合患者临床表现和其他临床检查结果。 血清/血浆: 60.0-85.0 g/L 9. 产品性能 9.1 空白吸光度 试剂空白吸光度:≤0.500(主波长546nm,光径10mm)。 9.2 准确度 相对偏差在±10.0%范围内。 9.3 精密度 批内重复性CV≤5.0%、批间相对偏差R≤10.0% 。 9.4 分析灵敏度 总蛋白(TP)浓度为70.0 g/L的吸光度变化值(△A)应在0.100~0.400之间。 9.5 线性范围 3.0~100.0g/L,r≥0.990; 3.0~30.0g/L时,线性绝对偏差应在±3.0g/L范围内; 30.0~100.0g/L时,线性相对偏差应在±10.0%范围内。 9.6 抗干扰能力 依据CLSI EP7-A文件方案,在贝克曼AU400和日立7080全自动生化分析仪上进行研究,得出结果为: 胆红素684μmol/L 以下TP测定结果影响为不超过10%; 甘油三酯11.3mmol/L以下对TP测定结果影响为不超过10%; 抗坏血酸0.30g/L以下对TP测定结果影响为不超过10%; 血红蛋白5.0g/L以下对TP测定结果影响为不超过10%。 10. 检验注意事项 1)试剂在使用中应避免污染,否则将会导致失效; 2)试剂与样品用量可根据不同仪器的需要,在试剂样品体积比例不变的条件下,适当增加或减少试剂与样品的用量。 3)更换批号后建议重新定标。 4)准确的结果取决于样品、试剂、仪器等多个环节的控制。 5)药物、抗凝剂、促凝剂、分离胶等其他物质都可能对测定值造成无法预知的干扰。当怀疑标本存在这些干扰物质的影响时,请停药后或采用无任何添加剂的血清进行测定。 11. 安全性提示 血清等样品可能含有病毒、细菌等病源微生物,操作者有被感染的潜在危险性,操作时应采取防范措施;试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规进行废物处理。 12. 主要参考文献 1)尚红等.全国临床检验操作规程.人民卫生出版社,2014年第4版:200-203. 2)韩志钧等. 临床化学常用项目自动化分析法,辽宁科学技术出版社,2005年第三版:877-885. 尿酸 Uric Acid(UA) 1. 预期用途 本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆样本中尿酸(UA)的含量。 2. 临床意义 样品UA含量测定主要用于痛风、肾病、慢性白血病、多发性骨髓瘤、真性红细胞增多症等疾病的辅助诊断。目前认为。尿酸测定是诊断嘌呤代谢紊乱所致痛风的最佳生化标志。 血清尿酸浓度升高见于: (1)肾功能减低:虽然由于尿酸在肾脏中排泄的特点,它比血清肌酐和尿素浓度更能敏感地反映肾小球滤过功能损伤,但血清尿酸测定受到肾外因素的影响较多,故临床上比血清肌酐和尿素少用。 (2)体内尿酸生成增多,常见于遗传性酶缺陷导致的原发性痛风,核酸代谢增加的白血病,多发性骨髓瘤等。 (3)长期使用噻嗪类利尿药物后可抑制肾小管分泌尿酸,引起血清尿酸水平升高,以及长期禁食者、铅中毒、酒精中毒、肿瘤放疗化疗后和妊娠中毒症等。 血清尿酸浓度降低见于: (1)各种原因引起的肾小管重吸收功能损害,如Fanconi综合征 (先天性多种肾小管功能障碍) 使尿酸重吸收障碍,导致尿酸大量丢失。 (2)肝功能严重受损如急性肝坏死、肝豆状核变性等以及参与尿酸生成的黄嘌呤氧化酶、嘌呤核苷磷酸化酶先天缺陷等导致尿酸生成减少。 (3)使用大剂量糖皮质激素、双香豆素、丙磺舒等药物后以及慢性镉中毒等,可使血清尿酸减少。 3. 检测原理 尿酸酶先催化尿酸的氧化产生尿囊素和过氧化氢,随后,过氧化氢、4-氨基安替比林和N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺经过氧化物酶的作用(Trinder’s反应)形成红色的醌亚胺化合物,从而引起546nm处吸光度的上升,此种变化与样本中的尿酸含量成正比。 4. 样品采集和处理 本试剂可检测血清或肝素抗凝血浆样本,避免溶血,血清和血浆原则上采集空腹血(禁食12小时);样本应在采血后立即离心分离,并在当日检测。如不能即时检测,冷藏(2~8℃)可保存3天,-20℃保存可稳定3个月。 5. 试剂 5.1 试剂组成 【试剂主要组成成分】 试剂 成分 浓度 R1 过氧化物酶(POD) 2.5KU/L 4-氨基安替吡啉(4-AAP) 4.0g/L R2 尿酸酶(URO) 2.7KU/L N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺(TOOS) 4.0g/L 5.2 试剂准备 R1和R2试剂为即用型液体试剂,开瓶装载即可使用,用后应及时冷藏保存。 5.3 试剂的保存及稳定性 应在2~8℃密闭避光贮存,稳定期为瓶签标示的有效期。开瓶后的试剂应在2~8℃保存,稳定期为30天。严禁放置0℃以下保存。 5.4 试剂使用中的注意事项及危险预防 1)严格按照试剂盒说明书的要求使用试剂。 2)不同批号试剂盒中各组份不能互换或混用。 3)超过有效期的试剂不能使用。 4)试剂开瓶后,会导致试剂与空气中成分有反应的可能性和水分蒸发,对检测结果有一定的影响,因此请尽快使用和减少试剂与空气的接触。 5)当试剂变混浊或被污染或空白吸光度值>0.200时,表明试剂已失效,应弃去。 6)装载试剂时防止产生气泡,否则影响试剂加注而无法保证结果。 7)使用时应避免与人体接触,当试剂误入口中或眼中,或者附着到皮肤上的时候,请立即用大量清水冲洗,如有必要,请接受医生的治疗。 5.5 废弃物处理 试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规(如WS/T249-2005《临床实验室废物处理原则》等)进行废物处理。 6. 检验操作 6.1 基本参数 测定方法:终点法 主波长:540nm 副波长:700nm 反应方向:向上   空白(B) 校准(C) 测定(U) 样 本(μl) -- -- 5 校准品(μl) -- 5 -- 蒸馏水/生理盐水(μl) 5 -- -- 试剂R1(μl) 200 200 200 混匀,37℃孵育5分钟,测定吸光度A1。 试剂R2(μl) 50 50 50 混匀,37℃孵育5分钟后读取各管吸光度A2,计算ΔA=A2-A1。 结果计算: 样本UA含量(μmol/l)= △Au  × Cc △Ac △AU/min为测定管相对空白管吸光度值 △Ac/min为校准管相对空白管吸光度值 Cc为校准品浓度值 6.3 校准 6.3.1 校准品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套校准品进行校准。 6.3.2 校准品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司的校准品时,请参照校准品使用说明书进行准备。加样时应避免气泡产生。 6.3.3 校准品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3) 开瓶复溶后的校准品,在-20℃密闭避光贮存可稳定30天。 6.3.4 校准周期 1) 使用四川沃文特生物技术有限公司提供的校准品每隔14天进行1次校准。 2) 当试剂批号更换时,要求进行校准。 3) 当试剂瓶更换时,要求进行校准。 4) 当仪器更换零部件或者保养时,要求进行校准。 5) 当发现质控品、患者样品的测定值显示异常时,要求进行校准。 6.3.5 校准品使用注意事项 1)严格按照校准品说明书要求进行操作。 2)请不要使用我公司以外的校准品,否则结果的准确性无法保证。 3)校准品使用后请按要求妥善保管,避免污染。 4)避免反复冻融使用。 6.4 质控 6.4.1 质控品 建议使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清(水平2和/或水平3)。 6.4.2 质控品准备 使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清时,请参照质控品使用说明书进行准备。 6.4.3 质控品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的质控品在2℃~8℃或-20℃下密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3)血清复溶后,在-20℃下至少稳定30天。 6.4.4 质控可接受性判断 使用正常值和病理值生化质控品(无法满足时至少使用其中一种)进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施,如:质控品是否有质量问题,重新校准,试剂是否有质量问题,仪器运行是否正常等相关因素进行确认后解决问题,作好记录。 6.4.5 质控品使用注意事项 1)严格按照质控品说明书要求进行操作。 2)当使用质控品时,由于基质效应的影响和不同实验室测定条件的差异,测定值与标示靶值可能存在一定的偏差,建议用户建立自己实验室的控制均值和标准差。 3)避免反复冻融使用。 7. 结果处理 对超出可报告范围的结果的处理:取0.1ml样品加0.9ml蒸馏水,重复测定后结果乘以稀释倍数10进行报告。对检验结果为病危报警值的处理:应立即报告。 8. 参考值范围 建议各实验室根据CLSI C28-A3 Vol.20 No.12(How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline --Third Edition)文件建立自己的参考值范围。用于诊断时应结合患者临床表现和其他临床检查结果。 血清/血浆: 男性208~428μmol/L ; 女性155~357μmol/L 。 9. 产品性能 9.1 空白吸光度 试剂空白吸光度:≤0.200(主波长540nm,光径10mm)。 9.2 准确度 相对偏差在±10.0%范围内。 9.3 精密度 批内重复性CV≤4.0%、批间相对偏差R≤5.0% 。 9.4 分析灵敏度 UA浓度为100μmol/L的吸光度变化值(△A)在0.015~0.060范围内。 9.5 线性范围 8~1200μmol/L,r≥0.990; 8~100μmol/L时,线性偏差在±15μmol/l范围内; >100μmol/L时,线性偏差在±10.0%范围内。 9.6 抗干扰能力 依据CLSI EP7-A文件方案,在贝克曼AU400和日立7080全自动生化分析仪上进行研究,得出结果为: 胆红素684μmol/L 以下UA测定结果影响为不超过10%; 甘油三酯11.3mmol/L以下对UA测定结果影响为不超过10%; 抗坏血酸0.30g/L以下对UA测定结果影响为不超过10%; 血红蛋白5.0g/L以下对UA测定结果影响为不超过10%。 10. 检验注意事项 1)试剂在使用中应避免污染,否则将会导致失效; 2)试剂与样品用量可根据不同仪器的需要,在试剂样品体积比例不变的条件下,适当增加或减少试剂与样品的用量。 3)更换批号后建议重新定标。 4)准确的结果取决于样品、试剂、仪器等多个环节的控制。 5)药物、抗凝剂、促凝剂、分离胶等其他物质都可能对测定值造成无法预知的干扰。当怀疑标本存在这些干扰物质的影响时,请停药后或采用无任何添加剂的血清进行测定。 11. 安全性提示 血清等样品可能含有病毒、细菌等病源微生物,操作者有被感染的潜在危险性,操作时应采取防范措施;试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规进行废物处理。 12. 主要参考文献 1)叶应妩等. 全国临床检验操作规程,东南大学出版社,2006年第三版:463. 2)林其燧等. 临床化学诊断方法大全,北京大学出版社,1990年第一版:17. 尿素 Urea 1. 预期用途 本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆样本中尿素(UREA)的含量。 2. 临床意义 血中尿素氮增高见于: (1)肾脏疾病:如慢性肾炎、肾动脉硬化症、严重肾盂肾炎、肾结核和肾肿瘤的晚期等,肾功能轻度受损时,尿素可无变化。当其高于正常时,说明有效肾单位的60%~70%已受到损害。因此血浆尿素测定不能作为肾脏疾病早期功能测定的指标,但对肾功能衰竭,尤其是尿毒症的诊断有特殊价值。其增高的程度与病情严重性成正比,故对病情判断和预后的估价有重要意义。如慢性肾功能衰竭可根据尿素等的测定来决定其程度,可分为:①肾功能衰竭代偿期,内生肌酐清除率下降。血肌酐不升高 (在179.8μmol/L以下),血尿素正常或轻度升高 (在9mmol/L以下);②肾功能衰竭失代偿期,又称氮质血症期(或尿毒症前期)。此时内生肌酐清除率下降明显,为50ml/分以下,血肌酐超过176.8μmol/L、血尿素超过9mmol/L;③尿毒症期,此时内生肌酐清除率下降至20ml/分以下,血肌酐超过445μmol/L,血尿素超过20mmol/L。 (2)肾前或肾后因素:引起尿量显著减少或尿闭,如脱水、水肿、腹水、循环功能衰竭、尿路结石或前列腺肿大引起的尿路梗阻等。 (3)体内蛋白质分解过多:如急性传染病、上消化道出血、大面积烧伤、大手术后和甲状腺功能亢进等。虽然血尿素增高,此时其他肾功能试验结果一般均正常。 医学决定水平 3.0mmol/L:低于此值常见于血液释放过多或肝功能不全。 7.1mmol/L:此值为正常上限,高于此值应考虑能引起尿素升高的多种可能原因,如肾功能不全、高蛋白饮食及上消化道出血等,此时测定血清肌酐有助于正确评价肾脏功能。 14.2mmol/L:高于此值常见于严重的肾功能不全,应选择其他有力的诊断方法及治疗措施。 3. 检测原理 采用脲酶偶联谷氨酸脱氢酶反应。脲酶先水解尿素生成氨和二氧化碳,随后,在谷氨酸脱氢酶存在的情况下,氨与α-酮戊二酸结合生成谷氨酸,并将还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化为氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸,从而引起340nm处吸光度的下降,此种变化与样本中的尿素含量成正比。通过监测340nm处吸光度下降的速率,可以计算出样品中尿素的含量。 4. 样品采集和处理 请使用血清或肝素抗凝血浆样本,避免溶血。样本应在采血后立即离心分离,并在当日检测。如不能即时检测,冷藏(2~8℃)可保存3~5天,-20℃冷冻保存可稳定11个月。 5. 试剂 5.1 试剂组成 【试剂主要组成成分】 试剂 成分 浓度 R1 还原型β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH) 0.2988g/L R2 脲酶 20KU/L α-酮戊二酸 10.0g/L 谷氨酸脱氢酶(GLDH) 5KU/L 5.2 试剂准备 R1和R2试剂为即用型液体试剂,开瓶装载即可使用,用后应及时冷藏保存。 5.3 试剂的保存及稳定性 应在2~8℃密闭避光贮存,稳定期为瓶签标示的有效期。开瓶后的试剂应在2~8℃保存,稳定期为30天。严禁放置0℃以下保存。 5.4 试剂使用中的注意事项及危险预防 1)严格按照试剂盒说明书的要求使用试剂。 2)不同批号试剂盒中各组份不能互换或混用。 3)超过有效期的试剂不能使用。 4)试剂开瓶后,会导致试剂与空气中成分有反应的可能性和水分蒸发,对检测结果有一定的影响,因此请尽快使用和减少试剂与空气的接触。 5)当试剂变混浊或被污染或空白吸光度值<1.000时,表明试剂已失效,应弃去。 6)装载试剂时防止产生气泡,否则影响试剂加注而无法保证结果。 7)使用时应避免与人体接触,当试剂误入口中或眼中,或者附着到皮肤上的时候,请立即用大量清水冲洗,如有必要,请接受医生的治疗。 5.5 废弃物处理 试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规(如WS/T249-2005《临床实验室废物处理原则》等)进行废物处理。 6. 检验操作 6.1 基本参数 测定方法:速率法 主波长:340nm 副波长:410nm 反应方向:向下   空白(B) 校准(C) 测定(U) 样 本(μl) -- -- 3 校准品(μl) -- 3 -- 蒸馏水/生理盐水(μl) 3 -- -- 试剂R1(μl) 240 240 240 混匀,37℃恒温5分钟 试剂R2(μl) 60 60 60 混匀,37℃恒温1分钟,以空白管调零测定初始吸光度,然后准确测定平均每分钟吸光度变化率△A/min。 结果计算: 样本UREA含量(mmol/l)= △Au/min × Cc △Ac/min △AU/min为测定管相对空白管吸光度变化值 △Ac/min为校准管相对空白管吸光度变化值 Cc为校准品浓度值 6.3 校准 6.3.1 校准品 建议使用四川沃文特生物技术有限公司配套校准品进行校准。 6.3.2 校准品准备 使用四川沃文特生物技术有限公司的校准品时,请参照校准品使用说明书进行准备。加样时应避免气泡产生。 6.3.3 校准品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的校准品,在2~8℃密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3) 开瓶复溶后的校准品,在-20℃密闭避光贮存可稳定30天。 6.3.4 校准周期 1) 使用四川沃文特生物技术有限公司提供的校准品每隔14天进行1次校准。 2) 当试剂批号更换时,要求进行校准。 3) 当试剂瓶更换时,要求进行校准。 4) 当仪器更换零部件或者保养时,要求进行校准。 5) 当发现质控品、患者样品的测定值显示异常时,要求进行校准。 6.3.5 校准品使用注意事项 1)严格按照校准品说明书要求进行操作。 2)请不要使用我公司以外的校准品,否则结果的准确性无法保证。 3)校准品使用后请按要求妥善保管,避免污染。 4)避免反复冻融使用。 6.4 质控 6.4.1 质控品 建议使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清(水平2和/或水平3)。 6.4.2 质控品准备 使用RANDOX公司提供的人定值临床化学质控血清时,请参照质控品使用说明书进行准备。 6.4.3 质控品的保存及稳定性 1)建议实验室可根据每次用量分装后冰冻保存。 2)未开瓶的质控品在2℃~8℃或-20℃下密闭避光贮存可稳定至标示的有效期。 3)血清复溶后,在-20℃下至少稳定30天。 6.4.4 质控可接受性判断 使用正常值和病理值生化质控品(无法满足时至少使用其中一种)进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施,如:质控品是否有质量问题,重新校准,试剂是否有质量问题,仪器运行是否正常等相关因素进行确认后解决问题,作好记录。 6.4.5 质控品使用注意事项 1)严格按照质控品说明书要求进行操作。 2)当使用质控品时,由于基质效应的影响和不同实验室测定条件的差异,测定值与标示靶值可能存在一定的偏差,建议用户建立自己实验室的控制均值和标准差。 3)避免反复冻融使用。 7. 结果处理 对超出可报告范围的结果的处理:取0.1ml样品加0.9ml蒸馏水,重复测定后结果乘以稀释倍数10进行报告。对检验结果为病危报警值的处理:应立即报告。 8. 参考值范围 建议各实验室根据CLSI C28-A3 Vol.20 No.12(How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline --Third Edition)文件建立自己的参考值范围。用于诊断时应结合患者临床表现和其他临床检查结果。 血清/血浆:2.86~8.20mmol/l 。 9. 产品性能 9.1 空白吸光度 试剂空白吸光度:≥1.000;试剂空白吸光度变化率(△A/min)≤0.010 (主波长340nm,光径10mm)。 9.2 准确度 相对偏差在±10.0%范围内。 9.3 精密度 批内重复性CV≤4.0%、批间相对偏差R≤5.0% 。 9.4 分析灵敏度 UREA浓度为7.14mmol/L的吸光度变化率(△A/min)在0.020~0.080范围内。 9.5 线性范围 0.20~35.70mmol/L,r≥0.990; 0.20~1.00mmol/L时,线性偏差在±0.15mmol/L范围内; >1.0mmol/L时,线性偏差在±10.0%范围内。 9.6 抗干扰能力 依据CLSI EP7-A文件方案,在贝克曼AU400和日立7080全自动生化分析仪上进行研究,得出结果为: 胆红素684μmol/L 以下Urea测定结果影响为不超过10%; 甘油三酯11.3mmol/L以下对Urea测定结果影响为不超过10%; 抗坏血酸0.40g/L以下对Urea测定结果影响为不超过10%; 血红蛋白5.0g/L以下对Urea测定结果影响为不超过10%。 10. 检验注意事项 1)试剂在使用中应避免污染,否则将会导致失效; 2)试剂与样品用量可根据不同仪器的需要,在试剂样品体积比例不变的条件下,适当增加或减少试剂与样品的用量。 3)更换批号后建议重新定标。 4)准确的结果取决于样品、试剂、仪器等多个环节的控制。 5)药物、抗凝剂、促凝剂、分离胶等其他物质都可能对测定值造成无法预知的干扰。当怀疑标本存在这些干扰物质的影响时,请停药后或采用无任何添加剂的血清进行测定。 11. 安全性提示 血清等样品可能含有病毒、细菌等病源微生物,操作者有被感染的潜在危险性,操作时应采取防范措施;试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规进行废物处理。 12. 主要参考文献 1)叶应妩等. 全国临床检验操作规程,东南大学出版社,2006年第三版:463. 2)林其燧等. 临床化学诊断方法大全,北京大学出版社,1990年第一版:17. 生化室质量自检措施 1.标本全部进行两人二次核对,避免标本对错。 2.报告由两人盖章: 测定者负责核对结果,遇结果异常、过高、过低需进行标本再次核对、复查、电告 审核者负责核对姓名、性别、年龄、编号、病房、床号、测定项目的正确与否 3.异常或不符合的结果,再次核对标本,由测定者负责。 4.超出线性范围的结果,同份标本重测,由测定者负责。 5.可疑结果电告重抽血。 6.危急结果处理: 对于可能危及患者生命的指标,达到一定水平需及时通知病房,常见指标如下: 1.血钾:<2.8mmol/L或>6.0mmol/L,复查后及时通知病房。 2.血钠:成人:<120mmol/L或>160mmol/L婴儿: <125mmol/L或>155mmol/L复查后及时通知病房。 3.血氯:成人:<80mmol/L或>120mmol/L婴儿:<90mmol/L或>115mmol 复查后及时通知病房。 4.血糖:<2.8mmol/L或>22.2mmol/L,婴儿:<1.7mmol/L或>22.2mmol/L复查后及时通知病房。 5. 尿素:>30mmol/L,复查后及时通知病房。 6. 肌酐>530 mmol/L,复查后及时通知病房。 7.钙<1.5或>3.5 mmol/L,复查后及时通知病房。 8.镁<0.5或>3.0 mmol/L,复查后及时通知病房。 9.ALT:成人>500u/l,儿童 >300u/l 10.AST成人: 500u/l,儿童 >300u/l 11.胆红素:>300ummol/l 12.CK:>1000U/L 13.肌钙蛋白:阳性 生 化 危 急 值 报 告 记 录 报 告 时 间 姓 名 性 别 年 龄 科 室 病历号 床 号 检测项目 危急结果 复查后结果 临床接收人 检验科报告人 备注 月 日 时 分                         月 日 时 分                         月 日 时 分                         月 日 时 分                         月 日 时 分                         月 日 时 分                         月 日 时 分                         月 日 时 分                         月 日 时 分                         月 日 时 分                         月 日 时 分                         月 日 时 分                         月 日 时 分                         注:请按要求及时、如实记录 。 制表:** 监督:** 室内质量控制的操作程序 一、 标本的管理程序:见相关内容 二、 试剂的管理: 1. 试剂的保存:库存试剂按照试剂说明书要求的条件存放,机内试剂在操作结束后放回冰箱内保存。 2. 试剂使用记录:试剂的使用随时登记在试剂使用记录表上,每月进行统计,并核对库存。 三、 仪器的准备和维护保养:见仪器的操作规程 四、 标准品: 1. 试剂盒配套标准:urea、UA、GLU、PA、Ig、TBA、APOA1、APOB、TC、TG、P、Ca、Mg、Cr、TP、ALB。 2. 选择使用标准的试剂盒:总胆红素、直接胆红素、Ig、ASO、CRP、RF 3.无标准品的项目:ALT、AST、ALP、GGT、LDH、CK、CKMB。 五、 质控品:朗道复合质控品、朗道特定蛋白质控品、朗道脂类质控品、沃文特CYS-C质控品、沃文特ADA质控品。 (一) 允许范围的制定 1.靶值的确定(中心线):每次更换批号时都要重新进行靶值的确定 新批号的质控品应与当前使用的质控品一起测定,根据20批次的结果(剔除3s之外的结果)的平均值作为暂定中心线,可作为下一个月的靶值。以后各月应进行核对或作累积计算均值作为靶值。。 1. 标准差的制定:根据卫生部临床检验中心推荐的RCV为依据,结合本室测定的标准差制定较为合理的标准差 2. 质量控制规则:采用Westgard的5 个质控规则:12s,22s,23s,R4s,10x 六、 质量控制操作程序: (一)标准测定:根据校准测定安排进行标准测定 (二)每日质控测定 ①每日开机测定(在标准测定之后),即时检查是否有失控,如有失控按失控后的处理程序进行。 ②重复测定,见于第一次质控结果失控或不理想的项目需在采取纠正措施之后再次测定,合格后方可决定报告的发放。 (三)失控后的处理程序:见具体文件 (四)质量控制总结 1.每月底打印质控图和月均值、CV等原始数据。 2.进行当月质量控制的小结:内容包括月均值、CV值、不同仪器间月均值动态变化的比较和原因分析,拟采取的解决方案等。 3.每年度的质量控制总结 失控后的处理程序 质控结果失控 随机误差 系统误差 试剂仪器是否问题 仪器 标准品 质控品 试剂错误 YES 排除故障 更换标准品、质控品、试剂 或重新定标 重新定标 解决后重新作质控测定 再次测定质控品 合格 测定患者的标本或发放报告 如果有些不能即时解决的,可对结果进行合理的校正 室间质量评价操作程序 一、填报室间质量评价的计划报表 填报表并邮寄质评费用(由科室统一进行) 二、接收质控品 在收到质控品后,检查质控品是否有破损和缺失,如有需及时报知临床检验中心补缺。 三、质评样品的测定 按照质量评价的安排日期进行测定,保证与常规测定条件一致。 四、质评结果的上报 在规定日期之内通过上网或邮寄方式上报质控结果 五、质评报告的分析 在收到质评回报以后,对结果进行分析,对不满意的项目寻找原因,如属于确切的操作、或有质量错误,及时采取措施纠正。 六、评估采取措施后的效果 在采取措施后,要观察常规质控和病人结果的情况,在下次质评时再次进行核实。 生化实验室校准程序 本实验室的检测系统均为非检测系统,即所用试剂校准均为开放性,非仪器所配套的原装试剂和校准品,故需采用非检测系统的校准方法,建立如下校准程序。 1. 购买仪器配套的试剂和校准品通过各种浓度范围的标本,与本室选用的试剂和校准品的测定结果相比对,达到用检测系统校准非检测系统的目的。 本室仪器有BS-800。相应的试剂为四川沃文特和四川沃文特试剂和校准品。 2. 本室选用的标(校)准品:均用沃文特复合生化校准品及试剂合配套校准品。 校准方法 (1) 两点校正的项目有TP、ALB、CREA、BUN、UA、TB、DB、Ca、Mg、P、GLU、TG、TC。 (2) 多点校正的项目:PA、Ig类、ASO、RF、CRP。 (3) 因数计算的酶为一点校正。 4.校准频度 校准均为适时校准。 5.至少每六个月或下列情况发生时,应进行一次校准 1)试剂的种类或批号改变 2)仪器更换重要部件或大的维护 3)质控有异常趋势或偏移,或超出可接受限时。 6.所有校准均作记录,并写成文件 部分附表 1、 仪器维护记录(附表8、9、10、11) 2、 质量控制记录(附表12、13) 3、 冰箱温度及消毒记录(附表14) 4、 水箱温度记录(附表15) 维护项目(每月) 维 护 记 录 年 1月 2月 3月 4月 5月 6月 7月 8月 9月 10月 11月 12月 1 清洗样本针清洗池 2 清洗试剂针清洗池 3 清洗搅拌针清洗池 4 清洗样本针驱动轴 5 清洗试剂针驱动轴 6 清洗搅拌针驱动轴 操作者 **市安居区人民医院检验科 仪器设备使用维护记录(BS800生化分析仪) (201 年) 工作时间 测试数 使用记录 每日维护 每周维护 使用状态 使用/维护者 开机 预热 关机 温度 相对湿度(%) 五针清洗 电极清洗 检查去离子水连接 检查强化清洗液量 强化清洗/反应杯检测 光度计检测 室间质量评价结果记录 附表12 日 期 质 评 批 次 失 控 项 目 及 情 况 原 因 分 析 处 理 情 况 签名 附表13 室 内 质 控 记 录 年 月 日 期 室 内 质 控 项 目 失 控 内 容 处 理 情 况 签名 试剂冰箱温度及消毒记录表(星星) ( 年)(附表14) 时 间 温 度 消毒液种类 消毒液稀释比例 清洁消毒范围 消毒时间 管 理 人 月 日   冰箱内壁及表面 40min   月 日   冰箱内壁及表面 40min   月 日   冰箱内壁及表面 40min   月 日   冰箱内壁及表面 40min   月 日   冰箱内壁及表面 40min   月 日   冰箱内壁及表面 40min   月 日   冰箱内壁及表面 40min   月 日   冰箱内壁及表面 40min   月 日   冰箱内壁及表面 40min   月 日   冰箱内壁及表面 40min   月 日   冰箱内壁及表面 40min   月 日   冰箱内壁及表面 40min   月 日   冰箱内壁及表面 40min   月 日   冰箱内壁及表面 40min   月 日   冰箱内壁及表面 40min   月 日   冰箱内壁及表面 40min   月 日   冰箱内壁及表面 40min   月 日   冰箱内壁及表面 40min   月 日   冰箱内壁及表面 40min   月 日   冰箱内壁及表面 40min   月 日   冰箱内壁及表面 40min   电热恒温水浴箱温度及消毒记录表(HH W21 .Cu 600) (附表15) 时 间 温 度 消毒液种类 消毒液稀释比例 清洁消毒范围 消毒时间 管 理 人 月 日   冰箱内壁及表面 40min   月 日   冰箱内壁及表面 40min   月 日   冰箱内壁及表面 40min   月 日   冰箱内壁及表面 40min   月 日   冰箱内壁及表面 40min   月 日   冰箱内壁及表面 40min   月 日   冰箱内壁及表面 40min   月 日   冰箱内壁及表面 40min   月 日   冰箱内壁及表面 40min   月 日   冰箱内壁及表面 40min   月 日   冰箱内壁及表面 40min   月 日   冰箱内壁及表面 40min   月 日   冰箱内壁及表面 40min   月 日   冰箱内壁及表面 40min   月 日   冰箱内壁及表面 40min   月 日   冰箱内壁及表面 40min   月 日   冰箱内壁及表面 40min   月 日   冰箱内壁及表面 40min   月 日   冰箱内壁及表面 40min   月 日   冰箱内壁及表面 40min   月 日   冰箱内壁及表面 40min   本文档由香当网(https://www.xiangdang.net)用户上传

    下载文档到电脑,查找使用更方便

    文档的实际排版效果,会与网站的显示效果略有不同!!

    需要 5 香币 [ 分享文档获得香币 ] 0 人已下载

    下载文档