土壤中分解尿素细菌分离计数
第学时教学设计
学目标：
知识目标
1简述稀释涂布板法分离微生物进行微生物计数实验原理
2说出选择性培养基鉴性培养基途
3纳分离纯化微生物原理方法
力目标
1学会制备土壤样稀释液
2学会稀释涂布法菌样液接种固体培养基板
3学会稀释涂布板法进行微生物数量测定方法
情感态度价值观目标
1体验科学知识形成程加深科学质理解
2体会实验活动中合作学效性养成严谨科学态度
学重点难点：
微生物选择培养分离计数等技术原理方法
教材分析课时安排：
土壤中分解尿素细菌分离计数教版高中生物（选修1）专题2微生物培养应第二课题学生已学关培养基菌技术基知识掌握板划线法稀释涂布法分离纯化微生物实验操作基础研究培养基微生物选择作测定数量中关特定菌株选择策略等知识性容土壤溶液稀释菌落数量统计等操作性容难度较探究性较强培养学生设计实验动手操作等科学探究力提高生物科学素养素材
课题教学实施中关键两点：① 教师处理知识性容操作性容关系学生理解特定菌株选择策略学关实验方法操作程序② 处理课课关系课题实验操作时间长操作前制备培养基培养基操作具进行灭菌操作培养时间微生物进行观察需较长时间需教师精心设计教学程序统筹安排教学时间
根教材特点课题教学分2课时进行2课时间应留2 d左右间隔便进行微生物培养观察教学设计针第课时
教学准备：
1 土壤样品采集土壤溶液配制
保证实验取预期效果应选择常施尿素农田铲表土采集3～8 cm深度范围土壤回实验室土壤中植物枯枝败叶杂物托盘天称取样品10 g加入盛90 g菌水锥形瓶中震荡10 min制101土壤溶液制备完成置冰箱冷藏室备（1～2 d）
2配制培养基进行高压蒸气灭菌
配制牛肉膏蛋白胨固体培养基（配方：牛肉膏5 g蛋白胨10 g氯化钠5 g琼脂20 g加热溶解加水定容1 000 mL条件具备琼脂糖代琼脂） 分装100 mL 带棉塞锥形瓶中瓶25 mL
配制尿素固体培养基（配方：葡萄糖10 g尿素1 gKH2PO4 14 gNa2HPO4 21gMgSO4・7H2O 02 g琼脂15 g加热溶解定容1 000 mL）分装100 mL 带棉塞锥形瓶中瓶25 mL
述分装两种培养基装45 mL 蒸馏水带棉塞试装99 mL 蒸馏水250 mL锥形瓶包装培养皿进行高压蒸气灭菌
教学程
1导入新课
教师讲解：尿素动物体蛋白质代谢终产物农业生产中常化肥农作物直接吸收利尿素土壤微生物产生分泌脲酶通分解土壤中尿素身植物生长提供氮元素引出课题：特定土壤中分解尿素微生物数量少？土壤中众微生物中分离出分解尿素微生物？
2分析原理学生尝试进行实验设计
教师介绍Taq细菌发现选择程引导学生认识研究微生物分离培养研究微生物利基础选择出符合需特定微生物微生物生理代谢特点出发创造利目菌株生长条件时抑制阻止微生物生长基础教师引导学生提出实验初步设想尿素惟氮源配制培养基阻止利尿素微生物生长筛选出分解尿素微生物学生实验组单位进行实验设计实验综合性强难度学生设计实验流程时存少困难教师方面鼓励组部开展讨逐步修正设计方面适时参组讨程中提出合理建议
3总结设计结果出行实验流程
组展示设计结果组织全体学生讨教师予评价终出行实验流程求学生明确步骤具体目根教师课前进行预实验取土壤样品中分解尿素微生物约15×108g选择学生进行104105两种土壤稀释液涂布接种样保证实验效果减少器材试剂量节约教学时间提高教学效率时牛肉膏蛋白胨固体培养基培养作实验便学生充分理解认识选择性培养基设计策略选择效果
4学生分组操作
节约教学时间教师课前前期备牛肉膏蛋白胨固体培养基尿素固体培养基电磁炉加热融化课前置80 ℃水浴中进行保温保持融化状态便学生时取
倒板：融化两种培养基分发实验组指导规范倒板两种融化固体培养基倒入已灭菌培养皿中100 mL锥形瓶中盛25 mL培养基倒两板实验组制两种板四制作完成分编号置实验台等冷凝固
配制104105土壤稀释液：101土壤溶液灭菌装45 mL 蒸馏水带棉塞试装99 mL 蒸馏水250 mL锥形瓶分发组教师指导学生制备104105两种土壤稀释液具体方法教师直接出组行讨制定方法学生微量移液器熟悉教师应予指导
接种菌液分离尿素分解菌：教师指导学生微量移液器取01 mL104105土壤稀释液分加入装牛肉膏蛋白胨培养基尿素固体培养基培养皿中涂布器酒精灯火焰附开培养皿加入菌液均匀涂布整培养基盖培养皿倒置37℃恒温培养箱中培养
第课时第二课时教学实施前教师组织学生定期观察培养情况
观察培养结果计算：2 d观察较牛肉膏蛋白胨培养基尿素固体培养基中菌落形态计数明显发现牛肉膏蛋白胨培养基菌落形态样数目较稀释倍数增加菌落数目减少尿素培养基菌落形态较单数目明显少应稀释倍数牛肉膏蛋白胨培养基菌落学生根计数结果计算出土壤中分解尿素微生物数量例学生计数105稀释倍数培养基出现均菌落数60克土壤中尿素分解菌数量60×5×105×103×108g
教学反思：
课题关特定菌株选择策略等知识性容土壤溶液稀释菌落数量统计等操作性容难度较探究性较强学起非常吃力预料中老师定教学程中认真细致学生指导时课时学做准备
板书设计：
土壤中分解尿素细菌分离计数（）
课题背景：
CO（NH2）2CO2+NH3+H2O
二研究思路：
（）筛选菌株
提供利目菌株生长（包括营养温度pH等）时抑制微生物生长
选择培养基：微生物学中允许特定种类微生物生长时抑制阻止种类微生物生长培养基称做选择培养基
（二）统计菌落数目
般选择菌落数30－300板进行计数
（三）设置（完全培养基选择培养基）
三实验设计
土壤取样→样品稀释→微生物培养观察
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第学时教学设计
学目标：
知识目标
1简述稀释涂布板法分离微生物进行微生物计数实验原理
2说出选择性培养基鉴性培养基途
3纳分离纯化微生物原理方法
力目标
1学会制备土壤样稀释液
2学会稀释涂布法菌样液接种固体培养基板
3学会稀释涂布板法进行微生物数量测定方法
情感态度价值观目标
1体验科学知识形成程加深科学质理解
2体会实验活动中合作学效性养成严谨科学态度
学重点难点：
微生物选择培养分离计数等技术原理方法
教材分析课时安排：
土壤中分解尿素细菌分离计数教版高中生物（选修1）专题2微生物培养应第二课题学生已学关培养基菌技术基知识掌握板划线法稀释涂布法分离纯化微生物实验操作基础研究培养基微生物选择作测定数量中关特定菌株选择策略等知识性容土壤溶液稀释菌落数量统计等操作性容难度较探究性较强培养学生设计实验动手操作等科学探究力提高生物科学素养素材
课题教学实施中关键两点：① 教师处理知识性容操作性容关系学生理解特定菌株选择策略学关实验方法操作程序② 处理课课关系课题实验操作时间长操作前制备培养基培养基操作具进行灭菌操作培养时间微生物进行观察需较长时间需教师精心设计教学程序统筹安排教学时间
根教材特点课题教学分2课时进行2课时间应留2 d左右间隔便进行微生物培养观察教学设计针第课时
教学准备：
1 土壤样品采集土壤溶液配制
保证实验取预期效果应选择常施尿素农田铲表土采集3～8 cm深度范围土壤回实验室土壤中植物枯枝败叶杂物托盘天称取样品10 g加入盛90 g菌水锥形瓶中震荡10 min制101土壤溶液制备完成置冰箱冷藏室备（1～2 d）
2配制培养基进行高压蒸气灭菌
配制牛肉膏蛋白胨固体培养基（配方：牛肉膏5 g蛋白胨10 g氯化钠5 g琼脂20 g加热溶解加水定容1 000 mL条件具备琼脂糖代琼脂） 分装100 mL 带棉塞锥形瓶中瓶25 mL
配制尿素固体培养基（配方：葡萄糖10 g尿素1 gKH2PO4 14 gNa2HPO4 21gMgSO4・7H2O 02 g琼脂15 g加热溶解定容1 000 mL）分装100 mL 带棉塞锥形瓶中瓶25 mL
述分装两种培养基装45 mL 蒸馏水带棉塞试装99 mL 蒸馏水250 mL锥形瓶包装培养皿进行高压蒸气灭菌
教学程
1导入新课
教师讲解：尿素动物体蛋白质代谢终产物农业生产中常化肥农作物直接吸收利尿素土壤微生物产生分泌脲酶通分解土壤中尿素身植物生长提供氮元素引出课题：特定土壤中分解尿素微生物数量少？土壤中众微生物中分离出分解尿素微生物？
2分析原理学生尝试进行实验设计
教师介绍Taq细菌发现选择程引导学生认识研究微生物分离培养研究微生物利基础选择出符合需特定微生物微生物生理代谢特点出发创造利目菌株生长条件时抑制阻止微生物生长基础教师引导学生提出实验初步设想尿素惟氮源配制培养基阻止利尿素微生物生长筛选出分解尿素微生物学生实验组单位进行实验设计实验综合性强难度学生设计实验流程时存少困难教师方面鼓励组部开展讨逐步修正设计方面适时参组讨程中提出合理建议
3总结设计结果出行实验流程
组展示设计结果组织全体学生讨教师予评价终出行实验流程求学生明确步骤具体目根教师课前进行预实验取土壤样品中分解尿素微生物约15×108g选择学生进行104105两种土壤稀释液涂布接种样保证实验效果减少器材试剂量节约教学时间提高教学效率时牛肉膏蛋白胨固体培养基培养作实验便学生充分理解认识选择性培养基设计策略选择效果
4学生分组操作
节约教学时间教师课前前期备牛肉膏蛋白胨固体培养基尿素固体培养基电磁炉加热融化课前置80 ℃水浴中进行保温保持融化状态便学生时取
倒板：融化两种培养基分发实验组指导规范倒板两种融化固体培养基倒入已灭菌培养皿中100 mL锥形瓶中盛25 mL培养基倒两板实验组制两种板四制作完成分编号置实验台等冷凝固
配制104105土壤稀释液：101土壤溶液灭菌装45 mL 蒸馏水带棉塞试装99 mL 蒸馏水250 mL锥形瓶分发组教师指导学生制备104105两种土壤稀释液具体方法教师直接出组行讨制定方法学生微量移液器熟悉教师应予指导
接种菌液分离尿素分解菌：教师指导学生微量移液器取01 mL104105土壤稀释液分加入装牛肉膏蛋白胨培养基尿素固体培养基培养皿中涂布器酒精灯火焰附开培养皿加入菌液均匀涂布整培养基盖培养皿倒置37℃恒温培养箱中培养
第课时第二课时教学实施前教师组织学生定期观察培养情况
观察培养结果计算：2 d观察较牛肉膏蛋白胨培养基尿素固体培养基中菌落形态计数明显发现牛肉膏蛋白胨培养基菌落形态样数目较稀释倍数增加菌落数目减少尿素培养基菌落形态较单数目明显少应稀释倍数牛肉膏蛋白胨培养基菌落学生根计数结果计算出土壤中分解尿素微生物数量例学生计数105稀释倍数培养基出现均菌落数60克土壤中尿素分解菌数量60×5×105×103×108g
教学反思：
课题关特定菌株选择策略等知识性容土壤溶液稀释菌落数量统计等操作性容难度较探究性较强学起非常吃力预料中老师定教学程中认真细致学生指导时课时学做准备
板书设计：
土壤中分解尿素细菌分离计数（）
课题背景：
CO（NH2）2CO2+NH3+H2O
二研究思路：
（）筛选菌株
提供利目菌株生长（包括营养温度pH等）时抑制微生物生长
选择培养基：微生物学中允许特定种类微生物生长时抑制阻止种类微生物生长培养基称做选择培养基
（二）统计菌落数目
般选择菌落数30－300板进行计数
（三）设置（完全培养基选择培养基）
三实验设计
土壤取样→样品稀释→微生物培养观察
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