核心解读HEXINJIEDU
1.微生物细菌肠杆菌间样关系?
(1)概念涵:关系图解见
(2)结构:三者结构简单形体微生物细胞角度结构具体:
2.培养肠杆菌LB培养基中种物质什选择物质物质什作呢?
(1)微生物营养物质需求配制出供生长繁殖营养基质——培养基然种培养基具体配方般含五营养素水机盐碳源(提供碳元素)氮源(提供氮元素)生长子(细菌需相物种差异补充身合成合成力较弱生长繁殖必需物质)见表:
微生物营养素
定义
功
类型
化合物类型
常物质
碳源[源学&科&网]
构成微生物细胞代谢产物中碳架源营养物质称碳源[源学+科+网Z+X+X+K][源学科网]
构成细胞物质供应微生物生长发育需量
机碳(养型微生物)
机物[源ZxxkCom]
CO2NaHCO3CaCO3等
机碳(异养型微生物)
蛋白质核酸类
牛肉膏蛋白胨花生粉饼明胶氨基酸等
糖类脂质等
葡萄糖蔗糖淀粉等
氮源
构成微生物细胞物质代谢产物中氮素源营养物质称氮源
提供合成原生质细胞结构原料般作源
机氮
铵盐
NH3(NH4)2SO4
硝酸盐
KNO3
N2
空气
机氮
牛肉膏蛋白胨醇母膏尿素明胶等
生长子
类微生物正常代谢必少简单碳氮源行合成需极微量机物
般酶核酸组成成分
酵母膏玉米浆黄豆饼粉动植物组织液麦芽汁等复合维生素
水
作:组成成分反响介质物质运输媒体热良导体
机盐
作:维持渗透压pH等
(2)肠杆菌LB培养基
微生物营养素
实验中肠杆菌LB培养基配方
培养基配方微生物营养素应关系
LB液体培养基
LB固体培养基
氮源
碳源
机盐
生长子
水
琼脂1 g
蛋白胨05 g
提供肠杆菌氮源碳源需求
酵母提取物025 g
提供生长子
NaCl 05 g
提供机盐
水 50 mL
提供水
(3)外配方中注意pH等
3.该实验中操作原
(1)三角锥形瓶中LB固体培养基灭菌需冷60 ℃左右时转移分装制成固体面培养基什?什简易方法快速估计该温度?
三角锥形瓶中LB固体培养基中琼脂98 ℃熔化44 ℃凝固冷60 ℃左右时会温度高烫手易操作会温度低三角锥形瓶中培养基凝固终法转移分装制成新面培养基
简易估计温度方法:手触摸灭菌三角锥形瓶感觉锥形瓶烫手转刚刚烫手时说明已冷60 ℃左右
(2)进行恒温培养时什培养皿倒置?
恒温培养时培养基中水分会水蒸气形式蒸发倒放培养皿会水蒸气凝结成水滴留盖子果正放培养皿水分形成水滴会落入培养基外表扩散开果培养皿中已形成菌落菌落中菌会水扩散菌落间相互影响难分成单菌落达离目培养皿中菌落盖子掉落水污染
(3)肠杆菌接种环斜面转移液体培养基中培养时什接种环必须先深入斜面冷取斜面菌体?
接种环取菌体前酒精灯火焰灼烧灭菌直灼烧红温度高假设冷直接取斜面菌体菌体接触高温接种环死亡导致肠杆菌转移培养失败
(4)划线法离肠杆菌中第次次划线前灼烧接种环原样?划线结束然灼烧接种环什呢?
然次灼烧灭菌灭菌种原样
灼烧接种环时间
消灭菌体
原
第次划线前
杂菌
防止杂菌侵入造成污染
次划线前
次划线结束残留接种环实验菌(实验:肠杆菌)
次划线时接种环菌次划线末端通划线次数增加次划线时菌种数目逐渐减少终获单菌落实现菌离
次划线结束
防止实验菌残留接种环污染环境感染实验员
(5)划线法离肠杆菌时次划线样?划线起点什求?什样求呢?
次划线
次2次划线间关系
次划线分布
图形辅助理解
划线求
出现线条重叠
第二次划线操作总次划线末端开始
区划线第区相连
样求原
线条末端细菌数目线条起始处少
划线线条末端细菌数目线条起始处少次次划线末端开始细菌数目着划线次数增加逐渐减少终单细菌繁殖单菌落
假设相连次划线末端处细菌第次叠加细菌数目少细菌数目着划线次数增加逐渐减少终难获单菌落
4.消毒灭菌样?
概念
常方法
应范围
消毒
较温物理化学方法仅杀死物体外表部局部体害微生物(包括芽孢孢子)
煮沸消毒法:100 ℃煮沸5~6 min
般物品
巴氏消毒法:70~75 ℃煮30 min80 ℃煮15 min
耐高温液体牛奶
化学药剂消毒法
酒精擦拭双手氯气消毒水源等
灭菌
强烈理化素杀死物体外微生物(包括芽孢孢子)
灼烧灭菌:酒精灯火焰
接种工具灭菌
干热灭菌:160~170 ℃灭菌1~2 h
玻璃器皿金属工具灭菌
高压蒸汽灭菌:121 ℃条件灭菌15~30 min
培养基容器灭菌
5实验中需解根底知识更便掌握理解呢?
(1)牛肉膏蛋白胨知识
牛肉膏蛋白胨源动物原料含糖维生素机氮等营养物质
1 000 mL牛肉膏蛋白胨培养基营养构成
培养基组分
提供营养
牛肉膏 5 g
碳源磷酸盐维生素
蛋白胨 10 g
氮源维生素
NaCl 5 g
机盐
H2O 定容1 000 mL
氢元素氧元素
(2)巴氏消毒法知识
巴氏消毒法称做低温消毒法
日常生活中常煮沸消毒法100 ℃煮沸 5~6 min 杀死微生物营养细胞局部芽孢耐高温液体牛奶巴氏消毒法70~75 ℃煮30 min80 ℃煮15 min杀死牛奶中微生物牛奶营养成分破坏
题例领悟TILILINGWU
例题1 操作属灭菌( )
A.酒精擦拭实验员双手
B.氯气处理水源
C.接种环酒精灯火焰灼烧红
D.杀死物体外表部局部体害微生物
解析:题考查微生物实验中灭菌理解微生物培养说灭菌操作十分重目获纯洁培养物关键防止外切杂菌入侵仅仅体害微生物灭菌操作般强烈物化素(:灼烧灭菌高压蒸汽灭菌等)较温物化方法
答案:C
消毒灭菌两者物化手段否强烈外消灭微生物容灭菌消切杂菌消毒仅仅杀死体害微生物消毒法消灭微生物芽孢孢子
例题2 关板划线操作表达正确选项 …
( )
A.灼烧接种环防止杂菌干扰应立伸入菌液取菌种
B.划线结束防止实验菌污染环境感染操作者必须次灼烧接种环
C.第次划线前灼烧接种环次划线前灼烧接种环目相
D.划线时区域定第区域相连达首尾相接
解析:题考查划线法离肠杆菌掌握实验重点难点A操作错误灼烧接种环冷前方取菌种免温度太高杀死菌种B操作完全正确C表达错误灼烧目完全第次划线前灼烧杀死杂菌保证实验菌纯洁灼烧杀死残留接种环实验菌保证实验菌划线次数增加减少次划线菌种次划线末端D操作正确应该相连样次划线受第次划线干扰
答案:B
肠杆菌离采划线离法方法十分重仅知步具体操作知然关注考前须知防止踏入误区
堂训练SUITANGXUNLIAN
1细菌培养程中分采高压蒸汽酒精火焰灼烧等种处理方法次杀灭部位杂菌( )
A.接种针手培养基 B.高压锅手接种针
C.培养基手接种针 D.接种针手高压锅
答案:C 解析:灭菌微生物培养程中重环节中高压蒸汽杀灭培养基中杂菌酒精擦拭双手灭手杂菌接种针火焰灼烧灭接种针菌C选项正确
2关倒板操作姿势表达中正确选项( )
A.右手名指指夹持含固体培养基三角瓶封口膜
B.右手拇指食指着三角瓶
C.左手着培养皿盖子放桌子
D.倒板时防止温度高暂时熄灭酒精灯
答案:A 解析:倒板技术微生物技术中根技术A正确B中手指姿势错误C错培养皿盖放桌D中熄灭酒精灯整程需酒精灯火焰旁完成
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