酶抑制分光光度法

酶抑制分光光度法
 
蔬菜农药残留速测检测方法酶抑制分光光度法原理：机磷氨基甲酸酯类农药具抑制昆虫中枢周围神系统中乙酰胆碱酯酶活性造成神传导介质乙酰胆碱积累影响正常传导昆虫中毒致死原理检测类农药食品中综合残留量种方法家蝇动物组织中提取乙酰胆碱酯酶（AChE）乙酰胆碱酯酶蔬菜样提取液混合碘化乙酰硫代胆碱（ATChI）底物二硫双硝基苯甲酸（DTNB）显色剂段时间色根吸光值计算乙酰胆碱酯酶受抑制程度
造成蔬菜水果农药残留问题机磷氨基甲酸酯类农药果蔬菜提取液中含农药残留量低酶活性抑制试验中加入基质水解水解产物加入显色剂反应产生颜色水解产物身颜色果蔬菜提取液中含农药残留量较高时酶活性抑制基质水解加入显色剂时显色颜色变化分光光度计测定吸光度变化计算出抑制率判断农药（机磷氨基甲酸酯类）残留情况抑制率农药浓度呈正相关残留农药乙酰胆碱酯酶活性抑制浓度越高抑制率越高仪器通测定酶底物显色剂显色反应变色速率空白较求酶抑制率判定农药残留量否超标农药残留速测检测结果判断标准（国标）中明确酶抑制率≥50时蔬菜中某种机磷氨基甲酸酯类农药残毒超标
酶抑制率法部分农药检出限
 
农药名称
检出限／（㎎／㎏）
农药名称
检出限／（㎎／㎏）
敌敌畏
01
氧化乐果
08
硫磷
10
甲基异柳磷
50
辛硫磷
03
灭威
01
甲胺磷
20
丁硫克百威
005
马拉硫磷
40
敌百虫
02
乐果
30
呋喃丹
005
 
 
 
AChE
 
化学反应式：
I(CH3)3NCH2CH2SOCCH3+H2O         I(CH3)3NCH2CH2SH+CH3COOH
（ATChI）
碘化硫代胆碱55二硫双硝基苯甲酸（DTNB）作生成5硫基2硝基苯甲酸（黄色）溶液吸光度测出乙酰胆碱酯酶催化活度


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