形考作业4
提交实验报告
植物生理学实验报告
实验题目
叶绿素a叶绿素b含量测定
日期
班级
姓名
实验目
熟悉未分离叶绿素溶液中测定叶绿素a叶绿素b方法计算
实验原理
• 叶绿素提取液中时含叶绿素a叶绿素b二者吸收光谱存着明显重叠分离叶绿素a叶绿素b情况时测定叶绿素a叶绿素b浓度分测定663nm645nm(分叶绿素a叶绿素b红光区吸收峰)光吸收然根LambertBeer定律计算出提取液中叶绿素a叶绿素b浓度
• A6638204ρa+927ρb (1)
• A6451675ρa+4560ρb (2)
• 公式中ρa叶绿素a浓度ρb叶绿素b浓度(单位gL)8204927 分叶绿素a叶绿素b663nm吸收系数(浓度1gL光路宽度1cm时吸光度值)16754560分叶绿素a叶绿素b645nm吸收系数混合液某波长光吸收等组分波长光吸收
式整理式:
• ρa00127A663000269A645 (3)
• ρb00229A645000468A663 (4)
叶绿素浓度改mgL式变:
• ρa127A663269A645 (5)
• ρb229A645468A663 (6)
• ρTρa+ρb802A663+2021A645 (7)
• ρT叶绿素总浓度
实验器材
1 实验仪器分光光度计离心机天剪刀研钵漏斗移液
2 实验药品:丙酮碳酸钙
3 实验材料:植物叶片:①陆生花生:水生花生 ②叶黄杨新叶:叶黄杨老叶
实验步骤
1色素提取
取新鲜叶片剪粗叶脉剪成碎块称取05g放入研钵中加纯丙酮5ml少许CaCO3石英砂研磨成匀浆加80丙酮5ml匀浆转入离心适量80丙酮洗涤研钵转入离心离心5min弃沉淀清液80丙酮定容20ml
2测定OD值
取述色素提取液1ml加80丙酮4ml稀释转入色杯中80丙酮分测定663nm645nm处OD值
4 计算
式(5)(6)(7)分计算色素提取液中叶绿素叶绿素叶绿素浓度根稀释倍数分计算克鲜重叶片中色素含量
实验结果
水花生(陆生)
水花生(水生)
Ρa(mgL)
2848
4433
ρb(mgL)
1098
1258
ρT(mgL)
3946
5691
叶绿素a含量(mgg鲜重)
01424
022165
叶绿素b含量(mgg鲜重)
00549
00629
叶绿素总含量(mgg鲜重)
01973
085065
珊瑚树(新叶)
珊瑚树(成熟叶)
Ρa(mgL)
4026
5682
ρb(mgL)
1408
2310
ρT(mgL)
5434
7992
叶绿素a含量(mgg鲜重)
02013
02841
叶绿素b含量(mgg鲜重)
00704
01155
叶绿素总含量(mgg鲜重)
02717
03996
实验注意事项
1 学会设计组合进行实验研究
2 实验时样品标清楚混淆
3 学会分光光度计
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