植物组织培养问题释疑
问题
选修3现代生物技术专题中常会出现许影响操作素植物组织培养脱分化分化影响素
植物组织培养影响素？
植物组培影响素
试题：（2018年4月浙江选考试题）取田间品种水稻幼胚先进行 然接种培养基中培养幼胚发生 形成愈伤组织进行继代培养含重组质粒农杆菌侵染愈伤组织培养愈伤组织便获抗虫转基水稻影响愈伤组织否成功生出植株素：培养条件光温培养基配方植物激素配 （答 2点）
答案：消毒脱分化水稻基型愈伤组织继代次数
解析：进行组织培养前先外植体（题中幼胚）进行消毒幼胚先发生脱分化形成愈伤组织影响愈伤组织够成功生出植株素：培养条件光温培养基配方植物激素配水稻基型愈伤组织继代次数等
植物组织培养影响素外
遗传特性生理特性器官组织类型产生愈伤组织器官分化明显基型决定体发育年龄发育细嫩组织容易脱分化愈伤组织容易诱导器官分化愈伤组织生理状态继代次数越器官分化力越差
外
营养条件（机盐机物植物激素天然复合物等）环境条件（渗透压光温度湿度pH等）
[资料1]快速繁殖颤杨时果枝条均分成三段结果发现顶端段枝条侧芽离体培养时繁殖系数高中间次基部低
结：外植体植株着生位置脱分化分化定影响
[资料2]MS培养基中加入质量分数05mgL6BA质量分数05mgLNAA诱导胡萝卜形成愈伤组织MS培养基中加入质量分数2mgLKT（激动素）质量分数02mgLNAA诱导胡萝卜生出丛芽MS培养基中加入质量分数01mgLNAA诱导胡萝卜生根
结：生长素细胞分裂素例影响细胞脱分化分化
[资料3]外植体培养黑暗条件10天左右形成高度液泡化愈伤组织外植体培养光条件发现细胞分化产生维束等组织形成愈伤组织
结：愈伤组织形成需避光
[资料4]研究烟草组织培养时发现烟草芽形成28度12度33度形成率均低
结：脱分化分化需适宜温度条件进行
问题二
家知道植物全性动物细胞容易植物组织培养会受许素影响浙科版选修3教材第23页较篇幅专门讲植物组织培养影响素（示）
选修3教材第23页
影响植物组织培养全性表现素？
典型试题解析
试题：（2018年4月浙江省选考试题）回答基工程植物克隆关问题
（1）含某抗虫基载体含卡霉素抗性基载体pBI121均限制性核酸切酶EcoR I酶切切口处形成 选取含抗虫基DNA片段切割pBI121DNA连接酶连接两片段相邻处形成 获重组质粒
（2）已知CaCl2处理细菌会改变某生理状态取CaCl2处理农杆菌重组质粒离心进行混合等操作重组质粒进入农杆菌完成 实验离心中加入液体培养基置摇床慢速培养段时间目 表达卡霉素抗性基量增殖
（3）取田间品种水稻幼胚先进行 然接种培养基中培养幼胚发生 形成愈伤组织进行继代培养含重组质粒农杆菌侵染愈伤组织培养愈伤组织便获抗虫转基水稻影响愈伤组织否成功生出植株素：培养条件光温培养基配方植物激素配 （答2点）
答案：
（1）粘性末端磷酸二酯键
（2）转化CaCl2处理农杆菌恢复细胞正常状态
（3）消毒脱分化水稻基型愈伤组织继代次数
解析：
（1）限制性核酸切酶EcoR I酶切含某抗虫基载体含卡霉素抗性基载体pBI121切口处形成黏性末端DNA连接酶连接含抗虫基DNA片段切割pBI121两片段相邻处形成磷酸二酯键获重组质粒
（2）取CaCl2处理农杆菌重组质粒离心进行混合等操作重组质粒进入农杆菌完成转化实验离心中加入液体培养基置摇床慢速培养段时间目：CaCl2处理农杆菌恢复细胞正常状态
（3）进行植物组织培养时取田间品种水稻幼胚先进行消毒清表面附着微生物然接种培养基中培养幼胚发生脱分化形成愈伤组织进行继代培养影响愈伤组织否成功生出植株素培养条件光温培养基配方植物激素配水稻基型愈伤组织继代次数等
植物组织培养影响素
植物离体培养程中影响植物细胞形态发生素外外培养植物细胞培养基环境条件植物细胞遗传性生理状态
1培养基环境条件
（1）培养基
培养基中生长调节类物质植物细胞形态发生较影响根芽分化研究中发现根芽分化取决生长素细胞分裂素配著名控制器官分化激素模式（图）
般情况器官发生仅取决两种激素配浓度关然激素定作
培养基营养成分器官分化胚状体形成重作例生根培养机盐离子求低常减半MS培养基糖种类浓度影响器官分化胚状体发生
培养基物理性质pH渗透压固态液态细胞形态发生影响培养基渗透压影响植物形态发生重素糖培养基渗透压起决定作
（2）环境条件
光温度器官分化胚状体形成重影响组织培养光求影响器官分化胚状体形成光包括光强光周期光质通常许培养物需1000－1500lx光强光长度正常光周期反应植物器官分化影响光质中红光利光生长 般培养温度25度左右温度适范围高低变化器官发生数量质量影响
2培养材料生理条件
（1）器官组织类型
植物器官组织产生愈伤组织器官分化明显差异材料基型决定胡萝卜烟草等培养物容易诱导器官形成棉花豆类等较难种植物器官组织形成愈伤组织般器官发生差异显著
（2）体发育年龄
外植体幼嫩较容易形成愈伤组织容易诱导器官分化
（3）愈伤组织生理状态
愈伤组织年龄器官分化影响般愈伤组织继代次数越器官分化力越低
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问题
选修3现代生物技术专题中常会出现许影响操作素植物组织培养脱分化分化影响素
植物组织培养影响素？
植物组培影响素
试题：（2018年4月浙江选考试题）取田间品种水稻幼胚先进行 然接种培养基中培养幼胚发生 形成愈伤组织进行继代培养含重组质粒农杆菌侵染愈伤组织培养愈伤组织便获抗虫转基水稻影响愈伤组织否成功生出植株素：培养条件光温培养基配方植物激素配 （答 2点）
答案：消毒脱分化水稻基型愈伤组织继代次数
解析：进行组织培养前先外植体（题中幼胚）进行消毒幼胚先发生脱分化形成愈伤组织影响愈伤组织够成功生出植株素：培养条件光温培养基配方植物激素配水稻基型愈伤组织继代次数等
植物组织培养影响素外
遗传特性生理特性器官组织类型产生愈伤组织器官分化明显基型决定体发育年龄发育细嫩组织容易脱分化愈伤组织容易诱导器官分化愈伤组织生理状态继代次数越器官分化力越差
外
营养条件（机盐机物植物激素天然复合物等）环境条件（渗透压光温度湿度pH等）
[资料1]快速繁殖颤杨时果枝条均分成三段结果发现顶端段枝条侧芽离体培养时繁殖系数高中间次基部低
结：外植体植株着生位置脱分化分化定影响
[资料2]MS培养基中加入质量分数05mgL6BA质量分数05mgLNAA诱导胡萝卜形成愈伤组织MS培养基中加入质量分数2mgLKT（激动素）质量分数02mgLNAA诱导胡萝卜生出丛芽MS培养基中加入质量分数01mgLNAA诱导胡萝卜生根
结：生长素细胞分裂素例影响细胞脱分化分化
[资料3]外植体培养黑暗条件10天左右形成高度液泡化愈伤组织外植体培养光条件发现细胞分化产生维束等组织形成愈伤组织
结：愈伤组织形成需避光
[资料4]研究烟草组织培养时发现烟草芽形成28度12度33度形成率均低
结：脱分化分化需适宜温度条件进行
问题二
家知道植物全性动物细胞容易植物组织培养会受许素影响浙科版选修3教材第23页较篇幅专门讲植物组织培养影响素（示）
选修3教材第23页
影响植物组织培养全性表现素？
典型试题解析
试题：（2018年4月浙江省选考试题）回答基工程植物克隆关问题
（1）含某抗虫基载体含卡霉素抗性基载体pBI121均限制性核酸切酶EcoR I酶切切口处形成 选取含抗虫基DNA片段切割pBI121DNA连接酶连接两片段相邻处形成 获重组质粒
（2）已知CaCl2处理细菌会改变某生理状态取CaCl2处理农杆菌重组质粒离心进行混合等操作重组质粒进入农杆菌完成 实验离心中加入液体培养基置摇床慢速培养段时间目 表达卡霉素抗性基量增殖
（3）取田间品种水稻幼胚先进行 然接种培养基中培养幼胚发生 形成愈伤组织进行继代培养含重组质粒农杆菌侵染愈伤组织培养愈伤组织便获抗虫转基水稻影响愈伤组织否成功生出植株素：培养条件光温培养基配方植物激素配 （答2点）
答案：
（1）粘性末端磷酸二酯键
（2）转化CaCl2处理农杆菌恢复细胞正常状态
（3）消毒脱分化水稻基型愈伤组织继代次数
解析：
（1）限制性核酸切酶EcoR I酶切含某抗虫基载体含卡霉素抗性基载体pBI121切口处形成黏性末端DNA连接酶连接含抗虫基DNA片段切割pBI121两片段相邻处形成磷酸二酯键获重组质粒
（2）取CaCl2处理农杆菌重组质粒离心进行混合等操作重组质粒进入农杆菌完成转化实验离心中加入液体培养基置摇床慢速培养段时间目：CaCl2处理农杆菌恢复细胞正常状态
（3）进行植物组织培养时取田间品种水稻幼胚先进行消毒清表面附着微生物然接种培养基中培养幼胚发生脱分化形成愈伤组织进行继代培养影响愈伤组织否成功生出植株素培养条件光温培养基配方植物激素配水稻基型愈伤组织继代次数等
植物组织培养影响素
植物离体培养程中影响植物细胞形态发生素外外培养植物细胞培养基环境条件植物细胞遗传性生理状态
1培养基环境条件
（1）培养基
培养基中生长调节类物质植物细胞形态发生较影响根芽分化研究中发现根芽分化取决生长素细胞分裂素配著名控制器官分化激素模式（图）
般情况器官发生仅取决两种激素配浓度关然激素定作
培养基营养成分器官分化胚状体形成重作例生根培养机盐离子求低常减半MS培养基糖种类浓度影响器官分化胚状体发生
培养基物理性质pH渗透压固态液态细胞形态发生影响培养基渗透压影响植物形态发生重素糖培养基渗透压起决定作
（2）环境条件
光温度器官分化胚状体形成重影响组织培养光求影响器官分化胚状体形成光包括光强光周期光质通常许培养物需1000－1500lx光强光长度正常光周期反应植物器官分化影响光质中红光利光生长 般培养温度25度左右温度适范围高低变化器官发生数量质量影响
2培养材料生理条件
（1）器官组织类型
植物器官组织产生愈伤组织器官分化明显差异材料基型决定胡萝卜烟草等培养物容易诱导器官形成棉花豆类等较难种植物器官组织形成愈伤组织般器官发生差异显著
（2）体发育年龄
外植体幼嫩较容易形成愈伤组织容易诱导器官分化
（3）愈伤组织生理状态
愈伤组织年龄器官分化影响般愈伤组织继代次数越器官分化力越低
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