精细化学品分析实验
实验 薄层色谱染料分离鉴
实验目
学薄层板制备方法操作技术
二实验原理
1．吸附薄层色谱原理作
吸附薄层色谱作原理吸附柱色谱相区吸附薄层色谱吸附粒度较细装柱中均匀涂布玻璃板塑料板金属箔形成定厚度薄层分离样品制成溶液毛细点薄层端处作流动相溶剂（称展开剂）毛细作点样品端端运动带动样点前进反复次吸附溶解竞争受吸附力较弱溶解度较组分行进较长路程反吸附较强溶解度较组分行程较短组分间拉开距离刮刀分刮组分色点（色带）溶剂萃取蒸溶剂组分纯品
吸附薄层色谱少量（般05g）物质分离更应化合物鉴定分离手段效果检测
作检测手段理种分子极性溶解度分子形状等方面完全相薄层色谱中展开剂爬升高度应相种分子诸方面中总会细微差爬升高度会完全相果分离手段某组分薄层板点样展开点说明该组分种分子 原分离方法达预期效果：果展开变成斑点说明该组分中数种分子原分离手段未达顶期效果
吸附薄层色谱作化合物鉴定手段理种化合物特定移值移值Rf值薄层色谱中化合物样点移动距离展开剂前移动距离值
例图示薄层板（b）中AB两种化合物组成混合溶液点起始线展开剂展开展开剂前爬升高度10化合物A爬
升高度7化合物ARf值07理化合物BRf值04
影响Rf值素包括吸附剂种类活性等级粒度展开剂温度等化合物薄层板重现统Rf值困难仅Rf值鉴定未知化合物取应该已知化合物块薄层板点样作较图（C）示认DE化合物CDE
薄层色谱吸附剂常见硅胶氧化铝两类薄层色谱硅胶分：硅胶H—含胶劲剂硅胶G’含煅石膏胶黏剂硅胶HF254含荧光物质（波长 254nm紫外光观察荧光）硅胶 GF254含煅石膏含荧光剂等类型
硅胶相似氧化铝含黏合剂含荧光剂分氧化铝G氧化铝HF254氧化铝GF254
2．薄层色谱途
实验室中薄层色谱种目
①作柱色谱先导般说某种固定相流动相柱中分
开混合物种固定相流动相薄层板分离开常利薄层色谱柱色谱选择吸附剂淋洗剂
②监控反应进程反应程中定时取样原料反应混合物分点
块薄层板展开观察样点相浓度变化原料点说明反应没进行原料点快变淡产物点快变浓说明反应迅速进行原料点基消失产物点变浓说明反应基完成
③检测分离纯化程柱色谱结晶萃取等分离纯化程中
分离出组分纯化产物溶样点板展开果点说明已完全分离开已纯化展开两斑点说明分离纯化尚未达预期效果
④确定混合物中组分数目般说混合物溶液点样展开出现样点说明混合物中组分
⑤确定两样品否物质样品点块薄层板展开样点升高度相体认定物质升高度肯定物质
⑥根薄层板组分斑点相浓度粗略判断组分相含量
⑦迅速分离出少量纯净样品快反应混合物中分离出少量纯净样品做分析测试扩薄层板面积加薄层厚度混合物样液点成条直线次分离出十毫克约五百毫克样品
实验硅胶作固定相乙酸乙酯甲醇水流动相未知染料混合样染料标准样分点薄层板流动相加展开染料色点直接观察需进行显色处理
染料组分通较薄层板色点位置通Rf值测定进行鉴
三仪器试剂
250mL广口瓶载玻片烧杯玻璃棒烘箱毛细铅笔直尺：滤纸
罗丹明B孔雀绿品红等染料乙醇溶液（1％左右）乙酸乙酯甲醇离子水：青岛硅胶H60数甲基纤维素钠CMCNa
四实验步骤
1．薄层极制备
（1）取 400mL烧杯加入250mL离子水加入 15gCMCNa放煤气灯火加热玻璃棒搅拌直羧甲基纤维素钠溶解放旁静置冷
（2）取载玻片 10块洗涤剂洗涤干净标准水够面形成均匀薄膜然纸擦净表面
（3）称取硅胶 H60 10g置100mL烧杯中加入CMC澄清液边加边磨加入CMC溶液提起玻璃棒时残留液刚滴滴线状流
（4）稠状物药勺倒载玻片然振动均匀铺注意硅胶量必太否铺出硅胶板太厚层折时速度慢效果变差放然琼干
（5）晾干硅胶板心放搪瓷托盘置烘箱中 105℃活化30min
（6）纱手套托盘烘箱取出降温50℃转移干燥器
2点样
毛细薄层板离底边1cm处点加染料标准液未知试样液色点间色点板边距离1cm注意：点样量宜少
3展开
（1）100mL锥形瓶加入39mL乙酸乙酯10mL甲醇 lmL水摇晃
混合均匀展开剂
（2）取250mL广口瓶广口瓶底部放腔直径略圆滤纸
（3）配展开剂倒入广口瓶中注意广口瓶底部液层厚度应05～08cm左右盖瓶盖放置5～10min保证瓶均匀展开剂蒸气饱
（4）点样薄层板斜放入广口瓶中略微倾斜瓶壁快盖顶
底 展开剂均匀升
（5）展开剂前达离板顶端约1cm处取出薄层板铅笔溶剂前处做标记
16）电吹风机薄层板溶剂吹干
17）测量染料样点移动距离展开剂前移动距离
I（8）根染料样点移动距离展开剂前移动距离值测量较染料色斑未知样Rf值定出未知样组成
五实验装置
六实验注意事项
1．CMCNa浓度 5‰～6‰宜太稀硅胶层强度较差容易掉粉
2．硅胶CMCNa混合均匀注意混合物包裹干硅胶颗粒存3．硅胶CMCNa混合稠状物玻璃棒细直线流宜果滴状
流稀应加硅胶果太稠流应加水稀释
4．硅胶铺载玻片硅胶层厚度适中太厚容易硅胶板中间高两边低太 薄容易引起边高中间低两种情况会影响效果
七思考题
1．制备薄层板加入羧甲基纤维素钠作什？果加会出现什
情况？
2．点样浓度太浓时展开程中会出现什情况？
3．薄层色谱板进行活化？
4．展开前层析缸空间什溶剂蒸气预先进行饱？
实验 醋酸甲酯环烷甲醇等混合样品色谱测定
[目求]
1进步掌握色谱定量分析原理
2解校正子含义途测定方法
3学会面积化定量方法
二[基原理]
色谱定量分析定条件测物质重量w 检测器响应值成正：
Ai测组分峰面积hi测组分峰高Fi例常数（峰面积表示时）
Fih例常数（峰高表示时）
定量时需：
（1）准确测量响应信号A h
A h 基定量数h直接测A参数计算求
：A1065hW12
（2 ）准确求校正子F
响应值正组分含量外样品性质关相条件数量相等物质产生信号进行定量分析时需加校正
前述知： 单位峰面积代表样品重量受操作条件影响较F 测定较困难实际操作中采相校正子f′f′组分i 标准物质s绝校正子：
WiWs分测物标准物重量AsAi分测物标准物峰面积f ′检测器类型关检测器结构特性操作条件关
物质量重量摩尔表示：
中MiMs ——分测物标准物分子量
f′ f 文献查直接测量准确称量定重量测物质标准物质混匀进样分测峰面积求校正子
（3）选择合适定量方法
常定量方法种实验采法
法分求出样品中组分峰面积校正子然次求组分百分含量
法优点：简洁进样量需准确条件变化时结果影响
缺点：混合物中组分必须全出峰必须测出峰面积
[仪器试剂]
气相色谱仪（附TCDFID ）微量注射器：1 μL5 μL
三组分混合样：甲醇醋酸甲酯环烷
[色谱条件]
色谱柱：GDX102(60—80 目)
温度：T c——100120℃T D ——150℃T i ——150℃
载气：H2 45 mLmin
三 [实验步骤]
述条件开机调试仪器稳定次进行
1定性分析
（1）调记录纸速5 cmmin 1 μL 注射器进分进甲醇醋酸甲酯环烷 01 μL记录色谱图准确测量峰保留时间（tR ）
（2 ）相条件进01 μL—02 μL 三组分混合样记录色谱图准确测量峰保留时间（tR ）
2测量校正子
分析天准确称取三标准试样瓶中混匀设定条件进样01 μL—02μL记录峰面积
3定量分析
进 01 μL—02 μL 未知混合样记录色谱图测量峰面积
4关机
四 [数处理]
1根保留时间确定峰属
2根称标样重量峰面积计算相校正子（甲醇标准物）
3根未知样品中峰面积化法计算测样品中组分百分含量
五[思考题]
1 化法条件什？
2求校正子？什条件考虑校正子？
仅供参考
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实验 薄层色谱染料分离鉴
实验目
学薄层板制备方法操作技术
二实验原理
1．吸附薄层色谱原理作
吸附薄层色谱作原理吸附柱色谱相区吸附薄层色谱吸附粒度较细装柱中均匀涂布玻璃板塑料板金属箔形成定厚度薄层分离样品制成溶液毛细点薄层端处作流动相溶剂（称展开剂）毛细作点样品端端运动带动样点前进反复次吸附溶解竞争受吸附力较弱溶解度较组分行进较长路程反吸附较强溶解度较组分行程较短组分间拉开距离刮刀分刮组分色点（色带）溶剂萃取蒸溶剂组分纯品
吸附薄层色谱少量（般05g）物质分离更应化合物鉴定分离手段效果检测
作检测手段理种分子极性溶解度分子形状等方面完全相薄层色谱中展开剂爬升高度应相种分子诸方面中总会细微差爬升高度会完全相果分离手段某组分薄层板点样展开点说明该组分种分子 原分离方法达预期效果：果展开变成斑点说明该组分中数种分子原分离手段未达顶期效果
吸附薄层色谱作化合物鉴定手段理种化合物特定移值移值Rf值薄层色谱中化合物样点移动距离展开剂前移动距离值
例图示薄层板（b）中AB两种化合物组成混合溶液点起始线展开剂展开展开剂前爬升高度10化合物A爬
升高度7化合物ARf值07理化合物BRf值04
影响Rf值素包括吸附剂种类活性等级粒度展开剂温度等化合物薄层板重现统Rf值困难仅Rf值鉴定未知化合物取应该已知化合物块薄层板点样作较图（C）示认DE化合物CDE
薄层色谱吸附剂常见硅胶氧化铝两类薄层色谱硅胶分：硅胶H—含胶劲剂硅胶G’含煅石膏胶黏剂硅胶HF254含荧光物质（波长 254nm紫外光观察荧光）硅胶 GF254含煅石膏含荧光剂等类型
硅胶相似氧化铝含黏合剂含荧光剂分氧化铝G氧化铝HF254氧化铝GF254
2．薄层色谱途
实验室中薄层色谱种目
①作柱色谱先导般说某种固定相流动相柱中分
开混合物种固定相流动相薄层板分离开常利薄层色谱柱色谱选择吸附剂淋洗剂
②监控反应进程反应程中定时取样原料反应混合物分点
块薄层板展开观察样点相浓度变化原料点说明反应没进行原料点快变淡产物点快变浓说明反应迅速进行原料点基消失产物点变浓说明反应基完成
③检测分离纯化程柱色谱结晶萃取等分离纯化程中
分离出组分纯化产物溶样点板展开果点说明已完全分离开已纯化展开两斑点说明分离纯化尚未达预期效果
④确定混合物中组分数目般说混合物溶液点样展开出现样点说明混合物中组分
⑤确定两样品否物质样品点块薄层板展开样点升高度相体认定物质升高度肯定物质
⑥根薄层板组分斑点相浓度粗略判断组分相含量
⑦迅速分离出少量纯净样品快反应混合物中分离出少量纯净样品做分析测试扩薄层板面积加薄层厚度混合物样液点成条直线次分离出十毫克约五百毫克样品
实验硅胶作固定相乙酸乙酯甲醇水流动相未知染料混合样染料标准样分点薄层板流动相加展开染料色点直接观察需进行显色处理
染料组分通较薄层板色点位置通Rf值测定进行鉴
三仪器试剂
250mL广口瓶载玻片烧杯玻璃棒烘箱毛细铅笔直尺：滤纸
罗丹明B孔雀绿品红等染料乙醇溶液（1％左右）乙酸乙酯甲醇离子水：青岛硅胶H60数甲基纤维素钠CMCNa
四实验步骤
1．薄层极制备
（1）取 400mL烧杯加入250mL离子水加入 15gCMCNa放煤气灯火加热玻璃棒搅拌直羧甲基纤维素钠溶解放旁静置冷
（2）取载玻片 10块洗涤剂洗涤干净标准水够面形成均匀薄膜然纸擦净表面
（3）称取硅胶 H60 10g置100mL烧杯中加入CMC澄清液边加边磨加入CMC溶液提起玻璃棒时残留液刚滴滴线状流
（4）稠状物药勺倒载玻片然振动均匀铺注意硅胶量必太否铺出硅胶板太厚层折时速度慢效果变差放然琼干
（5）晾干硅胶板心放搪瓷托盘置烘箱中 105℃活化30min
（6）纱手套托盘烘箱取出降温50℃转移干燥器
2点样
毛细薄层板离底边1cm处点加染料标准液未知试样液色点间色点板边距离1cm注意：点样量宜少
3展开
（1）100mL锥形瓶加入39mL乙酸乙酯10mL甲醇 lmL水摇晃
混合均匀展开剂
（2）取250mL广口瓶广口瓶底部放腔直径略圆滤纸
（3）配展开剂倒入广口瓶中注意广口瓶底部液层厚度应05～08cm左右盖瓶盖放置5～10min保证瓶均匀展开剂蒸气饱
（4）点样薄层板斜放入广口瓶中略微倾斜瓶壁快盖顶
底 展开剂均匀升
（5）展开剂前达离板顶端约1cm处取出薄层板铅笔溶剂前处做标记
16）电吹风机薄层板溶剂吹干
17）测量染料样点移动距离展开剂前移动距离
I（8）根染料样点移动距离展开剂前移动距离值测量较染料色斑未知样Rf值定出未知样组成
五实验装置
六实验注意事项
1．CMCNa浓度 5‰～6‰宜太稀硅胶层强度较差容易掉粉
2．硅胶CMCNa混合均匀注意混合物包裹干硅胶颗粒存3．硅胶CMCNa混合稠状物玻璃棒细直线流宜果滴状
流稀应加硅胶果太稠流应加水稀释
4．硅胶铺载玻片硅胶层厚度适中太厚容易硅胶板中间高两边低太 薄容易引起边高中间低两种情况会影响效果
七思考题
1．制备薄层板加入羧甲基纤维素钠作什？果加会出现什
情况？
2．点样浓度太浓时展开程中会出现什情况？
3．薄层色谱板进行活化？
4．展开前层析缸空间什溶剂蒸气预先进行饱？
实验 醋酸甲酯环烷甲醇等混合样品色谱测定
[目求]
1进步掌握色谱定量分析原理
2解校正子含义途测定方法
3学会面积化定量方法
二[基原理]
色谱定量分析定条件测物质重量w 检测器响应值成正：
Ai测组分峰面积hi测组分峰高Fi例常数（峰面积表示时）
Fih例常数（峰高表示时）
定量时需：
（1）准确测量响应信号A h
A h 基定量数h直接测A参数计算求
：A1065hW12
（2 ）准确求校正子F
响应值正组分含量外样品性质关相条件数量相等物质产生信号进行定量分析时需加校正
前述知： 单位峰面积代表样品重量受操作条件影响较F 测定较困难实际操作中采相校正子f′f′组分i 标准物质s绝校正子：
WiWs分测物标准物重量AsAi分测物标准物峰面积f ′检测器类型关检测器结构特性操作条件关
物质量重量摩尔表示：
中MiMs ——分测物标准物分子量
f′ f 文献查直接测量准确称量定重量测物质标准物质混匀进样分测峰面积求校正子
（3）选择合适定量方法
常定量方法种实验采法
法分求出样品中组分峰面积校正子然次求组分百分含量
法优点：简洁进样量需准确条件变化时结果影响
缺点：混合物中组分必须全出峰必须测出峰面积
[仪器试剂]
气相色谱仪（附TCDFID ）微量注射器：1 μL5 μL
三组分混合样：甲醇醋酸甲酯环烷
[色谱条件]
色谱柱：GDX102(60—80 目)
温度：T c——100120℃T D ——150℃T i ——150℃
载气：H2 45 mLmin
三 [实验步骤]
述条件开机调试仪器稳定次进行
1定性分析
（1）调记录纸速5 cmmin 1 μL 注射器进分进甲醇醋酸甲酯环烷 01 μL记录色谱图准确测量峰保留时间（tR ）
（2 ）相条件进01 μL—02 μL 三组分混合样记录色谱图准确测量峰保留时间（tR ）
2测量校正子
分析天准确称取三标准试样瓶中混匀设定条件进样01 μL—02μL记录峰面积
3定量分析
进 01 μL—02 μL 未知混合样记录色谱图测量峰面积
4关机
四 [数处理]
1根保留时间确定峰属
2根称标样重量峰面积计算相校正子（甲醇标准物）
3根未知样品中峰面积化法计算测样品中组分百分含量
五[思考题]
1 化法条件什？
2求校正子？什条件考虑校正子？
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