基工程
(时间:45分钟 满分:50分)
选择题(题2分24分)
1.列关基工程中关酶叙述错误( )
A.限制酶水解相邻核苷酸间化学键断DNA
B.DNA连接酶末端碱基互补两DNA片段连接
C.DNA聚合酶够引物末端延伸DNARNA
D.逆转录酶条RNA模板合成互补DNA
解析:选C DNA聚合酶引物末端延伸DNA延伸RNA
2.列基工程中基表达载体叙述错误( )
A.基表达载体标记基定抗生素抗性基
B.基表达载体构建基工程核心
C.基表达载体中定含起始密码子终止密码子
D.基表达载体构建需限制酶DNA聚合酶等特殊工具
解析:选D 基表达载体标记基般抗性基荧光基等基表达载体般包括启动子目基标记基终止子等构建基表达载体时需限制性核酸切酶DNA连接酶
3.列关应基工程技术治疗类遗传病叙述错误( )
A.基治疗效改善患者生理状况操作象基
B.进行基治疗时基受体细胞受精卵
C.基治疗患者体细胞缺陷基进行改造
D.基治疗时患者部分细胞输入正常基
解析:选B 基工程操作动物受体细胞般受精卵基治疗时全部体细胞发挥作受体细胞受精卵部分体细胞基治疗缺陷基改造般正常基导入受体细胞功覆盖缺陷基表达
4.国科学家运基工程技术苏云金芽孢杆菌抗虫基导入棉花细胞成功表达培育出抗虫棉列叙述错误( )
A.抗虫基提取运输需专工具载体
B.重组DNA分子中增加碱基定导致毒蛋白毒性丧失
C.抗虫棉抗虫基通花粉传递缘作物造成基污染
D.转基棉花否具抗虫特性通检测棉花抗生素抗性确定
解析:选D 转基棉花否具抗虫特性通体生物学水鉴定接种相应害虫观察棉花否抗虫
5.科学家鼠编码种离子通道蛋白基转入果蝇体培养出种转基果蝇通射激光遥控行懒散果蝇活动起叙述正确( )
A.获取编码离子通道蛋白基方法基文库中提取工合成法
B.保持基完整性应该目基直接导入果蝇细胞
C.该基导入果蝇细胞常方法基枪法
D.该转基果蝇性生殖代保持该性状稳定遗传
解析:选A 基工程中获取目基方法基文库中提取工合成目基导入受体细胞前需构建基表达载体目目基受体细胞中稳定存表达目基导入动物细胞常方法显微注射法转基果蝇性生殖代会发生性状分离该性状定稳定遗传
6.国转基技术发展态势良农业部法批准发放转植酸酶基玉米转基抗虫水稻生产应安全证书列关转基玉米转基水稻叙述错误( )
A.转植酸酶基玉米外源基植酸酶基
B.转基抗虫水稻减少化学农药减轻环境污染
C.转基抗虫水稻否具抗虫性通饲养卷叶螟进行检测
D.转基抗虫水稻外源基丁质酶基
解析:选D 转植酸酶基玉米外源基植酸酶基转基抗虫水稻外源基Bt毒蛋白基丁质酶基抗真菌转基植物常外源基转基抗虫水稻减少农药减轻环境污染时降低农业生产成检测目基否表达简便方法体水检测
7.关蛋白质工程叙述错误( )
A.蛋白质工程发展基础基工程
B.蛋白质工程原理预期蛋白质功出发终找脱氧核苷酸序列程
C.蛋白质改造通直接改造相应mRNA实现
D.T4溶菌酶中引入二硫键提高热稳定性蛋白质工程应体现
解析:选C 蛋白质工程通基操作实现蛋白质改造
8.某科学家细菌中分离出耐高温淀粉酶(Amy)基a通基工程方法基a载体结合导入马铃薯植株中检测发现Amy成熟块茎细胞中存列关程叙述错误( )
A.获取基a限制酶作部位图中①
B.基a进入马铃薯细胞马铃薯DNA分子复制复制传子代细胞
C.连接基a载体DNA连接酶作部位图中②
D.通该技术类实现定改造马铃薯遗传性状
解析:选C DNA连接酶限制酶作部位磷酸二酯键图中①部位
9.列关目基检测鉴定叙述错误( )
A.目基真核细胞中否稳定遗传关键目基否插入质DNA中
B.检测受体细胞否含目基否成功转录方法分子杂交法
C.目基鉴定通常体水进行
D.受体细胞检测目基表达蛋白质确定目基首端含启动子
解析:选A 目基真核细胞中否稳定遗传关键目基否插入核DNA中检测受体细胞否含目基方法DNA分子杂交法检测目基否转录出mRNADNA—RNA分子杂交法基成功表达说明首端含启动子
10.试图利基工程方法乙种生物生产甲种生物种蛋白质生产流程:
甲生物蛋白质→mRNA――→①目基――→②质粒DNA重组――→③导入乙细胞――→④获甲生物蛋白质
列说法正确( )
A.①程需酶逆转录酶原料AUGC
B.②限制酶切断质粒DNADNA连接酶目基质粒连接起
C.果受体细胞动物细胞③程农杆菌转化法
D.参④程物质含AUGC
解析:选B ①程逆转录利逆转录酶合成DNA片段需原料ATGC②程目基质粒DNA重组需限制酶切断质粒DNADNA连接酶目基质粒连接起果受体细胞动物细胞重组基导入常显微注射法农杆菌转化法植物细胞
④程基表达程程中mRNAtRNA含AUGC
11.基工程利某目基(图甲)Pl噬菌体载体(图乙)构建重组DNA限制酶酶切位点分BglⅡEcoRⅠSau3AⅠ列分析错误( )
A.构建重组DNA时BglⅡSau3AⅠ切割目基片段Pl噬菌体载体
B.构建重组DNA时EcoRⅠSau3AⅠ切割目基片段Pl噬菌体载体
C.图乙中Pl噬菌体载体EcoRⅠ切割含2游离磷酸基团
D.EcoRⅠ切割目基片段Pl噬菌体载体DNA连接酶连接产生种重组DNA
解析:选D 题图知BglⅡSau3AⅠEcoRⅠ三种酶目基Pl噬菌体切口BglⅡSau3AⅠEcoRⅠSau3AⅠ切割目基片段Pl噬菌体载体图乙知Pl噬菌体载体环状DNAEcoRⅠ切割产生两条反双螺旋链状DNA2游离磷酸基团EcoRⅠ切割目基片段Pl噬菌体载体DNA连接酶连接产生止种重组DNA
12.chlL基蓝藻拟核DNA控制叶绿素合成基研究该基叶绿素合成控制需构建缺失chlL基蓝藻细胞技术路线图示技术描述正确( )
A②程形成2磷酸二酯键
B.①②程需限制酶DNA连接酶
C.该项技术操作成功标志目基表达
D.红霉素抗性基标记基筛选含 chlL基受体细胞
解析:选B ②程红霉素抗性基重组质粒1结合该程中重组质粒1红霉素抗性基两切口需连接会形成4磷酸二酯键①程需限制酶切割质粒chlL基然DNA连接酶连接chlL基质粒该技术获缺失chlL基蓝藻细胞该技术成功标志蓝藻细胞chlL基控制性状蓝藻合成叶绿素红霉素抗性基插入蓝藻拟核DNA中破坏蓝藻拟核DNAchlL基筛选缺失chlL基蓝藻细胞
二非选择题(注明外空1分26分)
13.(8分)科学家运基工程技术结核杆菌MPT64基(控制合成MPT64蛋白)成功导入胡萝卜细胞终表达出肺结核疫苗请回答列问题:
(1)获取MPT64基结核杆菌细胞中提取应mRNA____________作合成双链cDNA片段获cDNA片段结核杆菌中该基碱基序列________(填相)
(2)通常采PCR技术扩增MPT64基前提段已知MPT64基核苷酸序列便根序列合成________操作步骤中需加热90~95
℃目____________________________
(3)根农杆菌特点果MPT64基插入________________通农杆菌转化作目基进入胡萝卜细胞插入植物细胞中________________
(4)研究发现果MPT64蛋白第20位24位氨基酸改变半胱氨酸保存时间延长科学家生产述耐储存MPT64蛋白现代生物工程技术________________
解析:(1)mRNA模板合成cDNA程逆转录需逆转录酶催化DNA转录形成mRNA程中非编码序列转录形成cDNA结核杆菌中该基碱基序列(2)PCR技术中已知MPT64基核苷酸序列模板合成引物操作步骤中需加热90~95 ℃开DNA双链(3)农杆菌转化法中MPT64基插入农杆菌Ti质粒TDNA通农杆菌转化作目基进入胡萝卜细胞插入植物细胞染色体DNA基表达产物蛋白质确认MPT64基否胡萝卜植株中表达应检测胡萝卜植株中否含MPT64蛋白(4)蛋白质工程第二代基工程通设计改造原蛋白质结构功
答案:(1)逆转录酶 (2)引物 目基DNA受热变性解链单链(2分) (3)Ti质粒TDNA 染色体DNA (4)蛋白质工程
14.(9分)虫草中超氧化物歧化酶(SOD)具抗衰老作研究员培育合成SOD转基酵母菌图回答列问题:
注:Hind ⅢApaLⅠ两种限制酶箭头表示酶切割位置
(1)图中重组DNA分子Hind ⅢApaLⅠ完全酶切________种DNA片段图示表达载体存氨苄青霉素抗性基导入食品生产酵母菌中图分析________切该抗性基部分片段失效DNA连接酶表达载体重新连接起
(2)作受体细胞酵母菌缺失URA3基必须含尿嘧啶培养基中存活图示表达载体URA3基作________供鉴定选择筛选出成功导入表达载体酵母菌培养基________(填需需)添加尿嘧啶
(3)目基进入受体细胞受体细胞维持稳定表达程称________确定受体细胞中SOD基否转录标记________作探针进行分子杂交检测分子杂交原理____________
(4)利蛋白质工程获活性更高SOD时需根设计蛋白质结构推测________序列终确定相应脱氧核苷酸序列____________获需基
解析:(1)图知图中基表达载体中存Hind Ⅲ酶切位点存ApaLⅠ两酶切位点两种酶时切割环状质粒会3种DNA片段图示表达载体存氨苄青霉素抗性基导入生产酵母菌中否会导致体抗生素敏感利ApaL
Ⅰ切该抗性基部分片段失效DNA 连接酶表达载体重新连接起(2)作受体细胞酵母菌缺失URA3基必须含尿嘧啶培养基中存活图示表达载体URA3基作标记基供鉴定选择导入表达载体酵母菌中含URA3基普通酵母菌中含URA3基筛选出成功导入表达载体酵母菌培养基需添加尿嘧啶(3)目基进入受体细胞受体细胞维持稳定表达程称转化确定受体细胞中SOD基否转录标记SOD基作探针进行分子杂交检测分子杂交原理碱基互补配(4)利蛋白质工程获活性更高SOD时需根涉蛋白质结构推测氨基酸序列终确定相应脱氧核苷酸序列基修饰获需基
答案:(1)3 ApaLⅠ (2)标记基 需 (3)转化 SOD基 碱基互补配 (4)氨基酸 基修饰
15.(9分)图科研员制备合成干扰素参愈伤组织细胞流程①~④表示相关操作EcoRⅠBamHⅠ限制酶识序列切割位点表示请回答列问题:
(1)步骤①中利PCR技术扩增干扰素基时设计引物序列________________________科研员两种引物端分加________________序列便续剪切连接
(2)程②构建基表达载体中未标注出必需结构__________程③中需先________处理农杆菌便基表达载体导入细胞
(3)程④中科研员提取愈伤组织细胞RNA先通________程获DNA进行PCR扩增终未检测出干扰素基原_________________________________
(4)治疗中发现口服α干扰素胃中会受定程度破坏影响功效需利________________技术加改造达满意效果
解析:(1)设计引物序列干扰素基两端部分核苷酸序列期需限制酶进行切割两种引物端分加GAATTCGGATCC序列(2)构建基表达载体中需复制原点程③中需先Ca2+处理农杆菌便基表达载体导入细胞(3)RNA通逆转录形成DNA终未检测出干扰素基原干扰素基未导入参愈伤组织细胞导入参愈伤组织细胞干扰素基未转录(4)α干扰素进行改造需利蛋白质工程
答案:(1)干扰素基两端部分核苷酸序列
GAATTC GGATCC (2)复制原点 Ca2+ (3)逆转录 干扰素基未导入参愈伤组织细胞导入参愈伤组织细胞干扰素基未转录(2分)
(4)蛋白质工程
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