HPLC法测定卡马西平血药浓度操作规程


    HPLC法测定卡马西血药浓度操作规程

    1血样处理
    送检血样离心2500rmin5min取层血清备
    尖头采样针取10ul艾司唑仑甲醇溶液(500ugml)加入15ml离心中作标心挥干甲醇加入05ml测血清混匀
    测血清中加入100ul01NNaOH碱化血样混匀加5ml水乙醚旋涡震荡器振摇3min(务求振摇均匀时液面应控制磨口塞部位防损失)静置3min分层
    取层乙醚(求取带入层血清否结果影响)放入10ml尖底离心45℃水浴通N2挥干残渣100ul流动相溶解(充分溶解旋涡震荡器振摇30s)取20ul进样(进样针流动相洗涤尖底离心反复抽动数次时壁附着药物充分溶解)

    2标准制作
    配制含卡马西10ugml浓度血清尖头采样针取10ul卡马西甲醇溶液(500ugml)加入离心中时加入标艾司唑仑挥干甲醇取05ml空白血清混匀操作

    3结果求算(标法)
    AiAi
    C —————×Cs
    AsAs
    式中 AiAi分样品标峰面积 AsAs分标准标峰面积
    C测血清浓度 Cs标准血清浓度

    4色谱条件
    流动相配 A相∶B相55∶45(VV)
    中 A相 甲醇∶乙睛1∶1 B相 水∶四乙胺∶冰醋酸500∶10∶8
    检测波长:UV 243nm AUFS004
    流 速:08mlmin
    温 度:室温
    色 谱 柱:C18柱
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