研究课题名称
硫化氢鼠烧伤休克应激反应中作
研 究 容 意 义
探讨鼠重度烧伤休克气体信号分子硫化氢(h2s)血清中变化烧伤休克早期应激反应影响表现血活性物质(组胺p物质)鼠心率血压变化重度烧伤早期休克应激反应引入新理机制烧伤抗休克治疗寻找新研究方78雄性sd鼠机分非烧伤组烧伤组烧伤组分单纯烧伤组nahs组ppg组烧伤组鼠制成30三度烫伤6h12h24h48h96h时项点采集血清采敏感硫电极法测定血清h2s浓度采试剂盒分析仪分析血清中血活性物质(组胺p物质)变化采16道生理指标测量仪测定鼠心率血压单纯烧伤组血清硫化氢浓度较非烧伤组明显升高单纯烧伤组nahs组ppg组两两较均差异烧伤鼠时期血清硫化氢浓度硫化氢浓度血活性物质表达硫化氢参抑制烧伤休克应激程重度烧伤抗休克治疗提出新研究方
二 选题
阐述该选题研究意义分析该研究课题关国外研究概况发展趋势
年研究发现生理浓度硫化氢(hydrogensulfideh2s)具种生理功气体分子 noco部分生物学功方面相相似作体[1]第三种气体信号分子 系统中具重病理生理学意义已成国外医学研究热点研究已发现高血压缺氧性肺动脉高压等疾病发病程中具重作然疾病情况
h2s作认识刚刚起步实验通外源性h2s干预烧伤鼠观测鼠重度烧伤休克早期应激反应中两种血活性物质(组胺p物质)鼠心率血压变化进步解硫化氢重度烧伤休克早期应激程中作
2国外参考文献(列出作者文名称期刊名称出版年月)
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三 研究容创新处
1选题目研究容:
硫化氢作第三种气体信号分子应领域方面研究出观研究成果气体信号分子具种病理生理作年少研究员纷纷开始气体信号分子烧伤中尤重度烧伤全身应激反应中作研究取具定价值研究结果目前气体信号分子尤硫化氢烧伤方面研究尚足做出更相关研究更解硫化氢等烧伤休克应激反应中应价值
实验应面积烧伤鼠模型 通外源性硫化氢干预重度烧伤鼠血清中血活性物质(组胺p物质)表达影响鼠心率血压改变探讨烧伤休克应激反应关系床严重烧伤抗休克治疗寻求效治疗药物提供实验硫化氢进步研究提供实验数
2意义创新处:
⑴首次研究h2s否参烧伤休克早期应激病理生理程
⑵研究烧伤休克血清中血活性物质(组胺p物质)表达变化规律
⑶严重烧伤早期应激程引入新理机制烧伤抗休克治疗寻找新研究方
3应前景:
第三种源性气体信号分子h2s 越越受广泛关注重视成前生物医学领域研究热门课题h2s 具种生物学效应 全身系统中参许方面生理病理生理程揭示某疾病未知发病机理提出新治疗途径具广阔研究前景应价值目前h2s心血循环系统神系统消化系统等研究已成果面积严重烧伤病脏器保护全身炎症反应综合征方面研究相缺乏 实验旨探讨h2s严重烧伤早期应激反应抗休克作床重度烧伤患者疾病演变治疗提供条新思路
四 课题设计方案
包括研究工作技术路线实验方法资料收集方法统计处理方法等:
1技术路线
2试验方法
1)动物模型制备分组
78健康雄性 sd鼠体重 200~240 g购青海省方病疾病控制中心鼠适应性喂养1周机分非烧伤组烧伤组烧伤组分单纯烧伤组nahs干预组ppg干预组分设6h12h24h48h组6烧伤组鼠背部脱毛乌拉坦麻醉仰卧固定烧伤模型板背部裸露皮肤浸泡
95°c恒温水箱中20秒制成30三度烫伤立纱布拭干水渍腹腔注射生理盐水40 mlkg抗休克进食水nahs干预组补液复苏腹腔注射硫氢化氢2mlppg干预组复苏腹腔注射ppg2ml正常组鼠予背部剃毛麻醉浸入 37 cc水浴中假烫 20 s假烫复苏补液 单纯烧伤组背部剃毛麻醉浸入95 cc水浴中烫 20 s烫复苏补液干预
2)鼠血压心率测定
组鼠均6 h12 h24 h48 h96 h时相点分机选取应鼠乌拉坦(100 mgkg)麻醉 16道生理测量仪颈部颈动脉插测定鼠心率血压
3)血标采集处理
组鼠均取血前 12 h禁食6 h12 h24 h48 h96 h时相点分机选取应鼠乌拉坦(100 mgkg)麻醉 剖腹 直视腹动脉采血 鼠抽血 2 ml室温 静置约 20 min XX转离心 10 分钟分离出血清 置 70℃冰箱中冰冻保存测
4)血清硫化氢血活性物质含量测定
血清中血活性物质(组胺p物质)含量测定采酶联免疫吸附(elisa)法 硫化氢采色法测定操作均说明书进行分记录时相点检测血清中子含量 较 组 鼠血 清 中硫化氢c反应蛋白il6总体抗氧化力含量变化
3统计学处理方法
采 spss170统计软件进行统计分析计数资料例数百分数表示计量资料均数 ±标准差( ±s)表示率较采卡方检验时相点组间均数较采方差分析两组间均数较采 lsd检验时相点两组间较采 t 检验 p<005表示差异具统计学意义标准
五实施计划进度
XX9XX10 文献资料检索课题预调查撰写综述
XX10XX11 药物置备动物购买预实验撰写开题报告
XX11XX1 动物实验研究
XX 1XX2 实验指标检测数整理统计撰写文
XX 2—XX 4 完成文审查文
六预期研究成果
预期结果意义:
通鼠烧伤予外源性气体信号分子硫化氢(h2s)前血清血活性物质(组胺p物质)鼠心率血压动态变化表明h2s参烧伤休克早期应激病理生理程定抗休克作严重烧伤早期休克病理生理变化引入新理机制烧伤抗炎治疗寻找新研究方
七估算课题工作量完成课题条件
1仪器设备员配备实验动物药物试剂等:
(1)仪器设备
95℃恒温水浴箱
高转速离心机
16道生理指标测量仪
敏感硫电极
722光栅分光光度计
酶标仪
(2)员配置:
符合条件实验室相关技术员指导协助
(3)实验动物
健康雄性sd鼠78体重200~250 g青海省方病疾病控制中心选购
(4)药物试剂
硫氢化钠(nahs)注射液ld炔丙基甘氨酸(ppg)注射液乌拉坦麻醉剂鼠组胺(his)酶联免疫分析试剂盒鼠p物质(sp)酶联免疫分析试剂盒抗坏血酸(c6h8o6)氢氧化钠(naoh)乙二胺四乙酸二钠(edta)na2s•9h2ol半胱氨酸5’磷酸吡哆醛磷酸二氢钾磷酸氢二钾三氯乙酸三氯化铁醋酸锌氨基二甲基苯二胺盐酸盐
2开展科学研究费
项 目费支出(元)备 注(说明)
研究费
1科研业务费
(1)测试计算分析费
(2)源动力费1000
(3)会议差旅费
(4)出版物文献信息费500
2实验材料费
(1)原材料试剂分析费2650两试剂盒2200元麻醉剂450元
(2)4160实验鼠笼具饲料
3仪器设备
(1)购置
(2)试剂
4实验室改装费
二劳务费
三合计8310
说明
八存问题解决办法措施
1 预计研究程中遇困难问题:
1)研究费足
2)试剂质量问题
2)缺少相应实验设备
3)专业实验验足
4)动物饲养程实验程中出现误差
5)预知问题
2解决办法措施:
1)量节省开支导师申请资金
2)严格动物饲养求组预备
3)严格文献记载造模进行预实验力争掌握成熟实验操作方法寻求验实验技术员指导
4)完善实验前期准备工作参阅相关文献资料找相关理
5)操作程力求规范检测设立标准质控量选批号试剂药物
6)公卫系高原实验中心寻仪器
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