1生物安全柜选择、原理、摆放、使用、维护、检测PPT
- 1. 陈 飞
- 2. 依据GB19489—2007《实验室生物安全通用要求》 《实验室生物安全手册》（第三版，2004） WS233-2017《病原微生物实验室生物安全通用准则》 GB50346-2011《生物安全实验室建筑技术规范》 YY0569-2005生物安全柜（2005.7.18） JG170-2005生物安全柜（2005.3.25） 生物危害一级防护：生物安全柜的选择、安装和使用
- 3. 容易产生气溶胶的工作行为对液体或半流体进行摇动、倾注或搅拌操作时， 将液体滴加到固体表面上或另一种液体中时， 在对琼脂板划线接种、用吸管接种细胞培养瓶， 采用多道加样器将感染性试剂的混悬液转移到微量培养板中， 对感染性物质进行匀浆及涡旋振荡， 对感染性液体进行离心， 进行动物操作时。
- 4. 生物安全柜如何进行选择 生物安全柜原理 生物安全柜摆放要求 生物安全柜的使用要求 生物安全柜的维护要求 生物安全柜的检测目录CONTENTS
- 5. Part 01生物安全柜如何进行选择
- 6. 一.生物安全柜如何进行选择 生物安全柜分类 生物安全柜选择原则
- 7. 1.生物安全柜分类根据处理样品的危害不同，分为三个等级:Ⅰ级, Ⅱ级, Ⅲ级 BSC-Ⅰ(Ⅰ级生物安全柜) BSC-Ⅱ(Ⅱ 级生物安全柜) ，Ⅱ 级生物安全柜又可分为（A1、A2、B1、B2） BSC- Ⅲ (Ⅲ 级生物安全柜)
- 8. Ⅱ级生物安全柜的分类B1Type BB2Class IIType AA1A2排出的气体可排入实验室或室外排出的气体必须经排风管道排至室外
- 9. 生物安全柜分类超净工作台：只能保护样品，不保护操作人员和环境。 负压排风柜：保护人员和实验室内环境，不保护外环境和柜内被操作对象。
- 10. 2.生物安全柜选择原则
- 11. Ⅱ 级生物安全柜选择选用A类还是B类Ⅱ级生物安全柜? 不是生物因素 而是是否会用到挥发性的有害物质或放射性物质
- 12. Ⅱ 级生物安全柜类型适用范围A1不涉及放射性、挥发性有害物质的操作A2无排风管不涉及放射性、挥发性有害物质的操作—有的地方说的痕量？ 有排风管适用于含少量放射性、挥发性有害物质的操作B1适用于含少量的放射性、挥发性有害物质的操作 B2适用于含放射性、挥发性有害物质的操作
- 13. Part 02生物安全柜原理
- 14. 二.生物安全柜原理 气流走向 高效过滤器原理
- 15. A：前开口； B：窗口： C：排风HEPA过滤器； D：后面的压力排风系统； E：供风HEPA过滤器； F：风机
- 16. 2.HEPA过滤器HEPA过滤器：通常以0.3μm微粒为测试物，在规定的条件下滤除效率高于99.97%的空气过滤器。本质是纸做的。
- 17. (本页无文本内容)
- 18. 过滤机理撞上→粘住：过滤介质靠范德瓦尔斯力（分子间作用力）捕捉粉尘。 惯性原理：大粒子作惯性运动。粒子越大，惯性力越强，撞击障碍物的可能性越大，因此过滤效果越好。 扩散原理：小粒子作布朗（扩散）运动。粒子越小，运动越剧烈，撞击障碍物的机会越多，因此过滤效果越好。 静电（驻极体）:参与粘住的工作。 过滤器不是筛子
- 19. 生物粒子的当量直径 生物粒子的一个特点是：空气中的微生物主要附着在是其自身体积数倍的灰尘粒子上，许多细菌和真菌以菌团或孢子的形式存在，但不排除个别情况微生物单独悬浮在空气中的可能性。因此，尽管微生物尺寸很小，但生物粒子的当量直径一般为：1m～20m。
- 20. HEPA过滤器的原位检漏 高效过滤器很容易在搬运或安装过程中发生损坏，因此高等级生物安全实验室要求在安装就位（原位）状态下对其检漏。 检漏方法：扫描检漏法、效率检漏法 HEPA过滤器的原位气体消毒：当需要搬运、更换前，应进行原位消毒。
- 21. Part 03生物安全柜摆放要求
- 22. 三.生物安全柜摆放要求 五个远离点（气流） 门 风扇 空调 开着的窗户 人员活动频繁的区域 摆放要求 稳固的平台或支架 两侧、后面和上端留30cm以上Air Register设备首选位置候选位置工 作 台设备
- 23. Part 04生物安全柜的使用要求
- 24. 四.生物安全柜的使用要求 个人防护要求 柜内物品的摆放 紫外灯、明火 工作前准备 工作中操作及溢洒处理 工作结束后处理
- 25. 1.个人防护要求在使用生物安全柜时必须穿工作服，戴手套（手套应套在隔离衣的外面） 带口罩和帽子，根据需要带防护眼罩或者面罩。
- 26. 2.柜内物品的摆放按照从洁净区到污染区的方向摆放 所有物品尽可能放在工作台后部，但不能遮挡后进气格栅 将废弃物袋、盛放废弃吸管的盘子以及吸滤瓶等体积较大的物品放在柜内某一侧 前进气格栅不能被纸、仪器设备或者其他物品阻挡
- 27. 洁净区半污染区污染区
- 28. 3.紫外灯、明火对紫外灯的三点要求： 每月至少两次，进行清洁、除去可能影响杀菌效果的灰尘和污垢 每季度要检查紫外线强度，以确保有适当的光发射量 房间中有人时一定要关闭紫外灯，以保护眼睛和皮肤，避免因不慎暴露而造成伤害
- 29. 3.紫外灯、明火不能使用明火，原因： 明火可造成生物安全柜的气流紊乱，干扰气流模式 可损坏HEPA过滤器 处理挥发性物品和易燃物品时易造成危险
- 30. 4.工作前准备内容首先紫外灯照射30分钟 使用前消毒，关紫外灯，打开安全柜的日光灯和风机，用消毒剂对生物安全柜的内表面进行消毒擦拭 将实验中需要用到的物品用70%~75%酒精擦拭后，放入工作台部靠近工作台后缘的位置，切记勿阻挡后部格栅 可以在消毒剂浸湿的毛巾上进行试验，以吸收可能溅出的液滴
- 31. 4.工作前准备内容等待5min，净化工作区的空气污染物 工作前认真理解操作步骤和所需设备 尽量减少扰动、人员走动、手臂的频繁进出 准备好消毒剂
- 32. 5.工作中操作及溢洒处理工作时操作规范： 双臂垂直缓慢进入前面的开口，在生物安全柜中等待大约1min，以使安全柜气流调整完毕后，才对物品进行处理。 所有操作应在离前窗10cm以外的工作区进行。 废弃物应丢弃在生物安全柜内的处理容器中。 避免胳膊在前开口处快速移动和频繁进出。 尽量避免污染的物品进入洁净区。 在生物安全柜内进行操作时，不能进行文字工作。 尽量减少操作者身后的人员活动。
- 33. 5.工作中操作及溢洒处理溢洒处理： GB19489—2008《实验室生物安全通用要求》附录C 实验室生物危险物质溢洒处理指南 1.溢洒区域的处理 2.生物安全柜内溢洒的处理 3.离心机内溢洒的处理
- 34. 5.工作中操作及溢洒处理如果溢洒的量不足1 mL 时，可直接用消毒灭菌剂浸湿的纸巾擦拭。 如溢洒量大或容器破碎，按如下操作处理： 使生物安全柜保持开启状态。 在溢出物上覆盖浸有消毒剂的吸收材料，作用大约30min以发挥消毒灭菌作用。 在安全柜内对污染的手套消毒后，脱下手套。如果衣服已经被污染，也要先脱下消毒。穿戴干净的手套和衣服作进一步的清洁工作。
- 35. 5.工作中操作及溢洒处理小心将吸收了溢洒物的纸巾连同溢洒物收集到专用的收集袋或容器中，并反复用新的纸巾将剩余物质吸净；破碎的玻璃或其他锐器要用镊子处理； 用消毒剂喷洒或擦拭安全柜内壁、工作表面以及前视窗的内侧。作用30 min后，擦干消毒剂并将擦拭物置于生物危害袋中。 将所有清理用物品以及防护服进行高压消毒。用肥皂洗手和暴露皮肤。 立即通知实验室主管。如果溢出物流入安全柜内，可能需要对安全柜进行更为广泛的消毒处理。
- 36. 6.工作结束后处理将安全柜继续运行至少5min来完成“净化”过程。 柜内所有物品都应清除表面污染，并移出安全柜。 每天实验结束后，对生物安全柜的内壁和台面进行擦拭。 等待5分钟后，关闭前窗，关灯，关风机，紫外灯照射30分钟。
- 37. Part 05生物安全柜的维护要求
- 38. 五.生物安全柜的维护要求保持生物安全柜表面清洁和无污染状态 每次试验后，用70%酒精或者合适的消毒剂擦拭前窗玻璃内外表面和工作台面； 如果使用漂白剂等腐蚀性消毒剂后，需要用无菌水再次进行擦拭除去残余的消毒剂； 定期抬起工作台面对其下面的区域进行清洁； 每两周对紫外灯进行清洁，以除去可能影响其杀菌效果的灰尘和污垢。
- 39. 定期保养： 每年按需要更换紫外灯和日光灯； 每年至少现场检测一次，依据： GB19489—2007《实验室生物安全通用要求》 WS233-2017《病原微生物实验室生物安全通用准则》 《实验室生物安全手册》（第三版，2004）
- 40. 生物安全柜的污染清除（原位消毒）在以下情况下需要进行熏蒸： ①在检查和维修之前 ②在更换HEPA过滤器之前 ③在移动安全柜之前 ④安全柜被严重地污染 ⑤变换使用目的 ⑥长时间未用 ⑦其它情况 方法：甲醛、过氧化氢熏蒸，应由有资质的专业人员来进行
- 41. Part 06生物安全柜的检测
- 42. 六.生物安全柜的检测什么情况下需要检测？ 应该由什么人来进行检测？ 需要进行哪些内容的检测？
- 43. 1.什么情况下需要进行现场检测？最初的购买安装完毕，投入使用前 移动位置后 进行检修后 更换高效过滤器后 一年一度的常规检测
- 44. 2.应该由什么人来进行检测？WS233-2017《病原微生物实验室生物安全通用准则》 7.4.13 生物安全柜、压力蒸汽灭菌器、动物隔离设备等应由具备相应资质的机构按照相应的检测规程进行检定。实验室应有专门的程序对服务机构及其服务进行评估并备案。 7.4.14 高效空气过滤器应由经过培训的专业人员进行更换，更换前应进行原位消毒，确认消毒合格后，按标准操作流程进行更换。新高效空气过滤器，应进行检漏，确认合格后方可使用。
- 45. 3.需要进行哪些内容的检测？WS233-2017《病原微生物实验室生物安全通用准则》 附录C中规定Ⅱ 级生物安全柜的检测项目有： 垂直气流平均速度 工作窗口气流流向 工作窗口气流平均速度 工作区洁净度 高效过滤器的检漏 噪声 照度
- 46. 谢谢观赏
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