FDA指导文件

 
FDA指导文件
证明生物制品性指南
（含治疗生物技术制品）
（FDA CBER CDER 1996．4）
1．前言：
指南系FDA目前致力改革容部分目生产厂家提供更灵活性便重优质生物制品更效快捷投放市场指南阐述产品性概念描述FDA关产品性现行规范产品包括CBER理生物制品治疗生物技术产品CDER理治疗生物技术产品指南叙述生产厂家应采取措施FDA评估生产厂家需生产改变外进行床试验证明产品安全性效性
指导性文件样FDA准备指南中包括容目提供信息制定规程生产厂家遵循指南提出程序选择指南外程序采程序前生产厂家应事FDA讨免期FDA未批准造成资源损失
指南产生授予权利指南实施FDA公众均产生约束力然指南体现FDA关证明产品性意指南重申某求系法令法规容时法律效力作受指南结影响
Ⅱ．背景
长期生物制品直难作单物体鉴定种分子形式复杂混合物某情况难确定特异活性部分者活性部分存成分周围成分许特性具潜影响情况原料具潜传播传染子性鉴定性结构测定床效成分活性力限生物产品通常生产程进行界定生物制品生产工艺包括生产方法设备设施什生物制品需申请生产企业许证（ELA）原FDA注意生产程设备设施改变导致生物制品身改变时需补充进行床试验证实产品安全性性纯度效力
生产方法生产质控方法产品检定方法改进导致生物制品理进步例FDA批准某生物制品生产厂家产品前关键性床试验该厂家着手改进生产工艺必补充进行床试验证明产品安全性纯度效力符合求发起通类型分析功性试验进行进行床前动物试验情况证明生产工艺改变前产品性果性试验结果证明生产工艺改变影响产品安全性性纯度效力FDA做出两种制品具性决定
FDA注意生产厂家种原寻求改进某特定产品生产工艺包括提高产品质量收率生产效率等FDA根具体情况审查生产工艺提出改进确定证明产品性必需资料包括床资料FDA评估部分根改变生产类型涉生物制品类FDA1990年制定关键性床试验前细胞子生长子资料包中指出：关键性床试验提交产品许证申请时期间生产工艺改变较必补充进行验证动物体外试验／床试验FDA1994年制定单抗产品生产检定考虑点中包括题改变生产关问题（证明产品相性product equivalence）章节FDA文床开发期间生产变化讨中注意种变化常性FDA指出证明产品相性需扩床资料取决体外试验动物试验类型资料质量生产厂家应记录产品开发程中生产进行改进生产工艺生产改进许关键床试验中验证确定市产品早期床试验产品关系
FDA性资料够继续保证产品安全纯度效力（效性）情况批准床研究程中结束生产进行改进产生产品批准前生产工艺进行更改包括中试全规模生产变化生产设施法律实体迁移实体生产程中阶段改动例发酵纯化配制情况FDA评审员集体科学理验做出相应法律体系前认识相致佳评价
产品批准前生产改变FDA认：非床实验室资料证明产品符合21CFR 601．2（a）章中述安全纯度效力标准进行床试验资料应包括生产改变前原产品床资料样生产厂家证原产品现产品具性生产厂家证明生产改变前产品性果 FDA认生产厂家力证明性FDA批准厂家实施改变需补充进行床试验
FDA注意生产方法工艺质检方法产品特性检定方法改进生产厂家机会鉴评估生产工艺设施变化产生影响例年分离分子产品关工艺技术提高生产厂家力建立灵敏度高验证鉴产品生物活性方法力试验中发现重差异做出评价种力FDA重复进行床效性试验情况评定产品性奠定基础
FDA已审查现行指导文件便澄清指南现行文件潜分歧点FDA未发现指南原文件致处然生产厂家先前指南解释某种程度现文件致指南已取代果某种程度厂家发现认原指南关生产变化问题说明明确DDA现明确指出：文件中阐述 FDA前采性指南FDA类产品现行政策参见（1983年）干扰素检测程序：研究性干扰素生产检测考虑点（1990年）关键性床试验前细胞子资料包（包括生产厂家应采批准相生产工艺生产关键性床试验产品参考材料）（1995年）FDA关利中试设施开发生产生物制品指南（中试生产某方面应商品化规模生产相致参考资料）
Ⅲ 产品性试验
指南强调产品批准前改变生产性试验现行适法律法规项产品批准前生产变化生产厂家必须许证试验新药申请中详细阐述该变化FDA敦促厂家实施影响性试验改变前FDA咨询免延误申请审查
生产改变导致某产品观察变化换言前资料证明影响情况产品种种特性改变产品药理影响产生显著影响样前资料证明影响情况产品种种特性改变产品药理产生产生显著作FDA评价产品性重素生产改变否成影响床安全效性重素做出预测
生产厂家应详细评价生产改变改变生产产品改变前产品性进行估价化学物理生物学试验某种情况需非床资料应作确定产品性果发起够证明性需补充进行新产品安全性／效性床试验
FDA性资料否足证明需补充进行床试验做出决定
产品生产涉生产工艺解确定适宜性评定计划重容确定需试验类型中FDA考虑生产变化范围发生变化生产阶段性试验计划包括：分析试验生物试验（体外）药物动力学／药效学动物毒性评估床试验（床药理学安全性效性）分析动物类药物动力学药效学床安全性效性试验相结合然性试验简单种特定试验结果决定级试验分层系统事实时进行许实验互相补充例药物动力学分析通常反映出类型试验（体外试验）反映生物学现象
生产厂家应FDA提供老产品合格新产品进行化学物理生物活性列分析详细资料情况应采全面鉴定参标准成品容器原料充分评估生产改变产品影响进行检定试验外应进行签发半成品成品前常规检定补加检定容通常包括受生产改变影响工序中间品检定生产厂家进行试验：
A分析试验：
分析试验包括化学物理两种检测选择试验方法应灵敏检测出生产工艺改变引起差异全范围分析试验敏感性幅度决定补加试验性质程度重素试验应包括生产批常规检定应包括充分鉴定产品结构性证明产品批连续稳定性进行试验适宜新试验
B．生物试验
生物试验发起评定产品活性／效力进行功性试验试验衡量产品生物学完整性（结构正确）补充分析方法发起应试验进行验证规定产品活性合格特定范围试验包括适体外试验（：细胞生长酶活性抗病毒试验感染性试验）相关动物进行体试验：产品体作机理已知生物试验（时）应反映该活性应考虑体体外动物模型预测体生物学效应例疫苗发起应评估进行试验（评估免疫原性）床保护相关程度资料报FDA便决定生产改变否应进行床试验果某产品具种完全相关活性床作机理未知时生产厂家必考虑进行项功试验药物种剂型生产变动改变销售剂型时测定种剂型生物活性估价生产改变造成影响意义
分析试验功试验综合检测精确度性评估产品特性关重发起FDA均应两种试验模式结果进行评估确定需补加试验范围
C．床前动物试验
性评估中种体外试验外动物进行体试验确定药物动力学参数药效活性毒性终点产品分析试验功试验未显示出差异情况需动物药物动力学资料进行性评估分析试验影响药物动力学变化敏感体外功试验反映时间变化分布药物动力学差异产生活体暴露差异导致治疗活性药物动力学评估通常认功性试验补充然激素说体效力试验通常需考虑动物潜药物动力学药效分布素旦类激素制品生物利率出现疑问时需床药学研究证明性
充分药物动力学测定包括行交叉研究方式CmaxTmaxAUCt进行测定出现异种蛋白免疫应答引起发症情况交叉设计适宜情况发起应考虑结合蛋白源蛋白水关引起发症素动物试验相关情况必进行床药理学试验证明性
产品批准前生产厂家般必证明产品性重复进行原生产工艺产品做全部毒理学试验某情况免疫原性安全性问题仅需进行补加动物试验补加毒性试验必性范围取决原产品安全性情况生产工艺变化产品影响产品治疗范围窄存特定安全素生产工艺改变出现分析试验检测毒性杂质外源子需进行补加试验
D 床试验
床试验包括药理学试验免疫原性安全性效力试验然性试验包括某形式床效力试验通常性试验包括效力试验FDA根类性资料决定否必进行补加床效力试验总体讲必进行体药理学试验评估生产改变产品药物动力学药效学（：产品配方改变）影响
旦生产工艺改变引起产品结构生物活性差异导致药物动力学模式改变差异潜影响产品安全性纯度效力种情况般需进行补加床试验评估产品安全性效力外分析试验床前试验灵敏度广度足检测出类差异时必进行补加床试验
E．补充考虑
性试验果半成品药物生产工艺发生变化生产厂家般应进行深入分析试验辅功试验类变化包括：生产厂变迁细胞菌毒种改变包括细胞库变更发酵分离提纯中变化某情况需补充药理学资料生物应答资料（：疫苗抗体滴度）
关成品变化例贮存容器改变剂型（：溶液改重溶冻干粉｝分装场变迁需提供签发成品标准规格资料产品稳定性资料成品配制发生改变时需进行较药物动力学试验类型试验
生产工艺改变种产品均牵连着产品安全性性纯度效力问题生产厂家应制定性试验计划时考虑生产工艺改变类产品开发阶段床特征（：患者群床终点药途径剂量反应曲线斜率疗程持续时间）中间品成品检定重点应集中受工艺改变影响工序生产厂家应改进生产工艺进行验证提供产品批认证资料适宜工艺验证标准应着工艺改变性质异生产厂家否力利验证灵敏检验方法证明产品性结构生物学活性床药理确定否重复床效力试验证明产品性奠定基础
IV．产品性文件
性文件描述许证申请者已获许证员研究新药发起采纳试验描述 FDA决定证明产品安全性纯度效力／效性必资料种类应进行试验
FDA应决定必类型性试验范围例：某情况FDA决定需进行床试验FDA根性资料决定必进行床效力试验
提高申报产品复查审批效率FDA鼓励产品申请者研究新药发起实施改变生产工艺前产品批准前改变事宜FDA咨询申请者FDA提供资料：生产改变描述进行相应性试验研究性试验资料许证／新药申请证明文件研究新药许证新药申请修订研究新药效果生物制品言 FDA求申请者应21CFR 601．1221CFR 314．7（g）章节中规定FDA关应报告改变指南提交生产改变资料
21CFR 60112章中描述申请者应FDA报告改变容产品批准前需报告改变FDA拟建议修订规定生产广家应决定提交报告时参考现行规定适宜指南
种情况均应准备适材料便FDA评审员调查员改变类型改变处生产阶段涉产品解种资料包括非床床试验效证明文件产品改变处生产阶段证明文件应
V结
果提交FDA性资料证明产品生产工艺改变安全性纯度效力效性FDA决定该生物制品（包括规定生物制品药品治疗生物技术产品）生产厂家执行生产工艺改变需进行补加床效力试验
 
 
 
 
 
 
血液制品生产设施质量保证
（FDA19957）
目
指南旨协助血液血液成分生产设施（包括血库输血站血浆单采中心〕公认质量保证原现行药品生产质量理规范（CGMP）相符前提制订质量保证（QA）体系
范围
指南提供关程序规范般信息血液机构制订执行质量保证体系帮助药品食品理局正修订21CFR10·90（b）文件文件末21CFR10·90（b）授权颁布文件称作指南具强制性提供授予权力特权受益血液机构遵指南纲求提供程序血液制品生产设施理机构深入探讨该问题防止药品食品理局接受活动浪费资源
预防治疗处置类疾病创伤血液血液成分属公卫生法351项（42US·C·262）理生物制品样意诊断治疗缓解处置预防类疾病血液血液成分分属联邦食品药品化妆品（FD＆C）法（21．U．S．C321（g）］201（g）项定义药品范畴根联邦食品药品化妆品法501（a）（2）（B）项陈述果制造商加工包装贮存程中设施方法控制标准操作理程保证该药品符合FD＆C法求制订现行药品生产质量理规范相悖时该药品应定假药品血液血液成分FD＆C法中属药品现行药品生产质量理规范中21CFR项210211部分均适外FDA21CFR项606部分颁布适血液血液成分CGMP规定
指南意图21CFR项 600680210211部分适联邦标准结合起2102项求 210 226600680部分规程应视补充互代遵守210226600680应规程时特适该药品法规应采代通关21CFR项互补充210211 600680部分例证见附录A指南视需定期修改血液制品生产机构应认识1988年床实验室改良修正案（CCLA）进行实验检测血液机构包括血库输血站血浆单采中心必须遵守 42CFR项493部分应规程规程 1992年9月1日起正式生效确定实验员质量控制资格审核病检测理建立实验复杂性病危险素基础质量保证等项标准
前言
般讲美国世界安全血液供应国家献血员血液制品质量制订执行相应标准1983年起进行包括执行新检验合格献血员指标许重改进外FDA加强血液机构监督标准缺陷引起合格血液血液成分分发记录存档发现种素关（1）试验检查项目增（包括复杂试验检查增加出现差错机会）（2）包括计算机系统复杂先进技术仪器（3）缺乏受适培训卫生保健试验室工作员（4）血液机构需更加尖端加工系统控制程序包括培训监督现员程序
1988年4月6目备忘录中 FDA生物制品评价研究中心（CBER）求血液机构审核工艺流程员培训计划确定安全程度防止合格血液制品发放 CBER 3月20目备忘录中已提醒血液机构加工程中差错事引起产品质量量投诉CBER引起合格制品流入市场差错事典型事例已做描述外CBER求血液机构必须报差错事追踪调查
确定国家血液供应连续安全性血液机构生产工艺系统必须执行效质量控制FDA认血液机构够建立旨识预防机构运作程中度出现缺陷设计包括计划周密文档详细严格理质量保证体系质量保证（QA）目标显著降低差错保证试验结果信性执行效生产工艺系统质量控制确保产品安全质量连续性QA包括预防检测调查审评校正差错种种措施重点防止差错事检查差错
执行质量保证体系需投入时间资源质量保证体系设计范围取决血液机构进行加工活动复杂性考虑导致潜公卫生果求血液机构必须重视QA投资
质量控制质量保证体系
质量保证体系设计实施确保制造程中生产出具稳定质量制品实施计划系列活动总确保体系影响产品质量素预期设想实际运作质量保证体系具方面含义包括质量控制（
QC）程现行药品生产质量理规范（CGMP）适宜质量控制规定认CGMP组成成分包括常规生产线生产程中生产工艺进行监测[见21CFR2ll．22（a）211．100（a）606140（b）］控制生产QA方面包括关员设施工艺程仪器检测文档理活动标准
质量保证务
质量控制部门具确保产品质量符合21CFR 211．22（a）求权力义务制药业执行述职部门通常称作质控部门着20年质量保证概念进展担负监督产品质量关活动职部门（包括质量控制部门）通常均称作质量保证部门质量控制名词实际许认仅限描述质量保证体系中确定机构加工中（例生产线生产中检测）精确性操作产品分发等关举措控制执行质量保证职责员称呼质量保证职必须建立21CFR210～211600～680末质量保证名词明确求应相应职体系控制生产程防止发放合格制品进步说明文件质量保证(Quality assurance）名词描述确保产品质量全部体系诸素预期求发挥功活动（指周密计划严格执行活动）履行该职责员组成QC／QA部门质量控制质量保证定义述参附录中名词解释QCQA部门应协调监督促进QA职责QC／QA部门包括专门履行QA职工作员者兼负职责组成（员专职兼职）兼职者应具职工作终监督权［见21 CFR606 100（c）］ 211 194］机构中担负QC／QA职允许该员担负控制审核产品结果职确保产品符合相应标准求
报职责
QC／QA部门应级指定领导汇报获许证厂家中该部门应负责汇报该负责指代表机构CBER(参见21CFR60010）督机构直接交道领导求领导指定合格员种遵守FDA求关事务中（包括FD＆C法PHS法）机构实施全面质量控制必时权实行干预行动员采取干预行动直接负责领导指定合格员责确保员合理安排
培训完成职责（见21CFR2112560010 606201QC／QA部门生产理作单独汇报QC／QA部门应确保生产员遵守CGMP必时QC／QA部门权制止生产发出产品
QC／QA部门职责
血液机构中 QC／QA部门职责应包括述领域限
标准操作细（SOPs）[见21CFR21110060665（e）606100］
SOPs关QA职责包括：
(1）确保生产程序包括限检定程序SOPs SOPs应准确描述界定操作程序包括说明该程序达目SOPs实际容生产部门职责[见联邦注册 43卷190期1978年9月29日第 45O14 45032页］
（ 2）实施前审查确保书面批准SPOs确保SOPs适法规条例求相致外SOPs实施前QC／QA部门应确保列书面SOP摆放位：
(a）建立验证方案程序确保种方法工艺达预期目
（b)确定完成工序责者：
(c）b项中指明责者进行培训授予岗证书办法：
（d）监督执行程序职责
（e）定期进行熟练程度检验方法
（f）定期考评程序执行方法
（g）QA审计程中考核程序完成情况方法
（h)确定某工序关键非关键质控点（见附录名词解释）工序
(i)文档保求相致原始记录保制度
（3）保存 SOPs索引存根副期 SOPs档案
(4）确保SOPs容审校确定体系职影响
（5）确保位雇员持必需现行SOPa版时新版完成定职责
（6）确保验证方案具前瞻性认真执行审核提出书面验证报告已采生产工艺根积累生产检定质控资料进行验证
（7）确保SOPs变更修改相应文件记录包括修改理确保变更更新方法生产工艺进行验证保证系统操作程产生良影响SOPs修改应现实施前正式批准程序进行
(8)确保理QC／QA活动SOPs界定QC／QA部门执行SOP审核批准授权职责适情况确保执行审核批准授权职
（9）确保关SOPs时更新反映生产程改变SOPs生产原始记录少应年审核次
培训教育
QCQA部门应协助制订审核确保全体员培训教育方案批准[见21CFR211．25］培训应包括列方案
新雇员训练程序cGMP培训SOP培训技术培训技术监督培训行政理培训QA培训计算机化系统培训连续教育连续培训
QCQA应解表明需培训培训素需述培训信息行政监察认证检查职考核技术更新差错事报告投拆意见QA验证血液机构身整运转中系统关键质控点发现问题
职考核
确保全体职员受培训胜指定务QCQA部门应执行正规定期职考核计划应考评列项容理实际知识（受限）
（1）直接考查职员常规质控程中表现容包括献血员筛选样品处理检验操作标示仪器维护
（2）通审阅工作记录质控记录预防性维护记录记录记载（手工动记录两种）监督实验结果记录报告
（3）书面考试形式考查解决问题技 SOPs知识理
（4）通采未知样外源提供资格考核样评估职员业务力
低录分数考核表现校正称职采取补救措施应文件记载装入事档案考评结助纠正组工作问题
熟练程度考核
熟练程度考核通常检定实验室 QA方案部分QC／QA部门熟练程度考核结果做常规审校外应审核评价监察熟练程度考核方案确保检验方法仪器执行检验员进行充分评价
血液机构熟练程度考核程中应确保全体员象常规检验样常规仪器考核样品进行常规检验血液机构应备代检查方法手工检验Stat检验进行考核检验程序应确保准确快速检验结果
行政官长QCQA部门应审核评价熟练程度考核结果外QCQA部门应鉴特殊问题趋模式结果进行分析应书面计划熟练程度考核通情况进行补救
质控规定监察试验室操作方面包括未知样品结果统计学分析初试复试结果较点方法试验进行较
验证
FDA验证总指南（1987年5月）提供验证指导原参制定适机构身体系生产程验证原QCQA部门应确保进行充分验证检查应审查投拆意见差错停放关键控制点问题确定否需重新验证修改验证程序
设备
设备安装认证确信工艺设备辅助系统规定限度耐力指标持续正常运转［工艺程验证总指南］[1978年5月］ QC／QA部门应确保规定执行设备认证工艺验证维护进行验证保证设备性正常应审核保存验证检验结果记录
设备认证验证维护监控应书面程序外应设备监测校正维护时间安排确保性符合标准规格求设备监测程序应包括功异常法校正设备果进行评价生产计算机系统属21CFR2ll．68 606．60条例理仪器
差错事报告投拆意见良反应
QA方案应确保相应操作程序审核评价调查纠正生产差错事中严格执行外应确保时CBER汇报影响血液制品质量纯度安全性差错事报告系统（见21CFR60014）QA规应保证关产品质量投拆意见进行调查明确该投拆意见否生产中差错事关调查程应包括供审查确定投拆否表现良反应献血员受血者副反应威胁生命造成终身残疾甚死亡程序应保证献血员受血者副反应进行全面调查完全记录备案根21CFR606170 b）条例死亡事例必项CBER报告QCQA部门应保证收回产品市场撤销产品已建立程序指南处理［见 21CFR第七节］
程序应保证输血反应进行调查应培训护理员方案识良反应症状做适处置怀疑产品污染细菌时调查程应包括复查生产流程细菌污染时应采血部门报告
QA基求通调查投拆意见差错／事良反应获知识反馈QA体系果投拆意见差错／事良反应进行调查确定纠正导致问题发牛素生产中差错事雇员常规操作中发现者员复核记录时发现QC／QA部门应生产中出现差错进行审核包括产品分发前发现差错QC／QA应留存差错／事报告副保证采取适追踪调查行动应保证落实纠正错误行动纠正错误行动包括系统流程重新设计重新培训员更改工艺流程
原始记录理
QCQA部门应批准确保批准原始记录保存系统（手工动记录）电子化计算机化原始记录保存系统应合理验证（见21CFR21168） QA程序必须履行确保完成工作（见21CFR60616o）准确完整记载审校采血处理质量检定贮存程中恰阶段进行
批号签发程序
21CFR606． 3（ C）界定单位全血制备种成分（例红细胞血板血浆冷沉淀抗血友病子）批制品具相应批号批号通常采血时确定单位血液编号执行QA确保记录准确性完整性否符合已规定标准进行审核签发批制品前应复核种成分相关程序重步骤[见21CFR606100(c)211194(a）(7)&(8）]QA应确保批次间差异符合特定求批次进行全面调查
标签控制程序应采系统设备求相适应果动贴签机出现错贴现象需严格控制程序防止类事情发生见[21CFR211．125］应制定执行书面操作细保证药物正确标签正确标示正确包装材料血液血液成分生产程中许阶段标示采集时产品应标明生产设施预设产品类型续工艺阶段标示产品血型效期．产品种类型转种类型（例新解冻血浆转回收血浆全血转红细胞）重新标示产品转化需重新标示应采取样控制程序初标示样保存标示记录
生产程中需标示道工序应实行工序控制确保正确标示完成标示产品签发前应复核审校终标示程序应包括复查相应产品生产记录外复验记录确保产品标示误容包括献血员类血型失效期产品名称果遵守正确标示控制程序限度减少标示错误
质量保证审计
QA审计整QA系统效性进行评估程应书面程序定期进行综合性审计[见21CFR211180（e）］综合性审计审查原始记录数量应统计学显著意义果已查出质量问题更效监察某特重领域需进行重点审计仅限领域孤立审计检查出系统性问题QC／QA部门重点审计书面细应充分灵活性便修改SOPs前提进行审计
审计程序繁简取决血液机构核查特殊艺少进行审计员应具丰富知识培训实际验发现查特殊工艺问题审计员审计组应负责审计工艺程果采外部审计计划QCQA部门应负责保证该审计符合生产厂需21CFR21l180（e）规定相致21CFR 211180（e）求年度复查作QA审计 FDA检查时应提供年度复查记录应书记述审计程序结果审计报告审计程序应包括关负责专职员负责官员审查评价审计结果计划目保证关负责解存问题采取纠正行动审计报告保存期限产品记录求保存期限相致
审计QA应采取系统性途径附录B表l～8列出血液生产作业系统血液机构作业系统需审计容少应包括项目：
质量控制质量保证
献血员合格条件
血液采集
血液成分制备
产品检定
贮存销售
签发制品批号
计算机
系统独立系统联合发挥作系统重控制点指执行发挥正常作时会影响产品质量安全性关键环节谓关键环节重控制点步骤QA审计应评价系统重控制点关键素重控制点关关键素示例见附录B．表l～8血液机构应身系统制定相应审计方案
附录
附录A 21CFR 210～211600～680示例
药品CGMP保证血液血液制品质量执行规范实际行21CFR211部分CGMP通适成品药视需更新现范制造商灵活性选择适合产品生产工艺方法灵活性制造商制定工艺必须保证达CGMP求果厂商确信变更机制接受应申请批准符合21 CFR640 120变更工艺少数严谨工艺纳入CGMP批（ lot）名词 21CFR6003（x）中牛物制品词21CFR2103（b）(10）中做规定 21CFR210．3（b）（2）批次(batch)定义生产周期中根生产指令生产出特定范围具样质量特征特定数量药品材料达GMP求输血深加工目采集单位（a unit）全血种成分称lot称batch通常单位血液检验作时检验许单位血液部分进行检验（加工）记录中记录出现止单位结果时作整检验非批次需记录次签名 21CFR21O～226600～680规范条例互补充互相代非规范中明确说明出现遵守21CFR6OO～680 200～211中适规范时特适申报药规范代较般规范图提供 21CFR211条例 600～8OO互补条例示例21CFR211中点成药CGMP提供适血液血液成分CGMP附加标准
全血成分血液GMP
制剂CGMP（包括全血成分血液）
生物制品法规描述原始记录审查产品质量控制实验室控制仪器设备控制质量保证控制SOPs容求未明确谈QC／QA部门CGMP2ll部分明确规定负责 执行QC／QA功（21CFR 211．22）综合审计记录审查审查代表性产品生产记录组成件投拆意见回收产品废品必须全部审核
 
211．22
（a）应设置质量理部门该部门责权力批准拒绝原料药品容器密封材料中间产品包装材料标签说明书药品权审查生产记录保证发生错误果发生错误保证进行充分调查
（C）质量理部门责批准拒绝影响药品组分含量质量纯度规程规格
（d）质量理部门职责规程应写成书面文字种书面规程必须遵执行
211 180（e）
部分规定书面记录必须予保留记录中数评价（少年次）种药品质量标准确定否需改变药品规格生产规程检验规程必须制订进行种评价书面规程遵执行书面规程包括列规定：
（1）审查批药品批准未批准必时审查批药品关记录


（2）审查提出意见药品收回退回退工处理药品 211192规定种药品进行调查研究
 
606．100（b）
制订标准操作细应坚持包括步骤种输血体输血供进步生产全血成分血液采集加工配型试验贮存运销样细应供事操作员工合实际外
 
211 100
（a）必须制订生产工艺理书面规程保证药品具声称组分含量质量纯度规程包括部分中规定书面规程包括改变适组织机构起草审查批准回．质量理部门审查批准
（b）执行种生产工艺理职责时遵守生产工艺理书面规程执行时做记录偏离书面规程时进行记录说明理
 
606．100（c）
签发批成品前应复核相应规程（例 600～800条款）保存
关记录全部部分复核工作采血加工配型试验贮存
阶段合适时间进行未解释差异达规格标准批号进行
全面调查（包括追踪程结）记录档
211．192
药品生产检验记录包括包装加标签记录批药品准予发放销售前必须质量理部门审查批准确定否符合制订批准书面规程未说明原差异（包括理产量百分率超总生产检验记录中规定高低百分率）批药品药品原料符合规格批药品否已销售必须进行彻底调查研究符合特定规格特定差异关联批药品种药品必须进行调查研究调查研究必须书面记录包括结措施

 
 
 
复核记录根211．192条例特殊限定QC／QA部门负责进行QC／QA部
门QA专职数员组成机构履行职非专职员组成者身工作具终审权
应紧急情况制品签发办法SOPs
生产程记录实验室检验记录复核记录档应包括执行复核员名单签名复核整原始记录附属某批次结果复核签名
应根SOPs求指定复核制定复核标准
211．194（ a）
（a）实验室记录包括保证符合已制订规格标准全部完整检验（包括检查分析）资料
(7）检验员签名完成日期
（8）制订标准员复查原始记录准确性完整性复查签名
 
 
211．15
(a）必须制订书面规程规定符合标准规格批药品进行加工制度规定应采取措施保证加工药品符合确定标准规格特征种规程必须遵守执行
(b）质量理部门审查批准进行加工
 
60620（b）
负责采血加配型贮存运销全血成分血液员数教育程度训练验包括必职业训练等方面应适力完成承担务成品安全性纯度效力达规定水应水员工应具职务相称力通晓事生产检定操作职工作中运章项规定方面必训练验适知识
 
21125
（a）位事药品生产加工包装仓贮工作员应接受培训教育实践验完成委派项职务培训现行GMP（包括章中现行GMP条例条例求成文程序）中涉雇员容邀请合格员指导连续次培训保证雇员熟悉现行GMP（cGMP）求
（b）负责监督药品生产加工包装仓贮工作员应受教育培训验完成委派项职务作提供药品具安全性均性效价含量质量纯度保证
（C）足够执行监督种药品生产加工包装仓贮合格员
60620（c）
制品安全性纯度良影响员应全血成分血液采集加工配制贮存运销场调离Federal Register（40FR535341975年11月8日）陈述规范目影响完成职责影响产品安全性纯度员（例未采取防范措施情况工作员检验区生产区）调离生产区
211．28
（a）事药品生产加工包装仓贮员应穿着适合履行职责清洁衣服需头部脸部手部臂部加外罩防止药物受污染
（b）员保持良卫生健康
（C）未监督员充许进入限制进建筑物设施

 
（d）时间明显表现出带影响药品安全性质量疾病开放性损伤应避免接触种成份药品容器包装设备密封件中间体直病愈医学测定认药品安全性质量危害性时止教育员报告监督员药品利影响健康情况
606106O620条描述负责职责确保岗员适培训胜
职责
 
21134顾问
问题提出意见聘请顾问顾问应药品生产加工包装仓贮提出建议受足够教育培训丰富实践验保留姓名址顾问资格服务形式等履历资料
 
606．40（b）描述充分通风求
211．46描述进步详细通风控制步骤
 
211．46
(b）提供足控制空气正压微生物尘土湿度温度设备适应药品生产加工贮存需
（C）空气滤系统包括预滤器微粒物质空气滤器空气滤送生产区果空气循环生产区应测量尘埃含量控制生产区带尘埃生产区生产中发生空气污染应排气系统系统充分抽出空气控制污染
 
211．48
（a）持续正压应药品污染道系统供应饮水饮水应符合环境保护机构制订基饮水条件标准


（40CFR141部分）符合该标准水许进入水系统
（b）排水设备应足够直接连接排水安装防止虹吸倒流空气破坏设备机械设备[43FR450771978年9月29日修正48FRll4261983年3月18日］
21CFR606．40（ c）
应工作员安装充足清洁方便洗手装置
提供适洗涤设备包括热冷水肥皂清洁剂空气干燥器专毛巾易进入清洁厕设备
 
21168
（a）药品生产加工包装贮存动化机械化电子设备包括计算机类型设备惯例设计成文条款作标定检查核保证工作性良保留检查标定核等文字记录
(b）保障重生产变化计算机关系统进行操作培训操作记录记录认员制订计算机关系统输入中输出种方案记录资料应该查准确性输入计算机关系统档案资料实验室分析计算结果消外应保留文字记录相应证明资料起保存事先设计硬件复制品种选择系统复印件磁带微型胶卷等保证支持资料正确完整出现资料改动非消遗失时应维修
 
606．40（d）
提供安全卫生处理设备预处理
（1）全血成分血液采集加工配型试验程中形成垃圾纸制品
（2）适应运销全血成分血液
211．56
(a）作药品生产加工包装贮存厂房应保持清洁卫生环境受咽齿动物鸟类昆虫害虫侵扰（实验动物外）垃圾机废料定时卫生方法控制处理
606．60
(a）采血加工配型试验贮存运销全血成分血液设备应保持清
洁秩序放置位置应便清洁保养设备应标准操作规程定期进行检
查标化校正设备设计应符合章关全血成分血液设备正式规定
606．100（b）（15）
求SOPs应包括仪器设备维护校准程序
 
211．67
(b）制订药品生产加工包装贮存设备（包括具）清洁保养文字程序执行
程序包括定限容：
（1）分配清洁保养务
（2）保养清洁细目览表包括消毒览表
（3）详细说明清洁保养设备物品方法拆卸装配设备方法必须保证适合清洁保养求
（4）擦前批遗留物鉴定
（5）已清污染清洁设备保护
（6）前检查清洁设备
（C）保留保养清洁消毒记录211．180211．182说明检查


211．105（b）
（b）种药品批生产设备鉴性识号代号加识鉴号代号记录该批产品记录生产中种特殊型号设备该设备名字代鉴性识号代号
606．100(b）（16）
求书面SOPs容包括贴标示程序避免标签混淆保障措施
606．120
（b）贴标签操作应进行列控制：
（l）收标签时应已批准副复查校制品品种标签
容保证已批准副准确致
 
211．122
(a）制订详述标签包装材料接收鉴贮存装卸取样检验程序遵循成文程序接收药品包装贴标签前代表性取样检验
(b）符合成文规格标准标签包装材料批准发放符合规格者生产
（C）接收批标签包装材料均须签收测试接收拒收须保留记录
 
606100（b）（16）见述
606．120（b）
（2）制品种标签保存理应避免混淆废标签应销毁
（3）贴标签程序中应必全面核措施特殊标示程序标示设备应相应控制程序果动标示设备然前生产阶段标示容造成阶段标示出现差错时应采取相应措施防止出现类情况
211．125标签发放
(a）严格控制已发放药品标签
(b）已发放批标签材料须认真检查均性应批单批生产记录中说明标签致
（C）核发放已回收标签发现成品数量发出标签数量符差额超出根历史水先前定数量范围需偏差做出评估211192求调查原

包装见606．65（a）热原容器见60665（b）外观检查见606100（b）（13）
单位血液追查献血员程序成品容器见640 2（C）
（d）超出关批号控制号标签全部应毁
（e）回收标签保留应加证明标志贮存防止混淆
（f）制订发放标签详细控制程序遵循
211130包装标签操作
设计保证标签标示包装材料正确药品程序遵循程序结合列特点：
(a）预防混合物理操作空间物质引起交叉感染
(b）带批号控制号药品鉴允许检查该批药品制造控制历史
（C）包装工作开展前检查包装标签材料适 性正确性检验提供证明文件应 符合批生产记录
（d）前立检查包装贴标签设备保证药品离开先前操作时移开适操作包装标签材料检查结果批生产记录形式提供证明文件
211．134药品检查
（a）已包装贴标签产品结束工作时应检查保证批容器包装标签正确误


(b）操作结束时组收集代表性样品时检查标签
（C）检查结果记录该批生产控制记录中
606．40（a）（4）
初次血清学试验结果疑重试前指定位置贮存检全血血液成分
606．40(a)（6）
隔离贮存理处理适合应制品试剂
211．142
制订遵循药品入库程序包括：
（a）药品发放前质量控制部门检
（b）药品适温度湿度光线贮存影响药品均性效价含量质量纯度等
 
血液血液成分进步加工产品规格标准见600s．606．140
实验室检定程序应包括：
（a）实验室科学适宜规格标准试验检查细保证全血成分血液安全纯度效力效果
(b）监控实验室检定操作仪器性准确性精密度应适规定
（C）充分鉴理检定样品样品特定检制品单位相联系供血者特定受血者相联系
60660
（2）仪器检查标化校正应达达次数限……
211．160
（a）部门求制订规格标准取样方法试验程序实验室控制机制包括述容修改关部门起草复查质量控制部门批准遵守部门中求实施时提供证明文件成文规格标准取样方法试验程序实验室控制机制改动应作记录提供证明改动正确
（b）实验室控制容包括科学制订完善合理规格标准取样方法保证种成分药品容器密封件中间体标签药品符合均性效价含量质量纯度标准设计检验程序实验室控制包括：

 
(1）根接收成文规格测定药品生产加工包装贮存装货量中批成份药品容器密封件标签保证符合制定规格标准规格包括取样检验程序说明样品代表性适鉴程序求变质成分药品容器密封件作重复检验
（4）仪器设备量具记录装置准确度／精密度范围符制订成文方案包含具体说明书览表准确度精确度范围治疗作条款适时间间隔仪器设备进行标定符合已制定规格仪器设备
产品规格标准指求建议病毒标志物检查质量控制检定血液机构身 SOPs列出试验求结合起试验检查合格标准产品规格确定
 
211．165
（a）发放前批药品须实验室测定保证符合药品终规格标准包括特性活性成分含量效期短需菌／热原试验放射药物特殊批号述试验完成前发放规定快完成试验
（d）质量控制部门取样检验接收标准满足保证药品批号符合规格标准统计学质量控制标准标准批准发放药品条件统计学质量控制标准包括适接收水／适拒收水


（e）证实提供文件证明严格检验方法准确性灵敏性特异性重复性验证证明 211194(a）(2)项完成
（f）符合制订标准规格关质量控制标准药品应拒收返工返工药品接收应前须符合标准规格关标准
 
606．120（a）（1）
收标签时样标签核保证收标签特性容准确误样
标签完全致
606160（b）（20）（v）
提供保存贴标签记录包括负责签名
211184
(d） 211．122（C） 211130（C）制订规定检查复查标签贴签提供文件
 
生产质控记录应包括211．186（a）项求签名
 
211186
（a）保证批批间致性制备批药品生产控制记录（包括批量）填写日期签名（全名手签）单独核买填写日期签名生产控制记录制备文字加说明遵循
606160（a）（6）描述关保存记录求血液血液成分批次产品记录求记入记录生产程中重步骤记录应易查找
211．188
批生产药品批生产控制记录包括批关生产控制完整资料记录包括：

 
（a)适生产控制记录复查注明日期签名准确复制件
(b）完成批生产加工包装贮存中项重措施项提供资料包括：
(1）日期
（2）重设备生产线特性
(3）批成品中间体具体鉴
（4）加工程中成份重量容量
（5）加工程实验室控制结果
（6）前包装贴标签区检查
(7）适加工阶段实际产量说明理百分数说明
（8）完整标签控制记录包括全部标签样复制件
（9）药品容器密封件说明
（10）已完成取样
（11)生产中执行直接监督复查重程员身份证明
(12)调查 211192进行
（13）检查结果211134处理
 
 
606170
批次血液血液制品采血输血涉产生良反应投诉报告均应记录保存良反应报告应全面调查良反应应写出书面调查报告包括结调查程采血输血部门做该批成品记录部分档保存确定产品问题引起输血反应时类书面报告复印件应送交生产采血部门档保存
(b）证实采血输血发症致命性反应时应电话电报早通知生物制品评价研究中心属办公室出现献血员反应事件时事采血部门者发生输血反应时执行配型试验部门死亡发生7天生物制品评价研究中心办公室提出书面调查报告
 
211．198
（a）制订遵循说明处理药品关全部文字口头投诉成文程序程序包括质量控制部门复查条款投诉中药品项符合规格性根211．192该药品进行测定作调查程序应包括复查条款检查投诉否出现严重意外良药品反应根章310305良反应须FDA报告
(b）投诉文字记录保存药品专档案该药品投诉关档案保存生产加工包装该药企业中存放方会更利检查里保存涉药品文字记录该品效期满计保存年收投诉日期计保存年较长时间较长者决定某缺少效期非处方药品情况符合211．137中免条例文字记录保存时间应该药品销售三年
（1）投诉文字记录包括资料：发现方药品名称含量效价批号投诉者姓名投诉性质投诉答复等
（2）执行2ll．192中调查报告包括调查踪中发展调查报告记录复印件根211．180（C）保存作该调查企业中


（3）没执行211．192中调查文字报告应包括没必调查原负责检查负责姓名［43FR 45077．1978年9月29日修正51FR244791986年7月3日］
附录B关系统表格
表1质量保证
重控制点：QCQA部门生产部门分开
关键素：目标／政策
产品规格标准／验证
标准操作细
岗位／职员QACGMP培训
职考核熟练程度考核
遵守 CGMP
重控制点：质量控制
关键素：产品检验
仪器设备检验
试剂检验
重控制点：QA审计
关键素：独立集体工作系统
限定范围
预警水行动水
书面审计报告
评价报告／资料分析
信息反馈
纠正行动／追踪调查
重控制点：投诉／产品缺陷良反应评价报告
关键素：评价程序包括果
差错事报告
实验室差错报告
献血员招回（献血资料）
者投诉
输血疾病良反应
适时评价
追踪调查问题解决
重控制点：信息流
关键素：定期审查厂家求关修改审查纳入 SOP生产指令
颁布新SOPs废旧 SOPs程序
实际者提供新修改容包括换班辅助员
FDA致关员信函
理员准确时收信息
重控制点：仪器设备保养／维修
关键素：认证验收试验
预防性维护
常规／定期保养
保养记录
维修认证／验证
维修记录
表2献血员合格标准
重控制点：献血员征集
关键素：教育
重控制点：献血员注册
关键素：献血员提供准确资料
输入档案准确资料
持卡查／永久效
防止已知合格献血员献血办法（例注册时发现立延
缓献血员注册）
重控制点：献血员筛选
关键素：保密
效沟通
坚持健康史筛选指标
仪器／试剂
献血员意书
质量控制
记录审核
爱滋病教育／高危行问题
献血员医学史／献血员体检
保密部门剔（果实行）
重控制点：献血员认
关键素：认标准
授权者文件／员认
重控制点：献血员延缓注册（DDR）
关键素：准确信息／阳性鉴定
献血员暂缓注册采血未进步处理前应延缓注册咨询
解决分歧意见
更改信息
加入／删信息
查出解决重复信息
传递信息
审查记录
资料评估
永久时状况
资料检索
重控制点：献血员延缓献血
关键素：通知献血员／卫生局
复查
咨询
教育
认步骤
表3采血
重控制点：血液血液成分原料血浆采集
关键素：确认献血员血液容器样血液成分记录
验证献血员血液容器样血液成分记录相致
采血部门（手臂）处理
设备／供应物／IV溶液
采血装置／容量类型
献血员良反应
量出血／出血足
产品规格标准
动采血
收集种血液成分
保留成分容积／输献血员容积
物料障
程度差错
记录审核
重控制点：献血员免疫方案
关键素：抗原安全性纯度效力
抗原选择接种方案剂量
献血员抗体产生评价
标示／废品标准规格
低滴度合格产品废弃处理
献血员医史审核
良反应
产品记录审核
表4血液成分加工
重控制点：血液成分制备
关键素：血液制品原料合格标准（例延长采血时间合格献血员等）
制备时间／温度设备／重量体积
规定失效日期
抗凝剂／添加溶液容器
菌连接装置合装置／装置
记录审核
质量控制（包括取样量）
产品处置
运输保存湿度
离心条件
员／设备标示
重控制点：手工标示
关键素：前验收标签
产品失效日期
标签正确标示核实
标示记录
重控制点：计算机控制标示
关键素：竖条编码（条形码）
标签控制前协调
线印装置
根需／批次印
重控制点：检
关键素：保存未检定正复试
生物危害合标准适输血
体定（directed)产品位置
加工记录审核第二审核
消毁处置／记录
设备
重控制点：菌连接采血装置
关键素：焊接完整
导系统
表5产品检验相容性
重控制点：样品
关键素：查验／采集标示
完整性（稀释污染）
查找丢失样品样品次序
厂家说明血清血浆
贮存时间温度
记录／样品获取
运输条件转运时间
样品保留
处理
重控制点：试剂
关键素：接受记录／运输条件
检验前验收批号／未检材料检
贮藏条件记录
厂家说明
质控检验日进行验收新入库试剂
控检验／稳定性／重复性
记录差错问题厂家报告
重控制点：设备（某情况包括软件）
关键素：途／设计
两表面间相容性（适）
认证校正
维修保养
员培训／新设备介绍
验证
行测试
质控
记录
备程序
记录问题FDA报告
重控制点：实验室检验
关键素：样品标示／序放置完整性
试剂盒控制／数计算说明
反应性／阳性检验结果／确认试验
试验成立／问题
复试／检验结果
检验中断／启动关机／方法
查找丢失试验结果
记录
QA签发检验结果中作
培训职考核
熟练程度考核
表6签发产品批
重控制点：验证标签容
关键素：记录审核：求建议全部检验均应SOP厂家说明进
行结果符合签发求
记录审核：完成全部质控结果应接受范围
记录审核：签发种成分前审查生产记录专职负责批准
记录审核：标明正确失效日期审核记录档
重控制点：献血员适合条件
关键素：记录审核
延迟注册
表7贮藏分发
重控制点：产品贮藏
关键素：产品位置／点／次序
进步加工产品
检（physical VS ComPuter）
末检正重试生物危害符合规格标准适输血体
定产品
供分发产品
供交叉配血产品
设备
温度
警报系统
记录审核
重控制点：销售
关键素：记录审核
失效日期
外观检查
包装目
运输容器验证
运输温度
记录
表8系统计算机
重控制点：文件
关键素：硬件列出设备安装日期序列号保养记录电学环境求
安装说明保养日程表程序清单
软件列出程序程序总描述程序间相互作研制修改文
档检验计划检验审核评价清单
执行日期
部件系统验证
员／SOPs
培训计划纲文件
重控制点：计算机系统检验
关键素：研制维持检测数库／检验计算（SOPs）研制维持包括正常异
常界应力合格检验等情况
执行检验记录结果
行检验
明确记载检验程序评价
执行检验进行文件修订
重控制点：执行
关键素：定义记录执行程序
仪器连接仪
改变控制
批准程序
备份贮存程序
数转换程序
检验停工程序
软件文档（合适情况）
安全性／口令
重控制点：维修
关键素：硬件
应操作系统软件
改变控制
批准程序
文档
备份贮存程序
常规验证数系统
外请参标示计算机化重控制点表4部件加工仪器设备／软件表5
产品检验
名词解释
行动水：指需立找出偏差源限度做出必修正避免产
品质量受影响QC／QA部门批准评价该限度执行
示警水：需查找修正潜问题限度表明产品质量已产生影
响QC／QA部门批准评价该限度执行
验证：见质量保证验证
职考评：评价某入胜指定务程种考评方法
成分（部件）：（1）物理机械方法分离批血液某种成分[见21CFR606．3
（ c）］
（2）生产某种药物成分包括未出现成药中
成分[见CFR210．3（b）（3）］
（3）台仪器种计算机系统相联系软件部件
计算机修改控制：计算机系统数库中查询评价协调执行记载获正式批准修改程
重控制点：加工程生产程功区域果发生失调失控会成品产生良影响危健康
现行药品生产理规范（cGMP)：加工生产包装贮藏某种药品包括限血液制品方法设备控制保证产品安全性符合FD＆C法求具特性效力达应质量纯度特性[见Fh＆C法第501(a）（2）（B）部分］CGMP确保产品恒定生产始终受相应质量标准控制包括生产质量控制／质量保证程
关键素：生产程中重控制点步骤
维护保养：调节清洗修正彻底检修设备保证求运转软件系统维护保养包括修正软件差错调整软件适应新环境软件做增强处理
生产：血液机体产生安全输血前需进步处理生产名词21CFR600．3（u）某种程度定义扩增生产加工产品程中步骤生物制品规程加工血液方面甚血液采集前提出相应求FD＆C规程PHS规程（例献血员合格条件部分中）生产名词直接血液血液制品（40FR535321975年11月8日）
行试验行运行：时两两系统进行功检测包括建立系统新系统较（国际标准化组织定义：新改变数处理系统系统相数进行检验时系统视参标准）
制造：予参生产员生产关实际操作总名称
资格检验：通外源定期提供求知样品分析评价精确度合格范围实验操作力
程序描述：说明计算机程序功程序相互作描述
测试：加工仪器试剂附属系统否确定限度耐受范围发挥正常功确认程序测验确定该程序效性重复性
质量：产品加工程序预先确定规格标准致性
质量保证（QA)：确保影响产品质量体系素单独求发挥作进行计划采取行动
质量保证程序：根规程标准机构安全效生产合格产品建立保障体系该程序包括预防探测校正影响产品质量缺陷
质量控制／保证（QC／QA）部门：组成明确权力责进行理直接级权力责部门汇报保证机构贯彻执行产品保证政策理机构
质量控制（QC）：QA体系组成部门生产血液制品程中（包括检验分发程）采取控制措施确保机构员设备试剂生产操作具性准确性
规格：指某种产品体系某部门体系（适情况）物理特征组成表型特征标准求标准预期功行特征
测试实例（应计算机化系统）
正常值：效数组产生正常输出
意外值：效数产生非正常扭曲迫程序做出相应反应
界值：迫程序具界含义情形做出评估数介预置告警水行动水间数
应激值：迫系统达极限水数（渐进阶段户环境中）
错误值：错误数检测数设定应迫程序证明探测错误数做出适反应测试合格情形包括提供日期错误例 02／30／91 ABO血液错误例P型象血红蛋白负值资料输入
测试数库：通复制生产数库加入异常数数库包含正常异常数测试数库判断效认试验中检测计算机化系统
限定值：记录时确定功状况需导性数
决定否采取干预行动质量合格限度数字百分表示
信性：指认文证某种特殊工艺持续生产出符合预先规格质量求产品提供充分保证通验证预设工作效性评价体系信性
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
利中试生产设施开发生产生物制品指南
（ FDACBER1995626）
FDA宣布利中试生产设施开发生产生物制品指导文件已出台题利中试生产设施开发生产生物制品指南指导文件生物制品评价研究中心（
CBER）制定该指南阐明生物制品生产厂家利规模中试生产设施开发生产生物制品申报许证求制定该指南目削弱公卫生保护作．提高工业灵活性
CBER认重点新生物制品开发昂贵费时公司应预测估价程花费生产床试验尚未全部验证制品建造新生产设施制品终投放市场情况公司导致投资损失CBER认识某公司言佳财政选择利中试生产设施生产较规模产品批准产品投资建厂
CBER反利中试生产设施生产床制品少公司担心类设施符合申报生产企业许证求指南明确阐明中试设施适合申请生产企业许证指导原认证验证现行GMP规定作业相应法律法规运行设施（生产规模）均申报生产企业许证进步简化审批程序FDA正考虑改变某特定类生物制品申报程序取消单独生产企业许证申报求现代科学生产方法分析方法进步某通生物技术开发产品鉴定考虑方法FDA正考虑允许已充分鉴定生物制品次性申请规定理FDA计划 95年秋季召开次科学会议制订已充分鉴定制品定义纳入新程序理范畴
指南描述中试生产设施企业许证（ELA）申请条件步骤期转生产设施进行产品生产申请条件步骤指南提供信息：
1）采中试生产设施生产制品进行床试验证实安全性效性渡生产设施佳选择
2）利中试设施生产制品应提交申报审批材料
3）中试设施生产制品许证（PLA）中试生产设施企业许证（ELA）尚未批准前申报生产设施生产企业许证应提交审批材料
4）产品中试设施均已获许证申报生产设施生产企业许证应提交审批材料
5）考虑中试产品中试设施许证申报问题时根中试产品资料申报产品许证（PLA）应提交审批材料
指南阐述审批申报时间求制品致性设施生产制品数制品许证效期制品性
外配合改变程序FDA准备修订题已获许证生物制品生产安排政策文件该文件出版1992年11月 25日联邦注册录中（57FR 55544）
指南FDA生物制品生产厂家均具约束力均产生授权利特权受利
I前言
生物制品般包括疫苗血液血液制剂变态反应原提取液生物制品治疗制剂公卫生法规（PHS Act）（42USC262）第351节项理联邦食品药品化妆品法规（21USC 321）理 PHS法规定生物制品增殖制备生产应持末终止未撤消生产企业许证厂家中进行关许证发放求尚欠明确致申请者开始必制品安全性效性床试验前量资金投入规模生产设施果产品投入市场投资造成重济损失文件中CBER生物制品生产者开发者利中试生产设施生产生物制品提供许证发放步骤指南CBER认中试生产程序设施完全代表模拟相应商业化生产规模需求例生产规模外细胞增殖收获产品纯化方法应完全相类生产设施工业统称试验性设施（Pilot facilities）文件中称中试（Pilot）类生产设施区研究开发设施者必现行GMP条件操作
Ⅱ背景
CBER认重新生物制品开发耗资费时公司必须够预测评估程花费建造规模生产设施生产尚未全面床验证制品果发生延误制品进入市场导致量资损失CBER认某公司言佳财政选择利中试设施较规模生产制品批准产品进行投资建厂时CBER反利中试设施生产床制品（果类制品生产符合床观察药品求）少公司担心中试设施中试产品符合许证申报求CBER认认证验证现行GMP规定作业相应法律法规运行设施（生产规模）均申报生产企业许证指南描述中试生产设施许证（ELA）申请条件步骤期转生产设施进行产品生产申请条件步骤
Ⅲ 指南
文中试生产设施产品许证申请（PLA）生产企业许证申请（ELA）试验性新药（IND）申报提供指南
1．利中试设施生产产品进行床试验证实安全性效性渡生产设施佳选择
制品试验性新药（IND）申请材料应包括床观察证实安全性效性制品产生物制品许证申请材料采中试设施生产制品数果新设施扩规模工艺设施中生产制品床安全性效性验证作申请许证产品IND申请中应时间表新厂址工艺程加阐明时应提交产品较草案新设施新工艺生产制品先前床试验制品资料应新制品进行床试验前提交IND果新设施新工艺生产制品准备安全性效性床验证应INDPLAPLA增补案中提交两种制品较材料INDPLA申报中应包括采新生产工艺设施产生生产变化描述稳定性资料
2申报中试设施产品许证审批材料
中试设施生产制品资料数作PLA申报材料ELA应包括全套FDA 3210表包括中试生产设施描述生物制品生产企业许证申请表（FDA3210）果生产设施已获许证应提交包括特定新制品ELA增补案设施设备规模应适认证验证应符合（仅限）联邦法规21CFR第210211600820节规定审批PLAELAELA增补案前应进行许证发证前视察先行申报 PLA ELA生产设施已绪供视察PLAELA中提出声明说明提交份申请约日期CBER拟规定正常审 批时间审批时间提交PLAELA（CBER收申请日起审查标准申请12月优先申请6月增补案6月）CBER通常时批准ELAPLA申请应注意提交两份申请时间未提出标准申请6月优先申请3月提交两份申请中份者CBER视申报成立发该申请者未批准函
3．中试设施产品许证（ PLA）中试设施生产企业许证（ELA）尚未批准前申报设施生产企业许证应提交申请材料
情况指南第Ⅲ章中第2节规定执行
FDA中试设施视察必进行中试设施许证外申请者求取设施许证材料应PLA批准前申报：
改变生产程描述
新旧设施中生产制品较数
新设施产品工艺验证文件稳定性资料
CBER准备建立单独 PLA档案制采新参考号 6月复审规定新ELA应包括新设施介绍全套ELA 3210表果新设施已获许证申请者应提交ELA增补案附新制品资料申报新PLA档案ELAELA增补案中应包括视察新设施声明中试设施复审继续直申请者求批量中试设施产品投放市场前审批果申请者求发放批量中试产品许证申请者提出书面申请撤回批ELAFDA设施进行视察情况中试设施生产制品床试验投放市场CBER新申报时间求审查程序新设施ELA进行审查CBER发表新参考号分 6月12月 6月完成优先标准补充申请审批CBER算 6月完成新 PLA档案审批果申请者提出两种设施许证申请FDA两种设施进行视察申请者应明确指出希优先获许证设施CBER集中资源首先审核该项申请
审核通种联合产品生产企业许证申请均获准新生产设施新设施产品尚未申报审批前中试设施产品申请许证应注意提交申请时间 CBER新ELA审核时间（CBER收申请日起审查标准申请12月优先申请6月增补案6月）长新PLA档案审核时间未提出标准申请6月优先申请3月提交两份申请中份者CBER视申报成立发该申请者未批准函
4．制品中试设施均已获现行许证时提交生产设施许证申请
申请者希获生产设施产品许证时应提交已获准中试设施产品补充材料新设施
ELAELA增补案PLA增补案应包括新设施产品资料包括现存生产改变描述（见申报制品生产企业许证时应报告 改变容指南（60FR175354月6日1995））应提供设施产品较数工艺验证材料新设施产品稳定性资料申报新ELA应提供填ELA 3210表格附新设施描述设施已获许证应提交含新制品介绍ELA补充材料提交类材料中应包括关设施供视察声明CBER根规定复审时间安排审批PLAELA增补案（生产设施改变复审需6月时间）材料审查通时CBER时批准ELAPLA增补案未提出标准申请6月优先申请3月提交两份申请中份者CBER视申报成立发该申请者未批准函
5准备申请中试产品中试设施许证时提交中试产品数PLA
CBER允许未申报中试设施许证情况申报中试产品床试验资料数PLA审核中试产品床试验产品申报许证设施产品数申请者获新设施产品许证时中试设施应具备供视察条件申请者未申报设施许证情况该设施生产床试验产品资料申报产品许证批准设施中生产产品方投放市场PLA应包括中试产品资料提交申请时求视察中试设施声明拟申报中试代表产品许证特定时间中试设施产品稳定性资料做申报材料外原设施ELAPLA时提交开始PLA审核提交应申请许证设施投产该设施产品供审查时提交ELA果ELA开始审批PLA提交申报材料应包括较两种设施产品PLA增补案增补案应包括产品稳定性数工艺验证生产程中变化资料（见指南（60 FR 17535））CBER规定复审时间ELAPLA进行逐审核（CBER接受时间起标准申请12月优先申请6月生产增补案6月）然ELAPLA必时申报应提请申请者注意 CBER时批准IKLA PLA未提出标准申请 6月优先申请3月提交两份申请中份者CBER视申报成立发该申请者末批准函
6．设施产品致性证数较
某种制品生产中试设施转移外设施应PLA增补案中制品致性证两种制品较工艺验证加描述IND进行修正应控制条件储存足够量中试保留样品便制品进行逐项检定鼓励申请者CBER起讨决定分析检定全面床试验资料制品必需
7．审批时间框架提交申请时间
申请者希提交PLA配套材料前提交中试设施 ELA提交申请材料应包括设施供视察声明FDA原计划申报许证产品投入生产时设施进行视察某情况生产设施视察提交PLA前提交ELAPLACBER正常复审时间审核时间提交PLAELA（CBER接受日期起标准申请12月优先申请6月补充申请6月）CBER根审批结果发出信函（已批准正批准批准）结束审批工作
申请者应意识时间提交ELAPLA定时申报更缩短审批时间然早提交申请较早CBER反馈意见申请者更时进行修正综述CBER时批准PLAELA增补案
产品生产厂家分担完成（见57 FR 55544 at 55545）应时提交PLA中间产品终产品材料便产品进行全面审核中间产品决定PLA终产品否批准关键环节时间提交ELA PLA材料
申请者应估价提交CBER申请材料时间结果需时申请者利灵活提交申报时间申请者应认识提交建档材料成熟完全CBER申请者造成必资源浪费取理想床试验初步数资料前建议申请者提交ELA材料申报制品严重生命威胁疾病时申请者应考虑时提交ELAPLA防止批制品设施尚未申报许证批准
指南未包含容申请者应通适许证申请部门联系找适宜指南联系部门包括：药品研究审评办公室血液研究审评办公室疫苗研究审评办公室生产设施许证办公室
8．许证审批程中制品限制性
果申请者求申请中试设施许证审批程影响制品产量治疗严重威胁生命疾病重新制品申请者应审批程中制品限制性结果予估价
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
单克隆抗体制品生产检定考虑点
（ FDA CBER 1994）
前言
生物制品评价研究中心（CBER）正修订1987年单克隆抗体生产检定考虑点（PTC）该新修订目开发单克隆抗体制品发起研究员提供帮助包括研究性新药（IND）产品许证申请时应提交资料
文件取代1987年文件反映次国国际会议讨值重视验会议包括：
1．FDA疫苗相关生物制品咨委会1990年8月召开生物制品潜逆转录病毒污染讨会
2．国际生物标准化学会（IABS）发起 1990年 11月伦敦召开生物制品安全性病毒学方面会议
3．FDAIABSNIH国家疫苗规划办公室HHSWHO发起1991年3月Bethesda召开传代细胞系前面问题国际性会议
4．FDANIH联合发起1992年1月Bethesda召开单克隆抗体床前安全性试验工作会议
单克隆抗体生物制品样供参考法规（21 CFR部分200～299600～680）CBER制定考虑点样单克隆抗体考虑点试图包容问题特殊制品产生特殊未包括考虑点中问题时应根具体情况进行评估文相应法规生产生产设施进行讨发起应治疗药物研究评审办公室生产企业许证发放产品监督办公室磋商
某单克隆抗体CDER负责审查工作CDRHCBER联合复审中心辖权1991年10月CBERCDERCBERCDRH部协议执行考虑点适合协议联合复审单克隆抗体
档案
研究性新药申请初始阶段需全部完成文中讨资料应床开发阶段适中心话方式指导资料断完善某情况设施相方法制备检定单克隆抗体时资料应单档案（Master File）中般说提交IND档案企业生产许证申请中生产数信息引文献均予保密
范围
活体外净化骨髓免疫肿瘤细胞活体外净化骨髓装置相结合单克隆抗体收集细胞（红细胞生成素干细胞）纯化制品单克隆抗体应直接病单克隆抗体纯度效力安全性外源病毒污染标准相符合外活体外骨髓处理（补体）通常单克隆抗体结合试剂应符合直接患者单克隆抗体标准
单克隆抗体组合
CBER认前途床前评估床理基础提出进行联合单克隆抗体床试验许证申请尚讨目前预期两种组合单克隆抗体类型：杂合型（cocktails系列型（panels）
文件中cocktail定义固定例混合成两种种单克隆抗体相关靶抗原包括位传染性病原体种抗原种肿瘤相关抗原制品组合理应清楚床环境床资料外应证明组合单克隆抗体间干扰作鉴定协增强效应必设定种成份剂量剂量设定应根床前床资料证明某剂量必需量限组合物中单抗例定
文中 panelse定义直接抗相关抗原（肿瘤抗原HLA型抗原）单克隆抗体系列根靶抗原特性中种种单抗单患者单产品申请许证举例说单抗系列包括淋巴瘤抗独特型单克隆抗体直接抗细菌病毒血清型单克隆抗体必须设定种成分剂量证明全系列效性重床试验中应首先获系列中成员某床验资料
制品生产检定
I．单克隆抗体生产
目前数单克隆抗体抗体产生细胞骨髓瘤细胞化学诱导融合获限传代杂交瘤细胞系生产某情况杂交瘤细胞系次融合会产生三重四重杂交瘤预料重组抗体抗体会增加般说面述原适杂交瘤异源杂交瘤产品考虑源种类生产程序应符合现行GMP标准
A．细胞系
应提供列材料
1亲（骨髓瘤）细胞系源名称特征包括合成分泌重链轻链免疫球蛋白
2动物种类品系特性免疫细胞组织源
3获限传代细胞系程序描述建立细胞系时采
4 免疫原鉴定特性
5．免疫方案描述源单克隆抗体体外体（严重联合免疫缺陷（SCID）鼠模型）免疫程序均应描述
6．筛选程序描述源单克隆抗体应描述富集抗原特异性B细胞群步骤
7细胞克隆程序描述（细胞含血清培养液适应血清培养液时应重新克隆）
8建立运细胞库生产细胞库采种子批系统描述
参文献（1）
B．组织培养法制备
应提供列材料
1组织培养程序描述果制品完全体外制备细胞接种鼠前体外传代
2．培养液描述包括合格证明检定结果（杂交瘤增殖血清应污染物外源子）
3．防止控制病毒细菌真菌支原体污染措施
4．进步生产细胞组织培养清合格标准
C．腹水法制备
1应提供关接种细胞资料（见B．1）
2．动物理应符合NIH （关实验动物饲养指南保证获生产单克隆抗体稳定致高质量腹水应建立起动物健康监控规划包括检疫程序前哨动物部卫生监测计划（包括支原体筛检）建议特定病原体（SPF）鼠应确定前哨鼠进行血清学检测频率通常根病毒污染情况确定检测频率
3 制备腹水记录应包括列容：
a．动物种属性年龄
b．动物供应者
c．降植烷量
d．接种细胞量浓度
e．初次免疫细胞接种腹水采集时间
f．腹水采集次数方法
g．批定义
h．动物垫料饲料水
i．笼动物数量
3．流程环境条件
D．纯化
单克隆抗体纯化工艺应具备列特征：
1生产技术应防止引入污染物包括动物蛋白材料DNA毒素热原质培养液成分层析柱析出成分病毒等
2．纯化前测定病毒污染程度
3．应包括已知灭活逆转录病毒步骤（见参考文献2第六章病毒验证讨）
4纯化方法种外源子力验证建议验证试验中采种模拟病毒包括颗粒病毒DNARNA基组病毒化学敏感耐受性类脂包膜包膜病毒株试验应实行生产工艺时进行
Ⅱ．纯化未修饰单克隆抗体鉴定
单克隆抗体体试验前应抗体特异性结构完整性效力等进行精确全面鉴定单克隆抗体应非免疫球蛋白污染物应套适合格部参品作批间较标准套参品应知结构特异性效力适条件保存定期检测结构完整性产品改进时参品应相应改变Ⅲ期床效力试验开始时应终确定
A．结构完整性
应联合SDS－PAGEIEFHPLC适理化方法证明纯化抗体未断裂未聚合末修饰（：碳水化合物侧链缺失）应生产批部参品进行列较
B 特异性
试验应证明单克隆抗体靶抗原特异结合旦抗体特异性鉴定应组织进行交叉反应性筛检（见第Ⅵ章）
1． 1．  直接结合试验应包括阴阳性抗体抗原少应检测种型匹配相关（阴性）抗体阴性抗原应包括种化学结构相似抗原性关复合物（具相似化学性质电荷电荷密度）
2．蛋白糖蛋白脂糖含反应表位分子进行生化测定测定身抗原表位抗原决定簇碳水化合物应确定糖组分连接键正位异构体构型
3．应利具确定结构抗原制品（寡搪肽）采抑制法技术鉴定抗体特异性复杂生物混合物直接结合试验试抗原抑制剂批应进行标化应定量测定抗体结合溶性抗原抗体抑制
4．旦确定某抗体特异性重定量测定抗体结合活性采切行方法亲力测定亲合性测定免疫反应性测定联合方法目前已许已发表方法适抗体结合活性测定
C．抗独特型疫苗
l．果抗独特型疫苗（Ab2疫苗）应鉴定Ab2免疫原例传统型（Ab2 α）抗原模拟型（Ab2 β）（5a)
2．苦获 Abl抗体（名义抗原）应证明 Ab2 β疫苗适Abl群抗体具反应性
3．应远交系交系动物Ab2制品免疫应答（靶抗原）适性进行研究
D．效力试验标准规格
效力试验鉴定产品监测批间变异确保产品稳定性通结合试验血清学试验动物模型中活性试验体体外功试验进行效力测定理想情况试验方法制品公认生理活性具相关系足够敏感性检测出制品床功差异效力试验保证制品批间致性效力试验应重复敏感
1．抗体结合活性ELISARIA放免沉淀反应细胞毒性反应流式血细胞计数适宜标准方法定量测定活性应mg抗体特异性抗原结合活性表示产品应部参品已建立起适抗体亲力测定方法该方法助试验计算效力时应采行线性生物测定法类似效统计方法
2．单克隆抗体效力测定动物模型测定活体功方法测定该法常常较繁琐难标准化体体外测定抗体活性相关时动物模型助验证体外效力测定方法
3．效力试验中充分反映制品生物学活性允许值范围应特定抗体验较理想床结果应效力试验相关发展意义代体外效力测定法意味着应床开发阶段批制品
Ⅲ．毒素药物放射性核素试剂偶联单克隆抗体特殊考虑
先前讨关末偶联单克隆抗体（裸露单克隆抗体）建议外免疫结合物生产厂家应注意列容：
A．免疫结合物构建
应提供构建免疫结合物试剂详细资料包括：
1．单克隆抗体部分种型结构纯度结合特异性
2描述单克隆抗体连接成分：毒素药物．酶细胞子包括：
a．成分源结构制法纯度（包括证明外源子）特征（成分购进应提供厂家分析证书）种成分毒性描述应充分说明出现良作发生率严重性
b．源传代细胞遗传工程方法制备产品［（转染瘤细菌合成嵌合易形互补决定区（cdr）接合单链Fv抗体重组免疫毒素等］应符合参考文献（1）（17）（18）中提出建议
3．制备免疫结合物化学试剂描述连接剂螫合剂资料应该包括试剂源制备方法合成纯化时残留杂质测定等容应提供合成反应途径图解免疫结合物制备中化学试剂毒性关已公开发表部相关资料活性中间体应灭活
B．免疫结合物纯度
1．应采取特殊措施保证抗体制品外源免疫球蛋白非免疫球蛋白污染物物质构建免疫结合物程中核素毒素药物发生反应
2．应规定终产品中游离抗体游离组分限量进行测定
3．建立成品批签发标准探索免疫球蛋白置换数量效力稳定性间关系首先应测定偶联物抗体均率抗体结合部分数量结合位置
C．免疫结合物免疫反应性效力稳定性
毒素药物偶联抗体会改变中成分活性
1．应采适方法评估偶联前免疫反应性（34）
2．放射造影力外应评估免疫结合物效力
3．免疫结合物构建应确定免疫反应性变化百分率限值作产品规格组成部分
4．应检测免疫结合物体外稳定性免疫结合物合血清中37℃孵育少2产品半衰期规定间隔时间分析等分样品中完整免疫结合物分解产物浓度应详细说明评估产品稳定性条件阴阳性
5．应检测免疫结合物体稳定性
a．动物进行药物动力学组织分布试验中应测定某免疫结合物单成分未修饰单克隆抗体组织分布进行较
b．应证明种成分靶组织引起潜毒性
D．放射性核素偶联单克隆抗体特殊问题
1．放免结合物应标准化严格控制验证方法制备应建立检测游离位素结合单克隆抗体标记非免疫球蛋白物质放射性百分率方法
a．建议放射性标记单克隆抗体初始研究新药申报包含2～3次放射标记试生产分析结果应证明制备产品具免疫反应性菌热原质项工作应种试剂进行研究工作员做
b．制备免疫结合物时应放射药物级位素药物档案中应提交种位素菌热原质分析证书横参信函
C．标记试生产程中应测定终产品中价结合游离位素浓度标记试剂分解产物残留水
d．应描述病应前进行质控试验
2．动物试验
a．动物生物分布资料I期床前剂量估定
b．表达靶抗原动物模型更揭示抗原沉积点非预期抗原表达组织
C．异源移植模型评估组织靶位抗原非特异性放射免疫结合物分布问题．助鉴定关正常抗原表达组织交叉反应性分布
d．应足量动物进行研究获具接受变异系数（通常20％）放射性剂量估算
e．应放免活性充分时间点进行全程计量确定放免试剂早期晚期清期
f．应放免结合物置血清中培育方法测定体外稳定性（参见第Ⅲ章C．4）应建立起估测游离位素结合单克隆抗体标记非免疫球蛋白物质放免活性百分率方法
IV．质量控制产品检定
A．细胞系鉴定
单克隆抗体作生物治疗制剂生产单抗细胞系鉴定应表1文献（1）中述试验方法细胞库（MCB生产细胞库（MWCB）分筛检次包括源外源子常规电镜检查助检出细胞系中潜高水病毒污染MWCB源MCB次组织培养传代采新引入污染物简化检查法行病毒污染应进行鉴定定量确定纯化程应达清病毒指标纯化程发生改变厂家应该重新评估病毒污染程度重新验证应采适感染试验确定种病毒细胞亲嗜性采组织培养发酵生产应检测生产终末细胞（EPC）评估新污染物引入生长环境滋生作出评估培养基生产规模发生变化时应重新检测EPC
表1细胞系鉴定检测试验
试验 MCB MWCB EPC
菌试验 + + +
支原体检查 + + +
病毒检查
常规 + + +
种特异病毒* + +
逆转录病毒** + +
性检测 + + +
*：检查啮齿类灵长类病毒（包括逆转录病毒）等
**：鼠源杂交瘤外细胞基质均应检查逆转录病毒
1．应通菌试验证明细胞系细菌真菌污染推荐支原体（培养培养）检查方法参见参考文献1
2外源病毒检查应包括文献1述常规体体外试验
3．种特异病毒检查(非逆转录病毒）：
a．鼠细胞系（见附录2）应采鼠抗体产生（MAP）试验法鼠细胞系采鼠抗体产生（HAP）试验法鼠细胞系采鼠抗体产生（RAP）试验法淋巴细胞绒性脉络膜脑膜炎病毒（LCM）包括非致死株推荐进行体试验HAP试验应包括鼠微病毒（见第Ⅲ章B．1．C）
b．污染LCM呼肠孤病毒轮状病毒仙台病毒汉坦病毒原料应单克隆抗体生产
C．猴细胞系应进行列病毒检查：疮疹病毒（狼疱疹SA－8）巨细胞病毒（sCMV）脑心肌炎病毒猴出血热病毒（SHF）猴水痘病毒（sVZV）腺病毒SV－40猴痘病毒麻疹病毒Ebola病毒
d．细胞系应进行列病毒检查：EB病毒巨细胞病毒（CMV)乙肝（HBV)丙肝（HCV）病毒疱疹病毒6型（HHV－6）细胞供者病史建立原代细胞系组织类型提示病毒
e．种类细胞系检查请CBER咨询
4．细胞系逆转录病毒检查：源种类细胞污染逆转录病毒设计逆转录病毒检查时应考虑点：
a．应考虑制备单克隆抗体鼠源细胞身够产生传染性鼠源逆转录病毒必证实鼠逆转录病毒存应收获物系列测定原材料逆转录病毒量证明批间均衡致（1）应通试验证明纯化工艺效逆转录病毒（见第IV章D）
b．鼠骨髓瘤细胞系杂交瘤表达逆转录病毒（6）应检测样品种广谱逆转录病毒敏感细胞系培养敏感检测试验方法相结合证明存逆转录病毒包括检查EPC干批产品感染性试验电镜均未检查出逆转录病毒必进行进步验证鼠细胞系制备单克隆抗体纯化工艺求包含灭活逆转录病毒步骤
C．鼠细胞系表达缺陷型逆转录病毒颗粒（7）该细胞否够表达感染性逆转录病毒尚知发起应现敏感感染性试验证明存感染性鼠逆转录病毒包括检样品广谱逆转录病毒易感细胞系培养敏感检测方法相结合制品进入Ⅱ期床关键性床试验阶段必利广谱指示性细胞（包括细胞系（89））进步检查潜感染性病毒检查鼠逆转录病毒感染性试验效性尚未确定应通试验证实纯化工艺充分逆转录病毒颗粒（见第Ⅳ章）
d．猴细胞系应检测SIVSTLVSRVFVHIVHTLV
e．细胞系应检测 HIV12HTLVSIVSTLV FV
5．确认试验应证实细胞系物种源典型特征证明细胞系交叉污染
B．原材料纯化半成品成品批质控标准规格
应批产品进行质量监控[21(FR6003（x）］该求样适末加工材料纯化材料
表2批产品安全性试验
试验 原材料 半成品 成品
菌试验 ＋ ＋ ＋
支原体检查 ＋ —
病毒检查
常规＊ 十 — —
种特异病毒＊＊ ＋ —
逆转录病毒＊＊ 十 — —
核苷酸 十 —
般安全性试验 — ＋
毒素 — － ＋
＊：非腹水原料应进行含三种指示细胞体外常规试验 体试验通常做次生产方法改变需重复检查
＊＊： MAP RAPHAP试验仅检查腹水原料
＊＊＊：逆转录病毒定量[感染试验电镜检查（TEM）］鼠源杂交瘤重杂交瘤MCBEPC阳性进行TEMRT DNA杂交培养试验重
1．原材料
a 收获组织培养液应细菌污染菌试验证明收获合腹水中存活污染物应进行定量根生产验规定细菌污染允许范围应定期鉴定污染细菌种类污染量反复超允许范围时应鉴定细菌种类建议贮存前收获腹水 045 μm滤膜滤（见第 Ⅸ章B1．b）
b．末纯化杂交瘤清澄清滤前应进行培养培养支原体检查（l）末加工腹水进行支原体检查前 045μm滤膜滤贮存≤60℃时样方式处理已知抗体滴度阳性阳性抗体滴度降10倍种处理腹水方法允许动物群末纯化腹水杂交瘤清中检查出支原体污染物材料应进步加工
c应常规三种指示细胞系进行体外病毒检查体试验通常做次（作细胞系鉴定部分见第IV章A）生产方法改变时应重新进行（1）含鼠细胞生物反应罐会常规体外试验漏检鼠微病毒污染MAP试验检查病毒较敏感总说连续生产单批生产时应根实际验规定调整监测频率某生产设施污染某特定病毒时应考虑修改常规检查计划便检出该病毒
d．应进行种特异病毒检查（见第Ⅲ章A3）
e．收获腹水应进行鼠逆转录病毒污染物常规定量检查应干批组织培养物进行逆转录病毒污染定量检查确定特定细胞系生产程病毒污染水（l）（见第IV章D）检查非鼠逆转录病毒应支持广范围逆转录病毒[包括非灵长类病毒（l）］生长试验细胞系检查原材料
f．组鼠制备腹水生产腹水前组鼠应重复进行种特异病毒血清学监测
2纯化半成品
末修饰修饰单克隆抗体纯化半成品常规检定应包括列检定（免疫结合物讨见第Ⅷ章）：
a．化学纯度包括外源动物蛋白残留量成品中白蛋白免疫球蛋白污染物应原非原处理条件考马斯亮蓝染色银染方法递增量纯化物进行SDS－PAGE分析应检出灵敏度1ppm（相单克隆抗体重量）方法检测污染控制检出水
b．分子完整性：包括否含聚合变性断裂产物
c．免疫球蛋白类亚类
d．部参考品标准相批半成品单克隆抗体（重链轻链）IEF图谱
e．菌试验
f．检查细胞库细胞（见第Ⅲ章A）中检出传染子应验证单克隆抗体纯化工艺效果应初连续3～5批纯化半成品进行检查证实纯化工艺已污染物细胞库细胞中检出感染子批纯化制品应进行检测建议扩生产前CBER员咨询
g．加赋形剂前建议批产品进行DNA含量检定果成品中细胞DNA含量应超100pg／剂量
h．潜污染物添加剂（抗生素试剂防腐剂亲合柱析出成分蛋白A）检测定量试验应青霉素β酸胺类抗生素标准方法痕量污染物提出IND申请前接受值应CBER讨腹水制备中降植烷应证明敏感方法检测出
3．分装成品
应批分装成品进行列检定（21CFR6003（y））某特定情况（放射性标记）应成品检定特殊事宜CBER讨情况定
a．蛋白浓度
b．效力（21 CFR 61010）
C原非原条件产品聚丙烯酰胺电泳中移行部参考标准进行
d．菌试验（21 CFR 61012）
e．般安全试验（21CFR 610．11）
f毒素测定：鲎试剂试验（LAL）21CFR 610．13中述家兔热原试验验证认种行等检定方法（ 21 CFR 6109）应美国批准试验系统进行LAL试验LAL源厂家应重复较性试验家兔热原LAL检测程序较试验必条件应根实际情况讨确定请参见文献（11）
g适鉴试验（21 CFR 610．14）
h．水分（21 CFR 610．13）测定
i．防腐剂（21 CFR 610．15）测定
C．产品稳定性
产品稳定性应满足床方案制定求快速稳定性试验资料作产品审批标定辅助材料代实时资料
1．应制定稳定性检定规划包括规定效期全程中间隔定时间进行制品化学完整性试验（断裂聚合）效力试验参见文献（11b）床试验制品贮存期间发生显著变化应CBER报告申请产品生产许证研究阶段前销售时容器封盖分装成品进行支持效期稳定性试验
2．确保制品生物活性稳定性试验应包括厂参品试验全程中批试验抗原（：纯化抗原细胞组织）定量试验应较效力界定生物活性
3．快速稳定性试验助鉴定建立稳定性指示试验重参数批制品趋分析方法进行指示稳定性监测
D．某已知污染物定量
应估测原料中污染物含量例：末纯化单克隆抗体常污染鼠逆转录病毒污染物病毒应探讨细胞疑亲嗜性（通培养法）然模拟纯化系统中利污染物身已知污染物典型相似物（逆转录病毒模型）证明纯化工艺会污染物效果（1）
低速离心澄清外进行加工前应先未纯化浓缩清液腹水进行检查建议啮齿动物细胞系生产污染逆转录病毒腹水清应浓缩样品电镜检查法定量TEM法检出病毒颗粒应假定具感染性便制定逆转录病毒指标TEM结果阴性假定逆转录病毒效价 1×106ml非啮齿动物杂交瘤细胞制备腹水清仅应 TEM检查应灵敏现代水感染性试验检测类试验检出细胞基质产生已知类型逆转录病毒
验证纯化工艺灭活逆转病毒效果重求参考文献12讨逆转录病毒验证试验设计该试验目证明初期污染相纯化工艺病毒量低限度减少3 log第V章提供验证Ⅰ期单抗床咽齿动物逆转录病毒简化方法应制品开发初期CBER讨灭活病毒工序设计验证
V．某Ⅰ期床单抗简化验证程序
病毒程序选择CBER员咨询实施简化验证方法
A．般考虑
程序代目前规模生产技术证明列特定条件啮齿动物逆转录病毒充分简化验证程序逆转录病毒污染物检测鉴定方面规模生产中采全面原料中逆转录病毒含量测定证明病毒简化程序关键环节
1．简化验证程序适啮齿动物细胞腹水组织培养制备单抗适细胞基质制备单抗
2简化验证程序仅床适应症患者生命直接受威胁严重衰弱性疾病（发病）治疗方法前治疗手段理想时 21CFR 34．生命直接受威胁疾病定义：月会发生死亡早期治疗造成早死亡疾病程
3．文前文文献（1）述关外源子检查建议应简化
4．简化验证程序支持Ⅰ期床试验支持正常量群象试验
B．简化验证程序证明逆转录病毒
1．般考虑
a．原料中逆转录病毒滴度（见第IV章D）应指导量化纯化程
b．建议纯化工艺应包括强化灭活病毒工序强化工序定义条件（柱层析缓液pH离子强度）种单抗均效强化工序包括低pH加热溶媒污剂处理滤列方法证明强化方法病毒效性：a)模拟系统（属验证）b）代抗体（通常源种种型）病毒程序相较两种方法发起完成c）单克隆抗体产品身逆转录病毒
C 亲离子交换层析污剂处理认强化方法处理方法应单克隆抗体制品身员单克隆抗体进行纯化逆转录病毒方法进行验证单克隆抗体制品代单克隆抗体结果应符合B．3项应法系统项相似性规
2．属验证
属验证种适群类分子病毒灭活综合方案方法文件中横参适已发表资料应包括高质量广泛承认科学研究结果CBER判定某项资料符合科学质量高标准发起实验室提供资料建立尚未发表病毒方法样接受
3．应法系统
a．属病毒验证程序中代单克隆抗体应Ig单克隆抗体制品类种型／种（lgGlgM）电荷生化特征方面相致般说代单克隆抗体制品抗体种源（均源腹水杂交瘤／转染瘤清）
b．属病毒系统中灭活病毒步骤纯化单克隆抗体方法应相类似病毒灭活步骤中应特注意层析柱洗脱缓液条件包括pH离子强度柱序蛋白浓度保留时间压力条件湿度伴规模扩出现潜问题纯化病毒步骤相似性应发起产品验证实验室提供资料
4考虑事项
a．制品进入扩Ⅰ期Ⅱ期床阶段应提供证明逆转录病毒充分（见第 Ⅵ章D）全面完整验证资料资料仅通模拟纯化中现实抗体制品证明单克隆抗体纯化程序身已知高度疑病毒污染物时应证明步骤灭活病毒作
b．采简化验证程序生产单克隆抗体Ⅰ期床试意文件准确反映出鼠源逆转录病毒偶然感染潜危险
C．担心鼠源源逆转录病毒基序列间潜相互作简化验证程序适预定已知逆转录病毒感染（ HIV12HTLV－12)患者抗体程序适预定患实质性细胞免疫缺陷病抗体
d．表3列出采种强化非强化灭活／步骤预测逆转录病毒范围（ log表示）目帮助生产者设计单克隆抗体纯化工艺特定步骤逆转录病毒效果取决种素应根实际验考虑素
表3(2)
灭活步骤 强化步骤 报导病毒log
pH3～4．5 3－4
加热 4
溶媒／污剂 5
滤（0．02～004μm） 4－8
污剂 4
亲／离子交换 1－5
Ⅵ．生产改变关问题（证明产品相性）
A．床试验期间生产改变
单克隆抗体床开发期间制品生产工艺常改变发起应预先考虑改变制定份计划证明新旧工艺生产产品相尤生产改变前已取支持深入床试验市场销售权申请床前床资料时证明产品相性计划应时提交CBER审批
生产中发生改变应单克隆抗体进行严格体外生化功特性鉴定（见第Ⅰ章产品生产检定）根体外试验动物试验类型资料质量必扩床资料证明产品相性某情况两种生产工艺产品进行扩床评估必性增情况包括：
1．分析试验充分鉴定产品活性
2．生化试验证明产品间存差异
3．动物试验揭示产品间存药物动力学方面差异
早期床开发期间生产发生变化时正进行床试验应包括床相性试验生产变化发生床试验晚期（2／3期）果产品生化功特性分析表明新旧产品差异需补充进行床评价床试验设计范围取决提出问题例提出问题修改清率需进行较性药物动力学试验情况预定患者群进行试验应适设计方案包括充分统计方法解决特定问题（12）许周密计划试验纳入单克隆抗体全面药物开发项目中
B．产品批准生产改变
细胞库已市产品生产显著改变时厂家应提交产品许证修正件包括提供保证产品标签说明产品系新工艺制备资料通常仅需新旧工序生产单克隆抗体进行生化功特性分析重新进行外源子检定病毒验证情况（述A．13）需进行较性床试验（12）发起应根生化动物试验结果统计结果制定推荐试验计划提交CBER备复审征求意见
床前试验
Ⅶ．交叉反应性试验
相相关抗原决定簇细胞非预定靶组织表达观察抗体种组织结合交叉反应性具严重果特药理活性抗体细胞毒性免疫结合物时般Ⅰ期床试验前应常进行交叉反应性实验室检测双特异性抗体检测双特异性产品外应株母抗体进行逐评估
A体外试验
目前细胞组织免疫细胞化学免疫组织化学技术进行检测较新技术检测
1．应附录1中列速冻成组织测定抗体免疫结合物反应性外科手术样允许采组织保存良尸检样检测存形性少应王相互关系供者组织进行评估应已知阳性组织评估固定液影响保证组织处理程中靶抗原保护
2．特殊情形通检测代表性培养细胞系干细胞胚／胎组织测定交叉反应性
3．应测定干种浓度制品交叉反应检测力取决抗体浓度选择适浓度进行组织结合研究时应考虑抗体亲力预期达血浆浓度应较单克隆抗体靶组织交叉反应组织结合率观察非特异性结合现象时应纯化抗原进行抑制试验评估潜交叉反应特异性
4．阐述试验结果必需阳性阴性证实组织条件方法否满足求转铁蛋白正常肿瘤细胞表面种普通量存分子抗转铁蛋白受体单克隆抗体作阳性
5．床衍生抗体抗体片段应类型进行检测检单抗相似特异性代抗体进行交叉反应性测定
6．交叉反应靶抗原存形性时试验应扩较系列组织确定频率
7．较源种类动物组织体外交叉反应性确定相关毒性试验动物具重意义
B体试验
综合体试验应显示某单克隆抗体非靶组织交叉反应性首先动物体然体进行溶细胞性免疫结合物具ADCC活性抗体研究通常求进行较详细床前试验包括种动物重复剂量进行动物试验
Ⅷ 床前药理学安全性毒性试验
单克隆抗体床前安全试验目鉴定估量出现体良反应发生率严重程度确定安全起始剂量逐步提高剂量单克隆抗体制品床前试验容包括免疫原性稳定性组织交叉反应性效性动物种类差异会床前试验设计解释复杂化
A．般考虑
1．生产产品配制改变导致生物活性重变化建议床前试验材料应床试验产品批制备程序相某情况适修改床前试验载体系统成分源动物血清白蛋白代血清白蛋白作载体防止动物体形成抗白蛋白抗体增加床前试验效性
2．床前试验方案应建议床剂量浓度时间表途径次数相剂量范围选择应少包括两剂量等效剂量高预期床剂量进行安全性试验时应范围剂量进行测试保证高剂量体分布清差异会产生良作毒性试验检测高剂量应显示良作应建立三剂量低值佳剂量范围通种剂量药间隔试验确定剂量反应曲线线性关系总体状态
B．动物安全性试验
准备进行单克隆抗体毒性试验时应考虑列素：
1．试样品修饰抗体疾病活性动物模型携带相关抗原动物组织交叉反应性试验阴性检测项目限般安全性试验述容（21 CFR 610．11）
2 动物模型应证明生物学效应剂量赖性较高剂量较预测治疗指数
3 体活性模型提供推荐产品理说明确定安全性毒性方面已证明意义例异源移植模型评估抗体肿瘤细胞结合力动物疾病模型研究单克隆抗体许炎症反应身免疫性疾病异体移植排斥等方面作
4 动物体相关抗原性质体相关抗原生物学分布功结构应具性例：狒狒体研究CD34+前体细胞狒狒体相细胞组分均表达CD34+抗原产生造血细胞动物模型必求单克隆抗体抗原密度亲力绝相等例结合力差异通增加剂量服药次数弥补应定量鉴定动物间抗原数单克隆抗体抗原亲力单克隆抗体结合细胞应答反应等方面存差异更精确推断安全初始剂量评估安全性极限
5 免疫结合物降解作位点活性单克隆抗体靶抗原结合结果应含放射性核素毒素药物免疫结合物进行动物毒性试验试验应包括种免疫结合物组分包括游离毒素药物核素毒性靶器官结果应结合物稳定性试验密切相关应具相关靶抗原疾病模型动物体进行免疫结合物试验游离毒素核素毒性试验应种类动物进行
6．单克隆抗体通常求进行常规突变性评估
C．药物动力学生物学分布
药物动力学模型助阐明床前活性毒性助推荐适剂量范围进改进床试验设计方案种研究目测定药物动力学药效学终点生物分布研究提供单克隆抗体结合非目组织初始证解释动物体观察毒性资料阐述应考虑单克隆抗体物种源种型单克隆抗体否完整免疫球蛋白碎片抗体标记方法免疫结合物稳定性受者体抗原表达水血清蛋白结合途径等糖基化蛋白酶感受性循环抗原存宿免疫应答影响单克隆抗体半衰期抗制品抗体存会改变生物学分布代谢清
1．列方面指导试验动物种类选择：
a．选择交叉反应相靶抗原动物种类模型试验单抗抗抗原修饰单克隆抗体抗外源抗原（细菌病毒等）单克隆抗体样解决生产问题（见第Ⅵ章产品均性）必缺乏靶抗原动物种类中试验
b．抗原结合资料表明灵长类相关物种时未偶联单克隆抗体试验采非灵长类动物适宜
C．应正常啮齿类动物鼠异源移植模型精确预测单克隆抗体药物动力学行性进行严格评估异源移植模型评估单克隆抗体体肿瘤结合力更意义
2．应通种方法（应ELISA法放射活性测定方法检测放射性标记单克隆抗体）确定药物动力学参数类免疫结合物完整结合物应游离单克隆抗体游离配基相区（毒素药物放射性核）
3．抗免疫球蛋白抗体出现分析解释动物体重复剂量效应复杂化鼠源抗体鼠非免疫原性物质体具免疫原性鼠重复剂量结果难外推拟体重复剂量源化单克隆抗体出现相反问题种情况啮齿类动物进行重复剂量研究意义
4．产品开发程中生产程发生改变时（见第Ⅵ章关产品相性）通药物动力学药效学研究说明产品相性测定产品相性药物动力学参数包括TmaxCmaxAUC数通适种类动物中进行产品时间活性曲线计算
床试验
单克隆抗体通常具良耐受性单克隆抗体特异性抗原非目性结合引起严重致死性副作实例少见类罕见情况发生突出单克隆抗体组织交叉反应性检测重性尤获相关抗原动物模型时便提醒医生注意潜毒性采较保守剂量方案
Ⅸ．Ⅰ期床试验般设计
A目
Ⅰ期床试验应进行列工作：（a）确定般毒性（b)找出剂量毒性间关系 （c）测定制品体药物动力学行（d）收集免疫原性资料某情况（e）探索单克隆抗体活性初步证剂量关系
应该认识带FC部分抗体会产生抗体特异性副作Fc部分够激活补体诱导ADCC效应（IgG1IgG3鼠IgG2a）导致结合细胞溶解单克隆抗体通阻断诱导靶细胞功产生预期相反作（抗CD3单克隆抗体诱发T细胞受体会产生淋巴子释放综合症）
单克隆抗体分属较广类中种Ⅰ期床试验方法会略治疗非偶联单克隆抗体没必直分析耐受剂量值（MTD）剂量限制毒性值（DLT）相反通测定抗原结合饱达预期生物学效应程度确定佳生物学剂量（OBD）更适宜作法免疫激活单克隆抗体作毒性机理关时应评估单克隆抗体免疫激活作放射性标记治疗单克隆抗体免疫毒素应考虑非预期组织结合结合物提前释放等问题接受免疫毒素治疗病应进行毛细血渗漏综合症肝肾肌肉损伤监测
B．试群
1．般说单克隆抗体床试验象应终接受该产品治疗代表性群目前研究数单克隆抗体潜免疫原性缺乏靶抗原健康动物动物疾病模型获详细毒性资料通常健康志愿者适作Ⅰ期床试验象考虑健康志愿者作单克隆抗体初期试验象时试象意文件应反映应出项工作直接医学效益存接受异源蛋白产生潜时长期危险危险包括：存毒性变态反应免疫应答（抗鼠抗体HAMA注意：整篇讨程中术语HAMA指抗外源免疫球蛋白抗体）接受诊断治疗单克隆抗体Ⅰ期试验中列情况采健康愿员：
a．某新试剂标准群危险性太高时标准群表明抗原水异常高担心引起特异性毒性标准群新生毒性试验承受力极弱时 b．标准群体质太差获明确安全性资料时脓毒症患者
2．发起研究者应仔细考虑单程程治疗中治疗策略否基单次次药物行I期床试验设计方案中需考虑床应中采单克隆抗体途径时间单克隆抗体间发治疗重复改变安全性效力例抗原量改变（抗原单克隆抗体结合清调理）单克隆抗体免疫应答改变例单剂量资料外推剂量方案存HAMA情况重复单克隆抗体产生毒性丧失治疗效力需研究弥补高HAMA循环抗原改良剂量方案包括药物动力学研究决定HAMA效价循环抗原水器官分布清毒性间关系
3．接触异源蛋白异源蛋白变态反应史病进行物种单克性机体Ⅰ期床试验时应排外
C．剂量设定
I期床起始剂量选择应相关动物模型安全性毒性资料动物剂量剂量探讨中关单克隆抗体抗原动物类似物相亲力资料重参考价值进行动物试验动物分析结果相关性初始试验体进行时床试验初期应采低剂量剂量根组织培养类似单克隆抗体床试验推定体目剂量浓度范围确定应抗原抗体亲力功活性(免疫调理细胞毒性）细胞体外试验结果结合相关抗原动物模型试验
1．单剂量试验
a．Ⅰ期床试验中治疗单克隆抗体初始研究应剂量逐步提高试验目应确定耐受剂量（MTD）佳生物学剂量（OBD）剂量代实验室测定结果确定（：受体结合水目物血液水）毒性效性标准应具疾病适应症特异性应慎重选择低生物学活性剂量剂量作起始剂量部分试验中应新患者群组试验种剂量种剂量递增方案广泛（13－15）
b．放射性免疫治疗单克隆抗体试验应采传统剂量递增方式高低剂量动物剂量测定发基础根正常器官放射耐受性定
C．毒性反应应明确规定停药剂量改变标准生命未受威胁慢性疾病遇明显毒性药物时方案中应规定药物递减方案相反生命受威胁疾病抗肿瘤制剂药物试验较高毒性耐受性常适宜疾病中出现非预期毒性应重新考虑剂量递增方案体清标准受试意文件安全性评估应包括关实验床副作评价存反应包括监测免疫功恢复彻底性必进行长期安全性踪方案中注明项容
2．剂量试验
a．开发免疫原性抗体便应重复剂量
b．某单克隆抗体采剂量应方案应获关单剂量高水清毒性基础资料Ⅰ期床中进行探讨采剂量应方案前应充分解单剂量生物学作需恢复时间（放射免疫治疗CD4细胞缺陷调理作骨髓功转免疫恢复）采种剂量方案均应根／动物模型剂量耐受获药物动力学药效学资料提出方案设计原理
C．次某放射性免疫治疗剂免疫毒素研究员应器官毒性病理学进行精确鉴定应全部毒性效应中恢复需时间段进行监测通常宜病体做剂量递增试验种作法会产生毒性蓄积效应特骨髓难确定种效应长时间治疗增加剂量引起初始剂量未出现毒性反应耐受剂量体差异提示初始安全试验剂量病体进行剂量增加试验病中做剂量增强试验时应考虑剂量值存留效果床实验室良反应恢复基值性
3单克隆抗体结合辅助治疗作常规方法应I期床中研究剂量潜相互作
D．药物动力学
设计药物动力学试验方案应考虑产生免疫球蛋白动物免疫球蛋白种类亚抗体（：完整单克隆抗体Fab片段等）免疫结合物结构试群携带适抗原抗原量关重类试验抗原量分层次进行药物动力学助证明产品剂型相性（见第Ⅷ章床前试验）药物动力学研究包括：
a．测定血浆浓度清
b．根体外测定效浓度相关性确定佳体剂量
C确定峰值基值清率系数利剂量方案设计
d．确定体具清作器官
e．检测全分子成份监控免疫结合物
f．研究体清方法抗原负荷循环抗原HAMA间关系
X．Ⅱ期床试验
Ⅱ期床试验初期应全面鉴定抗体特异性
A目
系列设计完善Ⅱ期床试验方案开展决定性成功Ⅲ期床试验具重意义中盘期床试验期间应：
1．应探讨建立床测量值终末值
2．应Ⅱ期床试验结束明确制剂关剂量范围途径时间技术素
3．根治疗诊断效果规模估测时预测Ⅲ期床应开展适规模
4．鉴单克隆抗体显示良效果副反应群
5．应积累关副反应相关资料
6．通测定实验室终点途径剂量时间表体清抗原负荷HAMA相关性研究单克隆抗体作机制（药效学）
B．试群
1．Ⅱ期床试验象应Ⅰ期床象（处疾病阶段器官功受损具肿瘤实体 performance statua疾病持续时间年龄骨髓保留先存免疫抑制伴非单抗治疗）特应区作Ⅲ期床作标记指示研究象患者群明显Ⅰ期床中群补充药物动力学资料时应研究器官损伤（肝肾）条件体清状况
2进步安全性调查应包括评估特定器官毒性重复剂量安全性（：存HAMA）
3．许试剂产品发展求具分详述患者治疗规应注意病程中单克隆抗体治疗转效时间传统疗法相互作预测病治疗反应影响素等Ⅱ期床终鉴定验证进入Ⅲ期床标定治疗规提供机会
C．剂量设定
Ⅱ期床应代表性患者群应剂量时间进行评估应生物学生物化学方法测定制品血浓度活性疾病严重程度患者群统计差异求采取治疗方案剂量评估中研究组中应拥足够量患者效力代指标选择单克隆抗体剂量时间具特指导作
D．机化
患者机化较剂量分析试验评估冷抗体清循环抗原阻断非特异性单克隆抗体结合力确定合适冷抗体剂量确定药物时间途径重性价值情况Ⅱ期床理想作法采双盲法机化法免产生误解结果影响Ⅲ期床成功
E．Ⅲ期床结束会议
Ⅱ期床结束时建议效力试验准备 CBER协商种会议通常建议性会议前发起应CBER提交列资料：
1．份整理完善床资料总结包括份现安全性资料关毒性剂量反应效应总结份床活性资料总结
2．包括效力试验关产品鉴定完整资料
3．证明生产设施生产方法制备足够量产品满足Ⅲ期床初期商品市场需
4．关生产合联合分工生产安排资料
5．分析性技术生产SOPs（标准操作规范）证明Ⅲ期床期间产品批次间持续稳定性
6．单克隆抗体联合产品资料兔补体资料档案形式提呈
Ⅵ．Ⅲ期床试验
A目
Ⅲ期床试验结果应产品审批提供决定性效力安全性资料
B．试象
旦单克隆抗体进入市场接受单克隆抗体治疗组Ⅲ期床试验群中应代表科学根单克隆抗体生物学分布代谢副作性年龄种族差异提出怀疑时包容类患者群尤重
C．剂量设定
Ⅲ期床试验前应通代床终点确定接受毒性曲线效剂量范围皿期床中设计2种2种剂量时间
D．制品问题
1．Ⅲ期床试验产品应预定进行商品化生产工艺生产规模设施进行制备
2Ⅲ期床试验前应注意扩生产规模计划预定产品生产改变Ⅲ期床结束生产发生重改变（：细胞库改变含血清培养基改血清培养基生产场部分场改变）必进行床试验取决床前生物化学药物动力学功性资料较（见第V章）
3．Ⅲ期床中发起应试验干产品批证明生产确实实全效产品
Ⅻ．免疫原性：床考虑
监测抗球蛋白效价免疫活性评估单克隆抗体安全性效力制定关治疗方案非常重单克隆抗体免疫应答果包括单克隆抗体效力干扰种样潜危险免疫学反应
A．产生抗单克隆抗体抗体监测
现已HAMA检测方法进行充分研究根单克隆抗体源需研究检测抗免疫球蛋白方法检测抗鼠抗体（HARA）抗嵌合性源化灵长目抗体抗免疫核素免疫毒素种组分（蓖麻蛋白）抗体／毒素／核素偶联新抗原
1．安排HAMA检测样品收集时间时应该考虑预定单克隆抗体目单次次通常应根基值前存抗体（包括抗球蛋白抗体抗结合物抗体）次应单克隆抗体前确定HAMA滴度样早取（ 2周）应晚期某时间（：6～8周）取样
2．选定HAMA检测方法应达程度标准化应选择源灵长类源确定特异性抗鼠抗体制品作标准分装冻存利期进行种种间研究较套标准建立常规检测线性标准曲线应采抑制竞争方法适阴阳性确定单克隆抗体特异性应研究正常反应性范围评估血清成份胆红素脂类干扰应证明试验方法灵敏特异精确准确
3．应鉴定分析患者单克隆抗体免疫应答特异性特征：产生免疫应答抗重链种型抗轻链抗恒定（C）区变（V）区独特型表位抗免疫结合物抗新抗原资料表明否具广泛特异性HAMA检测方法（检测抗体鼠免疫球蛋白类重链轻链恒定区抗原反应）表明否必限制性更强独特型抗体特异性HAMA检测方法某情况中HAMA检测方法必单克隆抗体制品作检测抗原
4．选择适HAMA检测方法取决单克隆抗体目制品标记方法种新单克隆抗体床开发调查阶段应时建立种HAMA检测方法进行验证HAMA反应单克隆抗体安全性效力佳剂量影响时HAMA检测结果应制品效力副作具相关性
5．种准确测定单克隆抗体HAMA反应性验证检测试剂盒应带重复指征单克隆抗体PLA试剂盒协果HAMA检测试剂盒够效检测改变新单克隆抗体制品药物动力学安全性效力HAMA市场销售HAMA试剂盒效获适HAMA检测试剂盒发起应建立种适验证检测系统
B．免疫原性床果
1．通常提倡皮肤试验皮肤试验鼠蛋白灵敏性差引起致敏
2存HAMA时应预先防止出现副作采取适措施发生潜威生命反应性通常应获急救设施中病单抗应根床安全性资料判断非医院设施条件单克隆抗体（：床家中）行性输注单克隆抗体少密切观察1时试验设计应考虑反映出单克隆抗体免疫应答迟发副作性包括进行适床实验室检测
3．敏敏样免疫反应
a．真正IgE介导抗全鼠免疫球蛋白敏反应少见理讲出现抗种异型变态反应尚未报导床重性单克隆抗体螫合剂毒素偶联变态反应发生性会较综合单克隆抗体重复增加发生敏反应性样接触鼠蛋白体会致敏急性敏反应范围温型（皮疹荨麻疹血性水肿哮喘）重症型（晕厥呼吸衰竭）
b．输液性反应发热背疼痛恶心已通常单克隆抗体期间立出现（发生率约5）反应机理尚清楚蛋白聚合体关通 常通降低输液速度调整治疗方案控制反应频率强度
C 单克隆抗体治疗少发生血清病抗体治疗期间治疗发生敏反应输液反应血清病延迟出现应测定循环中存高滴度溶性抗原．该抗原单克隆抗体副作相关
4．HAMA通鼠源检测抗体结合直接干扰鼠源抗体基础抗原床检测 CA125CEA单克隆抗体诱导出模拟抗原抗独特型反应理出现诊断试验间接干扰应利设计完体外分析系统找出种干扰类型证理想情况努力避免出现种干扰作验证床方法
5．某群选出进行单克隆抗体试验时诱发HAMA抗球蛋白应考虑单克隆抗体进行治疗带风险
ⅩⅢ．剂量测定
应提供充分动物体试验资料便合理计算体全身重器官放射性吸收剂量（2 CFR 312 23（a）（10）（ⅱ））
A．靶器官辐射剂量计算
研究员应根患者均值确定：
1．放射性靶组织器官累积量
2．放射性靶组织／器官组织累积量
3．放射治性单克隆抗体靶组织器官区域存留时间
4．放射性位素放射剂量包括游离位素放射性位素裂变产生子系产物放射性剂量包括制备立推迟半衰期终点放射性免疫结合物结合游离子系放射性位素
B．辐射吸收员
体放射性物质量应放射性剂量该剂量流程操作中实效影响研究结果
1．应采体放射剂量测定法计算体放射性标记抗体产生放射量两组织中分阐述放射性剂量吸收值测定方法核医学学会医体放射剂量委员会（MIRD）：放射性保护国际委员会（ICRP）[21 CFR61 1 Cb（iv）］两组织测定较高吸收剂量估测值应放射性剂量测定法安全性评估中
2测定法评价应包括列方面：靶器官／组织骨髓肝脏脾肾肺心脏尿道膀胱胆囊胸腺脑生殖腺胃肠道已知预期接触具相关毒性放射性组织
3．提供计算结果应体现放射性免疫结合物代谢排泄重器官发生病变（肾功障碍增加肝胆功肝功障碍导致肾清功增加）时出现剂量测量法改变
4．应提供计算放射性剂量吸收剂量值数学公式应列出样品计算程相关假设
5．剂量估测计算结果应放射性标记抗体高半衰期进行提供放射活性衰变污染物限应：
a．包括高放射性量
b包括作研究部分诊断程序X线片核医学扫描引起放射性暴露
c．放射剂量应表示：毫居里放射核素Gray（Gy）数
d．表格形式表示包括靶组织／器官第V章C．2中列器官吸收放射剂量
XIV．癌造影制品
A．早期床试验
干种候选抗体中挑选试验抗体时解该抗体靶细胞结合背景结合相例价值造影制品Ⅰ期床应表达种抗原患者群中进行
1．早期床试验应收集关资料：剂量效果途径程序位素结合物游离抗体排泄途径结合物螫合物体稳定性器官损伤循环抗原量肿瘤负荷影响（关药物动力学）应早期床研究期间考核冷抗体效果
2．测定放射剂量时应时注意抗体剂量引起变异剂量测定法包括部排泄剂量测定计算肿瘤器官（见第 V章）放射剂量
3．应进行适造影次数技术需造影设备初步估测
4．应估测制品测隐蔽疾病检测疾患造影力估测器官造影质量
5．资料应标准诊断技术相较患者理
6．通常应寻求造影质量初步证作期床研究设计基础
B．扩床试验
Ⅱ期床Ⅲ期床选择适患者群提供机会改进扫描技术问题阶段应进行抗体剂量较机化会帮助
1．造影制品Ⅱ期床应限定获许证制品床背景例：种癌症造影制品病筛选初期检查检测隐藏疾病复发分期仅排限定癌症时价值两者均意义研究员应注意造影效果受疾病特异性素（疾病阶段肿瘤负荷循环抗原水？病理性疾病）技术素（造影时间佳造影需视图设备冷抗体）影响
2Ⅱ期床中应取种环境诊断效性初始证（灵敏度特异性预期值）造影制品诊断效性应金标准试验致例组织病理学某情况传统诊断模式种标准结果应床结相关性
3． Ⅱ期床中应收集足够资料制定特定仔细鉴定床环境床应假说床环境会正式效力试验中进行评估应鉴定适宜效力试验测量方法终点Ⅱ期床中应建立说明造影制品配合病检查计算概
4． Ⅱ期床中应通获关循环肿瘤相关肿瘤特异性抗原肿瘤负荷造影次数热／冷抗体率选择影响进步资料更精确确定剂量
5应获关器官剂量测定副反应补充资料便进步床试验选择剂量方案
6．Ⅱ期床期间应收集床研究现场资料证明种环境中进行现场位素标记菌性纯度免疫反应性保留高特异性活性均符合求
7种制品单次情况作正确评估收集足够关HAMA研究副作资料应该重复造影分析次病单克隆抗体
C．效果试验
1．床方案中应包括列容：
a．预先确定详细床效力终点分析计划
b．制品批准预定接受造影患者组成试群
C．应获保存试验胶片试验试剂较试剂数字化资料计划研究开始前应CBER员咨询关资料结构改变表现形式保存等技术细节
d．提供事先指定标准造影技术（）较资料应具书面阅读扫描结果标准操作程序试验性常规扫描现场读数外建议未接触较试验详细床资料独立员委员会成员机抽样分析实验性常规扫描设计阅读床资料容时应指明资料确切性质
2．Ⅲ期床试验初级效力终值中应包括床收益证灵敏度特异性预期值通常适合初级终值满足造影制品Ⅲ期床中代品效力应提前指明根床效力估测性质判断灵敏度特异性否患者损伤基础进行计算般说床效力患者基础进行评估造影制品潜床效益定义包括：
a 初级终值证明治疗效果提高：新试验提供种更精确快速诊断技术技术存活时间疾病时间症状生存死亡率降作出诊断预测
b．初级终值表明患者理改进：1）试验提供关疾病程度（阶段）更精确资料外科医生摘更肿瘤组织缩短手术时间避免潜致病手术程序2）检测治愈转移性疾病更精确确定病程助选择适辅助治疗方法避免潜毒性药物疗法3）疾病程度测定方法改进助预测（防止）重发症（：脊髓压迫腔静脉结合症等）4）新检测手段发现传统诊断方法漏检期初发肿瘤（克隆性原发肿瘤测乳腺肿瘤等）建立改进患者理目试验求新方案：设计方案包括列方面：
（1）初级终值表示带置信区间数学量值（：新方法传统诊断技术检测阴性患者中检测出10％具隐性疾病新检测方法10％先前传统方法分病程病病程分析更精确化）
（2）应认真控制病检查治疗疾病阶段病理策略策略会受调查时诊断扫描结果影响进行调查试验前应制定关诊断性提问数表格数表格特异性公正包括关填写表格检查程时完成等求表格应时完成外实验性检验标准情况应开始试验前确定应开始实施理计划利新试验中产生修改理计划作较
（3）应确定改变诊断理新试验推荐方式方案中应注明设想效否包括采取代补充试验（试验容）否新试验决定试验否进行
（4）副作极情况证效诊断信息终值代证病理改进估测危险性效益时应考虑新试验副作包括：患者适关诊断治疗干扰良影响（HAMA延迟手术施行延长手术时间
C．初级终值表明患者改进舒适舒适程度：
l）新试验代种组前进行试验提高耐受舒适程度
新试验提供更精确缩短术期限诊断信息应床试验中终值CBER进行讨
d．检测提供通方式取独特信息信息病固价值（确定预预测治疗）价值超试验危险性直接床效益类信息考虑作效力
e．初级终值现存检测方法相具诊断等效性特具安全便利／定时优越性等效床试验应具检测新造影制品中低劣诊断操作预定效方案中应详细描述确定等效操作统计学方法
附录1 交叉反应性试验正常组织
肾腺 胃肠道 前列腺
膀胱 心 皮肤
血细胞 肾（球） 脊髓
骨髓 肝 脾
乳房 肺 横纹肌
脑 淋巴结 睾丸
脑皮质 卵巢 胸腺
结肠 胰腺 甲状腺
皮 甲状旁腺 输尿
眼 胎盘 子宫（子宫颈子宫膜）
输卵 垂体
附录2 鼠抗体产生试验
源属细胞系细胞库（MCB）生产终末细胞（EPC）源鼠腹水批号单抗应进行列鼠病毒试验鼠抗体产生试验（16）］：
鼠脱脚病毒 鼠脑脊髓炎病毒
兽疫幼鼠腹泻（EMID）病毒 鼠肝炎病毒
GD7病毒 鼠垂液腺病毒（鼠CMV）
Hantaan病毒 鼠肺炎病毒
淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒 瘤病毒
（LCMV）非致死株攻击 呼肠孤病毒3型
乳酸脱氧酶升高病毒(IDH） 仙台病毒
鼠细病毒（MVM） 胸腺病毒
鼠腺病毒（MAV）
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
核酸特性鉴定遗传稳定性
（ FDA 1992年 4月 6日）
rDNA技术生产新药生物制品考虑点补充
1．前言
文关真核原核细胞生产rDNA蛋白产品表达载体鉴定指南表达载体指含编码重组蛋白序列表达载体表达载体特性鉴定rDNA技术生产新药生物制品考虑点1985注意问题蛋白分析技术核酸特性鉴定发酵细胞培养工艺行取进展文意图推广阐明确定生产rDNA蛋白表达载体结构价值信息制定该文中考虑生物化学技术新进展生产系统历史国际会议信息提交FDA意见特1991年召开国际传代细胞前问题讨会问题进行详细讨CBER科学专家确信文提出补充指南反映科学界般见解阐明鉴定核酸特性确定遗传稳定性需进行试验CBER认识工业界特关注领域文提出意见修订rDNA技术生产新药生物制品考虑点中予考虑
Ⅱ．表达载体核酸特性鉴定理基础
重组蛋白活细胞中产生活细胞会突变会改变某蛋白性质具潜良影响没简单实验方法检出某蛋白变易蛋白分析技术确定表达蛋白许结构特征转译修饰系统诸影响蛋白水解加工糖基化磷酸化乙酰化蛋白变易（脱酰胺基氧化）造成改变分析终纯化蛋白检查出编码蛋白序列突变导致某蛋白结构变易例保守氨基酸置换肽图技术漏检引起蛋白结构改变某改变影响体外活性引起明显体效应导致药效学药物动力诱生抗体应答方面改变量产生外源蛋白某细胞群体中产生某变易蛋白产生蛋白量减少突变细胞具生长优势许代细胞群体中类细胞增鉴定终纯化蛋白时漏掉已合成游工艺变易蛋白纯化步骤效发生障时变易蛋白污染终纯化蛋白理DNARNA水检出编码蛋白基突变应仔细选包括纯化蛋白核酸二者分析综合方法确保产品连续致性
分析生物化学技术分析纯化蛋白数较容易解释rDNA技术生产新药生物制品考虑点1985中讨某情况终产品角度难解释核酸试验结果类数作纯化蛋白分析数补充提供价值信息核酸分析验证编码蛋白序列表达载体物理状态验证编码序列检测低水变易序列验证细胞全规模生产程操作纯化前占优势蛋白种类具正确氨基酸序列生产细胞表达载体整合考贝时考贝转录活性mRNAcDNA分析检查转录产物身分析DNA基组更适宜聚合酶链反应扩增材料检查量群体核酸取决DNA克隆选择方法更取
应提供述节叙述开发验证生产细胞克隆程中鉴定表达载体资料建议基目前技术提出预见着该领域新技术发展认识提高会进行修订
Ⅲ．表达载体特性鉴定
A．初始细胞克隆
DNA克隆
生产者应说明编码蛋白DNA制备方法包括细胞原料核酸源
应详细说明表达载体组建步骤应包括表达载体组件源功例复制抗生素抗性基启动子增强子合成蛋白否融合蛋白应提供限制性核酸切酶消化图谱说明构建表达载体位点鉴DNA片段位点
应进行表达载体编码蛋白区全氨基酸序列分析应提供序列分析结果包括标明重序列特征完整评注例构建关位点原序列改变编码蛋白区含编码序列外信息含子侧翼序列应附加序列进行特性鉴定
细胞表达克隆
预定产生蛋白宿细胞系统应表达载体相容提供关细胞源表型基型说明重宿细胞应生物制品生产传代细胞鉴定考虑点1987充分进行鉴定应提供关表达载体导入宿生细胞方法说明外应全面说明扩增表达载体选择生产细胞克隆方法标准表达载体考贝数物理状态应确定
B．基础细胞库
基础细胞库（MCB）等量分装规定条件保存批组成均细胞制备次级细胞库（生物制品生产传代细胞鉴定考虑点1987述）MCB般含表达载体单宿细胞克隆建立应说明克隆包括关建立MCB方法学资料采表达载体导宿细胞进行克隆筛选方法建立新细胞库应说明新克隆产生蛋白合格标准MCB细胞应进行适表型标记检查例营养缺陷抗生素抗性确保性纯度MCB应进行外源子检查基适宜生物制品生产传代细胞鉴定考虑点1987进行MCB应定期进行特性鉴定确保活力
MCB少测定次表达载体完整性应验证编码蛋白核苷酸序列带编码蛋白基单基组考贝细胞测定总基组DNA序列测定单基组序列更取带染色体插入表达载体细胞应mRNAcDNA直接序列测定法测定编码产物校酸序列染色体外表达系统应分离表达载体进步克隆情况验证编码产物核苷酸序列MCB细胞表达载体应限制性核酸切酶图谱法分析考贝数插入段缺失段整合位点数目（带染色体整合细胞）染色体外表达系统应选择选择培育条件测定宿保留表达载体百分述检定适新建MCB
C．生产细胞库（ MWCB）
MWCB生物制品生产传代细胞鉴定考虑点1987）1安瓶MCB细胞扩增建立MWCB等量分装规定条件保存批组成均细胞应详细叙述MWCB制备包括培育程中方法试剂MWCB算起群体倍增数保存条件保存期间应限制性核酸切酶图谱确定表达载体考贝数插入段缺失段方法鉴定MWCB性外必时应表型鉴定法例营养缺陷抗生素抗性鉴MWCB
D．生产终末细胞
生产终未细胞MWCB扩增全规模生产条件次实际生产程中结束时取细胞MWCB应文 Ⅱ项规定鉴定次生产终未细胞表达载体完整性全规模生产设施生产终末细胞应重复进行实验规模设施生产终末细胞进行鉴定
重应说明述生产终末细胞进行鉴定指次生产程结束时进行生产周期结束时应进行关细胞表型基型标记分析生物制品生产传代细胞鉴定考虑点1987进行外源子污染检查全规模培养收率稳定性资料应予保存应建立废弃培养批标准
Ⅳ．结语
表达载体纯化蛋白鉴定rDNA产品生产稳定致性重保证目前确信单核酸鉴定蛋白结构分析资料全面确定rDNA蛋白产品性纯度着技术进展次评述见解修订文
关生产rDNA源性蛋白产品细胞表达结构分析指南
草案
（FDA1995年8月）
Ⅰ前言
文叙述真核细胞原核细胞生产rDNA蛋白产品表达结构鉴定指南文阐述评估生产重组rDNA源性蛋白表达结构种价值资料涵盖rDNA源性医疗制品质量问题
表达结构定义：重组蛋白序列表达载体应核酸技术纯化重组蛋白试验相结合分析表达结构部分保证产品质量连续稳定性考虑种试验仅仅编码重组基序列转录真实性者重组蛋白特性评价二三级蛋白结构转录修饰核酸水分析表达结构作全面质量评价部分
Ⅱ：表达结构常现分析理说明
表达结构分析目证明正确产品编码序列已掺入宿细胞培养程中保持生产结束活细胞生产重组蛋白基序列发生突变突变会改变蛋白质特性患者良影响没检测出蛋白修饰单实验方法蛋白质分析技术确定蛋白质序列者蛋白水解加工糖化酸化乙酰化等程分析转录修饰表达蛋白结构特点进行评价核酸分析资料更蛋白质分析方法检测出重组蛋白质编码序列突变引起蛋白质结构改变核酸分析蛋白质分析相重性产品异
核酸分析确认表达结构编码序列物理位点进行核酸分析保证表达蛋白正确序列检测低水变异序列生产细胞表达结构整合拷贝然表达结构复制活性mRNA者cDNA分析鉴定复制产品身分析引基组DNA更合适检测混合克隆者PCR扩增材料样认检测量核酸分析方法进行单DNA克隆时应采方法快速灵敏确定表达结构中编码重组蛋白序列技术考虑
列章节叙述开发验证生产系统程中应提供表达结构鉴定资料证实序列分析方法学应验证验证文件少应包括检测变异序列限度估计核酸蛋白测序方法应样作文述分析方法原理建议应利高新技术科学信息定期加修定
Ⅲ：表达系统鉴定
A．建立细胞库表达结构细胞克隆
生产者应说明编码蛋白核苷酸序列源包括原初供核苷酸序列细胞确认源应说明制备编码蛋白DNA方法
应详细叙述装配表达结构步骤应包括表达结构组成成分源功例复制起点抗生素抗性基启动子增强子合成蛋白否融合蛋白等应提交详组份图质粒完整阅读序列中包括构建程中已测序区域基文库区域应质粒表达蛋白加说明意义基编码区核苷酸序列插入载体相关非结构区插入连接物应通DNA序列分析加鉴定
应说明表达结构转化宿细胞方法外应详阐述表达结构扩增方法生产细胞克隆选择标准
B：细胞库系统
重组蛋白生产应定义明确细胞库生产细胞库基础细胞库界定条件存贮组成均批细胞安瓶装等量单混合细胞细胞库（MCB）般源含表达结构选细胞克隆生产细胞库（WCB）通扩增源者MCB安瓶应详述细胞系历史细胞库制备包括细胞培养方法试剂体外培养龄储存条件等详细说明细胞库应进行表型基型标记鉴定包括重组蛋白表达者表达结构复制
MCB中表达结构应方法进行分析果MCB试验WCB进行试验
应限制性切酶图谱适宜技术分析表达结构拷贝数插入缺失位点整合位点数目染色体外表达系统应含表达结构宿细胞百分进行检测
验证表达重组蛋白产品表达结构蛋白编码序列染色体外表达系统分离表达结构验证编码产品核酸序列进步克隆表达结构染色体拷贝细胞通克隆染色体拷贝序列分析鉴定编码产品核酸序列然通混合
cDNA克隆者PCR扩增物序列分析技术测定编码产品核酸序列方法学检测限度核酸序列应文Ⅲ．A述表达结构确认序列致应预期蛋白序列相符
c：生产细胞体外培养龄范围
生产细胞体外培养龄范围应中试全规模生产条件扩增生产细胞推荐细胞体外培养龄超龄资料般言生产细胞WCB扩增正理时WCB制备生产细胞
非生产细胞中表达结构蛋白质编码序列核酸试验者终产品分析验证否应象Ⅲ．B．述样次MCB生产细胞表达结构进行分析生产扩规定细胞体外培养龄范围应已扩增等新细胞体外培养龄限度某细胞资料
Ⅳ：结
鉴定表达结构终纯化产品保证重组DNA产品连续生产稳定性重述核酸分析终纯化产品评价分析资料保证重组蛋白产品质量必少
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
生物制品菌试验规程
（WHO 1995修订讨稿）
前言
生物制品菌试验规程1973年发表新进展检查支原体菌试验求修订：
53检查支原体菌试验（ WHO TRS No．5301973Annex 4）
该节文取代：
检查支原体采琼脂肉汤培养基培养法指示细胞培养DNA染色法
求基础细胞库生产细胞库病毒种子批（库）细胞进行支原体检查时采培养法指示细胞培养法求病毒收获液疫苗原液成品批进行支原体检查时采培养法必时指示细胞培养法筛选培养基
培养法指示细胞培养法见附录
方法列出详细步骤井法验证采
附录 检查支原体培养法指示细胞培养法
1．培养法
1．1培养基选择
试验采足量固体液体培养基确保选定培养条件检出产品中存少量支原体液体培养基应含酚红培养基营养性少应列支原体验证：
口腔支原体（M．orale）（疫苗）
肺炎支原体（M．pneumoniae）（疫苗）
猪鼻支原体（M．hyorhinis）（非禽类兽疫苗例 DBS 1050）
鸡败血支原体（M．gallisepticum）滑液支原体（M Synoviae）（生产程中采禽类材料疫苗拟供家禽）
采低代试验菌株冻存冻干保存菌种克隆应适方法确认规定菌种
国家进行嵌入支原体检查
1·2培养条件
已接种培养基分成两份份置需氧条件培养份置厌氧条件培养需氧条件含
5—10％CO2适湿度空气环境中培养厌氧条件含5－10CO2适湿度氮气环境中培养
1．3营养性
适宜试验菌接种选定培养基支固体培养基干皿少200CFU超400CFU支液体培养基容器少20CFU超40CFU种菌株单独接种支皿液体培养基接种培养基置检定检品条件（需氧厌氧需厌氧试验菌需确定）培养试验菌生长充分液体培养基颜色适变化培养基营养性试验符合求
l·4抑制物质
检品存进行营养性试验检品存试验较试验菌生长明显减少检品中含抑制物质检查支原体前必须中（方法抵消稀释）中次进行抑制物试验检查中法方法效果
1．5检品克原体检查
固体培养基直径60mm皿支含9ml培养基少2支皿支接种02ml检品接种100ml液体培养基瓶接种检品 10ml置3538℃需氧厌氧条件培养21天时培养100ml未接种液体培养基作液体培养基pH加检品显著改变加Na0HHCI溶液调回原pH值接种第123天进行次代试验液体培养基接种 2支固体培养基皿支 0．2ml置3538℃需氧厌氧培养少21天试验第678天重复次第1314天进行次液体培养基23天观察次固体培养基周观察次
液体培养基显示细胞真菌污染应重试接种早7天试验阶段偶然污染细菌真菌破碎超支皿直接检查未证明支原体生长忽略计试验阶段支皿偶然污染细菌真菌破碎试验成立必须重试
培养期结束时镜检已接种固体培养基否支原体已接种培养基支原体生长产品通支原体生长2倍接种量培养基量进行重试支原体生长产品合格
2．指示细胞培养法
细胞培养DNA特异结合荧光染料进行染色根细胞表面污染严重根周围区域特荧光颗粒细胞丝模式检查立原体
2．1细胞基质验证
Vero细胞培养试验前液体固体培养基容易生长证明检出潜支原体污染菌株猪鼻支原体DBS1050口腔支原体1596适宜菌株接种量超100CFU
细胞基质生产细胞系证明检查潜支原体污染敏感性少相
22试验方法
少取1ml检材料接种2250长成片指示细胞培养物少 25cm2细胞面积少传代代适容器中盖玻片适合试验求表面培养
试验包括1阴性（未感染）2支原体阳性猪鼻支原体口腔支原体阴性接种量超100CFU
检查病毒悬液试验结果判定受细胞病变影响支原体抑制特异抗血清中病毒病毒生长细胞基质进行
2．3步骤
（1）常规浓度种子培养物｛2*104－2*105细胞／ml4*103－2．5*104细胞／cm2)36±1℃培养50％生长成片接种检品培养生长成片
（2）吸出弃培养液
(3）pH7．4磷酸盐缓生理盐水淋洗单层细胞然pH7．4磷酸盐缓生理盐水甲醇等量混合液淋洗甲醇淋洗
（4）加甲醇静置10分钟
（5）吸出弃甲醇
（6）进行单层细胞染色完全干燥
（7）直接进行单层细胞染色菌水洗酸性甲醇弃洗液
（ 8）加 bisbenzimid工作溶液适宜 DNA染料静置 10分钟
（9）染料水淋洗单层细胞
（10）滴甘油pH5．5磷酸盐枸橼酸盐缓液等量混合液封固盖玻片（应）盖玻片边缘吸余封固液
（11）放100－400倍检查表面荧光（330nm／380nm激发光滤片LP440nm抑制滤片）
（12）镜检试培养物阴性阳性
未证明检培养物中支原体存检品通该试验
试剂
Bisbenzimid：C25H27Cl3N6O·5H2O（Mr．624）4［5－［5－（4－Methylpiperazin－ 1yl） benzimidazol— 2— yi］ benzimidazol－2－yl］phenoltrihydrochloride pentahydrate
Bisbenzimid贮备液：取5mg bisbenzimide溶水稀释100ml保存暗处
Bisbenzimis工作溶液：前时 pH7．4磷酸缓生理盐水稀释 100μ1 bisbenzimid贮备液 100ml
磷酸盐枸橼酸盐缓液 pH5．5：取56．85ml2．84％（m／v）水磷酸氢二钠溶液4315ml2．l％（m／v）枸橼酸溶液混合
 
 
 
 
 
 
 
生物技术产品质量
生物技术产品／生物制品稳定性试验
（草案FDA19958）
前言
文作ICH制定新药半成品成品指南（1993年10月27日）补充件总体讲该指南中制定原适生物技术产品／生物制品然生物技术产品生物制品确特性预计储存期间证实生物技术生物品稳定性种已确定试验方案应考虑特性产品活性成分典型蛋白质／肽组成保持分子构型提高生物活性取决非价键价键强度产品周围环境素：温度变化氧光离子含量切应力等等特敏感确保生物活性避免降解严格储存条件必
稳定性评估综合性分析方法学必须生物学活性测定关键性稳定性研究基部分相应物理化学生物化学免疫化学方法分子实体分析降解制品量检出应稳定性计划部分制品纯度分子特性允许利方法学
首先关注：生物技术产品／生物制品申请者应出合适支持制品稳定性数应考虑影响制品效力纯度质量诸外部条件半成品成品支持种求储存期数应长期实际时间实际条件稳定性研究进行种制品成功发展成商品相应长期稳定性方案产生成关键文目关注稳定性研究模式申请者提供指南模式支持市场应言喻检查评估程中初稳定性资料应断更新
附件范围
附件中已采纳解释原适：已充分定性蛋白质肽衍生物组成制品组织体液细胞培养物中分离 rDNA生物技术生产制品文件涉制品稳定性资料产生提交：细胞子（干扰素白细胞介素集落刺激子肿瘤坏死子促红细胞生成素血纤维蛋白溶酶原激活剂血液血浆子生长激素生长子胰岛素单克隆抗体已充分鉴定蛋白质肽制成疫苗外章节概括原适类制品：关行政局评审常规疫苗
文件涉抗生素变应原浸出物肝素维生素全血
命名法
附件基名词请参ICH三方协议指南新药半成品成品稳定性试验（1993年10月27日）词汇表然生物技术产品生物制品生产者传统命名法非总遵三方指南中提命名法方便读者传统名词放括号加说明补充词汇表含生物领域传统名词解释
批量选择
原料药（ drug substance）（半成品物质bulk material）
半成品原料生产配成制剂成终成品前半成品原料应储存应提交少三批代表产品生产规模半成品原料生产储存稳定性资料求储存期超六月半成品原料提交资料少六月储存期少六月半成品原料低限度稳定性数应具体情况定理机构递交档案时应提交规模条件发酵纯化已定性半成品中试规模批资料保证初三批规模生产产品稳定性资料审批列入长期稳定性计划中
列入稳定性计划中半成品质量代表床前床中研究制品质量代表着生产规模中制品质量外中试规模半成品应种程序进行生产代表生产规模条件储存生产中列入稳定性计划半成品应储存代表生产规模实际状态容器中果容器种原料制成者采生产程中常现应相类型容器／封盖（containerclosure）系统半成品原料药稳定性监控说例缩容器接受
中间产物
生物技术产品／生物制品规模生产中中间产物质量控制终产 品生产关键通常生产者应中间产物进行鉴定形成生产范围确保稳定性室数规定中试规模数批准生产者应建立起相应规模生产数
药品（drug product）（成品 final container product）
生产规模代表性终产品少提供三批稳定性资料话涉稳定性试验终产品批应源半成品批量储存期超六月制品提交稳定性数少六月储存期少六月制品低限度稳定性数应根具体情况进行测定制品失效日期应根申请者提交实际数确定失效日期根检测实际时间／实际温度数确定希初稳定性数检测评估程中继续进行改进果规模生产制品效期全程符合长期稳定性规格床前床中研究材料没代表性申请者应通关局确定适方案
样品选择标准
种制品成批分装：容量（：lml2ml10ml）单位量（：10单位20单位50单位）质量（：lmg 2mg5mg）做样品根基质系统／通分类选择列入稳定性计划中
基质系统：种抽样点测试部分样品稳定性研究统计学设计提交文件确证明测试样品稳定性代表全部样品稳定性时设计采种制品应鉴样品性例：涉相封盖批次浓度尺寸某情况容器封盖系统存稳定性影响差异样品基质系统应：浓度容器／封盖储存条件产品相反应法证实
相浓度确定容器盖子系统适三种三种装填物申请者选择容器列入稳定性计划分类体现分类协议书设计应表现样品中间产物极限总必提供数证明收集极限数适体现全部样品
稳定性指示图
总体生物技术产品生物制品稳定性特性没单测定参数表示生产者应规范出稳定性指示图制品性纯度效力变化检测提供保证
希申请者公司提出申请时候已稳定性指示图组成观察资料方法作验证鉴定试验应该包括检测制品特异性节包括容制品特性代表特性应典型制品稳定性提供证明
协议书
带市场认申请书档案应包括份原料药成品稳定性进行评估详细协议书说明贮存条件失效期计划书应包括必需资料完整标准试验间隔期等等总体言通失效期限判定表示生物技术产品／生物制品稳定性统计学方法三方指南中加说明制品生产者严格忠协议书
效力
种算应制品否界定测定生物活性关联效力试验应成稳定性研究部分效力试验应稳定性协议书确定适差异进行实验结果应生物活性标准单位报告话时认国家国际标准相国家者国际协议达效力单位方实验结果应种适定性参考制品制备部单位报告
生物技术产品生物制品效力活性成分次部分佐剂相结合决定结合物佐剂载体中分离活性成分应进行实际时间／实际温度检查（包括运输程中遇情况）制品稳定性评估涉困难某情况检测生物活性物理化学特性体外试验切合实际提供结果准确适策略（例：结合前检测制品活性成分次部分释放出体检测等等）适代试验应克服体外试验足应考虑
纯度分子特性
列入稳定性研究生物技术产品／生物制品降解制品纯化程度体总体高限度话应写报告中降解接受限度应源床前床研究半成品成品批次分析
确定原料药成品物理化学特性相关物理化学生物化学免疫化学分析方法学求活性成分综合特性（：分子电荷流水性等等）储存期间通脱酰胺氧化作磺化氧化作凝集反应裂解导致降解变化准确鉴定例方法：电泳（SDSPAGE免疫电泳 Western blot等电点）高压液相层析（反相层析法凝胶滤离子交换亲力层析等等）肽定位图
长期加速受力稳定性研究程中降解制品形成具预示性明显质变量变进行鉴定长期稳定性计划中应潜危险降解制品定性定量需求予考虑观察床前床试验材料时候提出接受限度证明合法
表达特征物质通常规分析方法准确测定纯度制品申请者应提出变换检测程序
制品特征
制品特征然生物技术产品生物制品特相关应终产品进行检测报告：
制品外观（溶液悬液颜色透明性粉剂颜色质溶解时间）溶液溶解粉剂中见颗粒粉剂冻干制品冻干块pH值温度
菌试验代办法（：容器／封盖完整性试验）应推荐效期开始进行
添加剂（稳定剂防腐剂等）赋形剂效期失效进行初步稳定性研究时果添加物反应失效制品质量利影响话稳定性计划中需项目进行检测
果容器／封盖制品潜良影响应作仔细评估封盖形状瓶套筒铅封类型应考虑（见文）
储存条件
温度
数生物技术产品生物制品成品需精确特定储存温度推荐储存条件真实时间境实温度稳定性研究限制作
湿度
生物技术产品生物制品通常分装防潮湿容器中果容器（储存条件）充分防潮湿种相应湿度稳定性试验通常省略果没防潮湿容器应提供关稳定性数
加速受力试验
正前文提失效期般实际时间／实际温度数定然特强调半成品成品失效期研究应加速受力条件进行加速条件研究确定制品失效期提供利证明数制品进步发展提供稳定性信息资料（例推荐象配制例等方面生产改变）助验证稳定性分析方法帮助阐明半成品成品降解信息资料受力条件研究采意外暴露条件制品害推荐条件（例：运输期间）决定助特异性试验参数成制品指示剂进行评价半成品成品暴露极限条件研究助揭示降解模式假根规定储存条件变化应进行监控三方指南加速受力研究条件进行叙述申请者应该注意条件生物技术产品生物制品适宜应该根具体情况仔细选择
光度
申请者应会关理局根具体情况试验作测定指导
容器／封盖
配制生物技术产品生物制品容器／封盖相互作制品质量发生改变液体制品相互作情况排（密封安瓶外）稳定性试验样品应包括倒置水放置（封盖相接触）竖置样品确定封盖制品质量影响应提供投放市场容器封盖制品数
外申请者应提供通常次性瓶必需标准资料外应证明装剂量制品封盖够受反复插入抽取制品容器包装标签说明书中规定期限保持高效力纯度质量类标签应符合国家／区关求
重溶冻干制品稳定性
应证明重溶冻干制品否符合容器包装／包装说明书中规定储存条件储存期限稳定性类标签应符合国家／区关求
检测频率
生物技术产品生物制品储存期限天年等难起草适合类生物技术产品生物制品关稳定性试验期限检测频率统指南然少数制品例外现制品制品储存期限半年五年范围建议储存期限基础考虑生物技术产品／生物制品降解常常受储存期时间素影响事实
建议储存期限年年时实际稳定性试验通常应头三月月进行次三月进行次
建议制品储存期限年时应储存期第年隔三月进行次试验第二年六月次年次
制品批准发证前阶段试验间隔合适批准发证充分证明稳定性资料时减少试验适宜现资料证实某制品稳定性问题时申请者应提交支持特定试验间隔期（九月试验）批准发证长期研究方案
标准规格
生物技术产品生物制品储存期量活性丢失理化降解影响质量国际国家理法规中少区制品签发效期终末标准提出指导意见目前单种类生物技术产品／生物制品推荐效期接受活性丢失量理化降解限度尚未提出建议根具体情况定建议储存期限种制品安全性纯度效力应保持设定标准界限标准限定应产生适宜统计学方法获资料制品签发效期终未标准规格应充分资料证明床性未受影响应根三方指南中相应部分基原制定建议
标签
应数生物技术产品生物制品半成品成品储存温度加明确限定特耐冷冻半成品成品应提出特殊求容器包装／包装说明书中应注明储存条件适宜储存点避免光湿度建议类标签应符合国家／区关求
 

文档香网(httpswwwxiangdangnet)户传

《香当网》用户分享的内容，不代表《香当网》观点或立场，请自行判断内容的真实性和可靠性！
该内容是文档的文本内容，更好的格式请下载文档