金花茶叶抗炎功能之棉球诱导小鼠肉芽肿实验

来源:www.xiangdang.net上传者:少邦时间:2015/11/19

金花茶叶抗炎功能之棉球诱导小鼠肉芽肿实验

1 实验材料

1.1实验动物

60只SPF级KM成年雄性小鼠,18~22g,每组12只。

1.2金花茶叶

显脉金花茶叶,人用量为0.75g叶子/kg,本实验高剂量采用2.5倍人用量,则浓度为:0.75×2.5×12=22.50g叶子/kg。

2 金花茶叶水提取物的制备

取4kg金花茶叶(约38日量),粉碎,提取三次。首次加15倍水,冷泡30min,加热至沸腾后停止加热,使叶热浸30min后,加热致沸提取5min,收集提取液。第二、第三次分别加8倍量的水,加热至沸腾后停止加热,使叶热浸泡30min后,加热致沸提取5min。合并三次所得提取液,过350目滤布,将所得滤液真空浓缩至1kg浸膏(70-80℃),使浸膏浓度相当于4g叶/g。每盒分装约(1.125×105÷4=)29.53g。可分装33盒。使用时每盒稀释至105ml(高浓度)使用。

3实验步骤

3.1棉球处理

将脱脂棉制成约10mg紧致的小棉球,经高压灭菌后,置恒温干燥箱60°C干燥6h,取出无菌条件下称重,干燥保存,备用。

3.2操作及肉芽组织的形成

取成年18~22g雄性小鼠60只,随机分为模型对照组、金花茶叶组(5.625g叶子/kg(0.28125g叶子/ml);11.25g叶子/kg(0.5625g叶子/ml);22.50g叶子/kg(1.125g叶子/ml))和阳性对照组(地塞米松5mg/kg(0.25mg/ml)),每组12只。灌胃给药2.ml/100g/d,模型组给予等体积溶媒,连续给药7d。实验前1天,用脱毛器脱去小鼠两侧腹股沟处的毛,0.1ml水合氯醛(10%)浅麻醉小鼠,碘伏消毒,在无菌条件下切开小鼠两侧腹股沟皮肤,植入备用的棉球,缝合切口,继续给予受试物。实验结束当天,给受试物1小时后,断颈处死小鼠,在原缝合处剪开皮肤,剥离并取出棉球肉芽组织,置于已称重洁净平皿中,恒温干燥箱60°C开盖干燥6h后称重,计算肉芽肿净量。

肉芽肿净量(mg)=干燥后棉球肉芽肿重量-原棉球重量

抑制率%=(对照组平均肉芽净重-给药组平均肉芽净重)/对照组平均肉芽净重×100%。

3.3 统计学方法

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