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2021年微生物鉴定方法总结范
目录
1微生物鉴定技术—传统方法111细菌微菌落技术112生理生化反应特征113生态学特征214血清学反应215选择鉴定培养基法316微量项实验鉴定系统32微生物鉴方法—新技术新方法321细胞壁组分分析322红外光谱ir323气相色谱gc424高效液相色谱hplc425质谱分析ms43微生物鉴方法—分子生物学方法___分子生物学技术432pcr技术433基探针技术43416srdna基源性分析5
___理工学生命科学工程学院___届研究生发酵工程原理作业
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微生物鉴定方法
1微生物鉴定技术—传统方法
传统分类鉴定中微生物分类鉴定形态学特征生理生化反应特征生态学特征血清学反应噬菌体敏感性等鉴定时作鉴定项目进行系列观察鉴定工作
11细菌微菌落技术
细菌形态颜色特征细菌基生物学特性代谢类型分裂方式繁殖速度等密切关系肉眼见菌落菌落量菌体紧密堆积成少生物学特性辨微菌落指细菌生长繁殖早期固相载体形成助显微镜进行观察细菌集落菌落相微菌落边缘中央明显表形特征微生物种类进行鉴定缺点:受操作员观性影响
(1)细胞形态
显微镜观察细胞外形形状排列等细胞构造革兰氏染色反应否运动鞭毛着生部位数目芽孢荚膜芽孢位置放线菌真菌繁殖器官形状构造孢子数目形状颜色表面特征等
(2)群体形态
群体形态通常指情况特征定固体培养基生长菌落特征包括外形光泽黏稠度透明度边缘隆起情况正反面颜色质气味否分泌水溶性色素等定斜面培养基生长菌苔特征包括生长程度形状边缘隆起颜色等半固体培养基穿刺接种生长情况液体培养基中生长情况包括否产生菌膜均匀浑浊发生沉淀气泡培养基颜色等酵母菌注意成醭状环状岛状
12生理生化反应特征(1)利物质力
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包括种碳源利力(否co2唯碳源种糖类利情况等)种氮源利力(否固氮硝酸盐铵盐利情况等)源求(光化氧化机物氧化机物等)生长子求(否需生长子需什生长子等)
(2)代谢产物特殊性
方面鉴定项目非常否产生h2s吲哚co
2醇机酸否原硝酸盐否牛奶凝固冻化等
(3)温度氧气关系
测出适合某种微生物生长温度范围适生长温度低生长温度高生长温度氧气关系氧微量氧兼性氧耐氧专性厌氧
13生态学特征
生态学特征包括生物间关系(寄生生寄范围致病情况)然界分布情况(ph情况水分程度等)渗透压情况(否耐高渗否嗜盐性等)
14血清学反应
细菌十分相似外表结构(鞭毛)作相酶(乳酸杆菌属种细菌乳酸脱氢酶)然蛋白质分子结构异普通技术(电子显微镜生化反应)法分辨然利抗原抗体高度敏感特异性反应鉴相似菌种种微生物分型已知菌种型菌株制成抗血清鉴定象否发生特异性血清学反应鉴定未知菌种型菌株
该法常肠道菌噬菌体病毒分类鉴定利法已伤寒杆菌肺炎链球菌等菌分成数十种菌型
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15选择鉴定培养基法
培养基中加入特异性生化反应底物抗体荧光反应底物酶反应底物等目标培养物选择分离鉴定次性完成生物梅里埃公司bp+rpf(兔血浆+纤维蛋白原)培养基24h鉴定金黄色葡萄球菌
16微量项实验鉴定系统
该系统原理根微生物生理生化特征鉴定结果进行数码分类鉴定针微生物生理生化特性配制种底物培养基试剂等分微量加入分隔室中冷冻干燥脱水干燥脱水分室塑料条板构成检测卡未知菌加入中检测通查检索表直接输入计算机鉴定结果短甚___4h出结果
微生物项鉴定技术优点突出快速敏感准确重复性鉴定微生物缺点系统差异较价格昂贵反应准毫疑问微生物鉴定技术快速简易动化发展重方
2微生物鉴方法—新技术新方法
21细胞壁组分分析
细胞壁组分分析首先应放线菌分类中作区分属单纯形态进行分类更全面年___属放线菌细胞壁进行分析根细胞壁氨基酸组成分___细胞壁类型根细胞壁糖组成分成___糖类型基础结合形态特征提出相应科属检索表
22红外光谱ir般认种物质化学结构特定红外光谱两样品吸收光谱完全相初步认种物质红外光谱技术应微生物分类中先芽孢杆菌乳酸菌肠杆菌酵母菌进行分类年应放线菌分类中
根关学者试验表明种方法简便快速样品少结果较仅
___理工学生命科学工程学院___届研究生发酵工程原理作业
初步解属菌细胞成分化学性质时助微生物间系统发育关系探索足处助红外线光谱区分属种菌株困难作属分类特征
23气相色谱gc24高效液相色谱hplc25质谱分析ms3微生物鉴方法—分子生物学方法
___分子生物学技术
种应细菌表现特性(包括形态生理生化血清等)进行鉴定然种方法成功十分相似细菌难区进二十年核酸技术应分类鉴定已成发展趋势
32pcr技术
pcr技术采体外酶促反应合成特异性dna片段通扩增产物识细菌pcr灵敏度高理检出拷贝基细菌检测中需短时间增菌甚增菌通pcr进行筛选节约量时问pcr技术缺点:增菌培养基成分微生物dnataq酶具作导致检验结果假阴性微量外源性dna进入pcr引起限产生假阳性结果扩增程中定装配误差会结果产生影响
33基探针技术
基探针技术利具源性序列核酸单链适条件互补形成稳定dnarnadnadna链原理采高度特异性基片段制备基探针识细菌基探针优点减少基片段长度态性需分析条带数法国生物梅里埃公司基探针检测系统30min完成微生物确证试验基探针缺点鉴定目标菌外菌
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3416srdna基源性分析
16srdna基源性分析种常细菌分子鉴定方法16srdna基扩增需细菌染色体dna作模板目前建立___种新快速高效细菌染色体dna提取方法整提取程仅耗时2min细菌快速鉴定成
前制药企业中应较表型鉴定系统着现代科技发展微生物鉴定正历表现型基型鉴定转变程年兴起基探针技术全动微生物检测系统根改变微生物检测方法具非常广阔应前景
参考文献:
[___]陈艳微生物鉴定方法较[j]中国水产___(1)[___]夏菠周传云张庆芬等开菲尔中菌种分离鉴定方法初探[c]___[___]苏德模马绪荣药品微生物学检验技术___01(1)[___]吴清周艳红蔡芷荷卫生微生物特异性显色培养基研究应[j]中国卫生检验杂志___15(1)
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