1（江苏卷3）列关动物细胞工程胚胎工程叙述正确（ ）
A 乳腺细胞乳腺癌细胞更容易进行离体培养
B 细胞核移植种动物种组织细胞间进行
C 采胚胎分割技术产生卵胚数量限
D 培养早期胚胎培养液中含维生素激素等种源物质
答案C
考点定位动物细胞培养核移植早期胚胎培养胚胎分割等
名师点睛题综合考查动物细胞工程胚胎工程相关知识意检测学生相关知识理解记忆力现代生物科技专题知识学生中学期间法直接观察直接操作实验知识学生学想象理解识记相关考点知识完成相应试题
2（广东卷25）图9培育转基山羊生产β酪蛋白流程图
列叙述正确
A 程①β酪蛋白基cDNA文库中获
B 程②选囊胚期原肠胚期胚胎进行移植
C 程③胚胎分割技术扩转基山羊群体
D 程④β酪蛋白基细胞质进行转录翻译
答案AC
解析图知①程表示基表达载体构建目基获方法CDNA文库中获取中
A正确程②表示胚胎移植山羊胚胎移植应囊胚期前B错误胚胎分割遗传性状相体③程中应C正确真核生物基表达转录程发生细胞核翻译程发生细胞质D错误
3(四川卷2)精子顶体溶酶体特化精卵识顶体膜精子细胞膜融合释放溶酶体酶卵子外层形成孔洞利精卵融合形成受精卵列叙述正确（ ）
A．顶体储存溶酶体酶精子溶酶体中合成
B．精子游卵子需量线粒体细胞质基质
C．顶体膜精子细胞膜融合体现生物膜选择透性
D．受精卵中遗传物质半父方半母方
答案B
考点定位题考查细胞结构功时涉精子结构功受精程中遗传物质源膜结构特点
名师点睛题受精作程知识背景综合考查动物细胞中ATP产生部位生物膜结构特点遗传物质分配等知识点巧妙必修选修模块应容机结合起应该甚高考命题趋势[源Z+xx+kCom]
4（天津卷6）2015年2月3日英国议会院通项历史性法案允许医学手段培育三亲婴三亲婴培育程选技术路线
图分析列叙述错误（ ）
A该技术避免母亲线粒体遗传病基传递代
B捐献者携带红绿色盲基遗传三亲婴
C三亲婴染色体全部母亲提供细胞核
D三亲婴培育需早期环胎培养胚胎移植等技术
答案C
考点定位题考查核移植技术动物细胞培养体外受精早期胚胎培养胚胎移植细胞质遗传核基遗传等知识
名师点睛考生需解细胞质基遗传细胞核基遗传点然结合图示做出具体判断图示信息告诉学三亲分母亲捐献者父亲母亲提供细胞核捐献者提供核卵母细胞父亲提供精子考生需知道染色体存细胞核中结合图示做出正确推断：三亲婴染色体母亲父亲知题考查考生识记力分析力
5（北京卷5）应农杆菌侵染植物叶片获转基植株常规实验步骤中需（ ）
A携带目基农杆菌侵染植物细胞
B选择培养基筛法导入目基细胞
C聚乙二醇诱导转基细胞原生物质融合
D适例生长素细胞分裂素诱导愈伤组织生芽
答案C
考点定位基工程操作程序植物细胞工程
名师点睛解决题必须明确土壤农杆菌转化法培育转基植株程序：获取目基 → 目基Ti质粒结合形成重组质粒 → 重组质粒导入土壤农杆菌 → 土壤农杆菌感染植物细胞 → 检测否导入目基鉴定否成功表达 → 通植物组织培养技术培养 → 获转基植株[源学科网]
6(重庆卷6)列关胰岛素基表达载体叙述正确（ ）
A．表达载体中胰岛素基通肝细胞mRNA反转录获
B．表达载体复制胰岛素基表达均启动复制原（起）点
C．助抗生素抗性基含胰岛素基受体细胞筛选出
D．启动子终止密码子均胰岛素基转录中起作
答案C
考点定位题考查利基工程改造生物体性状操作点学科网
名师点睛基工程误区警示：
（1）般情况种限制酶切割质粒含目基片段时两种限制酶分切割质粒目基样避免质粒质粒间目基目基间连接
（2）目基进入受体细胞受体细胞维持稳定表达程称转化转化实质目基整合受体细胞染色体基组中
（3）标记基作——筛选检测目基否导入受体细胞常见抗生素抗性基发光基（表达产物带颜色物质）等
（4）受体细胞常植物受精卵体细胞（组织培养）动物受精卵（般体细胞）微生物（肠杆菌酵母菌）等合成糖蛋白生物活性胰岛素必须真核生物酵母菌（需质网高尔基体加工分泌）般支原体原营寄生生活定哺乳动物成熟红细胞原细胞核合成蛋白质
（5）基表达载体中启动子（DNA片段）≠起始密码子（RNA）终止子（DNA片段）≠终止密码子（RNA）基表达载体构建核心关键步体外进行
7（天津卷8）纤维素分子进入酵母细胞酵母菌够利环境中纤维素原料生产酒精构建含3种基片段重组质粒面酵母菌转化纤维素酶工程菌合成运输示意图
图回答：
（1）研究构建重组质粒时选四种限制酶识序列图防止酶切片段身环接选限制酶组合________________
A①② B①③ C②④ D③④
(2) 设置菌株Ⅰ验证__________携带纤维素酶基
(3) 纤维素酶基表达包括____________________程菌株Ⅱ相菌株ⅢⅣ中参纤维素酶合成分泌细胞器______________________________
（4）纤维素唯C源培养基分培养菌株ⅡⅢⅣ菌株___________存活原_________________________________
(5)酵母菌生产酒精细胞部位___________产生酒精时细胞呼吸方式___________利纤维素生产酒精时菌株Ⅳ更具优势导入中重组质粒含____________分泌纤维素酶固定细胞壁减少培养液更新二造成酶流失提高酶利率
答案（1）B (C) C (B) (2)质粒DNA酵母菌基组
（3） 转录 翻译 质网高尔基体
（4） II
缺少信号肽编码序列合成纤维素酶分泌胞外细胞利碳源
（5）细胞质基质 氧呼吸 A基片段
考点定位题考查基工程中限制酶相关知识实验设计分析基表达微生物筛选细胞呼吸等知识
名师点睛解决题首选求考生需具备知识储备：限制酶作特点实验设计原基表达包含转录翻译程细胞器功筛选特定微生物细胞呼吸相关知识次进行实验分析单变量入手例（2）然结合图中信息入手进行分析道题中考查知识识记应考查获取信息进行分析做出合理推断求考生牢记课基础知识时加强信息题训练提高获取信息利信息进行分析推理判断力高考中知道入手作答
8（江苏卷32）(9 分)胰岛素 AB 链分表达法生产胰岛素方法 图 1 该方法基表达载体图2 表示利肠杆菌作工程菌生产胰岛素基流程(融合蛋白AB 分表示半乳糖苷酶胰岛素 AB链融合蛋白) 请回答列问题
(1)图1 基表达载体中没标注出基结构 [源学*科*网]
(2)图1 中启动子 酶识结合部位启动目基表达氨苄青霉素抗性基作
(3)构建基表达载体时必需工具酶
(4)茁半乳糖苷酶胰岛素A 链B 链融合表达胰岛素肽链蛋白酶切割位点隐藏部意义
(5)溴化氰切断肽链中甲硫氨酸羧基端肽键溴化氰处理相应融合蛋白获完整 A 链 B 链半乳糖苷酶切成肽段
(6)根图2 中胰岛素结构请推测胰岛素分子中含游离氨基数量 推测结果 理
答案（1）终止子 （2）RNA聚合 作标记基含重组质粒肠杆菌筛选出 （3）限制酶DNA连接酶 （4）防止胰岛素AB链菌体蛋白酶降解 （5）β半乳糖苷酶中含甲硫氨酸胰岛素AB链中含甲硫氨酸 （6）少2 两条肽链端游离氨基氨基酸R基中含游离氨基
考点定位基工程
名师点睛题考查基工程操作工具基步骤中相关知识方面需学生识图解方面需学生相关知识系统理解基工程名词概念易混淆建议时学中应基工程基步骤线种涉方法致程应操作工具应做全面总结概括便解题时快速效提取相关知识[源学§科§网]
9（福建卷33）生物现代生物科技专题（10分）
GDNF种神营养子损伤神细胞具营养保护作研究员构建含GDNF基表达载体（图1示）导入鼠神干细胞中干细胞基治疗研究请回答：
（1）分离培养鼠神干细胞程中胰蛋白酶目
（2）构建含GDNF基表达载体时需选择图1中 限制酶进行酶切
（3）酶切载体GDNF基进行连接连接产物筛选载体三种：单载体连GDNF基载体正连接GDNF基载体反连接（图1示）鉴定3种连接方式选择HpaI酶BamHI酶筛选载体进行双酶切酶切DNA片段进行电泳分析结果图2示图中第
泳道显示鉴定载体正连接
（4）正连接表达载体导入神干细胞检测GDNF基否成功表达相应
提取蛋白质杂交培养神干细胞达定密度时需进行 培养更数量细胞神干细胞移植治疗实验
答案（1）细胞分散开 （2）XhoI （3） （4）抗体 传代
考点定位基工程动物细胞培养
名师点睛选修容理测试重点相关生物工程理基础操作流程般题目求难度记忆记忆操作流程干辅理基础解决题关键记住相应基础知识外求学生读懂题图中部分含义
10（海南卷31）生物－选修3：现代生物科技专题（15分）体胰岛素基表达合成出条称前胰岛素原肽链肽链质网中酶甲切割掉氨基端段短肽成胰岛素原进入高尔基体胰岛素原酶乙切割中间片段C产生AB两条肽链酶丙作生成51氨基酸残基组成胰岛素目前利基工程技术量生产胰岛素回答列问题：
（1）体合成前胰岛素原细胞＿＿＿＿＿合成胰高血糖素细胞＿＿＿＿＿
（2）根胰岛素原氨基酸序列设计合成编码胰岛素原＿＿＿＿＿序列该序列质粒表达载体构建胰岛素原基重组表达载体细菌转化筛选鉴定建立稳定合成＿＿＿＿＿基工程菌
（3）胰岛素原抗体检测该工程菌培养物时培养液抗原抗体反应菌体抗原抗体反应该工程菌进行工业发酵时应＿＿＿＿＿中分离纯化胰岛素原胰岛素原酶处理便转变胰岛素
答案（1）胰岛B细胞 胰岛A细胞 （2）DNA（序列） 胰岛素原 （3）菌体
考点定位蛋白质合成加工基工程发酵工程
名师点睛题通简单题干信息考查胰岛素合成加工基工程发酵工程等相关知识旨检测学生分泌蛋白合成加工基工程发酵工程等相关知识理解力分泌蛋白合成加工基工程操作步骤等知识熟练理解解决题关键
11(四川卷9)（11分）苏云金杆菌Bt蛋白基导入棉花细胞中获抗棉铃虫转基棉程图示（注：农杆菌中Ti质拉T－DNA片段转移植物细胞中）
（1）程①需种＿＿＿＿酶含Bt基DNATi质粒进行酶切程②获含重组质粒农杆菌筛选出应＿＿＿＿培养基
（2）程③中棉花细胞农杆菌混合培养旨＿＿进入棉花细胞农杆菌须转接含卡霉素培养基继续培养目＿＿＿＿＿＿＿＿
（3）程④仅获量根应培养基中增加＿＿＿＿获芽部分接种激素培养基芽长根原＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿
（4）检验转基棉抗虫性状常方法＿＿＿＿种植转基抗虫棉减少＿＿＿减轻环境污染
答案（1）限制性核酸切 选择
（2）T－DNA 筛选获T－DNA片段植物细胞
（3）细胞分裂素浓度 顶芽端合成生长素基部运输促进根分化
（4）投放棉铃虫 农药
考点定位题考查基工程细胞工程原理相关操作涉培养基功等知识点
名师点睛基工程操作点提示：（1）基表达载体构建实施基工程第二步基工程核心（2）植物说受体细胞受精卵体细胞常体细胞（3）动物说受体细胞般受精卵受精卵作受体细胞具体积易操作培养直接表达性状优点动物体细胞全性受限选择培养基运质粒标记基
12(重庆卷7)（10分）2014年埃博拉病非洲蔓延国派出医疗队首次境外组建医院帮助治疗埃博拉疫情
（1）研究表明埃博拉病毒侵入机体通靶感染破坏吞噬细胞等暴露病毒＿＿＿＿＿致感染信息呈递＿＿＿＿＿阻止正常激活细胞免疫体液免疫应答程导致机体该病毒＿＿＿＿免疫功降病毒体快速增殖致病
（2）志愿者接种埃博拉试验疫苗机体免疫系统产生相应抗体产生免疫细胞＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿
（3）埃博拉病毒某种蛋白免疫鼠通＿＿＿＿＿＿＿技术获杂交瘤细胞生产单克隆抗体治疗该病
答案（1）特抗原抗原肽－MHC T细胞 特异性
（2）记忆细胞效应T细胞
（3）细胞融合细胞杂交
考点定位题考查机体细胞免疫体液免疫涉细胞工程中单克隆抗体制备等相关知识点
名师点睛体液免疫细胞免疫判断方法：
（1）根免疫结果：果免疫引起靶细胞裂解释放中隐藏抗原细胞免疫果两种成分结合形成沉淀细胞集团体液免疫
（2）根抗原种类：果抗原进入体液体液免疫果抗原进入组织细胞细胞免疫
13(重庆卷8)（20分）某课题组解决种奶牛产奶量低问题引进含高产奶基适应性差纯种公牛
（1）拟进行杂交：
♂A（具高产奶基纯种）×♀B（具适宜生长基纯种）→C
选择B作母原胚胎母体正常＿＿＿＿＿＿C中母牛表现适宜生长产奶量未提高说明高产奶＿＿＿性状获产奶量高适宜生长母牛根现类型佳杂交组合＿＿＿＿＿代中出现种母牛概率＿＿＿（假设两基分位常染色体）
（2）佳组合流程加速获优良体
精子具受精力需进行＿＿＿处理卵子成熟程＿＿＿中完成程④培养基中含葡萄糖作＿＿＿＿＿＿＿＿＿筛选出具优良性状母牛程⑤前应鉴定胚胎＿＿＿＿＿＿子代母牛优良性状程＿＿＿基重组关
（3）提高已胚胎利率采＿＿＿＿＿＿技术
答案（1）生长发育胚胎发育 隐性 ♂A×♀C 18
（2）获增强活力 ③ 供 性高产奶适应生长基 ②
（3）胚胎分割
考点定位题考查遗传规律生产方面应时涉胚胎工程相关操作等知识点
名师点睛胚胎工程误区警示：
（1）胚胎移植胚胎工程中道程序移植胚胎必须原肠胚前直接移植受精卵
（2）促性腺激素两次：①期发情处理②超数排卵
（3）两次检查：①收集胚胎检查②移植否妊娠检查
（4）卵含义：出早期胚胎出卵子
（5）胚胎移植供体受体必须种生物
（6）期发情处理雌性激素超数排卵处理促性腺激素
（7）试动物性性状父母决定克隆动物性性状核供体相
（8）胚胎产生程般性生殖胚胎分割性生殖方式
14(课标I卷40)[生物——选修3：现代生物科技专题]（15分）
HIV属逆转录病毒艾滋病病原体回答列问题：
（1）基工程方法制备HIV某蛋白（目蛋白）时先提取HIV中 作模板 作合成 获取该目蛋白基构建重组表达载体导入受体细胞
（2）受体细胞中分离纯化出目蛋白该蛋白作抗原注入机体刺激机体产生蛋白结合相应分泌蛋白 该分泌蛋白检测受试者血清中HIV检测原理
（3）已知某种菌导致肺炎健康群中罕见艾滋病患者中发引起种现象根原HIV感染破坏患者部分 细胞降低患者免疫系统防卫功
（4）免疫系统 癌细胞功艾滋病患者免疫功缺陷易发生恶性肿瘤
答案（1）RNA 逆转录酶 DNA
(2)抗体 抗原抗体特异性结合
（3）T（T淋巴）
（4）监控清
考点定位题免疫调节基工程操作程等知识点
名师点睛解决题考生需知道基工程操作流程：目基获取途径基表达载体构建目基导入受体细胞目基检测鉴定免疫功：防卫监控清特目基获取检测方法原理够区分防卫监控清什条件发挥作
15(课标II卷40)生物——选修3：现代生物技术专题（15分）
已知生物体种蛋白质（P）该蛋白质种转运蛋白305氨基酸组成果P分子中158位丝氨酸变成亮氨酸240位谷氨酰胺变成苯丙氨酸改变蛋白质（P1）保留P功具酶催化活性回答列问题：
（1） 述资料知改变蛋白质功考虑蛋白质 进行改造
（2） P基序列基础获P1基途径修饰 基合成 基获基表达时遵循中心法中心法全部容包括 复制遗传信息分子间流动：
（3） 蛋白质工程称第二代基工程基途径预期蛋白质功出发通
进确定相应脱氧核苷酸序列获基表达纯化获蛋白质需蛋白质生物 进行鉴定
答案（1）氨基酸序列（结构）（1分）
（2） P P1 DNARNA
DNA→RNARNA→DNARNA→蛋白质（转录逆转录翻译）
（3）设计蛋白质结构 推测氨基酸序列 功
考点定位题考查蛋白质工程中心法等知识
名师点睛学会获取信息信息作答高考中项力考查（1）种性质考查知道蛋白质工程基途径中心法全部容图解解决题基础外具体环境中应（2）该性质考查（3）蛋白质工程途径识记力考查综分析考生时学复中注重知识识记具体环境中恰运
16（安徽卷31）II（9分）科研员采转基体细胞克隆技术获转基绵羊便通乳腺生物反应器生产凝血子IX医蛋白技术路线图
（1） 程获A
（2） 核移植前必须先掉卵母细胞核目 受体应选 期卵母细胞
（3） 进行胚胎移植时代孕母羊置入子宫重组胚胎基发生 重组胚胎代孕母羊体存活提供
（4） 采胎成纤维细胞进行转基体细胞克隆理获限转基绵羊
答案II（1）含目基表达载体 （2）保证核遗传物质目基成纤维细胞 MII中 （3）免疫排斥反应 （4）整合含目基成纤维细胞进行传代培养
考点定位基工程核移植胚胎工程
名师点睛题分两部分第Ⅰ部分考查基组合定律应基性状控制等知识重检测学生否运学知识观点结合题干信息通较分析综合等方法某生物学问题进行解释推理做出合理判断出正确结力第Ⅱ部分考查选修三中基工程核移植胚胎工程等现代生物科技相关知识重检测学生识图分析理解记忆相关知识点力解决前部分问题仅需学生题干中获取效信息需遗传规律原理实质完全理解正确作答部分选修知识相容易需学生较高语言组织表达力
17（山东卷36）（12分）生物—现代生物科技专题
治疗性克隆解决供体器官缺乏器官移植免疫排斥反应具重意义流程：
（1）程①采细胞工程中_________技术程②采胚胎工程中_________技术
（2）体细胞进行体外培养时需气体O2CO2中CO2作维持培养液（基）_____________
（3）果克隆程中需进行基改造构建基表达载体（重组载体）时必须_________________两种工具酶基表达载体目基外需________基便选出成功导入基表达载体细胞
（4）胚胎干细胞囊胚中________定条件胚胎干细胞分化形成组织器官图中获组织器官移植体_________(填AB)会发生免疫排斥反应
答案（1）（体细胞）核移植 （早期）胚胎培养 （2）PH（酸碱度） （3）限制性（核酸）切酶（限制酶） DNA连接酶（注：两空颠倒） 标记 （4）细胞团 B
考点定位现代生物科技专题——基工程核移植技术胚胎工程
名师点睛题通部分现代生物技术流程图解信息载体考查学生基工程核移植技术胚胎工程中相关操作步骤掌握情况旨检测学生相关知识准确理解力构建知识网络力通题项现代生物技术机联系起体现学生学专题时完全独立开应前联系[源Z§xx§kCom]
18（海卷综合题九）回答列关遗传信息传递表达问题（9分）
图28A示质粒pZHZ9含X抗生素抗性基（XR）Y抗生素抗性基（YR）中XR部含限制酶KasI识序列YR部含限制酶FseIHpaIINaeINgoMIV识序列五种酶识序列图28B（▼表示切割位点）识序列整质粒均仅处目基部存识序列
68．结构图28C示目基直接插入YR形成重组质粒pZHZ10pZHZ9需限制酶_____切开
69．述切开质粒溶液目基溶液混合加入DNA连接酶连接进行肠杆菌受体细胞导入操作受体细胞类型（两种抗生素表现出抗性R敏感性S）包含_____（选）
A．XRYR B．XRYS C．XSYR D．XSYS
70．KasIFseI联合酶切重组质粒pZHZ 10（含单目基）产生酶切片段数____（选）
A． 1 B．2 C． 3 D． 4
71．动物基工程通常受精卵作受体细胞根原________
A．受精卵目基高效表达 B．受精卵发育成动物体
C．受精卵基组更易接受DNA插入 D．受精卵尺寸较便DNA导入操作
答案68NgoMIV
69ABD
70ABC
71B
目基插入质粒YR基破坏重组质粒导入受体细胞具XR抗性表现XRYS
考点定位基工程
名师点睛题考查基工程关知识求学生首先懂图学知识结合图理解基工程程然根题目中信息运学知识观点通较分析综合等方法基工程相关问题进行解释推理做出合理判断出正确结类题目判断推理力考查求较高方面学生薄弱环节
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1（江苏卷3）列关动物细胞工程胚胎工程叙述正确（ ）
A 乳腺细胞乳腺癌细胞更容易进行离体培养
B 细胞核移植种动物种组织细胞间进行
C 采胚胎分割技术产生卵胚数量限
D 培养早期胚胎培养液中含维生素激素等种源物质
答案C
考点定位动物细胞培养核移植早期胚胎培养胚胎分割等
名师点睛题综合考查动物细胞工程胚胎工程相关知识意检测学生相关知识理解记忆力现代生物科技专题知识学生中学期间法直接观察直接操作实验知识学生学想象理解识记相关考点知识完成相应试题
2（广东卷25）图9培育转基山羊生产β酪蛋白流程图
列叙述正确
A 程①β酪蛋白基cDNA文库中获
B 程②选囊胚期原肠胚期胚胎进行移植
C 程③胚胎分割技术扩转基山羊群体
D 程④β酪蛋白基细胞质进行转录翻译
答案AC
解析图知①程表示基表达载体构建目基获方法CDNA文库中获取中
A正确程②表示胚胎移植山羊胚胎移植应囊胚期前B错误胚胎分割遗传性状相体③程中应C正确真核生物基表达转录程发生细胞核翻译程发生细胞质D错误
3(四川卷2)精子顶体溶酶体特化精卵识顶体膜精子细胞膜融合释放溶酶体酶卵子外层形成孔洞利精卵融合形成受精卵列叙述正确（ ）
A．顶体储存溶酶体酶精子溶酶体中合成
B．精子游卵子需量线粒体细胞质基质
C．顶体膜精子细胞膜融合体现生物膜选择透性
D．受精卵中遗传物质半父方半母方
答案B
考点定位题考查细胞结构功时涉精子结构功受精程中遗传物质源膜结构特点
名师点睛题受精作程知识背景综合考查动物细胞中ATP产生部位生物膜结构特点遗传物质分配等知识点巧妙必修选修模块应容机结合起应该甚高考命题趋势[源Z+xx+kCom]
4（天津卷6）2015年2月3日英国议会院通项历史性法案允许医学手段培育三亲婴三亲婴培育程选技术路线
图分析列叙述错误（ ）
A该技术避免母亲线粒体遗传病基传递代
B捐献者携带红绿色盲基遗传三亲婴
C三亲婴染色体全部母亲提供细胞核
D三亲婴培育需早期环胎培养胚胎移植等技术
答案C
考点定位题考查核移植技术动物细胞培养体外受精早期胚胎培养胚胎移植细胞质遗传核基遗传等知识
名师点睛考生需解细胞质基遗传细胞核基遗传点然结合图示做出具体判断图示信息告诉学三亲分母亲捐献者父亲母亲提供细胞核捐献者提供核卵母细胞父亲提供精子考生需知道染色体存细胞核中结合图示做出正确推断：三亲婴染色体母亲父亲知题考查考生识记力分析力
5（北京卷5）应农杆菌侵染植物叶片获转基植株常规实验步骤中需（ ）
A携带目基农杆菌侵染植物细胞
B选择培养基筛法导入目基细胞
C聚乙二醇诱导转基细胞原生物质融合
D适例生长素细胞分裂素诱导愈伤组织生芽
答案C
考点定位基工程操作程序植物细胞工程
名师点睛解决题必须明确土壤农杆菌转化法培育转基植株程序：获取目基 → 目基Ti质粒结合形成重组质粒 → 重组质粒导入土壤农杆菌 → 土壤农杆菌感染植物细胞 → 检测否导入目基鉴定否成功表达 → 通植物组织培养技术培养 → 获转基植株[源学科网]
6(重庆卷6)列关胰岛素基表达载体叙述正确（ ）
A．表达载体中胰岛素基通肝细胞mRNA反转录获
B．表达载体复制胰岛素基表达均启动复制原（起）点
C．助抗生素抗性基含胰岛素基受体细胞筛选出
D．启动子终止密码子均胰岛素基转录中起作
答案C
考点定位题考查利基工程改造生物体性状操作点学科网
名师点睛基工程误区警示：
（1）般情况种限制酶切割质粒含目基片段时两种限制酶分切割质粒目基样避免质粒质粒间目基目基间连接
（2）目基进入受体细胞受体细胞维持稳定表达程称转化转化实质目基整合受体细胞染色体基组中
（3）标记基作——筛选检测目基否导入受体细胞常见抗生素抗性基发光基（表达产物带颜色物质）等
（4）受体细胞常植物受精卵体细胞（组织培养）动物受精卵（般体细胞）微生物（肠杆菌酵母菌）等合成糖蛋白生物活性胰岛素必须真核生物酵母菌（需质网高尔基体加工分泌）般支原体原营寄生生活定哺乳动物成熟红细胞原细胞核合成蛋白质
（5）基表达载体中启动子（DNA片段）≠起始密码子（RNA）终止子（DNA片段）≠终止密码子（RNA）基表达载体构建核心关键步体外进行
7（天津卷8）纤维素分子进入酵母细胞酵母菌够利环境中纤维素原料生产酒精构建含3种基片段重组质粒面酵母菌转化纤维素酶工程菌合成运输示意图
图回答：
（1）研究构建重组质粒时选四种限制酶识序列图防止酶切片段身环接选限制酶组合________________
A①② B①③ C②④ D③④
(2) 设置菌株Ⅰ验证__________携带纤维素酶基
(3) 纤维素酶基表达包括____________________程菌株Ⅱ相菌株ⅢⅣ中参纤维素酶合成分泌细胞器______________________________
（4）纤维素唯C源培养基分培养菌株ⅡⅢⅣ菌株___________存活原_________________________________
(5)酵母菌生产酒精细胞部位___________产生酒精时细胞呼吸方式___________利纤维素生产酒精时菌株Ⅳ更具优势导入中重组质粒含____________分泌纤维素酶固定细胞壁减少培养液更新二造成酶流失提高酶利率
答案（1）B (C) C (B) (2)质粒DNA酵母菌基组
（3） 转录 翻译 质网高尔基体
（4） II
缺少信号肽编码序列合成纤维素酶分泌胞外细胞利碳源
（5）细胞质基质 氧呼吸 A基片段
考点定位题考查基工程中限制酶相关知识实验设计分析基表达微生物筛选细胞呼吸等知识
名师点睛解决题首选求考生需具备知识储备：限制酶作特点实验设计原基表达包含转录翻译程细胞器功筛选特定微生物细胞呼吸相关知识次进行实验分析单变量入手例（2）然结合图中信息入手进行分析道题中考查知识识记应考查获取信息进行分析做出合理推断求考生牢记课基础知识时加强信息题训练提高获取信息利信息进行分析推理判断力高考中知道入手作答
8（江苏卷32）(9 分)胰岛素 AB 链分表达法生产胰岛素方法 图 1 该方法基表达载体图2 表示利肠杆菌作工程菌生产胰岛素基流程(融合蛋白AB 分表示半乳糖苷酶胰岛素 AB链融合蛋白) 请回答列问题
(1)图1 基表达载体中没标注出基结构 [源学*科*网]
(2)图1 中启动子 酶识结合部位启动目基表达氨苄青霉素抗性基作
(3)构建基表达载体时必需工具酶
(4)茁半乳糖苷酶胰岛素A 链B 链融合表达胰岛素肽链蛋白酶切割位点隐藏部意义
(5)溴化氰切断肽链中甲硫氨酸羧基端肽键溴化氰处理相应融合蛋白获完整 A 链 B 链半乳糖苷酶切成肽段
(6)根图2 中胰岛素结构请推测胰岛素分子中含游离氨基数量 推测结果 理
答案（1）终止子 （2）RNA聚合 作标记基含重组质粒肠杆菌筛选出 （3）限制酶DNA连接酶 （4）防止胰岛素AB链菌体蛋白酶降解 （5）β半乳糖苷酶中含甲硫氨酸胰岛素AB链中含甲硫氨酸 （6）少2 两条肽链端游离氨基氨基酸R基中含游离氨基
考点定位基工程
名师点睛题考查基工程操作工具基步骤中相关知识方面需学生识图解方面需学生相关知识系统理解基工程名词概念易混淆建议时学中应基工程基步骤线种涉方法致程应操作工具应做全面总结概括便解题时快速效提取相关知识[源学§科§网]
9（福建卷33）生物现代生物科技专题（10分）
GDNF种神营养子损伤神细胞具营养保护作研究员构建含GDNF基表达载体（图1示）导入鼠神干细胞中干细胞基治疗研究请回答：
（1）分离培养鼠神干细胞程中胰蛋白酶目
（2）构建含GDNF基表达载体时需选择图1中 限制酶进行酶切
（3）酶切载体GDNF基进行连接连接产物筛选载体三种：单载体连GDNF基载体正连接GDNF基载体反连接（图1示）鉴定3种连接方式选择HpaI酶BamHI酶筛选载体进行双酶切酶切DNA片段进行电泳分析结果图2示图中第
泳道显示鉴定载体正连接
（4）正连接表达载体导入神干细胞检测GDNF基否成功表达相应
提取蛋白质杂交培养神干细胞达定密度时需进行 培养更数量细胞神干细胞移植治疗实验
答案（1）细胞分散开 （2）XhoI （3） （4）抗体 传代
考点定位基工程动物细胞培养
名师点睛选修容理测试重点相关生物工程理基础操作流程般题目求难度记忆记忆操作流程干辅理基础解决题关键记住相应基础知识外求学生读懂题图中部分含义
10（海南卷31）生物－选修3：现代生物科技专题（15分）体胰岛素基表达合成出条称前胰岛素原肽链肽链质网中酶甲切割掉氨基端段短肽成胰岛素原进入高尔基体胰岛素原酶乙切割中间片段C产生AB两条肽链酶丙作生成51氨基酸残基组成胰岛素目前利基工程技术量生产胰岛素回答列问题：
（1）体合成前胰岛素原细胞＿＿＿＿＿合成胰高血糖素细胞＿＿＿＿＿
（2）根胰岛素原氨基酸序列设计合成编码胰岛素原＿＿＿＿＿序列该序列质粒表达载体构建胰岛素原基重组表达载体细菌转化筛选鉴定建立稳定合成＿＿＿＿＿基工程菌
（3）胰岛素原抗体检测该工程菌培养物时培养液抗原抗体反应菌体抗原抗体反应该工程菌进行工业发酵时应＿＿＿＿＿中分离纯化胰岛素原胰岛素原酶处理便转变胰岛素
答案（1）胰岛B细胞 胰岛A细胞 （2）DNA（序列） 胰岛素原 （3）菌体
考点定位蛋白质合成加工基工程发酵工程
名师点睛题通简单题干信息考查胰岛素合成加工基工程发酵工程等相关知识旨检测学生分泌蛋白合成加工基工程发酵工程等相关知识理解力分泌蛋白合成加工基工程操作步骤等知识熟练理解解决题关键
11(四川卷9)（11分）苏云金杆菌Bt蛋白基导入棉花细胞中获抗棉铃虫转基棉程图示（注：农杆菌中Ti质拉T－DNA片段转移植物细胞中）
（1）程①需种＿＿＿＿酶含Bt基DNATi质粒进行酶切程②获含重组质粒农杆菌筛选出应＿＿＿＿培养基
（2）程③中棉花细胞农杆菌混合培养旨＿＿进入棉花细胞农杆菌须转接含卡霉素培养基继续培养目＿＿＿＿＿＿＿＿
（3）程④仅获量根应培养基中增加＿＿＿＿获芽部分接种激素培养基芽长根原＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿
（4）检验转基棉抗虫性状常方法＿＿＿＿种植转基抗虫棉减少＿＿＿减轻环境污染
答案（1）限制性核酸切 选择
（2）T－DNA 筛选获T－DNA片段植物细胞
（3）细胞分裂素浓度 顶芽端合成生长素基部运输促进根分化
（4）投放棉铃虫 农药
考点定位题考查基工程细胞工程原理相关操作涉培养基功等知识点
名师点睛基工程操作点提示：（1）基表达载体构建实施基工程第二步基工程核心（2）植物说受体细胞受精卵体细胞常体细胞（3）动物说受体细胞般受精卵受精卵作受体细胞具体积易操作培养直接表达性状优点动物体细胞全性受限选择培养基运质粒标记基
12(重庆卷7)（10分）2014年埃博拉病非洲蔓延国派出医疗队首次境外组建医院帮助治疗埃博拉疫情
（1）研究表明埃博拉病毒侵入机体通靶感染破坏吞噬细胞等暴露病毒＿＿＿＿＿致感染信息呈递＿＿＿＿＿阻止正常激活细胞免疫体液免疫应答程导致机体该病毒＿＿＿＿免疫功降病毒体快速增殖致病
（2）志愿者接种埃博拉试验疫苗机体免疫系统产生相应抗体产生免疫细胞＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿
（3）埃博拉病毒某种蛋白免疫鼠通＿＿＿＿＿＿＿技术获杂交瘤细胞生产单克隆抗体治疗该病
答案（1）特抗原抗原肽－MHC T细胞 特异性
（2）记忆细胞效应T细胞
（3）细胞融合细胞杂交
考点定位题考查机体细胞免疫体液免疫涉细胞工程中单克隆抗体制备等相关知识点
名师点睛体液免疫细胞免疫判断方法：
（1）根免疫结果：果免疫引起靶细胞裂解释放中隐藏抗原细胞免疫果两种成分结合形成沉淀细胞集团体液免疫
（2）根抗原种类：果抗原进入体液体液免疫果抗原进入组织细胞细胞免疫
13(重庆卷8)（20分）某课题组解决种奶牛产奶量低问题引进含高产奶基适应性差纯种公牛
（1）拟进行杂交：
♂A（具高产奶基纯种）×♀B（具适宜生长基纯种）→C
选择B作母原胚胎母体正常＿＿＿＿＿＿C中母牛表现适宜生长产奶量未提高说明高产奶＿＿＿性状获产奶量高适宜生长母牛根现类型佳杂交组合＿＿＿＿＿代中出现种母牛概率＿＿＿（假设两基分位常染色体）
（2）佳组合流程加速获优良体
精子具受精力需进行＿＿＿处理卵子成熟程＿＿＿中完成程④培养基中含葡萄糖作＿＿＿＿＿＿＿＿＿筛选出具优良性状母牛程⑤前应鉴定胚胎＿＿＿＿＿＿子代母牛优良性状程＿＿＿基重组关
（3）提高已胚胎利率采＿＿＿＿＿＿技术
答案（1）生长发育胚胎发育 隐性 ♂A×♀C 18
（2）获增强活力 ③ 供 性高产奶适应生长基 ②
（3）胚胎分割
考点定位题考查遗传规律生产方面应时涉胚胎工程相关操作等知识点
名师点睛胚胎工程误区警示：
（1）胚胎移植胚胎工程中道程序移植胚胎必须原肠胚前直接移植受精卵
（2）促性腺激素两次：①期发情处理②超数排卵
（3）两次检查：①收集胚胎检查②移植否妊娠检查
（4）卵含义：出早期胚胎出卵子
（5）胚胎移植供体受体必须种生物
（6）期发情处理雌性激素超数排卵处理促性腺激素
（7）试动物性性状父母决定克隆动物性性状核供体相
（8）胚胎产生程般性生殖胚胎分割性生殖方式
14(课标I卷40)[生物——选修3：现代生物科技专题]（15分）
HIV属逆转录病毒艾滋病病原体回答列问题：
（1）基工程方法制备HIV某蛋白（目蛋白）时先提取HIV中 作模板 作合成 获取该目蛋白基构建重组表达载体导入受体细胞
（2）受体细胞中分离纯化出目蛋白该蛋白作抗原注入机体刺激机体产生蛋白结合相应分泌蛋白 该分泌蛋白检测受试者血清中HIV检测原理
（3）已知某种菌导致肺炎健康群中罕见艾滋病患者中发引起种现象根原HIV感染破坏患者部分 细胞降低患者免疫系统防卫功
（4）免疫系统 癌细胞功艾滋病患者免疫功缺陷易发生恶性肿瘤
答案（1）RNA 逆转录酶 DNA
(2)抗体 抗原抗体特异性结合
（3）T（T淋巴）
（4）监控清
考点定位题免疫调节基工程操作程等知识点
名师点睛解决题考生需知道基工程操作流程：目基获取途径基表达载体构建目基导入受体细胞目基检测鉴定免疫功：防卫监控清特目基获取检测方法原理够区分防卫监控清什条件发挥作
15(课标II卷40)生物——选修3：现代生物技术专题（15分）
已知生物体种蛋白质（P）该蛋白质种转运蛋白305氨基酸组成果P分子中158位丝氨酸变成亮氨酸240位谷氨酰胺变成苯丙氨酸改变蛋白质（P1）保留P功具酶催化活性回答列问题：
（1） 述资料知改变蛋白质功考虑蛋白质 进行改造
（2） P基序列基础获P1基途径修饰 基合成 基获基表达时遵循中心法中心法全部容包括 复制遗传信息分子间流动：
（3） 蛋白质工程称第二代基工程基途径预期蛋白质功出发通
进确定相应脱氧核苷酸序列获基表达纯化获蛋白质需蛋白质生物 进行鉴定
答案（1）氨基酸序列（结构）（1分）
（2） P P1 DNARNA
DNA→RNARNA→DNARNA→蛋白质（转录逆转录翻译）
（3）设计蛋白质结构 推测氨基酸序列 功
考点定位题考查蛋白质工程中心法等知识
名师点睛学会获取信息信息作答高考中项力考查（1）种性质考查知道蛋白质工程基途径中心法全部容图解解决题基础外具体环境中应（2）该性质考查（3）蛋白质工程途径识记力考查综分析考生时学复中注重知识识记具体环境中恰运
16（安徽卷31）II（9分）科研员采转基体细胞克隆技术获转基绵羊便通乳腺生物反应器生产凝血子IX医蛋白技术路线图
（1） 程获A
（2） 核移植前必须先掉卵母细胞核目 受体应选 期卵母细胞
（3） 进行胚胎移植时代孕母羊置入子宫重组胚胎基发生 重组胚胎代孕母羊体存活提供
（4） 采胎成纤维细胞进行转基体细胞克隆理获限转基绵羊
答案II（1）含目基表达载体 （2）保证核遗传物质目基成纤维细胞 MII中 （3）免疫排斥反应 （4）整合含目基成纤维细胞进行传代培养
考点定位基工程核移植胚胎工程
名师点睛题分两部分第Ⅰ部分考查基组合定律应基性状控制等知识重检测学生否运学知识观点结合题干信息通较分析综合等方法某生物学问题进行解释推理做出合理判断出正确结力第Ⅱ部分考查选修三中基工程核移植胚胎工程等现代生物科技相关知识重检测学生识图分析理解记忆相关知识点力解决前部分问题仅需学生题干中获取效信息需遗传规律原理实质完全理解正确作答部分选修知识相容易需学生较高语言组织表达力
17（山东卷36）（12分）生物—现代生物科技专题
治疗性克隆解决供体器官缺乏器官移植免疫排斥反应具重意义流程：
（1）程①采细胞工程中_________技术程②采胚胎工程中_________技术
（2）体细胞进行体外培养时需气体O2CO2中CO2作维持培养液（基）_____________
（3）果克隆程中需进行基改造构建基表达载体（重组载体）时必须_________________两种工具酶基表达载体目基外需________基便选出成功导入基表达载体细胞
（4）胚胎干细胞囊胚中________定条件胚胎干细胞分化形成组织器官图中获组织器官移植体_________(填AB)会发生免疫排斥反应
答案（1）（体细胞）核移植 （早期）胚胎培养 （2）PH（酸碱度） （3）限制性（核酸）切酶（限制酶） DNA连接酶（注：两空颠倒） 标记 （4）细胞团 B
考点定位现代生物科技专题——基工程核移植技术胚胎工程
名师点睛题通部分现代生物技术流程图解信息载体考查学生基工程核移植技术胚胎工程中相关操作步骤掌握情况旨检测学生相关知识准确理解力构建知识网络力通题项现代生物技术机联系起体现学生学专题时完全独立开应前联系[源Z§xx§kCom]
18（海卷综合题九）回答列关遗传信息传递表达问题（9分）
图28A示质粒pZHZ9含X抗生素抗性基（XR）Y抗生素抗性基（YR）中XR部含限制酶KasI识序列YR部含限制酶FseIHpaIINaeINgoMIV识序列五种酶识序列图28B（▼表示切割位点）识序列整质粒均仅处目基部存识序列
68．结构图28C示目基直接插入YR形成重组质粒pZHZ10pZHZ9需限制酶_____切开
69．述切开质粒溶液目基溶液混合加入DNA连接酶连接进行肠杆菌受体细胞导入操作受体细胞类型（两种抗生素表现出抗性R敏感性S）包含_____（选）
A．XRYR B．XRYS C．XSYR D．XSYS
70．KasIFseI联合酶切重组质粒pZHZ 10（含单目基）产生酶切片段数____（选）
A． 1 B．2 C． 3 D． 4
71．动物基工程通常受精卵作受体细胞根原________
A．受精卵目基高效表达 B．受精卵发育成动物体
C．受精卵基组更易接受DNA插入 D．受精卵尺寸较便DNA导入操作
答案68NgoMIV
69ABD
70ABC
71B
目基插入质粒YR基破坏重组质粒导入受体细胞具XR抗性表现XRYS
考点定位基工程
名师点睛题考查基工程关知识求学生首先懂图学知识结合图理解基工程程然根题目中信息运学知识观点通较分析综合等方法基工程相关问题进行解释推理做出合理判断出正确结类题目判断推理力考查求较高方面学生薄弱环节
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