2020医疗机构新型冠状病毒核酸检测工作手册


    2020医疗机构新型冠状病毒核酸检测工作手册

    技术员基求 2
    二标采集基求 2
    三标理基求 5
    四实验室理基求 6
    五实验室质量控制理 8
    六核酸检测结果反馈基求 9
    七核酸检测安全理 9
    八核酸检测信息化理 14
    九求 14

    2020医疗机构新型冠状病毒核酸检测工作手册
    落实国务院应新型冠状病毒感染肺炎疫情联防联控机制关做新冠肺炎疫情常态化防控工作指导意见(国发明电〔2020〕14号)求进步规范新型冠状病毒(简称新冠病毒)核酸检测技术员标采集标理实验室检测结果报告等工作保证检测质量提高检测效率满足新冠病毒核酸检测需求特制定手册手册适开展新冠病毒核酸检测医疗机构
    技术员基求
    ()采样员事新冠病毒核酸检测标采集技术员应生物安全培训(培训合格)熟悉标种类采集方法熟练掌握标采集操作流程注意事项做标信息记录确保标质量符合求标相关信息追溯
    (二)检测员实验室检测技术员应具备相关专业专学历具中级专业技术职务职资格2年实验室工作历基检验相关培训合格证书实验室配备工作员应开展检测项目标量相适宜保证时熟练进行实验报告结果保证结果准确性
    二标采集基求
    ()基原
    1医疗机构检测力应门急诊诊次住院次等诊疗量相匹配采集标量相适应避免采集数量明显超出检测力导致标积压标失效检测结果反馈迟缓等问题
    2医疗机构采集标时根采集象设置采样区域发热患者患者愿检检群分区采样避免交叉感染
    3标采集应满足机构发热门诊住院患者陪护员院职工检测需求基础进步保障重点群应检检般群愿检检求
    (二)采样点设置医疗机构设置新冠病毒采样点应遵循安全科学便民原采样点应独立空间具备通风条件部划分相应清洁区污染区配备手卫生设施装置采样点需设立清晰指引标识明确采样流程注意事项设立独立等候区域保证员单流动落实1米线间隔求严控员密度
    (三)员配置防护求采样点应配备12名采样员合理安排采样员轮原24时轮岗休息1次采样员防护装备求:N95防护口罩护目镜防护服乳胶手套防水靴套果接触患者血液体液分泌物排泄物戴双层乳胶手套手套污染时时更换外层乳胶手套采应进行严格手消毒更换手套
    (四)采样流程医疗机构应建立新冠病毒核酸检测采样操作流程制度根采样象类确定具体采样流程包括预约缴费信息核采样送检报告发放等应利条码扫描等信息化手段采集受检者信息标采集前采样员应受检者身份信息进行核公区域信息公告形式告知核酸检测报告发放时限发放方式标应少记录信息:1受检者(患者)姓名身份证号居住址联系方式2采样单位名称标编号标采集日期时间采集部位类型数量等
    (五)采集方法应采集呼吸道标包括呼吸道标(口咽拭子鼻咽拭子等)呼吸道标(呼吸道吸取物支气灌洗液肺泡灌洗液深咳痰液等)中重症病例优先采集呼吸道标根床需留取便标
    1口咽拭子采集员先生理盐水漱口采样员拭子放入菌生理盐水中湿润(禁止拭子放入病毒保存液中避免抗生素引起敏)采集员头部微仰嘴张发啊音露出两侧咽扁桃体拭子越舌根采集者两侧咽扁桃体稍微力回擦拭少3次然咽壁擦拭少3次拭子头浸入含2~3ml病毒保存液(等渗盐溶液组织培养液磷酸盐缓液)中尾部弃旋紧盖
    2鼻咽拭子采样员手轻扶采集员头部手执拭子贴鼻孔进入鼻道底部缓缓深入鼻道呈弧形力猛免发生外伤出血拭子顶端达鼻咽腔壁时轻轻旋转周(遇反射性咳嗽应停留片刻)然缓缓取出拭子拭子头浸入含2~3ml病毒保存液中
    3深咳痰液求患者深咳咳出痰液收集含3ml采样液50ml螺口塑料中果痰液未收集采样液中检测前加入2~3ml采样液加入痰液等体积痰消化液采痰液等体积含1gL蛋白酶K磷酸盐缓液痰液化
    4鼻咽呼吸道抽取物负压泵相连收集器鼻咽部抽取粘液气抽取呼吸道分泌物收集器头部插入鼻腔气接通负压旋转收集器头部缓慢退出收集抽取粘液3ml采样液洗收集器1次(导尿接50ml注射器代收集器)
    5支气灌洗液收集器头部鼻孔气插口处插入气(约30cm深处)注入5ml生理盐水接通负压旋转收集器头部缓慢退出收集抽取粘液采样液洗收集器1次(导尿接50ml注射器代收集)
    6肺泡灌洗液局部麻醉纤维支气镜通口鼻咽部插入右肺中叶左肺舌段支顶端契入支气分支开口气活检孔缓缓加入灭菌生理盐水次30~50ml总量100~250ml应超300ml
    三标理基求
    ()标包装标应放适合带螺旋盖垫圈耐冷冻标采集里拧紧容器外注明标编号种类姓名采样日期密闭标放入合适塑料袋密封袋装份标
    (二)标送检标采集室温放置超4时应24h送实验室果需长途运输标应采干冰等制冷方式进行保存严格相关规定包装运输
    (三)标接收标接收员防护采样员防护装备执行标运送员接收员标进行双签收
    (四)标保存病毒分离核酸检测标应快进行检测24时检测标置4℃保存24时法检测标应置70℃保存(70℃保存条件20℃冰箱暂存)应设立专库专柜单独保存标标运送期间避免反复冻融
    (五)混检标采集检测
    1采样方法手册第二部分(五)采集方法进行样采集
    2样混合采集数样(原超5)取200ul进行充分混合形成混合检样
    3混检样结果判断重测检测结果先检测试剂盒说明书求检测基位点逐判定出现位点阳性测出Ct值混合样均作重测象常规方法进行单样核酸检测
    四实验室理基求
    ()实验室资质求开展核酸检测实验室应符合病原微生物实验室生物安全理条例(国务院令第424号)医疗机构床基扩增检验实验室理办法(卫办医政发〔2010〕194号)关规定具备卫生健康行政部门审核备案生物安全二级实验室条件床基扩增检验实验室条件独立设置医学检验实验室应符合医学检验实验室基标准(试行)医学检验实验室理规范(试行)等求
    (二)实验室分区求原开展新冠病毒核酸检测实验室应设置区域:试剂储存准备区标制备区扩增产物分析区3区域物理空间应完全相互独立空气直接相通区功:
    1试剂储存准备区:贮存试剂制备试剂分装扩增反应混合液制备离心吸头等消耗品贮存准备
    2标制备区:转运桶开启标灭活核酸提取加入扩增反应等
    3扩增产物分析区:核酸扩增产物分析
    根仪器功区域适合采标处理核酸提取扩增检测体动化分析仪标制备区扩增产物分析区合
    (三)仪器设备实验室应配备开展检验项目相适宜仪器设备包括核酸提取仪医PCR扩增仪生物安全柜病毒灭活设备(水浴锅等)保存试剂标冰箱冰柜离心机间断电源(UPS)备电源等
    (四)实验室检测实验室接标应生物安全柜标进行清点核标进行灭活处理标准操作程序进行试剂准备标前处理核酸提取核酸扩增结果分析报告实验室应建立疑标阳性标复检流程
    1试剂准备应选择国家药品监督理部门批准试剂选择标保存液核酸提取试剂时试剂盒说明书建议配套试剂核酸提取方法标保存液灭活方式相关核酸提取试剂(磁珠法者步法)容易受胍盐保存液中特殊成分影响特步法提取需试剂厂家配套标保存液
    2标前处理已含胍盐灭活型标保存液实验室环节需进行灭活处理直接进行核酸提取非灭活型标保存液实验室56℃孵育30分钟热灭活化学灭活处理方式
    3核酸提取灭活标取出生物安全柜开标采集加样核酸提取完成立提取物进行封盖处理生物安全柜提取核酸加PCR扩增反应体系中
    4核酸扩增扩增体系放入扩增仪核扩增程序否试剂说明书相符启动扩增程序扩增产物置含1 molL盐酸中应产物全部浸泡液体中浸泡扩增产物转移出实验室
    五实验室质量控制理
    医疗机构应加强核酸检测质量控制实验室应检测体系进行必性验证性指标包括限精密度低检测限实验室做日常室质控国家卫生健康委办公厅关医疗机构开展新型冠状病毒核酸检测关求通知(国卫办医函〔2020〕53号)求规范开展室质控应常态化接受国家级省级检验质量控制求参加室间质评室间质评结果合格检测结果质量问题突出开展核酸检测
    质量理包括员操作技生物安全培训标采集运输接收保存耗材理试剂选择性验证质控品合理设置效判定复检规结果报告解释建议等
    六核酸检测结果反馈基求
    ()报告时限发热门诊急诊患者6时报告核酸检测结果普通门诊住院患者陪护员等群原12时报告结果愿检检群般24时报告结果医疗机构应受检者出具检测报告告知查询方式理出具检测报告
    (二)检测报告医疗机构应新型冠状病毒核酸检测报告单参考样式出具检测报告(见附件)卫生健康行政部门规定互认检测结果医疗机构采纸质快递网络信息化系统等种形式发放核酸检测报告注意保护隐私发现核酸检测阳性结果时应相关求12时进行传染病报续流行病学调查工作
    七核酸检测安全理
    ()标安全理标转运箱封闭前须75酒精02含氯消毒剂喷洒消毒标包装应符合国际民航组织文件Doc9284危险品航空安全运输技术细PI602分类包装求涉外部标运输应A类感染性物质进行三层包装疑似确诊患者标应标示特殊标识进行单独转运检测完成标检测结果阴性剩余标核酸结果报告发出24时装入专密封废物转运袋中进行压力蒸汽灭菌处理医疗废物起转运出实验室进行销毁处理检测结果阳性剩余标应进行复核检测
    (二)实验室检测安全理
    1基求标灭活检测应生物安全二级实验室进行时采生物安全三级实验室防护开展新冠病毒核酸检测实验室应制定实验室生物安全相关程序文件实验室生物安全操作失误意外处理操作程序建立实验室环境消毒处理记录
    2实验前安全求应02含氯消毒剂75酒精进行桌面台面面消毒消毒液需天新鲜配制超24时转运实验室标转运桶应生物安全柜开启转运桶开启02含氯消毒剂75酒精转运桶壁标采集密封袋进行喷洒消毒取出标采集应首先检查标外壁否破损口否泄露壁残留物确认渗漏推荐02含氯消毒剂喷洒擦拭消毒样品外表面(处建议75酒精免破坏样品标识)发现渗漏应立吸水纸覆盖喷洒效氯含量055含氯消毒剂进行消毒处理标继续检测操作做标合格记录需立进行密封包压力蒸汽灭菌处理销毁
    实验室操作员进行标热灭活时温浴前需旋紧标采集盖必时封口膜密闭盖温浴程中隔10分钟标轻柔摇匀1次保证标均匀灭活温浴标需静置室温少10min气溶胶沉降开盖进行续核酸提取
    3核酸提取检测安全求标进行核酸提取检测时应生物安全柜进行操作开标盖产生气溶胶操作必须生物安全柜进行
    4实验结束安全求需实验室环境进行清洁消毒
    (1)实验室空气消毒实验室次检测完毕应进行房间紫外消毒30分钟紫外消毒机射消毒1时必时采核酸清剂等试剂清实验室残留核酸
    (2)工作台面消毒天实验02含氯消毒剂75酒精进行台面面消毒
    (3)生物安全柜消毒实验耗材废弃物放入医疗废物垃圾袋中包扎02含效氯消毒液75酒精喷洒消毒外表面手消毒垃圾袋带出生物安全柜放入实验室废弃物转运袋中试架实验台面移液器等75酒精进行擦拭关闭生物安全柜紫外灯消毒30分钟
    (4)转运容器消毒转运存放标容器前需02含氯消毒剂75酒精进行擦拭喷洒消毒
    (5)塑料机玻璃材质物品消毒:02含氯消毒剂氧乙酸氧化氢擦拭喷洒消毒
    (三)实验室医疗废物理
    1基求开展新冠病毒核酸检测实验室应制定医疗废物处置程序污物污水处理操作程序危险性医疗废物必须统规格化容器标示方式完整合规标示废物容应适培训员适防护装备设备处理危险性医疗废物实验室应建立医疗废物处理记录定期实验室排风HEPA滤器进行捡漏更换定期处理污水进行监测采生物指示剂监测压力灭菌效果
    2医疗废物处理措施医疗废物处理控制实验室安全关键环节必须充分掌握生物安全废弃物分类严格执行相应处理程序
    (1)废液处理实验室产生废液分普通污水感染性废液普通污水产生洗手池等设备类污水应排入实验室水处理系统统处理达标进行排放感染性废液实验操作程中产生废液需采化学消毒(055含氯消毒剂处理)物理消毒(紫外射30分钟)方式处理确认彻底消毒灭活方排入实验室水处理系统统处理达标进行排放污水消毒处理效果GB18466医疗机构水污染物排放标准相关规定进行评价
    (2)固体废物处理实验室固体废物应分类收集固体废物收集容器应具易破裂防渗漏耐湿耐热密封等特性实验室潜感染性废物允许堆积存放应时进行压力蒸汽灭菌处理废物处置前应存放实验室指定安全位置型固体废物检测耗材防护装备等均需双层防渗漏专包装袋包密封压力蒸汽灭菌处理医疗废物通道转运出实验室
    体积较固体废物HEPA滤器应专业士进行原位消毒装入安全容器进行消毒灭菌进行压力蒸汽灭菌物品电子设备采环氧乙烷熏蒸消毒处理消毒灭菌处理移出实验室固体废物需集中交医疗废物处理单位进行处置
    (四)实验室污染处理
    1标污染生物安全柜操作台造成局限污染时:立吸水纸覆盖055含氯消毒剂进行喷洒消毒消毒液需现现配24时
    2标倾覆造成实验室污染时:保持实验室空间密闭避免污染物扩散立润湿055含氯消毒剂毛巾覆盖污染区必时(量溢撒时)氧乙酸加热熏蒸实验室剂量2gm³熏蒸夜20gL氧乙酸消毒液气溶胶喷雾器喷雾量8mlm³作12时必时高锰酸钾甲醛熏蒸:高锰酸钾8gm³放入耐热耐腐蚀容器(陶罐玻璃容器)加入甲醛(40)10mlm³熏蒸4时熏蒸时室湿度6080
    3清理污染物时严格遵循活病毒生物安全操作求采压力蒸汽灭菌处理进行实验室换气等防止次生危害
    八核酸检测信息化理
    医疗机构应卫生健康行政部门统筹做标采集核酸检测检测报告信息接工作建立统信息采集扫码程序信息应少包括姓名性年龄身份证号联系电话做标采集信息医疗机构信息系统利接医疗机构间应做信息互通互采互认
    九求
    疫情防控需等素医疗机构采集标量明显超出身检测力范围建立医疗机构间新冠病毒核酸检测协作机制分散检测压力保证时效性效性

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