附件3
基核酸检测方法金黄色葡萄球菌耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测试剂注册技术审查
指导原
指导原旨指导注册申请基核酸检测方法进行耐甲氧西林金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌鉴检测体外诊断试剂注册申报资料准备撰写时技术审评部门审评注册申报资料提供参考
指导原针基核酸检测方法进行耐甲氧西林金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌鉴检测体外诊断试剂般求申请应产品具体特性确定中容否适适需具体阐述理相应科学产品具体特性注册申报资料容进行充实细化
指导原供申请审查员指导性文件涉注册审批等行政事项作法规强制执行够满足法规求方法采应提供详细研究资料验证资料应遵循相关法规前提指导原
指导原现行法规标准体系前认知水制定着法规标准断完善科学技术断发展指导原相关容适时进行调整
适范围
（）床背景
金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureusSA）革兰阳性球菌葡萄球菌属种分布广泛种动物均易感性床常见致病菌着抗菌药物逐渐出现耐药型金黄色葡萄球菌耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（Methicillinresistant staphylococcus aureusMRSA）MRSA具重耐药性仅β酰胺类抗菌药物耐药氨基糖苷类环酯类四环素类喹诺酮类药物表现出程度耐药抗菌药物耐药率存较域差异变化趋势
MRSA分医疗机构相关性MRSA（healthcareassociated MRSAHAMRSA)社区相关性MRSA ( communityassociated MRSACAMRSA )家畜相关性（Livestock associated MRSALAMRSA）CAMRSA HAMRSA LAMRSA微生物学细菌耐药（HAMRSA相较CAMRSA表现出更重耐药）床特点方面（感染部位）较差异根特点两者进行区分员医院社区间断流动CAMRSA HAMRSA 差异日渐缩MRSA分型种方式SCCmecspa基分型位点序列分型（MLST）基脉场凝胶电泳（PFGE）分型等
MRSA耐药机制MRSA受外界刺激身固耐药基激活引入外耐药基激活目前床分离MRSA菌株数β酰胺抗菌药物耐药（新型头孢菌素类外）部分耐药mecAmecC基介导部分MRSA携带mecA基存耐药机制
目前SA床检测方法包括：分离培养染色观察血浆凝固酶试验生化鉴定质谱鉴定聚合酶链反应（PCR）检测耐热核酸酶（nuc）基SA保守基16S rRNASA种毒素基
MRSA检测方法包括头孢西丁纸片扩散法苯唑西林微量肉汤琼脂稀释法（MIC）苯唑西林琼脂筛选法青霉素结合蛋白（PBP2a）乳胶凝集法显色培养基法动化药敏检测聚合酶链反应（PCR）检测mecA等基方法
美国床实验室标准协会（CLSI）推荐MRSA检测方法：纸片扩散法2NaCl肉汤琼脂稀释法苯唑西林琼脂筛选法检测方法均需3335℃条件孵育24时
目前床推荐选择头孢西丁筛查试验进行MRSA检测选择苯唑西林微量肉汤琼脂稀释法（MIC）
MRSASA床检测样类型包括限鼻拭子痰液皮肤软组织感染样血培养阳性革兰染色法阳性球菌样品等体样培养物样类型适床预期途：医疗机构住院病包括重症监护病手术病长期护理病等MRSA院感染预防控制监测结合实验室检测微生物培养等辅助诊断MRSASA感染床需进行培养检测患者MRSASA感染辅助诊断等
（二）指导原适范围
指导原适基核酸检测方法进行耐甲氧西林金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌鉴检测体外诊断试剂常见方法包括荧光聚合酶链反应（PCR）方法基芯片法等指导原相关容基荧光聚合酶链反应（PCR）方法产品相关申报资料提出求方法相关产品方法学具体特点参执行
二注册申报资料求
（）综述资料
综述资料包括产品预期途产品描述关生物安全性说明关产品研究结果总结评价容中预期途相关床适应症应重点描述申报产品检测金黄色葡萄球菌鉴定基选择耐药突变位点耐甲氧西林金黄色葡萄球菌相关性基选择覆盖耐药菌情况产品验证覆盖耐药菌株国流行特征产品描述应明确申报产品检出耐药基型（包含分型方式分型SCCmec型spa型PFGE分型）尚未验证耐药菌株型类产品国外批准市情况应着重检菌株覆盖情况检测低检出限菌株型间交叉反应等方面写明拟申报产品目前市场已获批准类产品间区综述资料撰写应符合体外诊断试剂注册理办法（国家食品药品监督理总局令第5号）体外诊断试剂注册申报资料求说明（国家食品药品监督理总局公告2014年第44号）相关求
（二）原材料研究资料
类产品PCR方法原材料包括引物探针DNA聚合酶dNTP尿嘧啶糖基化酶（）核酸分离纯化组分（）试剂盒质控品企业参考品等应提供原材料选择源制备质量标准等研究资料质控品确认试验资料生产企业应提供企业参考品原材料选择源质量指标参考品制备阴阳性确认程等
1引物探针：包括申报产品检测靶序列引物探针引物探针应详述引物探针设计原提供引物探针核酸序列模板核酸序列两者应情况针检测靶序列引物探针建议设计两套套引物探针供筛选针预期适型进行检出准确性特异性（交叉反应）评价采扩增靶序列SAMRSA基组研究方法终确认佳组合提交筛选研究数引物探针质量标准应少包括序列准确性纯度检查浓度检查功性实验等
2酶：需酶包括DNA聚合酶质量标准：
21DNA聚合酶应包括DNA聚合酶活性核酸切酶活性热启动力（适）热稳定性等
22申报产品中包含尿嘧啶DNA糖基化酶应酶活性热稳定性等质量控制标准进行规定
3dNTP：质量标准应少包括纯度检查功性实验等
4核酸分离纯化组分（）原理介绍组成原材料质量控制标准相关验证资料
5试剂盒质控品
试剂盒质控体系通设置种试剂盒质控品实现针阳性质控品阴性质控品申请应明确质控品源质量标准质控品阴阳性确认方法相关验证资料质控品应参样处理检测全程核酸行提取等步骤申报产品质控体系应考虑方面：
51阳性质控品中应含包含试剂盒检靶序列DNA优先MRSASA分离灭活菌株采工程菌株克隆菌株等企业应质控品检测结果做出明确范围求（Ct值）
52阴性质控品应含试剂盒检靶序列基阴性质控基质应实际样基质致接存交叉污染产生假阳性结果进行质量控制
53（标）抑制导致假阴性结果进行质量控制申请应（标）引物探针设计模板浓度做精确验证保证标荧光通道呈明显阳性曲线量降低靶基检测造成抑制检测结果应做出明确范围求（Ct值）
6企业参考品：应详细说明关企业参考品原料选择制备程提供阴阳性确认等试验资料
企业参考品应充分考虑产品检测靶物质种基型耐药菌株考虑产品验证性需求进行设置具体求：
61阳性参考品
阳性参考品应采鉴定确认床流行分离菌株含菌株纯化基组DNA等包含申报产品声称应检出MRSASA基型应覆盖国流行耐药菌株包含分型方式分型SCCmec型spa型PFGE分型等
62阴性参考品（特异性参考品）
阴性参考品应考虑检测MRSASA特异性分进行评价求应纳入试剂盒检测范围葡萄球菌革兰阳性菌菌株病原体样品特存潜竞争抑制甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌
63检测限参考品
检测限参考品应分针MRSASA分析物靶基样类型设定检测限附连续稀释参考品应处数增长期菌进行制备明确参考品活菌数CFUmL表示应明确CFU确定方法
64精密度参考品
精密度参考品应菌株针检测目标物设定组参考品包括阴性弱阳性（略高界值预期重复检测95阳性）中等阳性（高界值预期检测结果100阳性）三水
产品适样类型建议针样类型设定参考品基质应实际样类型基质致相似模拟基质应证实天然基质显著差异
原材料企业生产生产工艺必须相稳定提交原材料制备程原材料购供应商需针供应商选择提供评价数提供供应商出具质量标准出厂检定报告申请该原材料进行质量检验资料
（三）生产工艺反应体系研究资料
1介绍产品生产工艺图表方式表示说明生产工艺确定
2反应原理介绍
3详述样采集样处理方式选择设置提供相关研究资料
4确定佳反应体系研究资料包括样量种酶浓度引物探针浓度dNTP浓度阳离子浓度反应阶段温度时间循环数等
5适机型反应条件果差异应分详述提交验证资料
6申报产品包含核酸分离纯化试剂应提交核酸分离纯化程进行选择研究资料
（四）分析性评估资料
申请应提交产品研制阶段试剂盒进行性评价研究资料项分析性评价应包括具体研究目试验方法接受标准试验数统计方法等详细资料关分析性验证背景信息应申报资料中体现包括实验点适仪器试剂规格批号床样源等
针样类型鼻拭子痰液皮肤软组织感染拭子样血培养分离样等申请应分完成性评估包括阴阳性符合率低检测限精密度评价干扰验证等
分析性评价试验方法参考相关国外国关体外诊断试剂性评估指导原进行项性评价应符合求
1核酸分离纯化性（适）
进行靶核酸检测前应适核酸分离纯化步骤该步骤目量分离出目核酸外应相应纯化作PCR抑制物检测试剂否含核酸分离纯化组分企业应结合检测试剂特性配合核酸分离纯化试剂针声称样类型提取效率提取核酸纯度等做充分验证提供详细验证资料
2低检测限
申报产品低检出限性评估资料应包含低检出限确定验证程
应床分离获特征良MRSASA分离菌株进行低检测限研究选菌株建议包含区MRSASA涵盖金黄色葡萄球菌遗传样性应覆盖分型方式分型SCCmec型spa型PFGE分型涵盖国区床常见型低检测限确定研究试验应述选定种代表性MRSASA分离菌株进行连续稀释CFUmL检测单位引入DNA拷贝数作单位应确定两者间换算关系稀释基质应根产品声称样类型分配合相应基质样类型鼻拭子痰液皮肤软组织感染拭子建议阴性鼻拭子阴性皮肤软组织拭子洗液模拟基质进行稀释含生理盐水粘蛋白类基组DNA基质作鼻拭子痰液样代基质含白细胞红细胞血浆基质作皮肤软组织拭子样代基质样类型血培养确定含革兰阳性球菌（GPC）样应含血液适配血液培养基作模拟基质应添加高浓度常见感染菌模拟样稀释液培养段时间种模拟代基质应进行基质性试验证明代基质床实际样等效性
稀释液重复检测35次预估检测限范围制备少20份检测限浓度样证实MRSASA检出率达95浓度作低检测限针血培养瓶血培养系统应分验证检测限否致
3包容性
应通实验证实产品够检出金黄色葡萄球菌中存基态性MRSASA实验验证菌株纳入时考虑金黄色葡萄球菌进化结构常见克隆系型纳入SCCmec型spa型PFGE类型菌株建议检索年国相关文献报道收集区菌株（社区医院感染鼻腔皮肤软组织感染等）进行菌株验证验证细菌浓度应接检测限水菌株应进行鉴定浓度测定应预期存高浓度（高106CFUmL）感染菌甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌情况进行试验
4．申请应申报产品精密度指标做出合理求精密度评价菌株配制企业参考品相应床样进行精密度评价试验应包含核酸分离纯化步骤针类产品精密度评价包括求
41影响检测精密度变量进行验证检测试剂（包括核酸分离纯化组分）身影响外应分析仪操作者点检测批次等素进行相关验证
42设定合理精密度评价周期例：期少20天检测天少2完成少2次完整检测批批间日日间操作者间精密度进行综合评价
43精密度评价参考品床样均应少包含3水：阴性弱阳性（略高界值预期重复检测95阳性）中等阳性（高界值预期检测结果100阳性）根产品特性设定适精密度求床样精密度评价中次检测均应核酸提取开始
5分析特异性
51交叉反应
交叉反应验证应结合样源进行针样类型考虑生潜交叉反应病原体应高浓度交叉反应病原体（高106CFUmL细菌酵母高105PFUmL病毒）进行交叉反应验证明确否存交叉反应致假阳性
针鼻拭子痰液样应考虑鼻中呼吸道致病菌生菌甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）凝固酶阴性葡萄球菌耐甲氧西林表皮葡萄球菌（MRSE）革兰阴性杆菌革兰阴性球菌奈瑟菌莫拉菌酵母菌革兰阳性杆菌革兰阳性球菌等床常见菌种凝固酶阳性葡萄球菌代表菌株
针皮肤软组织感染样检测血培养测定阳性微生物生长革兰染色证实革兰阳性球菌样应纳入更微生物包括皮肤菌群血培瓶源样必进行病毒交叉反应验证
52微生物干扰
样采述潜交叉反应微生物评价潜微生物干扰否MRSASA界水样检测产生干扰建议采存标类型（鼻拭子痰液皮肤软组织感染血培养样）代表MRSA基型少两MRSA菌株界水进行微生物干扰试验
53干扰物质
评价样类型中存干扰物质否检测造成干扰建议采存标类型（鼻拭子痰液皮肤软组织感染血培养样）代表MRSA基型少两MRSA菌株界浓度干扰物质（潜高浓度）进行验证鼻拭子样干扰物质应考虑血液鼻腔分泌物黏液鼻腔药痰液样干扰物应考虑血液粘液细胞等皮肤软组织感染样潜干扰物应考虑血液脓液血浆常外抗菌药抗生素等皮肤药血培养样潜干扰物质应考虑血培养基树脂活性炭等具体结合培养瓶类型确定
6阳性阴性参考品符合率
阳性参考品检测旨验证试剂盒检测范围MRSASA均适浓度检测阳性参考品检测结果应阳性阴性参考品旨评价试剂特异性阴性参考品检测结果应阴性
7方法学研究
验证拟申报产品靶核酸检测准确性应选择部分床样拟申报产品已市核酸检测试剂进行较研究选试剂检测靶基应拟申报试剂致方法性床公认质量较已市核酸检测试剂目基病毒核酸序列测定方法进行核酸序列测定引物序列应考核试剂中检测目基引物序列建议扩增子进行双测序方法学研究具体方式参考相关国外国关指导文件进行床样数量特性应具代表性够充分验证拟申报产品靶核酸检测准确性
8性研究（涉）
携带污染验证高阳性样阴性样交叉检测次运行考察设备样检验否存携带污染
（五）阳性判断值确定资料
类试剂阳性判断值针目标物够获理想床灵敏度床特异性界值（Cutoff）荧光探针PCR方法Ct值确定资料建议采受试者工作特征（ROC）曲线方式进行相关研究申请应选取适足够数量床样进行试验确定阳性判断值
（六）稳定性研究资料
稳定性研究资料涉两部分容申报试剂稳定性适样稳定性研究前者包括实时稳定性（效期）开瓶稳定性冻融次数限制等研究申请根实际需选择合理稳定性研究方案稳定性研究资料应包括研究方法确定具体实施方案详细研究数结实时稳定性研究应提供少三批样品实际储存条件保存成品效期研究资料
样稳定性进行研究合理温度范围间隔定时间段储存样进行全性分析验证确认类型样效期稳定性冷冻保存样应冻融次数进行评价
样提取立进行检测应明确核酸储存条件储存时间等容时应提供相应核酸稳定性研究资料
试剂稳定性样稳定性两部分容研究结果均应说明书储存条件效期样求两项中进行详细说明
（七）产品风险分析资料
申请应参考YYT 0316医疗器械 风险理医疗器械应规定程方法产品生命周期申报产品造成危害进行判定（重点参考YYT 0316附录H）危害处境风险进行判定评价形成风险理报告控制风险监视控制效性充分保证产品安全性效性
该试剂危害致包括三方面：生物学化学危害操作危害信息危害
1生物学化学危害
生物学：细菌病毒引起交叉感染检测完成剩余样试剂废弃物处理引起交叉感染
化学：清洁剂消毒剂残留引发危害
2操作危害
正确测量：
未说明书中求进行测量造成测量失败测量误差
未验证厂家分析仪未正确保养校准仪器造成测量失败测量误差
制造商规定环境条件外产品造成测量误差
3信息危害
说明书标签缺少正确标记位置正确正确识清楚易认
符合法规标准规定产品说明书包括产品说明书中未限制充分告知未正确操作设备时易产生危害进行警告未正确标示储存条件消毒方法维护信息未长期产生功丧失引发危害进行警告未合理预见误进行警告等引发危害
（八）床评价资料
床试验开展方案制定报告撰写等均应符合相关法规体外诊断试剂床试验技术指导原（国家食品药品监督理总局通告2014年第16号）求
1研究方法
建议采前瞻性床试验拟申报产品进行床评价SAMRSA鉴定药敏检测床参考方法作方法金黄色葡萄球菌鉴定应结合形态学凝固酶试验生化鉴定质谱方法等方法药敏方法建议头孢西丁纸片法苯唑西林微量肉汤琼脂稀释法（MIC）应相应全动鉴定药敏方法证明拟市产品床性预期途针样类型应预期途分设计床试验进行研究
2床试验病例数
床试验样量应满足统计学求采适统计学方法进行估算床试验评价指标拟申报产品相床参考方法灵敏度特异性
床总体样量应分考虑SAMRSA阳性阴性样量统计需求综合估算SAMRSA床试验阳性样例数估算建议采单组目标值法考核试剂SA鉴定MRSA药敏检测灵敏度目标值建议针样类型设置建议鼻拭子痰液皮肤软组织拭子等直接样目标值低90血培养样目标值低95通参数估计（含相应信区间估计）方法证明产品针SA鉴定MRSA药敏检测灵敏度低目标值参考样量公式计算
nZ1α2P01P0+Z1βPT1PT2PTP02
公式中n样量Z1α2Z1β标准正态分布分数位P0评价指标目标值PT试验体外诊断试剂评价指标预期值
SAMRSA阴性样量估算采目标值法建议根预实验获特异度预期值采公式计算：
nZ1α22P(1P)Δ2
公式中n样量Z1α2标准正态分布分位数P评价指标预期值ΔP允许误差般取P95信区间宽度半常取值00501
时总体样确定时应考虑培养鉴定成功率造成样脱落情况需纳入干扰等适增加样量样类型适预期途针种预期途床试验总病例数均应分满足统计学求
3床研究单位选择
应选择少3家（含3家）床试验机构相关法规指导原求开展床试验床试验机构选择应量考虑拟申报产品特点预期途综合流行病学背景鉴区医疗机构中SAMRSA流行情况差异应选择区床试验机构开展床试验选择区域相医疗机构进行床试验床试验机构应具分子生物学方法检测优势实验操作员应足够时间熟悉检测系统环节熟悉评价方案
4病例选择样类型
床试验病例选择应根产品声称预期途中样类型适群进行选择床背景容中述该产品适样类型时应床预期途采鼻拭子样试剂MRSA院感染预防控制时应采医疗机构中住院病包括重症监护病手术病长期护理病等病例进行床研究皮肤软组织感染拭子结合实验室检测微生物培养等辅助诊断MRSASA皮肤软组织感染时应采床皮肤软组织感染病例进行床研究血培养测定阳性微生物生长显示包含革兰染色法产生革阳性球菌（GPC）样床需进行血培养检测患者MRSASA感染辅助诊断时应采床需进行血培养检测患者血培养测定阳性微生物生长显示包含革兰染色法产生革兰阳性球菌患者作病例进行床研究时适述样类型时应分进行相关病例床研究
申请建立病例纳入标准时应综合考虑试剂适类群潜差异年龄性病情等
时应关注样中病原体存情况源外源干扰素
5伦理学求
床试验必须符合赫尔辛基宣言伦理学准必须获床试验机构伦理委员会意研究者应考虑床试验样获试验结果受试者风险性应提交伦理委员会审查意见
6床试验方案
床试验实施前研究员应流行病学统计学床医学检验医学等方面考虑设计科学合理床研究方案床研究机构方案设置应基致保证整床试验程中遵循预定方案实施意改动整试验程应床研究机构实验室实验室技术员操作完成申报单位技术员进行必技术指导外意干涉实验进程尤数收集程
试验方案中应确定严格病例纳入排标准已入选病例排出床研究应记录案明确说明原试验操作程中判定试验结果时应采盲法保证试验结果客观性研究单位选参试剂应致便进行合理统计学分析
7统计学分析
床试验结果统计应选择合适统计方法检测结果致性分析床灵敏度特异度等常选择2×2表形式总结两种方法定性检测结果床研究方案中应明确统计检验假设评价考核试剂参方法否等效标准灵敏度结果95置信区间限应高目标值特异性结果预期值差异应明确接受标准差异较应合理解释继续扩样量应分SAMRSA检测结果进行较统计分析
致样应方案中明确否需进步复测确认致原进行分析
8质量控制
床试验开始前建议进行床试验预试验熟悉掌握相关试验方法操作仪器技术性等限度控制试验误差整试验程应处效质量控制限度保证试验数准确性精密度精密度
9床试验总结报告撰写
根体外诊断试剂床试验技术指导原求床试验报告应该试验整体设计关键点予清晰完整阐述应该整床试验实施程结果分析结等进行条理分明描述应包括必基础数统计分析方法建议床总结报告中容进行详述
91床试验总体设计方案描述
911床试验整体理情况床研究单位选择床研究员简介等基情况介绍
912病例纳入排标准年龄段群预期选择例数标准盲态检测求等
913样类型样收集处理保存等
914统计学方法统计软件评价统计结果标准
92 具体床试验情况
921床试验体外诊断试剂仪器名称批号机型等信息
922研究单位病例数年龄分布情况分布情况进行综合建议列表图示方式列出年龄组样例数
923质量控制试验员培训仪器日常维护仪器校准质控品运行情况
924具体试验程样收集样保存样检测结果处理结果致样确认等
93统计学分析
931数预处理差异数重新检测第三方验证否纳入终数统计异常值缺失值处理研究程中否涉方案修改
932结果致性分析
计算阳性符合率阴性符合率总体符合率采适统计学方法四格表卡方检验kappa检验验证两种试剂定性结果致性
94讨结
总体结果进行总结性描述简分析试验结果次床研究特说明出床试验结
95
床试验中涉核酸序列测定方法应床研究报告中选测序方法做详细介绍提供关测序试验详细信息资料
951测序方法原理测序仪型号测序试剂消耗品相关信息
952测序方法引物相关信息基区段选择分子量纯度功性试验等资料
953选测序方法分析性进行合理验证尤低检测限确认建议选测序方法拟申报产品相关性进行适分析
954测序方法应建立合理阳性质控品阴性质控品床样检测结果进行质量控制
955提交代表性样测序图谱结果分析资料
（九）产品技术求
申请应原材料质量生产工艺稳定前提根申请产品研制前期床评价等结果国家标准行业标准关文献医疗器械产品技术求编写指导原（国家食品药品监督理总局通告2014年第9号）关求编写产品技术求
该试剂产品性指标应包括：物理性状阴阳性参考品符合率精密度低检测限等性指标应分析性评估试验结果确定检验方法应明确具体操作方法样参考品情况
该产品第三类体外诊断试剂申请应医疗器械产品技术求编写指导原求附录形式明确原材料生产工艺半成品求附录编制应符合相关编写规范求
（十）产品检验报告
应提供该产品符合产品技术求具相应医疗器械检验资质承检范围医疗器械检验机构进行产品检验报告应提供连续3生产批次样品检验合格报告
（十）产品说明书
说明书承载产品预期途标采集处理检验方法检验结果解释注意事项等重信息指导实验室工作员正确操作床医生针检验结果出合理医学解释重产品说明书体外诊断试剂注册申报重文件产品说明书格式应符合体外诊断试剂说明书编写指导原（国家食品药品监督理总局通告2014年第17号）求进口体外诊断试剂中文说明书格式求外容应量保持原文说明书致性翻译力求准确符合中文表达惯产品说明书中相关技术容均应申请提交注册申报资料中相关研究结果保持致某容引参考文献应规范格式容进行标注单独列明文献相关信息
结合体外诊断试剂说明书编写指导原求面耐甲氧西林金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌鉴检测体外诊断试剂说明书重点容进行详细说明指导注册申报员更合理完成说明书编制
1预期途
11试剂盒定性检测鼻拭子痰液皮肤软组织感染拭子血培养测定阳性微生物生长显示包含革兰染色法产生革兰阳性球菌样品等样耐甲氧西林金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌适样类型应结合实际床研究完成情况进行确认
12明确试剂样类型床意义鼻拭子样医疗机构住院病包括重症监护病手术病长期护理病等MRSA院感染预防控制皮肤软组织感染拭子结合实验室检测微生物培养等辅助诊断MRSASA皮肤软组织感染血培养测定阳性微生物生长显示包含革兰染色法产生革兰阳性球菌样床需进行血培养检测患者MRSASA感染辅助诊断等
13SAMRSA流行特征介绍
14简单介绍测目标特征测靶基特征SAMRSA关系等
2检验原理
详细说明试剂盒技术原理核酸分离纯化方法原理说明检测靶基座位序列长度等介绍引物探针设计样品反应体系（）组合品（质控品）设置荧光信号标记等添加相关防污染组分（尿嘧啶DNA糖基化酶UDGUNG等）应作机理作适介绍
3组成成分
详细说明试剂盒组分名称数量成分浓度等信息含生物源性物质应说明生物学源活性特性说明批号试剂盒中组分否互换
试剂盒中包含该项检测必须组分应列出相关试剂生产企业产品名称货号医疗器械注册证号备案号（）等详细信息试剂盒中包含核酸分离纯化试剂组分时应注明验证推荐配合商品化核酸分离纯化试剂盒信息
4储存条件效期
试剂盒效期稳定性开瓶稳定性复溶稳定性冻融次数求等应相应稳定性研究结致
5适仪器
适仪器型号提供仪器关重信息指导户操作
6样求
明确适样类型详细描述样采集预处理求运输求保存条件期限等特样采集需设备保存液需特明确供应商货号注册证号（）关描述均应建立相关性评价稳定性研究基础
样取材处理方式等通技术规范指南应遵循处引
7检验方法
详细说明实验操作步骤包括：
71试剂配制方法注意事项
72核酸分离纯化条件步骤注意事项品（质控品）参样核酸行提取求等
73扩增反应前准备：组分加样体积序相关注意事项等
74 PCR阶段温度时间设置循环数设置相关注意事项
75仪器设置：特殊参数测基标荧光通道选择等
76质量控制：说明品（质控品）检测求
8阳性判断值
简总结阳性判断值研究方法结明确说明样阳性判断值
9检验结果解释
说明品标正确结果求结合品（质控品）样中靶基标检测结果出现结果组合相应解释进行详述检验结果解释应阳性判断值研究结
10检验方法局限性
应少包括描述：
101试剂检测结果应结合患者床症状相关医学检查结果进行综合分析单独作患者理
102基检测结果仅覆盖耐药机制相应基（mecA基mecC）耐药结果部分MRSA携带mecAmecC基存耐药机制出现漏检
103合理样采集转运处理实验操作实验环境均导致假阴性假阳性结果
11产品性指标
详述分析性评估试验结果简描述床试验基信息试验方法结
12注意事项
应少包括容：
121该产品含源动物源性物质应出生物安全性警告
122床实验室应严格医疗机构床基扩增实验室理办法（卫办医政发〔2010〕194号现行效版）等关分子生物学实验室床基扩增实验室理规范执行
123强调产品性仅针声称适样类型样求项说明样采集处理方法（包括样采集液等）进行验证样类型样采集处理方法保证产品性
124强调实验操作员应接受基扩增分子生物学方法检测专业培训具备相关实验操作资格实验室应具备合理生物安全防备设施防护程序
四编写单位
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基核酸检测方法金黄色葡萄球菌耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测试剂注册技术审查
指导原
指导原旨指导注册申请基核酸检测方法进行耐甲氧西林金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌鉴检测体外诊断试剂注册申报资料准备撰写时技术审评部门审评注册申报资料提供参考
指导原针基核酸检测方法进行耐甲氧西林金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌鉴检测体外诊断试剂般求申请应产品具体特性确定中容否适适需具体阐述理相应科学产品具体特性注册申报资料容进行充实细化
指导原供申请审查员指导性文件涉注册审批等行政事项作法规强制执行够满足法规求方法采应提供详细研究资料验证资料应遵循相关法规前提指导原
指导原现行法规标准体系前认知水制定着法规标准断完善科学技术断发展指导原相关容适时进行调整
适范围
（）床背景
金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureusSA）革兰阳性球菌葡萄球菌属种分布广泛种动物均易感性床常见致病菌着抗菌药物逐渐出现耐药型金黄色葡萄球菌耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（Methicillinresistant staphylococcus aureusMRSA）MRSA具重耐药性仅β酰胺类抗菌药物耐药氨基糖苷类环酯类四环素类喹诺酮类药物表现出程度耐药抗菌药物耐药率存较域差异变化趋势
MRSA分医疗机构相关性MRSA（healthcareassociated MRSAHAMRSA)社区相关性MRSA ( communityassociated MRSACAMRSA )家畜相关性（Livestock associated MRSALAMRSA）CAMRSA HAMRSA LAMRSA微生物学细菌耐药（HAMRSA相较CAMRSA表现出更重耐药）床特点方面（感染部位）较差异根特点两者进行区分员医院社区间断流动CAMRSA HAMRSA 差异日渐缩MRSA分型种方式SCCmecspa基分型位点序列分型（MLST）基脉场凝胶电泳（PFGE）分型等
MRSA耐药机制MRSA受外界刺激身固耐药基激活引入外耐药基激活目前床分离MRSA菌株数β酰胺抗菌药物耐药（新型头孢菌素类外）部分耐药mecAmecC基介导部分MRSA携带mecA基存耐药机制
目前SA床检测方法包括：分离培养染色观察血浆凝固酶试验生化鉴定质谱鉴定聚合酶链反应（PCR）检测耐热核酸酶（nuc）基SA保守基16S rRNASA种毒素基
MRSA检测方法包括头孢西丁纸片扩散法苯唑西林微量肉汤琼脂稀释法（MIC）苯唑西林琼脂筛选法青霉素结合蛋白（PBP2a）乳胶凝集法显色培养基法动化药敏检测聚合酶链反应（PCR）检测mecA等基方法
美国床实验室标准协会（CLSI）推荐MRSA检测方法：纸片扩散法2NaCl肉汤琼脂稀释法苯唑西林琼脂筛选法检测方法均需3335℃条件孵育24时
目前床推荐选择头孢西丁筛查试验进行MRSA检测选择苯唑西林微量肉汤琼脂稀释法（MIC）
MRSASA床检测样类型包括限鼻拭子痰液皮肤软组织感染样血培养阳性革兰染色法阳性球菌样品等体样培养物样类型适床预期途：医疗机构住院病包括重症监护病手术病长期护理病等MRSA院感染预防控制监测结合实验室检测微生物培养等辅助诊断MRSASA感染床需进行培养检测患者MRSASA感染辅助诊断等
（二）指导原适范围
指导原适基核酸检测方法进行耐甲氧西林金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌鉴检测体外诊断试剂常见方法包括荧光聚合酶链反应（PCR）方法基芯片法等指导原相关容基荧光聚合酶链反应（PCR）方法产品相关申报资料提出求方法相关产品方法学具体特点参执行
二注册申报资料求
（）综述资料
综述资料包括产品预期途产品描述关生物安全性说明关产品研究结果总结评价容中预期途相关床适应症应重点描述申报产品检测金黄色葡萄球菌鉴定基选择耐药突变位点耐甲氧西林金黄色葡萄球菌相关性基选择覆盖耐药菌情况产品验证覆盖耐药菌株国流行特征产品描述应明确申报产品检出耐药基型（包含分型方式分型SCCmec型spa型PFGE分型）尚未验证耐药菌株型类产品国外批准市情况应着重检菌株覆盖情况检测低检出限菌株型间交叉反应等方面写明拟申报产品目前市场已获批准类产品间区综述资料撰写应符合体外诊断试剂注册理办法（国家食品药品监督理总局令第5号）体外诊断试剂注册申报资料求说明（国家食品药品监督理总局公告2014年第44号）相关求
（二）原材料研究资料
类产品PCR方法原材料包括引物探针DNA聚合酶dNTP尿嘧啶糖基化酶（）核酸分离纯化组分（）试剂盒质控品企业参考品等应提供原材料选择源制备质量标准等研究资料质控品确认试验资料生产企业应提供企业参考品原材料选择源质量指标参考品制备阴阳性确认程等
1引物探针：包括申报产品检测靶序列引物探针引物探针应详述引物探针设计原提供引物探针核酸序列模板核酸序列两者应情况针检测靶序列引物探针建议设计两套套引物探针供筛选针预期适型进行检出准确性特异性（交叉反应）评价采扩增靶序列SAMRSA基组研究方法终确认佳组合提交筛选研究数引物探针质量标准应少包括序列准确性纯度检查浓度检查功性实验等
2酶：需酶包括DNA聚合酶质量标准：
21DNA聚合酶应包括DNA聚合酶活性核酸切酶活性热启动力（适）热稳定性等
22申报产品中包含尿嘧啶DNA糖基化酶应酶活性热稳定性等质量控制标准进行规定
3dNTP：质量标准应少包括纯度检查功性实验等
4核酸分离纯化组分（）原理介绍组成原材料质量控制标准相关验证资料
5试剂盒质控品
试剂盒质控体系通设置种试剂盒质控品实现针阳性质控品阴性质控品申请应明确质控品源质量标准质控品阴阳性确认方法相关验证资料质控品应参样处理检测全程核酸行提取等步骤申报产品质控体系应考虑方面：
51阳性质控品中应含包含试剂盒检靶序列DNA优先MRSASA分离灭活菌株采工程菌株克隆菌株等企业应质控品检测结果做出明确范围求（Ct值）
52阴性质控品应含试剂盒检靶序列基阴性质控基质应实际样基质致接存交叉污染产生假阳性结果进行质量控制
53（标）抑制导致假阴性结果进行质量控制申请应（标）引物探针设计模板浓度做精确验证保证标荧光通道呈明显阳性曲线量降低靶基检测造成抑制检测结果应做出明确范围求（Ct值）
6企业参考品：应详细说明关企业参考品原料选择制备程提供阴阳性确认等试验资料
企业参考品应充分考虑产品检测靶物质种基型耐药菌株考虑产品验证性需求进行设置具体求：
61阳性参考品
阳性参考品应采鉴定确认床流行分离菌株含菌株纯化基组DNA等包含申报产品声称应检出MRSASA基型应覆盖国流行耐药菌株包含分型方式分型SCCmec型spa型PFGE分型等
62阴性参考品（特异性参考品）
阴性参考品应考虑检测MRSASA特异性分进行评价求应纳入试剂盒检测范围葡萄球菌革兰阳性菌菌株病原体样品特存潜竞争抑制甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌
63检测限参考品
检测限参考品应分针MRSASA分析物靶基样类型设定检测限附连续稀释参考品应处数增长期菌进行制备明确参考品活菌数CFUmL表示应明确CFU确定方法
64精密度参考品
精密度参考品应菌株针检测目标物设定组参考品包括阴性弱阳性（略高界值预期重复检测95阳性）中等阳性（高界值预期检测结果100阳性）三水
产品适样类型建议针样类型设定参考品基质应实际样类型基质致相似模拟基质应证实天然基质显著差异
原材料企业生产生产工艺必须相稳定提交原材料制备程原材料购供应商需针供应商选择提供评价数提供供应商出具质量标准出厂检定报告申请该原材料进行质量检验资料
（三）生产工艺反应体系研究资料
1介绍产品生产工艺图表方式表示说明生产工艺确定
2反应原理介绍
3详述样采集样处理方式选择设置提供相关研究资料
4确定佳反应体系研究资料包括样量种酶浓度引物探针浓度dNTP浓度阳离子浓度反应阶段温度时间循环数等
5适机型反应条件果差异应分详述提交验证资料
6申报产品包含核酸分离纯化试剂应提交核酸分离纯化程进行选择研究资料
（四）分析性评估资料
申请应提交产品研制阶段试剂盒进行性评价研究资料项分析性评价应包括具体研究目试验方法接受标准试验数统计方法等详细资料关分析性验证背景信息应申报资料中体现包括实验点适仪器试剂规格批号床样源等
针样类型鼻拭子痰液皮肤软组织感染拭子样血培养分离样等申请应分完成性评估包括阴阳性符合率低检测限精密度评价干扰验证等
分析性评价试验方法参考相关国外国关体外诊断试剂性评估指导原进行项性评价应符合求
1核酸分离纯化性（适）
进行靶核酸检测前应适核酸分离纯化步骤该步骤目量分离出目核酸外应相应纯化作PCR抑制物检测试剂否含核酸分离纯化组分企业应结合检测试剂特性配合核酸分离纯化试剂针声称样类型提取效率提取核酸纯度等做充分验证提供详细验证资料
2低检测限
申报产品低检出限性评估资料应包含低检出限确定验证程
应床分离获特征良MRSASA分离菌株进行低检测限研究选菌株建议包含区MRSASA涵盖金黄色葡萄球菌遗传样性应覆盖分型方式分型SCCmec型spa型PFGE分型涵盖国区床常见型低检测限确定研究试验应述选定种代表性MRSASA分离菌株进行连续稀释CFUmL检测单位引入DNA拷贝数作单位应确定两者间换算关系稀释基质应根产品声称样类型分配合相应基质样类型鼻拭子痰液皮肤软组织感染拭子建议阴性鼻拭子阴性皮肤软组织拭子洗液模拟基质进行稀释含生理盐水粘蛋白类基组DNA基质作鼻拭子痰液样代基质含白细胞红细胞血浆基质作皮肤软组织拭子样代基质样类型血培养确定含革兰阳性球菌（GPC）样应含血液适配血液培养基作模拟基质应添加高浓度常见感染菌模拟样稀释液培养段时间种模拟代基质应进行基质性试验证明代基质床实际样等效性
稀释液重复检测35次预估检测限范围制备少20份检测限浓度样证实MRSASA检出率达95浓度作低检测限针血培养瓶血培养系统应分验证检测限否致
3包容性
应通实验证实产品够检出金黄色葡萄球菌中存基态性MRSASA实验验证菌株纳入时考虑金黄色葡萄球菌进化结构常见克隆系型纳入SCCmec型spa型PFGE类型菌株建议检索年国相关文献报道收集区菌株（社区医院感染鼻腔皮肤软组织感染等）进行菌株验证验证细菌浓度应接检测限水菌株应进行鉴定浓度测定应预期存高浓度（高106CFUmL）感染菌甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌情况进行试验
4．申请应申报产品精密度指标做出合理求精密度评价菌株配制企业参考品相应床样进行精密度评价试验应包含核酸分离纯化步骤针类产品精密度评价包括求
41影响检测精密度变量进行验证检测试剂（包括核酸分离纯化组分）身影响外应分析仪操作者点检测批次等素进行相关验证
42设定合理精密度评价周期例：期少20天检测天少2完成少2次完整检测批批间日日间操作者间精密度进行综合评价
43精密度评价参考品床样均应少包含3水：阴性弱阳性（略高界值预期重复检测95阳性）中等阳性（高界值预期检测结果100阳性）根产品特性设定适精密度求床样精密度评价中次检测均应核酸提取开始
5分析特异性
51交叉反应
交叉反应验证应结合样源进行针样类型考虑生潜交叉反应病原体应高浓度交叉反应病原体（高106CFUmL细菌酵母高105PFUmL病毒）进行交叉反应验证明确否存交叉反应致假阳性
针鼻拭子痰液样应考虑鼻中呼吸道致病菌生菌甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）凝固酶阴性葡萄球菌耐甲氧西林表皮葡萄球菌（MRSE）革兰阴性杆菌革兰阴性球菌奈瑟菌莫拉菌酵母菌革兰阳性杆菌革兰阳性球菌等床常见菌种凝固酶阳性葡萄球菌代表菌株
针皮肤软组织感染样检测血培养测定阳性微生物生长革兰染色证实革兰阳性球菌样应纳入更微生物包括皮肤菌群血培瓶源样必进行病毒交叉反应验证
52微生物干扰
样采述潜交叉反应微生物评价潜微生物干扰否MRSASA界水样检测产生干扰建议采存标类型（鼻拭子痰液皮肤软组织感染血培养样）代表MRSA基型少两MRSA菌株界水进行微生物干扰试验
53干扰物质
评价样类型中存干扰物质否检测造成干扰建议采存标类型（鼻拭子痰液皮肤软组织感染血培养样）代表MRSA基型少两MRSA菌株界浓度干扰物质（潜高浓度）进行验证鼻拭子样干扰物质应考虑血液鼻腔分泌物黏液鼻腔药痰液样干扰物应考虑血液粘液细胞等皮肤软组织感染样潜干扰物应考虑血液脓液血浆常外抗菌药抗生素等皮肤药血培养样潜干扰物质应考虑血培养基树脂活性炭等具体结合培养瓶类型确定
6阳性阴性参考品符合率
阳性参考品检测旨验证试剂盒检测范围MRSASA均适浓度检测阳性参考品检测结果应阳性阴性参考品旨评价试剂特异性阴性参考品检测结果应阴性
7方法学研究
验证拟申报产品靶核酸检测准确性应选择部分床样拟申报产品已市核酸检测试剂进行较研究选试剂检测靶基应拟申报试剂致方法性床公认质量较已市核酸检测试剂目基病毒核酸序列测定方法进行核酸序列测定引物序列应考核试剂中检测目基引物序列建议扩增子进行双测序方法学研究具体方式参考相关国外国关指导文件进行床样数量特性应具代表性够充分验证拟申报产品靶核酸检测准确性
8性研究（涉）
携带污染验证高阳性样阴性样交叉检测次运行考察设备样检验否存携带污染
（五）阳性判断值确定资料
类试剂阳性判断值针目标物够获理想床灵敏度床特异性界值（Cutoff）荧光探针PCR方法Ct值确定资料建议采受试者工作特征（ROC）曲线方式进行相关研究申请应选取适足够数量床样进行试验确定阳性判断值
（六）稳定性研究资料
稳定性研究资料涉两部分容申报试剂稳定性适样稳定性研究前者包括实时稳定性（效期）开瓶稳定性冻融次数限制等研究申请根实际需选择合理稳定性研究方案稳定性研究资料应包括研究方法确定具体实施方案详细研究数结实时稳定性研究应提供少三批样品实际储存条件保存成品效期研究资料
样稳定性进行研究合理温度范围间隔定时间段储存样进行全性分析验证确认类型样效期稳定性冷冻保存样应冻融次数进行评价
样提取立进行检测应明确核酸储存条件储存时间等容时应提供相应核酸稳定性研究资料
试剂稳定性样稳定性两部分容研究结果均应说明书储存条件效期样求两项中进行详细说明
（七）产品风险分析资料
申请应参考YYT 0316医疗器械 风险理医疗器械应规定程方法产品生命周期申报产品造成危害进行判定（重点参考YYT 0316附录H）危害处境风险进行判定评价形成风险理报告控制风险监视控制效性充分保证产品安全性效性
该试剂危害致包括三方面：生物学化学危害操作危害信息危害
1生物学化学危害
生物学：细菌病毒引起交叉感染检测完成剩余样试剂废弃物处理引起交叉感染
化学：清洁剂消毒剂残留引发危害
2操作危害
正确测量：
未说明书中求进行测量造成测量失败测量误差
未验证厂家分析仪未正确保养校准仪器造成测量失败测量误差
制造商规定环境条件外产品造成测量误差
3信息危害
说明书标签缺少正确标记位置正确正确识清楚易认
符合法规标准规定产品说明书包括产品说明书中未限制充分告知未正确操作设备时易产生危害进行警告未正确标示储存条件消毒方法维护信息未长期产生功丧失引发危害进行警告未合理预见误进行警告等引发危害
（八）床评价资料
床试验开展方案制定报告撰写等均应符合相关法规体外诊断试剂床试验技术指导原（国家食品药品监督理总局通告2014年第16号）求
1研究方法
建议采前瞻性床试验拟申报产品进行床评价SAMRSA鉴定药敏检测床参考方法作方法金黄色葡萄球菌鉴定应结合形态学凝固酶试验生化鉴定质谱方法等方法药敏方法建议头孢西丁纸片法苯唑西林微量肉汤琼脂稀释法（MIC）应相应全动鉴定药敏方法证明拟市产品床性预期途针样类型应预期途分设计床试验进行研究
2床试验病例数
床试验样量应满足统计学求采适统计学方法进行估算床试验评价指标拟申报产品相床参考方法灵敏度特异性
床总体样量应分考虑SAMRSA阳性阴性样量统计需求综合估算SAMRSA床试验阳性样例数估算建议采单组目标值法考核试剂SA鉴定MRSA药敏检测灵敏度目标值建议针样类型设置建议鼻拭子痰液皮肤软组织拭子等直接样目标值低90血培养样目标值低95通参数估计（含相应信区间估计）方法证明产品针SA鉴定MRSA药敏检测灵敏度低目标值参考样量公式计算
nZ1α2P01P0+Z1βPT1PT2PTP02
公式中n样量Z1α2Z1β标准正态分布分数位P0评价指标目标值PT试验体外诊断试剂评价指标预期值
SAMRSA阴性样量估算采目标值法建议根预实验获特异度预期值采公式计算：
nZ1α22P(1P)Δ2
公式中n样量Z1α2标准正态分布分位数P评价指标预期值ΔP允许误差般取P95信区间宽度半常取值00501
时总体样确定时应考虑培养鉴定成功率造成样脱落情况需纳入干扰等适增加样量样类型适预期途针种预期途床试验总病例数均应分满足统计学求
3床研究单位选择
应选择少3家（含3家）床试验机构相关法规指导原求开展床试验床试验机构选择应量考虑拟申报产品特点预期途综合流行病学背景鉴区医疗机构中SAMRSA流行情况差异应选择区床试验机构开展床试验选择区域相医疗机构进行床试验床试验机构应具分子生物学方法检测优势实验操作员应足够时间熟悉检测系统环节熟悉评价方案
4病例选择样类型
床试验病例选择应根产品声称预期途中样类型适群进行选择床背景容中述该产品适样类型时应床预期途采鼻拭子样试剂MRSA院感染预防控制时应采医疗机构中住院病包括重症监护病手术病长期护理病等病例进行床研究皮肤软组织感染拭子结合实验室检测微生物培养等辅助诊断MRSASA皮肤软组织感染时应采床皮肤软组织感染病例进行床研究血培养测定阳性微生物生长显示包含革兰染色法产生革阳性球菌（GPC）样床需进行血培养检测患者MRSASA感染辅助诊断时应采床需进行血培养检测患者血培养测定阳性微生物生长显示包含革兰染色法产生革兰阳性球菌患者作病例进行床研究时适述样类型时应分进行相关病例床研究
申请建立病例纳入标准时应综合考虑试剂适类群潜差异年龄性病情等
时应关注样中病原体存情况源外源干扰素
5伦理学求
床试验必须符合赫尔辛基宣言伦理学准必须获床试验机构伦理委员会意研究者应考虑床试验样获试验结果受试者风险性应提交伦理委员会审查意见
6床试验方案
床试验实施前研究员应流行病学统计学床医学检验医学等方面考虑设计科学合理床研究方案床研究机构方案设置应基致保证整床试验程中遵循预定方案实施意改动整试验程应床研究机构实验室实验室技术员操作完成申报单位技术员进行必技术指导外意干涉实验进程尤数收集程
试验方案中应确定严格病例纳入排标准已入选病例排出床研究应记录案明确说明原试验操作程中判定试验结果时应采盲法保证试验结果客观性研究单位选参试剂应致便进行合理统计学分析
7统计学分析
床试验结果统计应选择合适统计方法检测结果致性分析床灵敏度特异度等常选择2×2表形式总结两种方法定性检测结果床研究方案中应明确统计检验假设评价考核试剂参方法否等效标准灵敏度结果95置信区间限应高目标值特异性结果预期值差异应明确接受标准差异较应合理解释继续扩样量应分SAMRSA检测结果进行较统计分析
致样应方案中明确否需进步复测确认致原进行分析
8质量控制
床试验开始前建议进行床试验预试验熟悉掌握相关试验方法操作仪器技术性等限度控制试验误差整试验程应处效质量控制限度保证试验数准确性精密度精密度
9床试验总结报告撰写
根体外诊断试剂床试验技术指导原求床试验报告应该试验整体设计关键点予清晰完整阐述应该整床试验实施程结果分析结等进行条理分明描述应包括必基础数统计分析方法建议床总结报告中容进行详述
91床试验总体设计方案描述
911床试验整体理情况床研究单位选择床研究员简介等基情况介绍
912病例纳入排标准年龄段群预期选择例数标准盲态检测求等
913样类型样收集处理保存等
914统计学方法统计软件评价统计结果标准
92 具体床试验情况
921床试验体外诊断试剂仪器名称批号机型等信息
922研究单位病例数年龄分布情况分布情况进行综合建议列表图示方式列出年龄组样例数
923质量控制试验员培训仪器日常维护仪器校准质控品运行情况
924具体试验程样收集样保存样检测结果处理结果致样确认等
93统计学分析
931数预处理差异数重新检测第三方验证否纳入终数统计异常值缺失值处理研究程中否涉方案修改
932结果致性分析
计算阳性符合率阴性符合率总体符合率采适统计学方法四格表卡方检验kappa检验验证两种试剂定性结果致性
94讨结
总体结果进行总结性描述简分析试验结果次床研究特说明出床试验结
95
床试验中涉核酸序列测定方法应床研究报告中选测序方法做详细介绍提供关测序试验详细信息资料
951测序方法原理测序仪型号测序试剂消耗品相关信息
952测序方法引物相关信息基区段选择分子量纯度功性试验等资料
953选测序方法分析性进行合理验证尤低检测限确认建议选测序方法拟申报产品相关性进行适分析
954测序方法应建立合理阳性质控品阴性质控品床样检测结果进行质量控制
955提交代表性样测序图谱结果分析资料
（九）产品技术求
申请应原材料质量生产工艺稳定前提根申请产品研制前期床评价等结果国家标准行业标准关文献医疗器械产品技术求编写指导原（国家食品药品监督理总局通告2014年第9号）关求编写产品技术求
该试剂产品性指标应包括：物理性状阴阳性参考品符合率精密度低检测限等性指标应分析性评估试验结果确定检验方法应明确具体操作方法样参考品情况
该产品第三类体外诊断试剂申请应医疗器械产品技术求编写指导原求附录形式明确原材料生产工艺半成品求附录编制应符合相关编写规范求
（十）产品检验报告
应提供该产品符合产品技术求具相应医疗器械检验资质承检范围医疗器械检验机构进行产品检验报告应提供连续3生产批次样品检验合格报告
（十）产品说明书
说明书承载产品预期途标采集处理检验方法检验结果解释注意事项等重信息指导实验室工作员正确操作床医生针检验结果出合理医学解释重产品说明书体外诊断试剂注册申报重文件产品说明书格式应符合体外诊断试剂说明书编写指导原（国家食品药品监督理总局通告2014年第17号）求进口体外诊断试剂中文说明书格式求外容应量保持原文说明书致性翻译力求准确符合中文表达惯产品说明书中相关技术容均应申请提交注册申报资料中相关研究结果保持致某容引参考文献应规范格式容进行标注单独列明文献相关信息
结合体外诊断试剂说明书编写指导原求面耐甲氧西林金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌鉴检测体外诊断试剂说明书重点容进行详细说明指导注册申报员更合理完成说明书编制
1预期途
11试剂盒定性检测鼻拭子痰液皮肤软组织感染拭子血培养测定阳性微生物生长显示包含革兰染色法产生革兰阳性球菌样品等样耐甲氧西林金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌适样类型应结合实际床研究完成情况进行确认
12明确试剂样类型床意义鼻拭子样医疗机构住院病包括重症监护病手术病长期护理病等MRSA院感染预防控制皮肤软组织感染拭子结合实验室检测微生物培养等辅助诊断MRSASA皮肤软组织感染血培养测定阳性微生物生长显示包含革兰染色法产生革兰阳性球菌样床需进行血培养检测患者MRSASA感染辅助诊断等
13SAMRSA流行特征介绍
14简单介绍测目标特征测靶基特征SAMRSA关系等
2检验原理
详细说明试剂盒技术原理核酸分离纯化方法原理说明检测靶基座位序列长度等介绍引物探针设计样品反应体系（）组合品（质控品）设置荧光信号标记等添加相关防污染组分（尿嘧啶DNA糖基化酶UDGUNG等）应作机理作适介绍
3组成成分
详细说明试剂盒组分名称数量成分浓度等信息含生物源性物质应说明生物学源活性特性说明批号试剂盒中组分否互换
试剂盒中包含该项检测必须组分应列出相关试剂生产企业产品名称货号医疗器械注册证号备案号（）等详细信息试剂盒中包含核酸分离纯化试剂组分时应注明验证推荐配合商品化核酸分离纯化试剂盒信息
4储存条件效期
试剂盒效期稳定性开瓶稳定性复溶稳定性冻融次数求等应相应稳定性研究结致
5适仪器
适仪器型号提供仪器关重信息指导户操作
6样求
明确适样类型详细描述样采集预处理求运输求保存条件期限等特样采集需设备保存液需特明确供应商货号注册证号（）关描述均应建立相关性评价稳定性研究基础
样取材处理方式等通技术规范指南应遵循处引
7检验方法
详细说明实验操作步骤包括：
71试剂配制方法注意事项
72核酸分离纯化条件步骤注意事项品（质控品）参样核酸行提取求等
73扩增反应前准备：组分加样体积序相关注意事项等
74 PCR阶段温度时间设置循环数设置相关注意事项
75仪器设置：特殊参数测基标荧光通道选择等
76质量控制：说明品（质控品）检测求
8阳性判断值
简总结阳性判断值研究方法结明确说明样阳性判断值
9检验结果解释
说明品标正确结果求结合品（质控品）样中靶基标检测结果出现结果组合相应解释进行详述检验结果解释应阳性判断值研究结
10检验方法局限性
应少包括描述：
101试剂检测结果应结合患者床症状相关医学检查结果进行综合分析单独作患者理
102基检测结果仅覆盖耐药机制相应基（mecA基mecC）耐药结果部分MRSA携带mecAmecC基存耐药机制出现漏检
103合理样采集转运处理实验操作实验环境均导致假阴性假阳性结果
11产品性指标
详述分析性评估试验结果简描述床试验基信息试验方法结
12注意事项
应少包括容：
121该产品含源动物源性物质应出生物安全性警告
122床实验室应严格医疗机构床基扩增实验室理办法（卫办医政发〔2010〕194号现行效版）等关分子生物学实验室床基扩增实验室理规范执行
123强调产品性仅针声称适样类型样求项说明样采集处理方法（包括样采集液等）进行验证样类型样采集处理方法保证产品性
124强调实验操作员应接受基扩增分子生物学方法检测专业培训具备相关实验操作资格实验室应具备合理生物安全防备设施防护程序
四编写单位
国家药品监督理局医疗器械技术审评中心
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