新型丹参提取物抗癌活性研究


    药敏感抗丝分裂活性抗类肿瘤细胞活性
    Salvinal丹参中分离出种新型微抑制剂

    丹参水提物已广泛治疗心血疾病癌症该植物中分离出种化合物5(3羟丙基)7甲氧基2(3′甲氧基4′羟基苯基)3苯(Salvinal)具抑制肿瘤细胞生长诱导凋亡活性研究中调查肿瘤细胞中细胞毒作作机制抑制类种肿瘤细胞株生长(IC50范围417μM)流式细胞仪分析表明salvinal治疗效果浓度聚集细胞G2M阶段观察Hoechst33258荧光染料染色salvinal阻止丝分裂细胞周期体外体实验表明salvinal浓度赖方式抑制微蛋白聚合免疫细胞化学研究表明salvinal治疗引起细胞微网络改变秋水仙碱类似效果外salvinal导致细胞周期素B1水调活化CDC2激酶Cdc25磷酸化外观察salvinal种浓度赖性治疗方式提高MPM–2磷脂表面抗原水抗微蛋白相似影响bcl2度磷酸化诱导DNA片段裂解激活caspase3抗微蛋白特相似salvinal抑制kB母细胞活性糖蛋白度表达KB vin10KB taxlo50细胞重药物联合抵抗(MRP)蛋白表达托泊苷耐药KB7D细胞总数表明salvinal抑制微蛋白聚合阻止细胞丝分裂周期诱导细胞凋亡显易见Salvinal通P 糖蛋白MRP运输贫瘠培养基Salvinal治疗类癌症方面会起作特针耐药患者
    正文
    微细胞丝分裂纺锤体机组成部分元化功中起关键素作包括趋化隔膜支撑运输分泌程监细胞运动分裂(魏特曼等2001)微丝分裂组织中发挥重调节作破坏微诱导细胞周期中M期阻滞触发细胞信号程序性死亡微通结构成分微蛋白攻击许结构化合物引起丝分裂停滞微抑制剂干预微蛋白聚合解聚活性导致细胞分裂紫杉醇**生物碱抗丝分裂药物中具良床特性已治疗类种癌症药物结果相破坏微蛋白微活性微聚合抗肿瘤活性范围微抑制剂发挥作紫杉醇类药物包括紫杉醇烯紫杉醇稳定微诱导微网状聚合够效治疗乳腺癌肺癌卵巢癌膀胱癌脑颈部癌症**生物碱类代表药**新碱**瑞滨阻止正常微聚合治疗白血病淋巴瘤细胞肺癌恶性肿瘤方面发挥重作紫杉醇类**生物碱够效治疗类种癌症潜力断发展耐药性限制耐药机制特征通编码重耐药基度表达170K
    da P糖蛋白(Pgp)调解微抑制剂结果导致药物积聚减少外遗传基改变翻译修饰微蛋白结构功改变认等肿瘤细胞紫杉醇类**生物碱获耐药性效治疗耐药肿瘤时发现新然化合物合成化合物吸引力
    长时间丹参普遍认治疗心绞痛急性心肌梗死传统中药提取物包括丹参醌够抑制血板聚集保护心肌缺血引起紊乱心肌保护效应方面讲种植物水提取物已治疗癌症10年报道丹参未加工提取物够显著延长艾氏腹水癌鼠存活时期外合成化合物丹参酮IIA 磺酸化钠够增强氢氧化喜树碱治疗艾氏腹水癌细胞杀伤作外丹参三氯甲烷提取物中够提取出许丹参酮类似物类癌症细胞系统中四种类型细胞显示杀伤作该植物中提取化合物否够类癌症细胞起细胞杀伤作目前未知该草植物中提取化合物5 (3羟丙基)7甲氧基2(3′甲氧基4′羟基苯基)3苯furancarbaldehyde(salvinal)已证明烈性腺苷拮抗剂初次报告着重隔离全合成A1腺苷受体亲力种化合物类癌细胞杀伤作然未开发发现种化合物具抑制肿瘤细胞生长诱导类固肿瘤细胞系统凋亡活性项研究中详细描述种化合物分子作机制发现salvinal细胞杀伤作通抑制微蛋白聚合产生尤salvinal细胞度表达PgpMRP
    材料方法:
    1.材料方法 
    11合成Salvinal
    郭吴(1996)描述方法Salvinal合成国立台湾学化学系甲基丙酮三氯化铁水溶液中阿魏酸氧化成二氢苯呋喃然二氢苯呋喃
    乙酰醋酸酐乙酰化氢化苯呋喃甲醇甲苯磺酸溶液中加10%碳P钯然时脱乙酰化需产品证实1H NMR电子电离质谱法谱数文献值相该产品熔点78点80°C
    12 药品酶化学品
        托泊苷(VP16)**新碱紫杉醇(泰素)秋水仙碱购Sigma化工限公司(圣路易斯密苏里州)Cdc25c克隆抗体单克隆BCL2Cdc2细胞周期素B1辣根氧化物酶轭二抗购Santa圣克鲁斯生物技术公司(圣克鲁斯加利福尼亚州)单克隆 MPM抗体2购州生物技术(普**德湖纽约州)异硫氰酸荧光轭抗体购Ancell公司细胞培养试剂根Invitrogen公司获(卡尔斯巴德加利福尼亚州)微相关蛋白质微蛋白购Cytoskeleton公司(科罗拉州丹佛市)秋水仙素(6087次毫摩尔)购买珀金埃尔默生命分析科学(马萨诸塞州波士顿)化学品符合标准分析者更高
    13 细胞系
    口腔皮癌KB细胞鼻咽癌 癌骨 1细胞肠癌HT29细胞非细胞肺癌H460细胞形性胶质瘤DBTRG细胞培养RPMI 含5%胎牛血清1640溶液中提供类乳腺癌MCF7细胞胃癌细胞TSGH肝癌HepG2细胞低限度保持5%胎牛血清中**新碱耐药细胞株KB vin10VP 16耐药细胞系KB 7D紫杉醇抗细胞系KB紫杉醇 50保持增长培养基中分 10纳米**新碱7μMVP1650纳米紫杉醇 分KB vin10紫杉醇KB50细胞度表达P 糖蛋白(JY张未公布数)KB7D条表现出拓扑异构酶Ⅱ降
    14生长抑制分析
    数生长期细胞培养5000 cellsml接种 24 孔板培养基中耐药细胞培养前3天配制培养基中细胞暴露浓度测试药物中72时亚甲基蓝染料检测试验药物细胞生长影响前面述(芬利等1984年)确定抑制50细胞生长(IC50)药物浓度
    15 细胞周期分析
    细胞浓度salvinal中孵育24时磷酸盐缓液(PBS)洗涤细胞70%乙醇固定然加入5μg毫升酶I1μg毫升碘化丙锭然荧光激活细胞四分选流式细胞仪测定细胞DNA含量定量分析丝分裂细胞 Hoechst 33258染色少200细胞计数染色体凝集细胞数
    16体外微集合分析
    96孔板中微聚合孔板中含丰富MAP微蛋白浓度salvinal富含100 mM PIPES pH 69 2mM MgCl2 1mM GTP and 4 (vv) 二甲亚砜(DMSO)buffer缓液酶标仪读取高350nm增加光吸收值37°C30分钟记录30秒曲线面积确定该抑制50%微蛋白聚合浓度该区域面积未处理控制曲线设置100%IC50非线性回计算
    17体微含量分析
    Blagosklommy等微蛋白调光器分离聚合微蛋白完成salvinal完整细胞微蛋白聚合效果分析(1995年)简言HONE 1细胞浓度1×106dish治疗24加入裂解液PBS洗3次4°C分钟10000转离心10分钟收集清液溶解颗粒SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)样缓10%SDS–PAGE中凝胶电泳蛋白质转移硝酸纤维素膜然放入微蛋白单克隆抗体中孵育利免疫印迹化学发光试剂检测免疫反应信号已完成
    18 免疫细胞化学
    HONE1细胞中加入浓度Salvinal秋水仙碱紫杉醇作细胞20°C固定1时PBS洗涤然含3%牛血清白蛋白PBS中封闭1时进步含3%牛血清白蛋白PBS中加入抗鈥微蛋白单克隆抗体孵育2时洗涤细胞中加入二抗暗室中孵育1时荧光显微镜观察细胞微
    19 凋亡研究
    细胞冰冷PBS洗次然溶裂解液4°C10分钟16000/min离心20分钟破碎DNA分离15%琼脂糖凝胶电泳HONE1细胞加入浓度Salvinal24时96时活化caspase3相关试剂盒检测
    2.结果:
    21 类固肿瘤细胞增值凋亡影响
    Salvinal抗增殖效果存类种癌症细胞系统包括口腔癌鼻咽癌乳腺癌肺癌结肠癌 胃脑肿瘤细胞图1列出种癌症细胞系统半抑制浓度值
    salvinal 半抑制浓度值范围417㏕M具体值取决细胞系统HONE1 cells HT 29 细胞分显示较高较低敏感性分4㏕M 17㏕M 检测salvinal否够诱导凋亡浓度salvinal 处理HONE1细胞 24时通DNA裂解片段caspase3活性分析确定Salvinal 诱导凋亡图2显示Salvinal 浓度赖方式诱导HONE1 细胞凋亡外包括时间赖方式(数未出)8 mil MDNA形成明显阶梯外注意裂解产物浓度赖方式清caspase3底物力增加
    22 Salvinal 细胞周期中影响
    研究浓度salvinal 暴露24时HONE1细胞影响Salvinal 治疗结果显示HONE1细胞G2M期浓度赖性积聚时伴G0G1期丧失S期没观察改变salvinal浓度8μM时subG1细胞增值达稳定状态细胞中KB细胞HepG2细胞等出现相
     

    文香网httpwwwxiangdangnet

    《香当网》用户分享的内容,不代表《香当网》观点或立场,请自行判断内容的真实性和可靠性!
    该内容是文档的文本内容,更好的格式请下载文档

    下载文档到电脑,查找使用更方便

    文档的实际排版效果,会与网站的显示效果略有不同!!

    需要 1 香币 [ 分享文档获得香币 ]

    下载文档

    相关文档

    活性肽在无抗养殖中的研究应用

    由于抗生素在畜禽养殖中的不合理使用,导致广泛耐药菌群出现,破坏了动物免疫系统,造成普遍免疫抑制,使畜禽养殖业进入疫病难防、难治的困境,并严重威胁人类健康。随着国民经济的快速发展,人民生活水平的不...

    5年前   
    1208    0

    混合种植下丹参土壤理化性质的研究

    目 录摘要…………………………………………………………………………………………1关键词…………………………………………………………………………………………1Abstract………………………...

    3年前   
    494    0

    丹参综述

    丹参综述 中药资源与开发                 摘要:丹参是一种具有广泛的药理活性和应用价值的常用中药材,通过查阅相关文献资料,进行分类总结,本文从丹参的品种考证、种类资源、化学...

    9年前   
    7920    0

    地区新型工业化研究

    地区新型工业化研究     序 言   改革开放20多年来,实现工业化仍然是我国现代化进程中的一个艰巨的历史性任务。如何借鉴和运用国内外有关理论和实践经验,加快我国工业化进程,实现...

    15年前   
    14330    0

    提取物市场分析(1)

     2002-2003植物提取物市场分析 目录 第一章 概述 1 第一节 概念的界定 1 第二节 现代植物药的主要工业分离技术和技术标准 4 第三节 现代...

    7年前   
    18529    0

    创新型员工延续管理研究

    创新型员工延续管理研究[提要]高新技术企业的创新能力与经营绩效依赖于创新型员工的知识价值创造能力,因此在稳定创新型员工数量基础上提升企业对这一群体的知识管理能力是高新技术企业提升创新绩效的有效...

    1年前   
    249    0

    建设创新型城市的路径研究

    2006年,全国科技大会提出了到2020年建成创新型国家的奋斗目标。各地竞相开展创新型省份、创新型城市建设的实践与探索,形成了富有特色的发展模式。

    4年前   
    910    0

    对英语新型学习模式“人机对话”的研究

    **市从 2017 年选取人机对话试点学校。在教研员和教研组长带领下,我们全体英语组教师积极参加市属人机对话讲座和相关经验交流会。我们认真学习,为本校的考试开展也起到经验积累作用。同时我们接受相...

    3年前   
    781    0

    新型建材研究院简介

    山西新型建材研究院 简       介       山西**新型建材研究院,是由国家铁道部混凝土外加剂协会成员单位、山西省建材协会常务理事单位的山西**建材有限公司牵头,与中国铁路总公司...

    9年前   
    7931    0

    不同电荷生物聚合物对聚赖氨酸的抑菌活性研究

    摘 要ε-聚赖氨酸是一种天然食品防腐剂,但与人工合成化学防腐剂相比,其抑菌效果相对差,提高其的抑菌活性具有重要意义。本文利用紫外分光光度扫描分析ε-聚赖氨酸与呈不同电荷生物聚合物的相互作用,...

    3年前   
    344    0

    15 万吨年活性焦再生,2 万吨年活 性焦、活性炭处置工程可行性研究报告

    项目编号:HS16JX50 环保工程有限公司 15 万吨/年活性焦再生,2 万吨/年活 性焦、活性炭处置工程 可行性研究报告 目录 1 总论 1 1.1 概述 1 1.1...

    5年前   
    1295    0

    间接部门活性化检讨表

    间接部门活性化检讨表 项 目现 状改 善 对 策区分工作1.必要的工作  2.最好动手进行的工作  3.做与不做都无所谓的工作  4.不必要的工作  由谁负责较佳?1.需由管理者负责的工作  ...

    10年前   
    346    0

    间接部门活性化检讨表

    间接部门活性化检讨表 本文档由香当网(https://www.xiangdang.net)用户上传

    9年前   
    8836    0

    复方丹参片检验方法确认方案

    复方丹参片检验方法确认方案     浙江优康制药有限公司       1. 概述: 复方丹参片质量标准为已验证的法定标准,含量测定方法为HPLC法,其它项目为实验室日...

    9年前   
    7019    0

    论文:中国新型老年人养老生活模式研究

    在老龄化的浪潮面前,传统的家庭养老模式难以为继,养老社会化乃大势所趋.但是,在我国"未富先老"的背景下,大规模推行社会机构养老也不大可能.因此,社区化居家养老是我国养老模式的发展方向,它顺应养老...

    4年前   
    1002    0

    加强创新型人才队伍建设问题研究—调研报告

    加强创新型人才队伍建设问题研究—调研报告     胡锦涛总书记在十七大报告中指出:“建设创新型国家,关键在人才,尤其在创新型科技人才。没有一支宏大的创新型科技人才队伍作支撑,要实现建设创新型国...

    11年前   
    826    0

    一种新型排风热泵热回收型新风机的特性研究

    创造高质量的室内空气环境,对于提高人们的劳动生产率,保护人体身体健康,创造舒适的工作和生活环境有非常重要意义。随着当今社会物质和文化生活水平的提高,以及人们自我保护意识的加强,越来越多的人们对空...

    3年前   
    655    0

    新型工业化道路的研究探讨—财经金融

     新型工业化道路的研究探讨—财经金融 党的十六大报告明确指出:要“坚持以信息化带动工业化,以工业化促进信息化,走出一条科技含量高、经济效益好、资源消耗低、环境污染少、人力资源优势得到充分发挥的...

    11年前   
    439    0

    我国新型农村养老保险问题研究

    农村社会养老保险制度是农村社会保障制度中最基本、最核心的一项保障制度。它是一项非常重要的社会政策,这关系到我国亿万农民的基本生活。十多年的农村养老保险制度的改革和实践,取得了初步的成果,同时也遇...

    4年前   
    1875    0

    加强高校研究生教育创新,建设创新型国家

    进入21世纪以来,提高自主创新能力,建设创新型国家,是国家发展战略的核心。为适应这一新形势的需要,高等教育应该把大学生创新能力的培养作为重要使命和首要目标,尤其是研究生的教育创新,我们要围绕建设...

    4年前   
    1167    0