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知识点19 现代生物科技专题
1 (2017·江苏高考·T11)牛雄性胚胎中存特异性HY抗原牛早期胚胎培养液中添加HY单克隆抗体筛选胚胎进行移植利乳腺生物反应器进行生物制药列相关叙述正确 ( )
AHY单克隆抗体骨髓瘤细胞分泌
B应选原肠胚做雌雄鉴
C鉴雄性胚胎直接做胚胎移植
DHY抗原免疫母牛获相应抗体
解析选DHY单克隆抗体般骨髓瘤细胞B淋巴细胞相融合形成杂交瘤细胞制备A项错误早期胚胎细胞分化程度低全性高应选囊胚滋养层做雌雄鉴B项错误进行胚胎移植应选雌性胚胎C项错误HY抗原免疫母牛该母牛产生相应抗体抵御HY抗原D项正确
2 (2017·江苏高考·T14)列关鼠体外受精胚胎发育叙述错误 ( )
A精子获液中37℃5 CO2条件培养目精子获
B鼠特定光控周期条件饲养注射相关激素促进超数排卵作
C分割胚胎细胞相遗传物质发育成体没形态学差异
D注射囊胚腔中胚胎干细胞参体器官发育
解析选C37℃5 CO2条件精子获液中培养精子获获精子受精力A项正确鼠特定光控周期条件饲养注射促性腺激素促进排卵(超数排卵)B项正确分割胚胎细胞相遗传物质遗传物质发育程中差异性表达发育成体形态学差异C项错误注射囊胚腔中胚胎干细胞具发育全性滋养层提供营养参体器官发育D项正确
3 (2017·北京高考·T5)增加菊花花色类型研究者植物中克隆出花色基C(图1)拟质粒(图2)重组助农杆菌导入菊花中列操作实验目符 ( )
A限制性核酸切酶EcoRⅠ连接酶构建重组质粒
B含C基农杆菌侵染菊花愈伤组织C基导入细胞
C培养基中添加卡霉素筛选转化菊花细胞
D分子杂交方法检测C基否整合菊花染色体
解析选C题干题图分析知C基目基两侧含EcoRⅠ限制性核酸切酶切割位点质粒中EcoRⅠ限制性核酸切酶切割位点限制性核酸切酶EcoRⅠ连接酶构建重组质粒A项正确含C基农杆菌侵染菊花愈伤组织C基着农杆菌转移受体细胞中B项正确质粒中含潮霉素抗性基含卡霉素抗性基添加卡霉素培养基中筛选出转化菊花细胞C项错误应标记DNA探针C基杂交分子杂交方法检测C基否整合菊花染色体D项正确
4(2017·全国卷甲·T38)丁质许真菌细胞壁重成分丁质酶催化丁质水解通基工程丁质酶基转入植物体增强抗真菌病力回答列问题
(1)进行基工程操作时植物体中提取丁质酶mRNA常选嫩叶选老叶作实验材料原 提取RNA时提取液中需添加RNA酶抑制剂目
(2)mRNA材料获cDNA原理
(3)目基受体细胞中表达需通质粒载体直接目基导入受体细胞原
(答出两点)
(4)丁质酶基质粒载体连接时DNA连接酶催化形成化学键
(5)获转基植株(丁质酶基已整合植物基组中)抗真菌病力没提高根中心法分析原
解析(1)嫩叶相老叶细胞壁较薄较易破碎容易提取丁质酶mRNARNA酶降解RNA提取RNA时提取液中应添加RNA酶抑制剂防止提取RNA降解
(2)mRNA模板4种脱氧核苷酸原料逆转录酶作碱基互补配原mRNA通逆转录合成cDNA
(3)目基中缺乏表达需复制原点启动子等质粒载体中含目基受体细胞中表达应目基质粒载体形成重组质粒导入受体细胞
(4)DNA连接酶种限制酶切割产生末端连接起恢复限制酶切开两核苷酸间磷酸二酯键
(5)丁质酶基整合植物基组中植物抗真菌病力没提高说明丁质酶基植物细胞中未表达中心法知基表达包括转录翻译两程目基转录翻译程异常导致目基受体细胞中未表达进导致植物抗真菌病力没提高
答案(1)嫩叶组织细胞易破碎 防止RNA降解
(2)逆转录酶作mRNA模板碱基互补配原合成cDNA
(3)目基复制原点目基表达需启动子
(4)磷酸二酯键
(5)目基转录翻译异常
5(2017·全国卷乙·T38)真核生物基中通常含子原核生物基中没原核生物没真核生物具切含子应RNA序列机制已知体中基A(含子)表达出某种特定蛋白(简称蛋白A)回答列问题
(1)某学基组文库中获基A肠杆菌作受体细胞未蛋白A原
(2)家蚕作表达基A受体噬菌体昆虫病毒两种载体中选 作载体原
(3)高效获蛋白A选肠杆菌作受体家蚕相肠杆菌具
(答出两点)等优点
(4)检测基A否翻译出蛋白A检测物质 (填蛋白A基蛋白A抗体)
(5)艾弗里等肺炎双球菌转化实验证明DNA遗传物质做出重贡献说基工程先导果说工作基工程理建立提供启示启示
解析题考查基工程相关知识
(1)体基A含子获基A导入肠杆菌中转录含含子mRNA肠杆菌没真核生物具切含子应RNA序列机制含子部分应mRNA序列阻断蛋白A合成
(2)家蚕作表达基A受体选昆虫病毒作载体选噬菌体作载体原噬菌体宿细胞细菌噬菌体侵染家蚕
(3)肠杆菌原核生物原核生物作受体细胞优点结构简单繁殖速度快容易培养等
(4)检测基A否翻译出蛋白A准确方法利蛋白A抗体抗体具特异性种抗体特定蛋白质结合根蛋白A抗体杂交情况判断否合成蛋白A
(5)艾弗里等肺炎双球菌转化实验中种生物体DNA转移种生物体中表达合成相应蛋白质
答案(1)基A含子肠杆菌中初始转录产物中含子应RNA序列切法表达出蛋白A (2)噬菌体 噬菌体宿细菌家蚕 (3)繁殖快容易培养 (4)蛋白A抗体 (5)DNA种生物体转移种生物体
6(2017·全国卷丙·T38)编码蛋白甲DNA序列(序列甲)ABCDE五片段组成编码蛋白乙丙序列序列甲部分片段组成图1示
回答列问题
(1)现通基工程方法获蛋白乙启动子游直接接编码蛋白乙DNA序列(TTCGCTTCT……CAGGAAGGA)构建表达载体转入宿细胞翻译出蛋白乙原
(2)某学PCR技术获取DNA片段BD程中PCR反应体系中加入DNA聚合酶引物等加入序列甲作 加入 作合成DNA原料
(3)现通基工程方法获甲乙丙三种蛋白鉴定三种蛋白否具刺激T淋巴细胞增殖作某学做实验定量含T淋巴细胞培养液均分成四组中三组分加入等量蛋白甲乙丙组作培养定期检测T淋巴细胞浓度结果图2
①图2知细胞浓度达a时添加蛋白乙培养液中T淋巴细胞浓度增加时T淋巴细胞继续增殖采方法 细胞培养程中培养箱中通常维持定CO2浓度CO2作
②仅根图1图2知述甲乙丙三种蛋白中缺少 (填ABCDE)片段编码肽段会降低刺激T淋巴细胞增殖效果
解析(1)编码蛋白乙DNA序列(TTCGCTTCT……CAGGAAGGA)转录mRNA起始密码子AUGGUG法进行翻译翻译出蛋白乙
(2)PCR技术获取DNA片段BD程中PCR反应体系中加入序列甲作模板加入4种脱氧核苷酸作合成DNA原料
(3)①细胞培养程中会出现贴壁生长接触抑制现象采胰蛋白酶处理进行传代培养细胞培养程中培养箱中CO2作维持培养液定pH
②根图1图2知蛋白乙促进T淋巴细胞增殖效果编码蛋白甲乙DNA序列相编码蛋白丙序列缺少C片段蛋白丙缺少C片段编码肽段促进T淋巴细胞增殖效果差
答案(1)编码乙DNA序列中起始密码子应碱基序列转录出mRNA起始密码子
(2)模板 脱氧核苷酸
(3)①进行细胞传代培养 维持培养液pH ②C
7(2017·天津高考·T9)玉米交系(遗传稳定育种材料)B具高产抗病等优良性状难直接培育成转基植株获抗草剂性状需次进行步骤ⅠⅡ试验
Ⅰ获抗草剂转基玉米交系A技术路线图
(1)防止酶切产物身环化构建表达载体需2种限制酶选择原 (单选)
①Ti质粒种限制酶切割位点
②G基编码蛋白质序列中种限制酶切割位点
③酶切G基形成两黏性末端序列相
④酶切Ti质粒形成两黏性末端序列相
A①③ B①④ C②③ D②④
(2)表4种玉米交系幼胚组织培养阶段结果表知细胞脱分化时激素 交系 幼胚适合培养成愈伤组织作转化受体
激素
结果
交系
24D(20 mgL)
6BA(05 mgL)
IBA(20 mgL)
愈伤组织形成率()
芽分化率()
根诱导率()
甲
99
13
90
乙
85
80
87
丙
88
83
12
丁
16
85
83
(3)农杆菌转化愈伤组织时TDNA携带插入片段转移受体细胞筛选转化愈伤组织需含 选择培养基
(4)转化程中愈伤组织表面常残留农杆菌导致未转化愈伤组织选择培养基生长含含子报告基真核生物中正确表达产物催化色物质K呈现蓝色K分处理愈伤组织出现蓝色 (选)
A农杆菌附着未转化愈伤组织
B农杆菌附着转化愈伤组织
C农杆菌附着未转化愈伤组织
D农杆菌附着转化愈伤组织
(5)组织培养获转基植株(核DNA中仅插入G基)进行交子代含G基植株中纯合子占 继续筛选终选育出抗草剂纯合交系A
Ⅱ通回交交系B获抗草剂性状
(6)抗草剂交系A(GG)交系B杂交产生F1然进行轮回交(图)交系B作亲次回交目代
(7)假设子代生活力致请计算图育种程F1H1H2H3代中含G基植株例图1中画出应折线图回交代进行鉴定筛选直接回交请图2中画出相应折线图
(8)表鉴定含G基植株4种方法请预测代群体中4种方法检出含G基植株例次
方法
检测象
检测目标
检出含G基
植株例
PCR扩增
基组DNA
G基
x1
分子杂交
总mRNA
G基转录产物
x2
抗原抗体杂交
总蛋白质
G基编码蛋白质
x3
喷洒草剂
幼苗
抗草剂幼苗
x4
Hn继续筛选终选育出高产抗病抗草剂等优良性状玉米交系
解析(1)Ti质粒种限制酶两切割位点产生相黏性末端会导致酶切产物身环化①正确G基编码蛋白质序列中应限制酶切割位点否会破坏目基完整结构②错误酶切G基Ti质粒形成两黏性末端序列应相防止酶切产物身环化③正确④错误
(2)细胞脱分化目培养出愈伤组织表中数出脱分化激素24D甲乙丙丁四组项结果乙组保证愈伤组织形成率时芽分化率根诱导率较高交系乙幼胚适合培养成愈伤组织作转化受体
(3)转移受体细胞目基草剂抗性基筛选转化愈伤组织含草剂选择培养基
(4)题干中提含含子报告基真核生物中正确表达转化愈伤组织否农杆菌附着真核细胞转化愈伤组织会出现蓝色
(5)组织培养获转基植株(核DNA中仅插入G基)相杂合子Gg进行交子代含G基植株包括13GG23Gg纯合子占13
(6)B具高产抗病等优良性状交系B作亲次回交目代积累越越交系B遗传物质优良性状
(7)根(6)中图示分析交系B含G基交系A基型GGF1肯定含G基筛选B回交含G基筛选组含G基植株例会H1降50保持稳定Gggg杂交未筛选组H1含G基植株例50H1基型50Gg50ggB(gg)杂交H2基型例Gg∶gg1∶3含G基植株例25理H3中含G基植株例125绘制图1曲线时F1100H1H2H3均50绘制图2曲线时F1100H150H225H3125
(8)含G基细胞中G基定正常转录果G基正常转录形成mRNA定指导合成G基编码蛋白质果G基编码蛋白质合成定表达出抗草剂性状4种方法检出含G基植株例次x4x3x2x1
答案(1)A (2)24D 乙 (3)草剂 (4)BD (5)13(6)积累越越交系B遗传物质优良性状
(7)
(8)x4x3x2x1
易错警示第(3)题容易答抗生素错思维定式惯性认抗生素抗性基作标记基目基筛选没考虑直接含草剂选择培养基筛选含草剂抗性基愈伤组织
8(2017·江苏高考·T33)金属硫蛋白(MT)类广泛存金属结合蛋白某研究组计划通聚酶链式反应(PCR)扩增获目基构建转基工程菌重金属废水净化处理PCR扩增程示意图请回答列问题
(1)高表达MT蛋白生物组织中提取mRNA通 获 PCR扩增
(2)设计MT基两端序列互补配引物(引物1引物2)方便构建重组质粒引物中需增加适 位点设计引物时需避免引物间形成 造成引物连
(3)图中步骤1代表 步骤2代表退火步骤3代表延伸三步骤组成轮循环
(4)PCR扩增时退火温度设定成败关键退火温度高会破坏 碱基配退火温度设定引物长度碱基组成关长度相 引物需设定更高退火温度
(5)果PCR反应扩增产物采取改进措施 (填序号①升高退火温度 ②降低退火温度 ③重新设计引物)
解析(1)高表达MT蛋白生物组织中提取mRNAmRNA逆转录酶催化通逆转录程形成cDNA然PCR扩增(2)目基质粒形成重组质粒时需限制性核酸切酶切出相黏性末端设计MT基两端序列互补配引物(引物1引物2)时引物中增加适限制性核酸切酶位点设计引物时两种引物间互补性否引物间会配形成双链DNA(3)图中步骤1代表高温变性目DNA分子解旋(4)PCR扩增时退火步骤中引物模板结合退火温度高会破坏引物模板碱基配AT间2氢键CG间3氢键CG含量越高DNA分子越稳定引物中含CG碱基较时需采较高退火温度(5)果PCR反应扩增产物引物没模板结合二退火步骤中退火温度高破坏引物模板碱基配采取改进措施应该选②③
答案(1)逆转录 cDNA (2)限制性核酸切酶 碱基互补配 (3)变性 (4)引物模板 GC含量高 (5)②③
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